检索结果-内蒙古大学图书馆

应用间接ELISA检测鸡痘病毒抗体方法的建立

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中国兽医学报 2005年第2期25卷 128-130页

作者：张体银李军伟孙蕾孙学辉张如宽刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

建立了检测鸡痘病毒抗体的间接 EL ISA方法。应用该方法检测鸡痘阳性血清 ,其灵敏度为琼脂扩散试验的 4 0 0~ 80 0倍 ,而且还具有特异性强、操作简便。

关键词：间接ELISA 鸡痘病毒抗体检测鸡痘

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不同家禽红细胞悬液对禽流感血清抗体检测的影响

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中国兽医科技 2005年第4期35卷 267-271页

作者：张评浒唐应华仇旭升薛峰曹永忠高崧刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

为探讨不同家禽红细胞对禽流感血清抗体检测的影响,对不同家禽的禽流感阳性血清分别经不同方法处理后,做了一系列对比试验。结果发现,经受体破坏酶(RDE)处理后,虽然可以消除异种家禽血清对异种家禽红细胞的非特异性凝集作用的影响,但因... 详细信息

为探讨不同家禽红细胞对禽流感血清抗体检测的影响,对不同家禽的禽流感阳性血清分别经不同方法处理后,做了一系列对比试验。结果发现,经受体破坏酶(RDE)处理后,虽然可以消除异种家禽血清对异种家禽红细胞的非特异性凝集作用的影响,但因处理复杂,费用高,不宜推广应用;经鸡红细胞吸附处理,可明显降低水禽血清对异种红细胞的非特异性凝集作用,但处理费时;而用水禽红细胞检测同种水禽的禽流感血清抗体,可以有效去除血清非特异性凝集的影响,且更能准确地反映水禽经禽流感疫苗免疫后的抗体水平。因而,应选用与宿主来源相同的红细胞悬液检测水禽禽流感血清抗体。

关键词：血清抗体检测红细胞悬液禽流感家禽非特异性凝集作用阳性血清对比试验推广应用吸附处理鸡红细胞细胞检测抗体水平疫苗免疫水禽异种宿主

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鹅源新城疫病毒单克隆抗体的研制及其与不同NDV毒株的反应性

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中国兽医科技 2005年第5期35卷 341-345页

作者：胡顺林吴艳涛刘文博刘玉良刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

以鹅源新城疫病毒(NDV)作为免疫原免疫BALB/c小鼠,获得了5 株具有HI特性的单克隆抗体,分别命名为2G5、3A4、3B5、6B1 和8C5,其腹水HI 效价分别为214、212、29、215 和28。竞争ELISA结果表明,2G5、3A4、3B5和6B1在HN蛋白上所针对的表位... 详细信息

以鹅源新城疫病毒(NDV)作为免疫原免疫BALB/c小鼠,获得了5 株具有HI特性的单克隆抗体,分别命名为2G5、3A4、3B5、6B1 和8C5,其腹水HI 效价分别为214、212、29、215 和28。竞争ELISA结果表明,2G5、3A4、3B5和6B1在HN蛋白上所针对的表位属于同一抗原区,而8C5针对的表位为另一抗原区。将上述5株单抗与不同来源的NDV进行了HI排谱试验。结果显示,同一抗原区4株单抗的反应谱比较一致,而与另一抗原区单抗8C5 的反应谱明显不同。5 株单抗与鹅源NDV毒株的反应性较强,而与鸽源NDV毒株的反应性较弱。这5 株单抗用HRP标记后再与不同单抗进行交叉夹心ELISA,得到了一个新的系统(2G5 8C5)。用该系统对NDV分离株做排谱试验。结果显示,该系统与鹅源NDV分离株的反应性较好,表明所建立的新系统可用于鹅源NDV的检测。

关键词：鹅源新城疫病毒单克隆抗体毒株反应谱 HI排谱试验

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应用间接ELISA检测鸡痘病毒抗体方法的建立

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中国预防兽医学报 2005年第6期27卷 540-543,548页

作者：张体银孙蕾孙学辉刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

应用鸡胚成纤维细胞(CEF)扩增鸡痘病毒(Fowlpox virus,FPV)并提纯后作为抗原建立了具有较高特异性和灵敏性的间接ELISA方法.通过方阵滴定法来确定抗原最佳包被浓度为2.7μg/孔,待检血清最佳稀释倍数为1:100,其阳性临界值为OD≥0.113.将... 详细信息

应用鸡胚成纤维细胞(CEF)扩增鸡痘病毒(Fowlpox virus,FPV)并提纯后作为抗原建立了具有较高特异性和灵敏性的间接ELISA方法.通过方阵滴定法来确定抗原最佳包被浓度为2.7μg/孔,待检血清最佳稀释倍数为1:100,其阳性临界值为OD≥0.113.将400份FPV免疫实验鸡血清用本方法进行检测,其阳性检出率为81.25%(325/400).此外,将该方法与琼脂扩散试验进行比较检测血清样品,结果显示本方法的灵敏度比琼脂扩散试验灵敏400～800倍,而且还有特异性强,操作简便、快速等优点.

关键词：间接ELISA 鸡痘病毒抗体

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H5N1亚型禽流感病毒血凝素单克隆抗体的制备及其应用

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中国兽医科技 2005年第6期35卷 450-454页

作者：龙进学郝贵杰唐应华刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

采用活病毒免疫,常规杂交瘤融合的方法,获得了4株针对H5N1亚型禽流感病毒(AIV)A/duck/Shandong/093/2004(A/D/SD/04)株血凝素(HA)的单克隆抗体A8E8、D2F8、A8C8和C3G4。其中A8E8可以与11株不同来源的H5N1AIV发生交叉免疫抑制性反应(HI),具有广谱性。采用间接免疫荧光试验(IFA),用A8E8单克隆抗体测定A/D/SD/04株对COS1和MDCK2种细胞的半数感染量(TCID50),结果显示,A/D/SD/04株在COS1上的TCID50为10-5.33/0.1mL,在MDCK上的为10-7.33/0.1mL。将编码A/D/SD/04株的HA基因质粒与PR8质粒共转染COS1细胞后,用A8E8进行IFA,能观察到特异性绿色荧光,这与鸡胚接种结果相符。表明,用此单克隆抗体能准确地检测到H5重组病毒。

关键词： H5N1亚型禽流感病毒血凝素单克隆抗体制备间接免疫荧光试验

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H_5亚型禽流感疫苗免疫肉鸡、水禽后抗体消长规律的研究

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扬州大学学报（农业与生命科学版） 2005年第2期26卷 1-3页

作者：薛峰张评浒刘晓文唐应华龙进学高崧刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

通过对父母代肉鸡、水禽禽流感病毒H5血清血凝抑制抗体水平连续跟踪监测。探讨H5亚型禽流感疫苗免疫肉鸡、水禽后抗体消长规律。结果表明:雏鸡7日龄时母源抗体水平达最大值,20日龄时母源抗体下降到极低水平,雏鸡最佳首次免疫日龄为10日... 详细信息

通过对父母代肉鸡、水禽禽流感病毒H5血清血凝抑制抗体水平连续跟踪监测。探讨H5亚型禽流感疫苗免疫肉鸡、水禽后抗体消长规律。结果表明:雏鸡7日龄时母源抗体水平达最大值,20日龄时母源抗体下降到极低水平,雏鸡最佳首次免疫日龄为10日龄左右,二次免疫应根据鸡群母源抗体水平于首次免疫后100d左右进行。雏鹅、鸭3日龄进行首次免疫,水禽对禽流感疫苗产生良好的免疫应答,并于免疫后25～30d达到抗体高峰,但首次免疫抗体维持时间不长,最佳二次免疫时间应在首次免疫后30d左右进行。

关键词：抗体消长规律疫苗免疫 H5亚型禽流感水禽肉鸡母源抗体水平血凝抑制抗体禽流感病毒禽流感疫苗跟踪监测水平连续 10日龄免疫日龄二次免疫免疫应答维持时间免疫抗体免疫时间父母代最大值 3日龄雏鸡最佳

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应用多重PCR方法鉴定粪样和食品中分离的产气荚膜梭菌

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中国人兽共患病杂志 2005年第5期21卷 420-423,406页

作者：梁光军赵李祥杨旭芹贾红张小荣文其乙刘秀梵江苏省扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

目的用国标方法和多重PCR方法检测粪样和食品中产气荚膜梭菌分离株。方法采集粪样和食品样品按照国标方法进行分离鉴定,再应用多重PCR方法进行基因型鉴定。结果346份粪便样品分离与鉴定出了69株产气荚膜梭菌,275份食品样品分离到97株产... 详细信息

目的用国标方法和多重PCR方法检测粪样和食品中产气荚膜梭菌分离株。方法采集粪样和食品样品按照国标方法进行分离鉴定,再应用多重PCR方法进行基因型鉴定。结果346份粪便样品分离与鉴定出了69株产气荚膜梭菌,275份食品样品分离到97株产气荚膜梭菌。经过生化试验鉴定和多重PCR方法鉴定,证实均为A型产气荚膜梭菌,携带β2毒素的产气荚膜梭菌共为53株,另检出了2株肠毒素阳性A型产气荚膜梭菌。结论初步摸清了我国的粪便中和食品中的产气荚膜梭菌的动态分布。并在食品中发现了导致人食物中毒的肠毒素阳性A型产气荚膜梭菌,为分子流行病学研究提供了重要理论依据。

关键词：产气荚膜梭菌多重PCR 肠毒素基因分型

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携带新城疫病毒DNA疫苗的鼠伤寒沙门氏菌及其安全性与免疫效力

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微生物学报 2005年第6期45卷 937-941页

作者：潘志明焦新安黄金林殷月兰唐丽华张辉张晓明张小荣刘秀梵扬州大学生物科学与技术学院扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

根据GenBank中发表的新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)基因序列,设计一对引物,通过RTPCR扩增出鹅源新城疫病毒分离株JS5F基因,测序确认后,将其克隆入真核表达载体pVAX1,获得重组真核表达质粒pVAX1F。将pVAX1F转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,... 详细信息

根据GenBank中发表的新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)基因序列,设计一对引物,通过RTPCR扩增出鹅源新城疫病毒分离株JS5F基因,测序确认后,将其克隆入真核表达载体pVAX1,获得重组真核表达质粒pVAX1F。将pVAX1F转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,构建成携带DNA疫苗的重组沙门氏菌SL7207(pVAX1F)。重组菌以不同剂量口服免疫1日龄雏鸡,结果表明,细菌对雏鸡具有良好的安全性,且不影响鸡的增重。将SL7207(pVAX1F)分别以108CFU和109CFU的剂量3次口服免疫1日龄商品代伊莎褐蛋鸡,抗体检测结果显示,在三免后1周,SL7207(pVAX1F)109CFU剂量组的血清抗体效价与空载体组之间存在显著性差异(p<0.05)。重组菌两个剂量组在首免后2周开始出现粘膜抗体,并于二免后2周和3周达到较高水平。免疫保护试验结果显示,SL7207(pVAX1F)109CFU剂量组的保护率为77.27%,与空载体组之间存在显著性差异(p<0.05)。

关键词：减毒沙门氏菌 DNA疫苗新城疫病毒安全性免疫效力

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不同NA亚型H5禽流感疫苗在鸭群的免疫效力及母源抗体对免疫效力的影响

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中国家禽 2005年第20期27卷 8-11页

作者：张评浒唐应华刘晓文薛锋仇旭升曹永忠高崧吴艳涛刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

研究以H5N2和H5N1两种油乳灭活疫苗免疫鸭群对高致病性禽流感H5N1AIV的攻毒保护效力进行了比较。结果表明,在同等免疫剂量下,从发病率、死亡率和泄殖腔排毒规律三项指标综合评价来看,H5N1疫苗免疫组对高致病性禽流感H5N1流行株攻毒的保... 详细信息

研究以H5N2和H5N1两种油乳灭活疫苗免疫鸭群对高致病性禽流感H5N1AIV的攻毒保护效力进行了比较。结果表明,在同等免疫剂量下,从发病率、死亡率和泄殖腔排毒规律三项指标综合评价来看,H5N1疫苗免疫组对高致病性禽流感H5N1流行株攻毒的保护效率较H5N2免疫组理想,故针对高致病性禽流感H5N1流行的情况,宜采用H5N1禽流感疫苗。水禽禽流感母源抗体对灭活苗免疫具有一定的干扰作用。

关键词： NA亚型H5禽流感疫苗鸭群免疫效力母源抗体发病率死亡率泄殖腔排毒规律

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鸡白细胞介素2原核表达载体的构建及表达产物的鉴定

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中国家禽 2005年第14期27卷 15-17页

作者：提金凤张艳梅郝贵杰邵卫星刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

将鸡白细胞介素2(IL-2)的cDNA克隆到原核表达载体pET-30a(+)上,构建原核重组表达质粒pET-IL-2,并在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,37℃用IPTG诱导3.5h后,SDS-PAGE检测表明,表达蛋白以包涵体的形式存在。将诱导后的工程菌超声波裂解,离心... 详细信息

将鸡白细胞介素2(IL-2)的cDNA克隆到原核表达载体pET-30a(+)上,构建原核重组表达质粒pET-IL-2,并在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,37℃用IPTG诱导3.5h后,SDS-PAGE检测表明,表达蛋白以包涵体的形式存在。将诱导后的工程菌超声波裂解,离心后的沉淀用PBS洗涤5～6次,得到高纯度的目的蛋白。

关键词：鸡白细胞介素2 原核表达载体包涵体免疫增强剂

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