检索结果-内蒙古大学图书馆

病毒学报 2002年第3期18卷 264-269页

作者：吴艳涛倪雪霞万洪全刘文博刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

对从我国部分地区 1985～ 2 0 0 1年间分离的 2 6株新城疫病毒毒株进行研究 ,克隆其融合蛋白 (F)基因 ,分析相应的核苷酸 (nt)序列。根据绘制的系统进化发生树和F基因上三种限制性内切酶 (RE)位点分布 ,确定了这些毒株的基因型分类地位... 详细信息

对从我国部分地区 1985～ 2 0 0 1年间分离的 2 6株新城疫病毒毒株进行研究 ,克隆其融合蛋白 (F)基因 ,分析相应的核苷酸 (nt)序列。根据绘制的系统进化发生树和F基因上三种限制性内切酶 (RE)位点分布 ,确定了这些毒株的基因型分类地位。除 2个毒株属于已知的VIb亚型外 ,其余 2 4个毒株分别属于新发现的基因Ⅸ型、Ⅵf亚型、Ⅵg亚型和VⅡc亚型。基因Ⅸ型毒株的F基因 5 4 0nt存在RsaⅠ位点 ,同时缺乏 1198ntHinfⅠ位点、14 78ntBstOⅠ位点和 16 2 5ntRsaⅠ位点 ;Ⅵf和Ⅵg亚型毒株不具有国外其它Ⅵ型毒株的 872ntRsaⅠ位点 ;Ⅶc亚型的RE位点分布和Ⅶa亚型、Ⅶb亚型、Ⅷ型毒株不同 ,鹅源毒株均出现 973ntRsaⅠ位点 ,7个鹅源毒株还出现了特有的 12 4 9ntRsaⅠ位点。在F基因编码的氨基酸中 ,基因Ⅸ型毒株出现Ile9→Val9和Val10 6→Ala10 6的替换。

关键词：部分地区中国动物来源新城疫病毒分子流行病学

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致人腹泻产气荚膜梭菌的分离鉴定与基因分型

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中国人兽共患病杂志 2002年第4期18卷 36-38页

作者：张小荣文其乙刘秀梵焦新安扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

目的　研究产气荚膜梭菌与我国人群中引起食物中毒的关系。方法　从江苏扬州三家医院采集腹泻病人临床粪便样品进行细菌分离培养与生化鉴定 ,然后根据ＧｅｎｅＢａｎｋ中已发表的产气荚膜梭菌毒素基因序列 ,设计出针对ｃｐａ、ｃｐｂ、... 详细信息

目的　研究产气荚膜梭菌与我国人群中引起食物中毒的关系。方法　从江苏扬州三家医院采集腹泻病人临床粪便样品进行细菌分离培养与生化鉴定 ,然后根据ＧｅｎｅＢａｎｋ中已发表的产气荚膜梭菌毒素基因序列 ,设计出针对ｃｐａ、ｃｐｂ、ｅｔｘ、ｉＡ、ｃｐｅ和ｃｐｂ2的 6对引物 ,应用多重ＰＣＲ方法对鉴定出的产气荚膜梭菌进行基因分型。结果　从 40份样品中分离到 8株 (占 2 0 %)产气荚膜梭菌 ,分型结果均为Ａ型 ,其中 4株还扩增出ｃｐｂ2基因。结论　产气荚膜梭菌是致人类腹泻的重要病原菌 ,

关键词：腹泻产气荚膜梭菌分离鉴定基因分型多重PCR

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应用多重PCR快速诊断山羊猝死症的研究

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中国兽医科技 2002年第3期32卷 10-12页

作者：张小荣文其乙刘秀梵焦新安扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

对 2例突然死亡的山羊病料进行细菌分离培养 ,再应用多重PCR方法对可疑菌进行鉴定和基因分型 ,结合流行病学、临床症状、病理变化 ,诊断为由A型产气荚膜梭菌引起的山羊猝死症 ,通过毒素中和试验加以验证 ,两者结果相一致。

关键词：多重PCR 产气英膜梭菌山羊猝死症诊断

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两株H_9N_2亚型禽流行性感冒病毒HA基因序列分析

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病毒学报 2002年第3期18卷 285-287页

作者：程坚刘红旗彭大新张如宽刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

The complete cDNA sequences of HA genes of two AIV isolates were presented in this paper The result of comparative sequence analysis seemed to suggest that these two isolates may be identical to three other AIV strains(H 9N 2) isolated from HongKong recently and these five strains may have the same origin in that the identity of the HA protein sequences of these AIV isolates is higher than 95%

关键词： H9N2亚型禽流行性感冒病毒 HA基因序列分析禽流感病毒血凝素基因

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多重PCR方法快速检测粪样中产气荚膜梭菌

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中国预防兽医学报 2002年第1期24卷 48-51页

作者：文其乙刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

建立了多重聚合酶链反应 (multiplexPCR)检测产气荚膜梭菌的α_毒素和肠毒素 (enterotoxin)基因。该方法可以检测猪粪便样品或小肠内容物中肠毒性产气荚膜梭菌。首先猪粪便样品经前处理后 ,接种选择性培养基 ,再挑取单个菌落溶于超纯水... 详细信息

建立了多重聚合酶链反应 (multiplexPCR)检测产气荚膜梭菌的α_毒素和肠毒素 (enterotoxin)基因。该方法可以检测猪粪便样品或小肠内容物中肠毒性产气荚膜梭菌。首先猪粪便样品经前处理后 ,接种选择性培养基 ,再挑取单个菌落溶于超纯水中 ,煮沸提抽 ,制备样品DNA ,进行PCR检测。从实验中我们成功的扩增出 32 4bp的α毒素基因片段和 2 33bp的肠毒素基因片段。以人工污染样品 10倍系例稀释后进行检测 ,该方法的检测灵敏度达到 1.0× 10 4 CFU/g并对 5 8份猪粪便样品检测 ,获得 5 3株产气荚膜梭菌 ,分离率为 91%,其中 4株为带有肠毒素的产气荚膜杆菌 ,占整个分离菌株的 7.5 %。因此多重PCR方法在检测粪样中的产气荚膜梭菌是一种非常有用的方法并可以快速检出肠毒素 ,从而避免了使用动物作定型试验。

关键词：产气荚膜梭菌 α-毒素肠毒素多重聚合酶链反应粪样检测

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表达鸡Ⅱ型干扰素基因的重组鸡痘病毒的构建

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农业生物技术学报 2002年第2期10卷 152-155页

作者：程坚刘秀梵彭大新吴艳涛扬州大学畜禽传染病学农业部重点开放实验室扬州大学畜禽传染病学农业部重点开放实验室扬州225009

以插入鸡Ⅱ型干扰素(IFN-Ⅱ)cDNA序列的重组质粒AIFN为模板,根据鸡痘病毒早晚期启动子PE/L的序列设计上游引物,鸡IFN-Ⅱ基因的cDNA3’端序列设计下游引物,采用PCR法扩增包括启动子PE/L和鸡IFN-Ⅱ全长cDNA序列的基因片段。将该扩增片段... 详细信息

以插入鸡Ⅱ型干扰素(IFN-Ⅱ)cDNA序列的重组质粒AIFN为模板,根据鸡痘病毒早晚期启动子PE/L的序列设计上游引物,鸡IFN-Ⅱ基因的cDNA3’端序列设计下游引物,采用PCR法扩增包括启动子PE/L和鸡IFN-Ⅱ全长cDNA序列的基因片段。将该扩增片段定向插入鸡痘病毒转移载体1175中,获重组转移载体1175IFN,用以转染已感染鸡痘病毒282E4疫苗株(wt-FPV)的鸡(Gallusgallus)胚成纤维细胞(CEF)。1175IFN与wt-FPV基因组DNA之间的同源重组产生了表达IFN-Ⅱ的重组鸡痘病毒rFPV-IFN-Ⅱ。通过在含X-gal的营养琼脂上连续挑选蓝色病毒蚀斑获得并纯化rFPV-IFN-Ⅱ。以细胞病变抑制实验证实,rFPV-IFN-Ⅱ感染的CEF表达了具有抗水泡性口炎病毒(VSV)活性的鸡IFN-Ⅱ。rFPV-IFN-Ⅱ(M.O.I=0.01)感染CEF72h后,培养上清中IFN-Ⅱ的表达量为1280U/mL。动物实验表明,rFPV-IFN-Ⅱ接种雏鸡7d或14d后,其在体内表达的IFN-Ⅱ可显著减轻载体鸡痘病毒对1日龄SPF雏鸡体重增长的抑制作用。

关键词：鸡Ⅱ型干扰素重组鸡痘病毒表达

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两种消毒剂对禽流感病毒的杀灭效果比较

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中国家禽 2002年第24期24卷 18-19页

作者：卢建红邵卫星刘玉良韦栋平吴艳涛张如宽刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

我们受湖南省畜牧兽医总站和浏阳市消毒剂厂的委托,对两种消毒剂产品(消毒威和流感灭)进行了杀灭禽流感病毒(AIV)的试验,现报告如下.

关键词：消毒剂禽流感病毒杀灭效果比较

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重组卡介苗表达的MalE蛋白T细胞表位的鉴定

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中华微生物学和免疫学杂志 2002年第1期22卷 53-57页

作者：焦新安 Richard Lo-man Edith Driaud Sophie Burgaud Brigitte Gicquel Nathalie Winter Claude Leclerc 刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点实验室法国巴斯德研究所免疫调节生物学实验室

目的　鉴定重组卡介苗表达的MalE蛋白T细胞表位。方法　用抗原提呈试验、T细胞增殖试验、ELISPOT试验和表位作图测试重组MalE蛋白的T细胞表位。结果　重组BCG MalE功能性表达了MalE蛋白的 4种H 2 d 限制性T细胞表位。结论　在 4种表位中... 详细信息

目的　鉴定重组卡介苗表达的MalE蛋白T细胞表位。方法　用抗原提呈试验、T细胞增殖试验、ELISPOT试验和表位作图测试重组MalE蛋白的T细胞表位。结果　重组BCG MalE功能性表达了MalE蛋白的 4种H 2 d 限制性T细胞表位。结论　在 4种表位中 ,p6 8～ 82是重组MalE蛋白的主要T细胞表位 ,而其余

关键词：重组卡介苗 MalE蛋白 T细胞表位鉴定

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H9N2亚型禽流感病毒血凝素基因的遗传变异

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扬州大学学报（农业与生命科学版） 2002年第2期23卷 6-9页

作者：刘红旗彭大新程坚贾立军张如宽刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

连续3年对某鸡场禽流感感染鸡群进行跟踪监测,对使用疫苗前与使用疫苗后不同时段分离的H9N2亚型禽流感病毒的血凝素(HA)基因进行全序列分析,研究其H9N2亚型禽流感病毒在同亚型灭活疫苗的选择压力下的遗传变异。结果表明:在使用第1次分... 详细信息

连续3年对某鸡场禽流感感染鸡群进行跟踪监测,对使用疫苗前与使用疫苗后不同时段分离的H9N2亚型禽流感病毒的血凝素(HA)基因进行全序列分析,研究其H9N2亚型禽流感病毒在同亚型灭活疫苗的选择压力下的遗传变异。结果表明:在使用第1次分离的病毒株制备的疫苗后8个月分离该病毒株,其HA基因仅有1个氨基酸发生变异;继续使用该疫苗第2年分离的该病毒株,其HA基因有20个氨基酸发生变异。

关键词： H9N2亚型血凝素基因遗传变异禽流感病毒疫苗选择压力

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运用锚引物扩增新城疫病毒鹅源分离株基因组末端序列

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扬州大学学报（农业与生命科学版） 2002年第2期23卷 17-20页

作者：黄勇吴艳涛刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

在T4RNA连接酶的作用下,将人工合成的锚引物直接与新城疫病毒(NDV)鹅源毒株ZJ1株的基因组5′末端的反转录产物及NDV基因组3′末端直接相连,然后用聚合酶链反应(PCR)和RT PCR分别快速扩增基因组5′末端和3′末端。测序结果表明:3′末端的... 详细信息

在T4RNA连接酶的作用下,将人工合成的锚引物直接与新城疫病毒(NDV)鹅源毒株ZJ1株的基因组5′末端的反转录产物及NDV基因组3′末端直接相连,然后用聚合酶链反应(PCR)和RT PCR分别快速扩增基因组5′末端和3′末端。测序结果表明:3′末端的Leader序列为55nt,5′末端的trailer序列为114nt。将该序列与GenBank报道的NDV鸡源毒株的相应序列相比,ZJ1株与6个鸡源NDV毒株的Leader和trailer序列的同源性分别为83.6%～92.7%和60 5%～63.2%。序列比较结果表明:该鹅源毒株与鸡源毒株在基因组3′端调控区有较高的同源性,而在基因组5′端的调控区同源性则较低。

关键词：末端序列新城疫病毒锚引物基因组鹅源分离株 PCR

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