检索结果-内蒙古大学图书馆

农业生物技术学报 2000年第1期8卷 76-78页

作者：倪振亚焦新安高崧彭大新张如宽刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点实验室!扬州225009

根据已知大肠杆菌志贺氏菌样毒素Ⅱ型变异体Ｂ亚单位(ＳＬＴ－ⅡｖＢ)基因序列，设计并合成３条２对引物，以大肠杆菌Ｏ３８基因组为模板，通过聚合酶链式反应(ＰＣＲ)分别扩增出２０４ｂｐ的基因序列及包含一段信号肽的２６１ｂ... 详细信息

根据已知大肠杆菌志贺氏菌样毒素Ⅱ型变异体Ｂ亚单位(ＳＬＴ－ⅡｖＢ)基因序列，设计并合成３条２对引物，以大肠杆菌Ｏ３８基因组为模板，通过聚合酶链式反应(ＰＣＲ)分别扩增出２０４ｂｐ的基因序列及包含一段信号肽的２６１ｂｐ基因序列。将这两段ＤＮＡ分别克隆进表达性载体质粒ＰＹＡ３３３４的ＥｃｏＲⅠ和ＢａｍＨⅠ位点之间，经地高辛标记探针进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交和酶切分析鉴定，并对两条扩增片段进行序列测定。结果表明，扩增产物的大小与设计相符，扩增与克隆的片段为ＳＬＴ－ⅡｖＢ基因的特异性片段。

关键词：大肠杆菌 SLT-ⅡvB基因克隆序列测定

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鸡痘病毒载体启动子的优化

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病毒学报 2000年第4期16卷 347-351页

作者：朱爱华彭大新刘秀梵张如宽扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

要提高外源基因在鸡痘病毒 (FPV)载体的表达量 ,必须使用强启动子来控制表达。为构建较强的启动子组合 ,根据痘苗病毒天然启动子P7 5的结构 ,人工合成 4条寡核苷酸 ,形成一个早期启动子和一个晚期启动子 ,其首尾可相互连接。利用分子生... 详细信息

要提高外源基因在鸡痘病毒 (FPV)载体的表达量 ,必须使用强启动子来控制表达。为构建较强的启动子组合 ,根据痘苗病毒天然启动子P7 5的结构 ,人工合成 4条寡核苷酸 ,形成一个早期启动子和一个晚期启动子 ,其首尾可相互连接。利用分子生物学常用实验方法把合成的启动子进行不同组合 ,最终形成 10个较有代表性的启动子组合PS1～ 10。在其下游插入大肠杆菌 β 半乳糖苷酶基因LacZ ,并进一步构建成鸡痘病毒转移载体 pFBS1～10 ,同时以P7 5作对照构建成 pFB7 5。以脂质体介导转染鸡痘病毒中国疫苗株 2 82E4感染 3h～ 4h后的原代鸡胚成纤维细胞 (CEF)单层。用蓝斑筛选法纯化病毒 4次 ,最终得到稳定的重组病毒。将纯化的重组病毒感染次代CEF ,分别于感染后 10h、2 4h、36h、48h、72h收获细胞 ,制备提取物 ,检测提取物中 β 半乳糖苷酶的活性。通过计算比较 ,筛选出其中较强的启动子组合LLEE ,其表达活性约为P7 5的 3 5倍 ,为进一步构建高效表达的鸡痘病毒通用载体打下了良好的基础。

关键词：人工合成强启动子鸡痘病毒重组病毒载体

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鸡γ-干扰素基因的克隆与鉴定

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农业生物技术学报 2000年第3期8卷 236-239页

作者：程坚吴艳涛彭大新刘秀梵张如宽扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室!225009

干扰素是动物机体内复杂的免疫网络中起调节作用的重要细胞因子之一.在体内广泛参与免疫调节及炎症反应等生物过程,具有十分重要的生理功能.目前已有一大批人和动物的干扰素基因被克隆.以重组干扰素作为免疫调节剂及基因治疗剂已显示出... 详细信息

干扰素是动物机体内复杂的免疫网络中起调节作用的重要细胞因子之一.在体内广泛参与免疫调节及炎症反应等生物过程,具有十分重要的生理功能.目前已有一大批人和动物的干扰素基因被克隆.以重组干扰素作为免疫调节剂及基因治疗剂已显示出广泛的应用前景,成为重要的学科增长点之一.

关键词：聚合酶链式反应 IFN 动物产物基因重组质粒干扰素抗病毒药引物 PCR

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两株H9亚型禽流感病毒HA基因序列分析

两株H9亚型禽流感病毒HA基因序列分析

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中国畜牧兽医学会禽病学会分会第十次学术研讨会

作者：程坚刘红旗彭大新张如宽刘秀梵扬州大学畜禽传染病学农业部重点开放实验室扬州大学畜禽传染病学农业部重点开放实验室扬州大学畜禽传染病学农业部重点开放实验室扬州大学畜禽传染病学农业部重点开放实验室扬州大学畜禽传染病学农业部重点开放实验室

采用Pharmacia的Timesave cDNA synthesis Kit,结合RT-PCR方法测定了本室分离的两株H9亚型AIV的HA全基因cDNA序列。推导的氨基酸序列比较分析结果表明:这两株AIV和99年从香港地区鸡、鹌鹑中分离的三株HN亚型的AIV的亲源关系很近,它们HA... 详细信息

采用Pharmacia的Timesave cDNA synthesis Kit,结合RT-PCR方法测定了本室分离的两株H9亚型AIV的HA全基因cDNA序列。推导的氨基酸序列比较分析结果表明:这两株AIV和99年从香港地区鸡、鹌鹑中分离的三株HN亚型的AIV的亲源关系很近,它们HA的氨基酸同

关键词：基因序列分析禽流感病毒 H9

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表达新城疫病毒F48E8株融合蛋白基因的重组鸡痘病毒及其免疫效力

表达新城疫病毒F48E8株融合蛋白基因的重组鸡痘病毒及其免疫效力

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中国畜牧兽医学会禽病学会分会第十次学术研讨会

作者：吴艳涛彭大新刘秀梵刘伟忠张如宽扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

将新城疫病毒(NDV)F48E8株融合蛋白基因导入鸡痘病毒(FPV)插入载体pFG1175-1的P7.5启动子下游,得到转移载体pFGF1175-1重组质粒。采用脂质体转染技术,将该质粒转染FPV282E4株感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)。经过多次蓝斑筛选纯化,获稳定的... 详细信息

将新城疫病毒(NDV)F48E8株融合蛋白基因导入鸡痘病毒(FPV)插入载体pFG1175-1的P7.5启动子下游,得到转移载体pFGF1175-1重组质粒。采用脂质体转染技术,将该质粒转染FPV282E4株感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)。经过多次蓝斑筛选纯化,获稳定的重组病毒rFPV-NDF。间接免疫荧光试验表明,rFPV-NDF感染的CEF中表达了NDV的融合蛋白。用rFPV-NDF免疫的SPF试验鸡能产生对NDV强毒攻击的免疫力,保护率达96.3%。

关键词：重组鸡痘病毒新城疫病毒F48E8株融合蛋白

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减毒鸡沙门氏菌97A疫苗株安全性和免疫效力试验

减毒鸡沙门氏菌97A疫苗株安全性和免疫效力试验

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中国畜牧兽医学会禽病学会分会第十次学术研讨会

本试验将减毒鸡沙门氏菌97A疫苗株分别以不同剂量经口服和肌肉注射接种10日龄AA肉鸡,结果表明,97A对10日龄雏鸡有良好安全性。将97A分别以108、5×108、109个细菌的免疫剂量口服接种10日龄AA肉鸡,抗体检测结果显示,所有试验组鸡在第... 详细信息

本试验将减毒鸡沙门氏菌97A疫苗株分别以不同剂量经口服和肌肉注射接种10日龄AA肉鸡,结果表明,97A对10日龄雏鸡有良好安全性。将97A分别以108、5×108、109个细菌的免疫剂量口服接种10日龄AA肉鸡,抗体检测结果显示,所有试验组鸡在第7天均能检测到抗体,第14天抗体水平均有不同程度的提高。于接种后14天,用强毒鸡沙门氏菌Sg9按口服或肌肉注射的方

关键词：效力试验疫苗株鸡沙门氏菌

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重组卡介苗表达的MalE蛋白T细胞表位的鉴定

重组卡介苗表达的MalE蛋白T细胞表位的鉴定

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第十次学术研讨会

作者：焦新安刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点实验室(扬州)

为鉴定重组卡价苗表达的MalE蛋白T细胞表位及其多样性，采用抗提呈试验、T细胞增殖试验、ELISPOT试验和表位作图测度重组MalE蛋白的T细胞表位，结果重组BCG·MalE功能性表达了MalE蛋白的四种H-2d限制性T细胞表位。在四种表位中，p6... 详细信息

为鉴定重组卡价苗表达的MalE蛋白T细胞表位及其多样性，采用抗提呈试验、T细胞增殖试验、ELISPOT试验和表位作图测度重组MalE蛋白的T细胞表位，结果重组BCG·MalE功能性表达了MalE蛋白的四种H-2d限制性T细胞表位。在四种表位中，p68～82是重组MalE蛋白的主要T细胞表位，而其余三个为次要表位。

关键词：家禽免疫学重组卡介苗 T细胞表位 MalE蛋白

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表达新城疫病毒F48E8株融合蛋白基因的重组鸡痘病毒及其免疫效力

表达新城疫病毒F48E8株融合蛋白基因的重组鸡痘病毒及其免疫效力

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第十次学术研讨会

作者：吴艳涛刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室(扬州) 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室(扬州)

将新城疫病毒(NDV)F48E8株融合蛋白基因导入鸡痘病毒(FPV)插入载体pFG1175-1的P7.5启动子下游，得到转移载体pFGF1175-1重组质粒。采用脂质体转染技术，将该质粒转染FPV282E4株感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)。经过多次蓝斑筛选纯化，获稳... 详细信息

将新城疫病毒(NDV)F48E8株融合蛋白基因导入鸡痘病毒(FPV)插入载体pFG1175-1的P7.5启动子下游，得到转移载体pFGF1175-1重组质粒。采用脂质体转染技术，将该质粒转染FPV282E4株感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)。经过多次蓝斑筛选纯化，获稳定的重组病毒rFPV-NDF。间接免疫荧光试验表明，rFPV-NDF感染的CEF中表达了NDV的融合蛋白。用rFPV-NDF免疫的SPF试验鸡能产生对NDV强毒攻击的免疫力，保护率达96.3℅。

关键词：基因重组鸡痘病毒新城疫病毒融合蛋白

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分子微生物学在疫苗学中的应用与展望

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江苏农业研究 2000年第3期21卷 17-17页

作者：焦新安刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点实验室江苏扬州225009

19世纪后叶和 2 0世纪早期是微生物学发展的黄金时代 ,对控制人类和动物烈性传染病作出了重大贡献。分子微生物学的发展 ,对免疫学尤其是疫苗学带来了巨大推动力。简要概述了疫苗的分子技术、全基因组定序、核酸作为免疫原等发展态势。

关键词：分子微生物学疫苗学全基因组定序分子技术

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重组卡介苗表达的MalE蛋白T细胞表位的鉴定

重组卡介苗表达的MalE蛋白T细胞表位的鉴定

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中国畜牧兽医学会禽病学会分会第十次学术研讨会

作者：焦新安刘秀梵 RichardLo—man EdithDériaud SophieBurgaudBrigitteGicquel NathalieWinter ClaudeLeclerc 扬州大学农业部畜禽传染病学重点实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点实验室法国巴斯德研究所免疫调节生物学实验室法国巴斯德研究所免疫调节生物学实验室法国巴斯德研究所免疫调节生物学实验室法国巴斯德研究所免疫调节生物学实验室法国巴斯德研究所免疫调节生物学实验室

为鉴定重组卡介苗表达的MalE蛋白T细胞表位及其多样性,采用抗原提呈试验、T细胞增殖试验、ELISPOT试验和表位作图测试重组MalE蛋白的T细胞表位,结果重组BCG·MalE功能性表达了MalE蛋白的四种H-2d限制性T细胞表位。在四种表位中,p68... 详细信息

为鉴定重组卡介苗表达的MalE蛋白T细胞表位及其多样性,采用抗原提呈试验、T细胞增殖试验、ELISPOT试验和表位作图测试重组MalE蛋白的T细胞表位,结果重组BCG·MalE功能性表达了MalE蛋白的四种H-2d限制性T细胞表位。在四种表位中,p68～82是重组MalE蛋白的主要T细胞表位,而其余三个为次要表位。

关键词：重组卡介苗 MalE蛋白 T细胞表位

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