检索结果-内蒙古大学图书馆

病毒学报 2012年第1期28卷 67-72页

作者：朱艳梅胡增垒宋庆庆段志强顾敏胡顺林王晓泉刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

参照GenBank上公布的鸽源Ⅵb亚型新城疫病毒JS/07/04/Pi株基因组全序列设计9对引物,RT-PCR扩增目的片段后,依次亚克隆至TVT7/R转录载体,成功构建出含JS/07/04/Pi株基因组全长cDNA的转录载体TVT/071204。然后将其与三个辅助表达质粒pCI-N... 详细信息

参照GenBank上公布的鸽源Ⅵb亚型新城疫病毒JS/07/04/Pi株基因组全序列设计9对引物,RT-PCR扩增目的片段后,依次亚克隆至TVT7/R转录载体,成功构建出含JS/07/04/Pi株基因组全长cDNA的转录载体TVT/071204。然后将其与三个辅助表达质粒pCI-NP、pCI-P和pCI-L共转染BSR-T7/5细胞,60h后将转染细胞及其上清接种鸡胚,收集死亡鸡胚尿囊液进行HA与HI试验。结果显示死亡鸡胚尿囊液HA呈阳性,并能被ND阳性血清所抑制,表明该病毒已成功拯救,且拯救病毒rNDV/071204在细胞上的生长增殖能力同母本病毒相似。该病毒的成功拯救为鸽源Ⅵb亚型NDV感染的宿主特异性及鸽用ND新型疫苗的研究提供了理想的生物材料。

关键词：鸽新城疫病毒共转染拯救

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动物源性沙门菌的血清型、生物被膜形成能力和耐药性分析

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畜牧兽医学报 2012年第10期43卷 1630-1638页

作者：孙化露姜逸李树纯陈素娟张华张晓平田艳娜吴艳涛焦库华彭大新扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

本研究旨在探讨动物源性沙门菌的血清型分布、生物被膜形成能力及其耐药性。从不同动物病料中分离细菌,以PCR方法鉴定沙门菌,结合玻片凝集法和16SrRNA序列测定确定沙门菌的血清型和分布,结晶紫染色定量法检测分离株的生物被膜形成能力,... 详细信息

本研究旨在探讨动物源性沙门菌的血清型分布、生物被膜形成能力及其耐药性。从不同动物病料中分离细菌,以PCR方法鉴定沙门菌,结合玻片凝集法和16SrRNA序列测定确定沙门菌的血清型和分布,结晶紫染色定量法检测分离株的生物被膜形成能力,药敏试验检测分离菌对常用药物的敏感性。结果共分离鉴定出58株沙门菌,包括鸡白痢沙门菌、鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、丙型副伤寒沙门菌、乙型副伤寒沙门菌、都柏林沙门菌和阿哥那沙门菌等7种血清型,其中鸡群以鸡白痢沙门菌感染为主,肠炎沙门菌次之;水禽以鼠伤寒沙门菌感染为主。生物被膜测定结果显示51.72%的沙门菌分离株可形成生物被膜,其中83.33%的鼠伤寒沙门菌可形成生物被膜。20种抗生素(氨基糖苷类、磺胺类、喹诺酮类、林可酰胺类、氯霉素类、青霉素类、四环素类和头孢菌素类)敏感性试验表明所有菌株对林可霉素耐药,51.72%对4种及其以上抗生素耐药,并出现了1株对所有受试抗生素均耐药的鼠伤寒沙门菌。结果表明鸡白痢沙门菌、鼠伤寒沙门菌和肠炎沙门菌是为目前在家禽中分离的优势血清型;同时具有生物被膜形成能力和多重耐药性的沙门菌将对家禽疾病控制和公共卫生带来更大的威胁。

关键词：沙门菌血清型生物被膜耐药性

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Clade2．3．2H5N1亚型禽流感疫苗候选株的构建

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畜牧兽医学报 2012年第6期43卷 915-921页

作者：张妍张文俊李群辉刘晓文刘文博刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

近年来Clade2.3.2H5N1亚型的禽流感病毒逐渐成为我国及越南等其他一些国家流行的优势毒株,并呈现出一定变化规律的氨基酸进化趋势。本研究以A/Puerto Rico/8/34(H1N1)(PR8)AIV为内部基因供体,以Clade2.3.2H5N1亚型AIV A/chicken/Yangzho... 详细信息

近年来Clade2.3.2H5N1亚型的禽流感病毒逐渐成为我国及越南等其他一些国家流行的优势毒株,并呈现出一定变化规律的氨基酸进化趋势。本研究以A/Puerto Rico/8/34(H1N1)(PR8)AIV为内部基因供体,以Clade2.3.2H5N1亚型AIV A/chicken/Yangzhou/1117/2011(YZC3)为表面抗原血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)基因供体,通过反向遗传操作,在符合人类疫苗生产标准的COS-1细胞中救获低致病性的疫苗毒株。结果成功拯救出1株重组病毒rYZC3,该病毒在鸡胚和MDCK细胞上均具有较好的繁殖能力,对SPF鸡和鸡胚无致病性。本研究为防控当代流行的H5亚型禽流感提供了良好的疫苗候选株。

关键词： H5亚型 Clade2.3.2 禽流感病毒反向遗传

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超量添加头孢噻呋对马立克氏病疫苗的危害性评估

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中国家禽 2012年第24期34卷 63-64页

作者：张小荣许秋阳王义敏卜仕金吴艳涛扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

头孢噻呋（Ceffiofur）作为第一个动物专用的第三代头孢菌素类抗生素，其抗菌谱广、抗菌活性强，已经在动物细菌性疾病的预防和治疗中得到广泛应用。鸡白痢沙门菌是我国养鸡生产中的一种危害非常严重的病原菌，该菌既能水平传播，也能... 详细信息

头孢噻呋（Ceffiofur）作为第一个动物专用的第三代头孢菌素类抗生素，其抗菌谱广、抗菌活性强，已经在动物细菌性疾病的预防和治疗中得到广泛应用。鸡白痢沙门菌是我国养鸡生产中的一种危害非常严重的病原菌，该菌既能水平传播，也能垂直传播。研究表明，雏鸡出壳后早期注射头孢噻呋进行预防可有效控制鸡白痢沙门菌引起的雏鸡早期感染，该方法目前在生产中已经大规模推广应用。

关键词：危害性评估头孢噻呋马立克氏病疫苗头孢菌素类抗生素鸡白痢沙门菌超量养鸡生产早期感染

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鹅源新城疫病毒M基因的原核表达及其多克隆抗体制备

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江苏农业学报 2012年第1期28卷 125-130页

作者：段志强胡娇胡增垒王郁杨朱杰胡顺林刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

试验旨在制备原核表达鹅源新城疫病毒(NDV)JS/5/05/Go株M蛋白的多克隆抗体并进行鉴定。以鹅源NDV总RNA为模板,RT-PCR扩增M基因,亚克隆到原核表达载体pET-32a(+)获得重组质粒pET32a-M,转化*** BL21(DE3)菌株进行诱导表达,SDS-PAGE电泳检... 详细信息

试验旨在制备原核表达鹅源新城疫病毒(NDV)JS/5/05/Go株M蛋白的多克隆抗体并进行鉴定。以鹅源NDV总RNA为模板,RT-PCR扩增M基因,亚克隆到原核表达载体pET-32a(+)获得重组质粒pET32a-M,转化*** BL21(DE3)菌株进行诱导表达,SDS-PAGE电泳检测表达产物;用KCl染色切胶纯化法纯化重组蛋白;采用切胶免疫小鼠的方法制备M蛋白多克隆抗体,抗体效价用间接ELISA检测,特异性用Western blot和间接免疫荧光法鉴定。结果表明,在大肠杆菌中成功表达了分子量约为55 000的重组蛋白,用切胶纯化法获得了纯度较高的重组蛋白;ELISA法检测抗体效价可达1∶102 400,Western blot和间接免疫荧光试验结果表明制备的多克隆抗体能够特异性识别纯化的M蛋白及NDV自身表达的M蛋白。

关键词：鹅源新城疫病毒 M基因原核表达多克隆抗体

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H9N2亚型禽流感病毒基因组的遗传进化分析

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病毒学报 2012年第1期28卷 7-14页

作者：李树纯李心海仲书官孙化露潘金金陈素娟彭大新刘秀梵扬州大学兽医学院扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009 徐州生物工程职业技术学院徐州221006

2009～2011年从江苏省、湖北省和安徽省等地来源于鸡、鸭、鹌鹑和鸽子的样品中分离鉴定出16株H9N2亚型禽流感病毒。通过反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出分离株的全基因片段,并对其进行测序及遗传进化分析。序列分析显示,16株病毒HA... 详细信息

2009～2011年从江苏省、湖北省和安徽省等地来源于鸡、鸭、鹌鹑和鸽子的样品中分离鉴定出16株H9N2亚型禽流感病毒。通过反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出分离株的全基因片段,并对其进行测序及遗传进化分析。序列分析显示,16株病毒HA基因裂解位点氨基酸序列为P-S-R/K-S-S-R,符合低致病性禽流感的分子特征;226位均为L,具有与哺乳动物唾液酸α,2-6受体结合的特性。M2基因均出现了对金刚烷胺产生耐药性的N31S突变。不同宿主来源的H9亚型AIV的主要分子特征一致。全基因遗传进化分析表明16株H9N2亚型禽流感病毒全基因发生了3配体重组,即以F98亚系AIV为骨架,HA来源于Y280亚系,PB2和M基因来源于G1亚系,形成了2种新的基因型。因此,要加强对H9N2亚型禽流感病毒的监测,密切关注它的重组趋势。

关键词： H9N2 禽流感病毒基因组遗传进化分析

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2009—2010年华东地区家禽低致病性禽流感病毒的流行病学调查与分析

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中国兽医学报 2012年第3期32卷 345-349页

作者：赵坤坤仲书官赵国阮丽莎朱艳梅张妍段志强刘晓文刘文博彭大新刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 安徽农业大学动物科技学院安徽合肥230036

为了解华东地区家禽中低致病性禽流感病毒(low pathogenic avian influenza viruses,LPAIVs)的分布规律,从2009年10月到2010年9月在华东地区某活禽市场采集鸡、鸭、鹅等家禽的泄殖腔拭子共1 650份,经鸡胚接种和HA、HI试验鉴定,结果从58... 详细信息

为了解华东地区家禽中低致病性禽流感病毒(low pathogenic avian influenza viruses,LPAIVs)的分布规律,从2009年10月到2010年9月在华东地区某活禽市场采集鸡、鸭、鹅等家禽的泄殖腔拭子共1 650份,经鸡胚接种和HA、HI试验鉴定,结果从58份样品中分离到了LPAIVs,总分离率为3.51%。所分离到的6种HA亚型及各HA亚型分离率从高到底依次为:H6、H3、H1、H4、H9、H11。从这些样品中鉴定出7种NA亚型,包括N1、N2、N3、N4、N5、N6、N8,二者之间有11种组合。家鸭样品中LPAIVs的分离率为7.28%,显著高于鸡源样品的分离率1.00%和鹅源样品的分离率1.02%。LPAIVs的季节性分布较为明显,3～6月份和10～12月份的分离率较高,而冬季最冷的1月份和夏季最热的7月份则没有分离到。2种或2种以上不同HA亚型混合感染的样品有6份,全部为水禽源样品,占总阳性样品数的10.34%。这些数据表明活禽市场可以作为AIV的一个重要储存库,而家养水禽可作为AIV的一个重要储存宿主,应该继续加强对活禽市场,尤其是家养水禽中AIV的监测。

关键词：低致病性禽流感流行病学家禽分离率家养水禽

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新城疫病毒基质蛋白第23位苯丙氨酸对病毒复制与细胞致病性的作用

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中国家禽 2012年第9期34卷 17-20页

作者：高海岗陆建荣胡增垒胡娇刘晓文王晓泉朱杰苏州市动物卫生监督所江苏苏州215100 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

副黏病毒科的副流感病毒5型(Parainfluenza virus5,SV5)和腮腺炎病毒(Mumps virus,MuV)的基质蛋白(Matrix protein,M)都编码FPIV-like晚期结构域(Late-domain,L-domain),L-domain中的苯丙氨酸(Phenylalanine,F)对病毒出芽与复制有很重要的作用。新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)M蛋白也包含潜在的L-domain23FPIV26,但23F对NDV的出芽及复制的作用尚不明确。本试验应用反向遗传学技术,以NDV ZJ1株为母本病毒,拯救一株M蛋白F23A突变的重组病毒ZJ1F23A,并在DF1细胞上对ZJ1F23A的复制性能和细胞致病性进行评价。结果显示,ZJ1F23A在DF1上的复制水平显著低于母本病毒ZJ1,ZJ1F23A对DF1的致病性比ZJ1弱。试验结果说明NDV M蛋白23F对病毒复制及病毒的细胞致病性具有重要作用。

关键词：新城疫病毒基质蛋白晚期结构域病毒复制细胞致病性

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共表达H5亚型禽流感病毒HA与NA基因的重组新城疫病毒

共表达H5亚型禽流感病毒HA与NA基因的重组新城疫病毒

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第十六次学术研讨会

作者：胡顺林胡增垒朱艳梅胡娇王晓泉刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

在H5亚型禽流感一新城疫重组二联苗研制中,研究者们通常只表达禽流感病毒(AIV)的血凝素(HA)基因。为进一步提高重组病毒的免疫效力,本研究尝试以基因Ⅶ型致弱株新城疫病毒(NDV)A/14作载体同时表达H5亚型AIV的HA和神经氨酸酶(NA)两个囊... 详细信息

在H5亚型禽流感一新城疫重组二联苗研制中,研究者们通常只表达禽流感病毒(AIV)的血凝素(HA)基因。为进一步提高重组病毒的免疫效力,本研究尝试以基因Ⅶ型致弱株新城疫病毒(NDV)A/14作载体同时表达H5亚型AIV的HA和神经氨酸酶(NA)两个囊膜蛋白基因,以研制更加高效的禽流感—新城疫二联苗。材料与方法:基因Ⅶ型NDV致弱株A/14全长cDNA克隆pNDV/A14由胡增垒构建。选取2010年活禽市场分离的1株H5亚型AIV作为HA和NA基因的供体。以带有NDV基因起始序列、间隔序列及终止序列的引物,分别扩增出带有NDV转录调控元件的HA和NA基因。利用分子克隆的方法先将NA基因插入至NDV基因组的F-HN基因之

关键词：重组新城疫病毒 AIV 禽流感病毒

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中国部分地区禽源性大肠杆菌分离株的致病性试验

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江苏农业科学 2012年第11期40卷 230-231页

作者：刘静贺生中陈祥高崧江苏畜牧兽医职业技术学院宠物科技系江苏泰州225300 扬州大学/农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

1995—2011年对中国18个省(市、区)临诊上有典型大肠杆菌病病变的病、死鸡中分离到的243株大肠杆菌分离株进行了致病性试验。结果表明:受试的243个禽源性大肠杆菌分离株均有致病性,其中,80%以上的分离株属高致病株,其他为中度致病株或... 详细信息

1995—2011年对中国18个省(市、区)临诊上有典型大肠杆菌病病变的病、死鸡中分离到的243株大肠杆菌分离株进行了致病性试验。结果表明:受试的243个禽源性大肠杆菌分离株均有致病性,其中,80%以上的分离株属高致病株,其他为中度致病株或低致病株。

关键词：禽源性大肠杆菌 O血清型分离株致病性病原体

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