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中国畜牧兽医学会2011年学术年会

作者：赵明军吴志明赵国赵坤坤刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室河南省动物疫病预防控制中心

H4亚型禽流感病(Avian Influenza Virus,AIV)属于低致病性毒株,该亚型病毒可以感染各种家禽以及哺乳动物。自80年代起,不断有分离到H4亚型AIV的报道。1999年,Alexander首次报道从加拿大患有肺炎的猪体内分离到H4N6亚型AIV,表明该亚型病... 详细信息

H4亚型禽流感病(Avian Influenza Virus,AIV)属于低致病性毒株,该亚型病毒可以感染各种家禽以及哺乳动物。自80年代起,不断有分离到H4亚型AIV的报道。1999年,Alexander首次报道从加拿大患有肺炎的猪体内分离到H4N6亚型AIV,表明该亚型病毒也可以在种间传播。为了更深入了解H4亚型AIV的来源及遗传进化情况,作者对一株从鸭体内分离的H4N2亚型AIV A/duck/Anhui/2010进行全基因组序列测定和遗传进化分析。

关键词： AIV 禽流感病毒全基因序列分析

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一株鸭源H4N2亚型禽流感病毒全基因序列分析

一株鸭源H4N2亚型禽流感病毒全基因序列分析

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中国畜牧兽医学会2011学术年会

作者：赵明军吴志明赵国赵坤坤刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州 225009 河南省动物疫病预防控制中心河南郑州 450008 河南省动物疫病预防控制中心河南郑州 450008 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州 225009

为了更深入了解H4亚型AIV的来源及遗传进化情况，作者对一株从鸭体内分离的H4N2亚型AIV A/duck/Anhui/2010进行全基因组序列测定和遗传进化分析。研究结果表明，H4亚型AIV病毒可以在种间传播，同时有可能感染其他哺乳动物或者具有感染... 详细信息

为了更深入了解H4亚型AIV的来源及遗传进化情况，作者对一株从鸭体内分离的H4N2亚型AIV A/duck/Anhui/2010进行全基因组序列测定和遗传进化分析。研究结果表明，H4亚型AIV病毒可以在种间传播，同时有可能感染其他哺乳动物或者具有感染哺乳动物能力的毒株提供基因。HA基因在鸭体内的遗传进化很慢，当鸭体内同时存在集中不同亚型AIV时，可能容易发生基因片段交换或重组，极易出现感染宿主范围扩大或者毒力增强。因此，应密切关注H4亚型病毒的来源、传播以及变异规律的研究。

关键词：亚型禽流感病毒鸭源病毒基因序列分析

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缺失ORF73或ORF214基因对重组鸡痘病毒免疫应答的影响

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微生物学报 2010年第4期50卷 512-516页

作者：王彦红陈素娟刘武杰仇旭升董丽彭大新刘秀梵扬州大学畜禽传染病学农业部重点开放实验室扬州225009

【目的】旨在研究鸡痘病毒ORF73和ORF214编码蛋白是否具有IL-18结合蛋白的功能,以及ORF73或ORF214基因缺失后对重组病毒诱导免疫应答的影响。【方法】以缺失ORF73或ORF214基因并表达H5亚型AIVHA基因的重组鸡痘病毒(rFPVLP-△73LRH5A、rF... 详细信息

【目的】旨在研究鸡痘病毒ORF73和ORF214编码蛋白是否具有IL-18结合蛋白的功能,以及ORF73或ORF214基因缺失后对重组病毒诱导免疫应答的影响。【方法】以缺失ORF73或ORF214基因并表达H5亚型AIVHA基因的重组鸡痘病毒(rFPVLP-△73LRH5A、rFPVLP-△214LRH5A)作为研究对象,以未缺失ORF73或ORF214基因而表达H5亚型AIVHA基因的重组鸡痘病毒(rFPVLP-12LSH5A)作为对照,检测重组病毒体外诱导SPF鸡脾细胞和外周血淋巴细胞产生IFN情况,同时检测重组病毒免疫SPF鸡后诱导的体液免疫、CD4+/CD8+比值、外周血淋巴细胞的增殖能力和H5亚型AIV强毒攻击后的免疫保护效力。【结果】rFPVLP-△73LRH5A和rFPVLP-△214LRH5A体外诱导脾细胞产生的IFN量显著高于rFPVLP-12LSH5A,而免疫10d后的CD4+/CD8+比值显著低于rFPVLP-12LSH5A;3种重组鸡痘病毒诱导外周血淋巴细胞增殖的能力没有明显差异;3种重组病毒在SPF鸡均产生针对H5亚型AIV的HI抗体,免疫14d后rFPVLP-△214LRH5A组诱生的HI抗体水平显著低于rFPVLP-12LSH5A组的抗体,但3组在免疫21d后HPAIV的致死性攻击时,均100%被保护。【结论】鸡痘病毒ORF73和ORF214编码蛋白具有IL-18结合蛋白抑制IFN产生的功能,虽然缺失株和亲本株重组鸡痘病毒在细胞和体液免疫应答存在一定差异,但在SPF鸡均能诱导产生良好的免疫保护。

关键词：重组鸡痘病毒 ORF73 ORF214 免疫应答

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猪圆环病毒2型感染对猪瘟疫苗免疫的影响

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中国兽医杂志 2011年第11期47卷 44-45页

作者：周庆雨程明周利锋单玉平陆春权石基强吴建中王建李锋正大集团(中国区)饲料技术线江苏连云港222047 连云港市灌南县畜牧兽医站江苏灌南223500 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 连云港市畜牧兽医站江苏连云港222000 连云港正大农牧发展有限公司技术部江苏连云港222047

猪瘟（CSF）被世界动物卫生组织（OIE）列为必须报告的A类传染病之一,是我国目前强制免疫的主要传染病之一。做好猪瘟免疫是制定猪场免疫程序的基础。近年来,猪瘟疫苗免疫效果不佳甚至免疫失败的现象时有发生,除了猪瘟疫苗质量、免疫程... 详细信息

猪瘟（CSF）被世界动物卫生组织（OIE）列为必须报告的A类传染病之一,是我国目前强制免疫的主要传染病之一。做好猪瘟免疫是制定猪场免疫程序的基础。近年来,猪瘟疫苗免疫效果不佳甚至免疫失败的现象时有发生,除了猪瘟疫苗质量、免疫程序不当和猪瘟野毒持续感染母猪将其野毒传播给仔猪造成免疫失败等因素外,其他猪病病原感染对猪瘟疫苗的免疫效力也构成影响[1-4]。

关键词：猪瘟疫苗疫苗免疫持续感染猪圆环病毒2型世界动物卫生组织免疫程序免疫失败猪瘟野毒

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1株H6N5亚型禽流感病毒A/duck/Yangzhou/013/2008的全基因测序及遗传进化分析

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畜牧兽医学报 2010年第4期41卷 441-448页

作者：顾敏赵国宋庆庆刘文博彭大新刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

在对华东地区家养水禽中流感病毒的带毒状况进行流行病学监测的过程中,采用常规的血清学试验和特异性RT-PCR方法,分离鉴定出1株H6N5亚型禽流感病毒A/duck/Yangzhou/013/2008(简称Dk/YZ/013/08)。为了探讨该亚型病毒在流感病毒生态分布... 详细信息

在对华东地区家养水禽中流感病毒的带毒状况进行流行病学监测的过程中,采用常规的血清学试验和特异性RT-PCR方法,分离鉴定出1株H6N5亚型禽流感病毒A/duck/Yangzhou/013/2008(简称Dk/YZ/013/08)。为了探讨该亚型病毒在流感病毒生态分布中的作用,作者对Dk/YZ/013/08进行了全基因序列测定,并结合Gen-Bank中已收录的所有H6N5亚型病毒的基因组序列及其它参考序列进行了遗传进化分析。结果表明Dk/YZ/013/08的血凝素基因(HA)与近年中国台湾分离的鸭源毒株A/duck/Kingmen/E322/2004(H6N2)的核苷酸一致性最高(94%),推导的氨基酸剪切位点序列为"P-Q-I-E-T-R-G",为典型低致病性禽流感病毒的特征序列;神经氨酸酶基因(NA)与瑞士分离株A/mallard/Switzerland/WV4060167/2006(H3N5)的亲缘关系最近(核苷酸一致性96.9%);而碱性聚合酶2(PB2)基因则与A/duck/Zhejiang/11/2000(H5N1)的遗传距离最近,可能由H5N1亚型流感病毒提供,提示该毒株可能是一株重组病毒。

关键词：禽流感病毒 H6N5 基因组进化分析重组

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1株H6N6亚型禽流感病毒A/duck/Jiangsu/022/2009的全基因测序及遗传进化分析

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中国人兽共患病学报 2010年第7期26卷 642-647页

作者：顾敏宋庆庆李彦芳徐全刚彭大新刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

目的对2009年分离自华东地区某活禽交易市场的1株国内未见报道的H6N6亚型禽流感病毒进行了全基因序列的测定,以探讨该病毒各基因片段的可能来源。方法通过常规的血清学试验确定病毒HA亚型,经RT-PCR方法扩增出各基因片段,连接到pGEM-Teas... 详细信息

目的对2009年分离自华东地区某活禽交易市场的1株国内未见报道的H6N6亚型禽流感病毒进行了全基因序列的测定,以探讨该病毒各基因片段的可能来源。方法通过常规的血清学试验确定病毒HA亚型,经RT-PCR方法扩增出各基因片段,连接到pGEM-Teasy载体上进行序列测定,利用BLAST进行序列的同源性分析,并结合GenBank中已收录的H6N6亚型流感病毒及其它相关序列进行遗传进化分析。结果 BLAST结果显示该H6N6病毒的HA基因与近年台湾分离株A/duck/Kingmen/E322/2004(H6N2)的核苷酸一致性最高(94.0%),推导的氨基酸剪切位点序列为P-Q-I-E-T-R-G,是典型低致病性禽流感病毒的特征序列;NA基因与华东地区分离株A/duck/EasternChina/160/2002(H4N6)的亲缘关系最近(核苷酸一致性91.0%);而PB1基因与荷兰2003年间分离的H7N7亚型流感病毒关系密切;PA基因则与1999-2000年间意大利分离的H7N1亚型流感病毒亲缘关系较近;NS1蛋白在第218位提前引入终止密码子致使C末端缺失13个氨基酸。结论国内首次分离到的H6N6亚型禽流感病毒的基因组构成较为复杂,但8个基因片段均属于欧亚系,与分离自北美地区的H6N6病毒的遗传距离较远,分别位于不同的进化分支。

关键词：禽流感病毒 H6N6 基因组进化分析 H7

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混合感染的多种亚型禽流感病毒的纯化与鉴定

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微生物学报 2010年第1期50卷 107-112页

作者：仇保丰刘武杰胡顺林唐应华彭大新刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

【目的】研究混合感染的多种亚型禽流感病毒的纯化和鉴定方法。【方法】用鸡胚终点稀释法和鸡胚终点稀释法结合特异性血清中和法分别对2-3种已知亚型禽流感病毒的混合感染样品进行纯化,并对纯化结果用RT-PCR和血凝抑制试验进行鉴定。用... 详细信息

【目的】研究混合感染的多种亚型禽流感病毒的纯化和鉴定方法。【方法】用鸡胚终点稀释法和鸡胚终点稀释法结合特异性血清中和法分别对2-3种已知亚型禽流感病毒的混合感染样品进行纯化,并对纯化结果用RT-PCR和血凝抑制试验进行鉴定。用建立的方法对214份禽流感病毒阳性样品进行了纯化和鉴定。【结果】用鸡胚终点稀释法对样品稀释、传代6-7次可使病毒达到纯化,但用鸡胚终点稀释法结合特异性血清中和法对样品稀释、传代4-5次即可达到病毒纯化。用RT-PCR和血凝抑制试验两种方法同时鉴定病毒的纯化效果,可明显提高准确性。用本方法从214份样品中纯化出涵盖13种亚型的禽流感病毒233株。【结论】鸡胚终点稀释法及其结合特异性血清中和法均能对禽流感病毒进行纯化,但是鸡胚终点稀释法结合特异性血清中和法更具有针对性,也更有效。另外,对纯化结果的鉴定需采取多种手段。

关键词：禽流感病毒混合感染纯化鉴定

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1株含H9N2内部基因的H5N1亚型基因重配禽流感病毒的全基因测序及遗传进化分析

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病毒学报 2010年第4期26卷 298-304页

作者：顾敏刘文博曹军平曹永忠张小荣彭大新刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

在对华东地区家养水禽中流感病毒的带毒状况的流行病学监测过程中,从表观健康家鸭体内分离到一株H5N1亚型禽流感病毒A/duck/Shandong/009/2008(简称Dk/SD/009/08)。为了解该毒株的基因组构成,对该分离株进行全基因测序。测序结果显示:... 详细信息

在对华东地区家养水禽中流感病毒的带毒状况的流行病学监测过程中,从表观健康家鸭体内分离到一株H5N1亚型禽流感病毒A/duck/Shandong/009/2008(简称Dk/SD/009/08)。为了解该毒株的基因组构成,对该分离株进行全基因测序。测序结果显示:该毒株HA裂解位点处的氨基酸序列为PLRERRRK-R/GL,符合高致病性禽流感病毒的分子特征,且参照H5N1国际统一命名准则,Dk/SD/009/08的HA基因属于2.3.4进化支。BLAST结果显示,HA、NA、NP及NS基因均与H5N1亚型病毒的核苷酸一致性最高,而RNA聚合酶基因(PB2、PB1、PA)及M基因则与H9N2亚型病毒的亲缘关系最近,故推测该分离株可能是一株天然重组病毒;遗传进化分析进一步表明,流行于华南地区鹌鹑中的G1-like H9N2亚型病毒可能为该分离株提供部分的内部基因。

关键词： H5N1 H9N2 2.3.4进化支 G1-like 禽流感病毒重组

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新城疫病毒P/V/W基因编码产物功能结构域的分析及定位

新城疫病毒P/V/W基因编码产物功能结构域的分析及定位

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上海市畜牧兽医学会2011年学术年会

作者：仇旭升孟春春于洋陈鸿军于圣青丁铲中国农业科学院上海兽医研究所上海 200241 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州 225009 中国农业科学院上海兽医研究所上海 200241

NDV的P基因能够通过RNA编辑机制编码三种病毒蛋白P、V和W。为了初步确定新城疫病毒P、V和W的功能结构域及其在P基因中位置，本研究对这三种具有相同N端不同C端的病毒蛋白进行了生物信息学分析。分别设计针对基因II、III、VI和VII型以及c... 详细信息

NDV的P基因能够通过RNA编辑机制编码三种病毒蛋白P、V和W。为了初步确定新城疫病毒P、V和W的功能结构域及其在P基因中位置，本研究对这三种具有相同N端不同C端的病毒蛋白进行了生物信息学分析。分别设计针对基因II、III、VI和VII型以及class I NDV毒株P基因的引物。RT-PCR获得5种基因型NDV P基因的正确序列。通过核苷酸序列预测P基因表达产物的氨基酸序列，并进行二级结构预测和三级结构模拟。将SV5 V蛋白空间结构作为模板，从而分析获得了NDV P/V/W基因编码产物的二级结构以及部分空间结构。综合各种分析数据，预测P蛋白辅助N蛋白折叠的结构域位于N端前50aa内;介导P蛋白四聚体形成的coiled-coil结构位于221 aa-290 aa范围内;介导P蛋白与基因组的作用的X结构域位于291 aa-392 aa范围内。V蛋白的C端结构域的编码区域位于P蛋白132 aa-239 aa编码区域内。

关键词：新城疫病毒 P蛋白 V蛋白生物信息学功能结构域

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不同基因型新城疫病毒对美国白羽王鸽的致病性研究

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中国预防兽医学报 2010年第6期32卷 424-427页

作者：吴双王伟伟曹军平胡顺林王晓泉刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

为比较鸽源Ⅵb亚型新城疫病毒(NDV)与其它不同基因型NDV对鸽的致病性差异,本研究选取JS-7-05-Ch(基因Ⅲ型)、WX-10-07-Pi(基因Ⅵb型)、JS-5-05-Go(基因Ⅶd型)和F48E8(基因Ⅸ型)4个病毒株,分别人工感染2月龄实验鸽。接种后,观察实验鸽临... 详细信息

为比较鸽源Ⅵb亚型新城疫病毒(NDV)与其它不同基因型NDV对鸽的致病性差异,本研究选取JS-7-05-Ch(基因Ⅲ型)、WX-10-07-Pi(基因Ⅵb型)、JS-5-05-Go(基因Ⅶd型)和F48E8(基因Ⅸ型)4个病毒株,分别人工感染2月龄实验鸽。接种后,观察实验鸽临床症状、病理剖解变化、同时检测HI抗体水平变化、喉气管和泄殖腔排毒以及病毒在组织分布情况。4株NDV均能导致接种鸽的发病,但死亡率分别为0、0、100%、50%。WX-10-07-Pi接种组鸽泄殖腔排毒时间最长、而且病毒检出率比其它组高。另外,在接种组鸽的多种组织器官中均可检测出病毒。实验结果表明,不同基因型NDV对鸽均有致病性,但致病力强弱与NDV毒株特性有关;基因Ⅵb型NDV在鸽体内可长期的带毒与排毒,与其它基因型NDV相比更易在鸽群中传播。

关键词：新城疫病毒鸽致病性排毒

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