检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧与兽医 2004年第2期36卷 11-13页

作者：陈祥高崧施慧王雷刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

从疑似断奶仔猪腹泻的仔猪中分离、鉴定出15株病原性大肠杆菌。经O血清型鉴定,11株为0131、4株未定型,所有O131血清型菌株呈β溶血。多重PCR检测毒素基因(STa、STb、LT、SLT-2e)和大肠杆菌粘附素单抗(F4、F5、F6、F41、F18)检测菌毛,O13... 详细信息

从疑似断奶仔猪腹泻的仔猪中分离、鉴定出15株病原性大肠杆菌。经O血清型鉴定,11株为0131、4株未定型,所有O131血清型菌株呈β溶血。多重PCR检测毒素基因(STa、STb、LT、SLT-2e)和大肠杆菌粘附素单抗(F4、F5、F6、F41、F18)检测菌毛,O131菌株的毒素为STa、STb、SLT-2e,表达F18粘附素,未定型菌株的毒素为STa,共表达F6和F18粘附素。对15株大肠杆菌用16种抗生素进行药敏试验,结果表明:分离株对阿米卡星、痢特灵、新霉素敏感,而对多种抗生素产生了不同程度的耐药性。运用本场大肠杆菌分离株灭活苗免疫猪群,取得良好效果。

关键词：大肠杆菌 0血清型断奶仔猪腹泻 PcR 毒力因子仔猪

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两种消毒剂对禽流感病毒的杀灭效果

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中国兽医杂志 2004年第5期40卷 43-44页

作者：卢建红刘玉良韦栋平邵卫星张如宽刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

禽流感是由正粘病毒科中的A型流感病毒引起的一种禽类感染和疾病综合征.A型流感病毒基因易变、亚型众多、分布广泛,虽然中国出现的禽流感主要是低致病性的H9N2亚型,但各种家禽散养和混养的生态以及香港和世界各地不断从活禽市场检出H5N... 详细信息

禽流感是由正粘病毒科中的A型流感病毒引起的一种禽类感染和疾病综合征.A型流感病毒基因易变、亚型众多、分布广泛,虽然中国出现的禽流感主要是低致病性的H9N2亚型,但各种家禽散养和混养的生态以及香港和世界各地不断从活禽市场检出H5N1流感病毒或发生禽流感等情况提示我们加强禽流感的防止工作迫在眉睫,除应用疫苗外,卫生和消毒等是非常重要的生物安全措施.我们对两种不同制剂的消毒剂进行了杀灭流感病毒试验,可以给实际应用提供参考.

关键词：消毒剂禽流感病毒杀灭效果菌毒杀星杀毒威

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抗H9亚型禽流感病毒血凝素单克隆抗体的制备及初步鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2004年第6期20卷 702-704页

作者：曾艳兵焦新安潘志明黄金林张评汻张苏华孙泉云刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 上海畜牧兽医总站兽医诊断中心上海201103

目的 :制备抗禽流感病毒 (AIV)H9亚型血凝素蛋白的单克隆抗体 (mAb)。方法 :以AIVH9亚型油乳剂灭活疫苗作为免疫原 ,免疫 8wk龄BALB/c小鼠。采用淋巴细胞杂交瘤技术制备抗AIVH9亚型血凝素蛋白的mAb ;采用ELISA和血凝抑制试验(HI)检测腹... 详细信息

目的 :制备抗禽流感病毒 (AIV)H9亚型血凝素蛋白的单克隆抗体 (mAb)。方法 :以AIVH9亚型油乳剂灭活疫苗作为免疫原 ,免疫 8wk龄BALB/c小鼠。采用淋巴细胞杂交瘤技术制备抗AIVH9亚型血凝素蛋白的mAb ;采用ELISA和血凝抑制试验(HI)检测腹水mAb的效价 ;采用ELISA、HI、免疫荧光染色 (IF)及Westernblot鉴定mAb的特异性。结果 :获得 3株可稳定分泌特异性mAb的杂交瘤细胞株 2A3、2H1和 1C8,其腹水mAb的ELISA效价依次为 1× 10 7、1× 10 5和 5× 10 6,血凝抑制效价为 1× 2 8～ 1× 2 13 ;3株mAb的Ig亚类均为IgG1。以mAb 2H1进行Westernblot的结果显示 ,该mAb能与AIV的Mr 为 75 0 0 0的蛋白条带起反应 ,表明其是针对AIVH9亚型血凝素蛋白的mAb。与 32株AIVH9亚型国内分离株进行血凝抑制试验表明 ,mAb 2H1具有良好的广谱性。结论 :成功地制备了抗AIVH9亚型血凝素蛋白的mAb ,为AIV的抗原性分析、血清学诊断。

关键词：禽流感病毒 H9亚型血凝素单克隆抗体

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产气荚膜梭菌α毒素基因的克隆表达和生物学活性的鉴定

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中国人兽共患病杂志 2004年第7期20卷 573-576页

作者：梁光军田银芳文其乙张小荣潘志明高玉高崧焦新安刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009 扬州大学实验农场苏北人民医院

目的　利用原核表达系统表达具有生物学活性的产气荚膜梭菌α毒素。方法　设计针对α毒素基因的一对引物 ,用聚合酶链式反应 (PCR)技术扩增出α毒素的全基因。经测序确认正确后 ,回收的α毒素目的条带与 pGEX6 p - 1表达载体经限制性内... 详细信息

目的　利用原核表达系统表达具有生物学活性的产气荚膜梭菌α毒素。方法　设计针对α毒素基因的一对引物 ,用聚合酶链式反应 (PCR)技术扩增出α毒素的全基因。经测序确认正确后 ,回收的α毒素目的条带与 pGEX6 p - 1表达载体经限制性内切酶XhoⅠ和EcoRⅠ双酶切后 ,进行连接 ,转化大肠杆菌BL2 1。诱导表达后 ,做SDS -PAGE电泳 ,出现特异的表达产物条带。表达产物做溶血活性、卵磷脂水解活性和腹腔接种小鼠实验。结果　构建的重组质粒经内切酶XhoⅠ和EcoRⅠ双酶切后 ,发现特异的目的基因条带。SDS -PAGE电泳后 ,发现重组菌株有特异的表达条带。实验证明表达产物具有溶血活性、卵磷脂水解活性和腹腔接种后致死小鼠特性。结论　重组菌株BL2 1(pGEX6p - 1-cpα)表达了具有活性的α毒素蛋白。目的　利用原核表达系统表达具有生物学活性的产气荚膜梭菌α毒素。方法　设计针对α毒素基因的一对引物 ,用聚合酶链式反应 (PCR)技术扩增出α毒素的全基因。经测序确认正确后 ,回收的α毒素目的条带与 pGEX6 p - 1表达载体经限制性内切酶XhoⅠ和EcoRⅠ双酶切后 ,进行连接 ,转化大肠杆菌BL2 1。诱导表达后 ,做SDS -PAGE电泳 ,出现特异的表达产物条带。表达产物做溶血活性、卵磷脂水解活性和腹腔接种小鼠实验。结果　构?

关键词：产气荚膜梭菌 α毒素基因克隆表达生物学活性鉴定聚合酶链式反应

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H7亚型禽流感病毒血凝素基因的真核表达载体的构建及鉴定

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中国家禽 2004年第z1期26卷 31-34页

作者：杨旭芹梁光军张小荣文其乙刘秀梵扬州大学兽医学院畜禽传染病学农业部重点开放实验室江苏扬州225009

参考已发表的H7亚型禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)基因序列设计引物,以pUCH7为模板,经PCR扩增出一条1.7kb的HA全基因片段,将该片段定向克隆到真核表达质粒载体pcDNA3.1(一)中,转化大肠埃希氏菌DH5α,小量制备重组质粒pcDNA-HA,酶切鉴定正确... 详细信息

参考已发表的H7亚型禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)基因序列设计引物,以pUCH7为模板,经PCR扩增出一条1.7kb的HA全基因片段,将该片段定向克隆到真核表达质粒载体pcDNA3.1(一)中,转化大肠埃希氏菌DH5α,小量制备重组质粒pcDNA-HA,酶切鉴定正确后,转染COS-1细胞,经免疫荧光鉴定其体外表达情况。结果表明H7亚型AIV HA在COS-1细胞中获得了成功表达。用该重组质粒pcDNA-HA免疫BALB／C小鼠,制备免疫血清,经免疫印迹实验证实该H7亚型AIV HA在小鼠体内也得到了良好的表达。

关键词： H7亚型禽流感病毒血凝素基因真核表达质粒载体表达

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运送鹅源新城疫病毒DNA疫苗的减毒沙门氏菌及其免疫原性

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农业生物技术学报 2004年第4期12卷 412-415页

作者：潘志明焦新安张小荣张晓明黄金林万洪全刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009 扬州225009 扬州225009 扬州225009 扬州225009 扬州225009 扬州大学生物科学与技术学院扬州大学生物科学与技术学院扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学生物科学与技术学院扬州大学生物科学与技术学院扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009 扬州225009

根据GenBank中发表的新城疫病毒融合蛋白(F)基因序列,设计一对引物,通过RT-PCR扩增出鹅源新城疫病毒分离株JS5 F基因,约1 700 bp,测序确认后,将其克隆入真核表达载体pVAX1,得到候选DNA疫苗pVAX1-F。将pVAX1-F转化减毒鼠伤寒沙门氏菌(Sal... 详细信息

根据GenBank中发表的新城疫病毒融合蛋白(F)基因序列,设计一对引物,通过RT-PCR扩增出鹅源新城疫病毒分离株JS5 F基因,约1 700 bp,测序确认后,将其克隆入真核表达载体pVAX1,得到候选DNA疫苗pVAX1-F。将pVAX1-F转化减毒鼠伤寒沙门氏菌(Salmonellatyphimurium)X4550,获得运送DNA疫苗的重组沙门氏菌X4550(pVAX1-F)。以2×108CFU/只的剂量两次免疫CD1小鼠,免疫小鼠可以检测到特异性针对NDV F蛋白的血清抗体应答,X4550(pVAX1-F)免疫组抗体水平显著高于X4550(pVAX1)组(P <0.05),表明该运送DNA疫苗的减毒沙门氏菌系统在体内能够成功释放所携带的质粒,并能够刺激机体产生免疫应答。

关键词：减毒沙门氏菌 DNA疫苗新城疫病毒免疫原性

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华东地区致初生仔猪腹泻大肠杆菌的O血清型和毒力因子

华东地区致初生仔猪腹泻大肠杆菌的O血清型和毒力因子

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中国畜牧兽医学会2004学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会

作者：陈祥高崧王雷焦新安刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

从江苏、江西、安徽等7个省疑似黄、白痢直肠棉拭及病死猪的十二指肠和肠系膜淋巴结中分离鉴定出339株病原性大肠杆菌。经O血清型鉴定,除77株未能定型、41株自凝外,测定出221个分离株的O血清型,这些分离株覆盖了64个血清型,以107、O101... 详细信息

从江苏、江西、安徽等7个省疑似黄、白痢直肠棉拭及病死猪的十二指肠和肠系膜淋巴结中分离鉴定出339株病原性大肠杆菌。经O血清型鉴定,除77株未能定型、41株自凝外,测定出221个分离株的O血清型,这些分离株覆盖了64个血清型,以107、O101、O20、O93、O11和O149为主,共99株,占定型菌株的44.80%。这些血清型与已报道的常见血清型问存在一定差异。运用黏附素单抗对以上菌株进行F4、F5、F6、F18、F41五种黏附素检测,共97个分离株表达黏附素(28.61%),而表达两种和3种黏附素的菌株分别有22株和8株,它们分别占表达黏附素菌株的22.68%和8.25%,其中单独表达F4、F6、F5+F41黏附素菌株分别有18、30、15株,分别占表达黏附素菌株的18.56%、30.93%和15.46%;同时运用多重PCR对其中145个分离株进行毒素基因(STa、STb、LT、SLT-2e)的检测,拥有STA和STb乃毒素基因的菌株分别占检测菌株的51.72%和37.24%。F6、F4、F5+F41和STa、STb为该地区致初生仔猪腹泻大肠杆菌常见的毒力因子。

关键词：仔猪腹泻大肠杆菌 O血清型黏附素毒素

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以减毒沙门氏菌运送的H5亚型禽流感病毒DNA疫苗的构建及其对小鼠的免疫原性

以减毒沙门氏菌运送的H5亚型禽流感病毒DNA疫苗的构建及其对小鼠...

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全国首届动物生物技术学术研讨会

作者：张小荣焦新安潘志明张晓明黄金林张如宽刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学生物科学与技术学院扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

根据Genbank中已经发表的H5亚型禽流感病毒HA基因序列,设计一对引物,通过RT-PCR扩增鹅源H5亚型高致病性禽流感病毒HA基因,测序确认后,将其克隆入真核表达载体pVAX1和asd-pVAX1得到重组表达载体pVAX1-HA和asd-pVAX1-HA。将重组质粒转染P... 详细信息

根据Genbank中已经发表的H5亚型禽流感病毒HA基因序列,设计一对引物,通过RT-PCR扩增鹅源H5亚型高致病性禽流感病毒HA基因,测序确认后,将其克隆入真核表达载体pVAX1和asd-pVAX1得到重组表达载体pVAX1-HA和asd-pVAX1-HA。将重组质粒转染P815细胞,经间接免疫荧光试验证实,HA基因在细胞内得到了瞬时表达。进一步将重组质粒转化减毒鼠伤寒沙门氏菌X4550,得到两种运送DNA疫苗的重组沙门氏菌X4550(pVAX1-HA)和X4550(asd-pVAX1-HA),以1×10～9CFU/只的剂量两次口服免疫BALB/c小鼠,免疫小鼠不仅可以检测到血清抗体应答,而且还能抵抗稳定表达H5亚型禽流感病毒HA基因的P815肥大细胞瘤的攻击,说明该运送DNA疫茵的减毒沙门氏菌系统在体内能够成功释放所携带的质粒,并且能够刺激机体产生免疫应答。

关键词：减毒沙门氏菌 DNA疫苗 H5亚型禽流感病毒免疫原性

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华东地区家鸭中不同HA亚型禽流感病毒的分布

华东地区家鸭中不同HA亚型禽流感病毒的分布

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中国畜牧兽医学会2004学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会

作者：钱忠明张评浒薛峰刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

2002年7-2003年11月,在华东地区家鸭中采集到1603个泄殖腔拭子。用鸡胚尿囊腔传代接种法对泄殖腔拭子进行分离鉴定禽流感病毒,共分离到207株禽流感病毒,总分离率为12.9%。经HI试验和RT-PCR法鉴定,这207株禽流感病毒中共有8种HA亚型,包... 详细信息

2002年7-2003年11月,在华东地区家鸭中采集到1603个泄殖腔拭子。用鸡胚尿囊腔传代接种法对泄殖腔拭子进行分离鉴定禽流感病毒,共分离到207株禽流感病毒,总分离率为12.9%。经HI试验和RT-PCR法鉴定,这207株禽流感病毒中共有8种HA亚型,包括Hl、H3、H4、H5、H6、H9、H10和H11亚型。在这些禽流感病毒中,优势禽流感病毒是H5亚型禽流感病毒,其次是H3亚型禽流感病毒。不同月份的分离率显示,冬春季节的分离率特别高(大于40.0%),而夏季的分离率则很低(低于6.0%)。H5亚型病毒的分离率也具有相似的特征。本次调查的结果表明,我国家鸭在冬春季节时H5亚型病毒的高感染率,可能与我国近几年来鸡在冬春季节易发H5亚型高致病性禽流感有一定的联系。

关键词：禽流感病毒家鸭 HA亚型分布

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H9N2亚型A型流感

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中国禽业导刊 2004年第9期21卷 30-31页

作者：王海燕刘文博文其乙张如宽刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

A型流感病毒能引起各种鸟类、低等哺乳动物和人类的疾病.禽流感(AI)自1878年在意大利首次发现至今,由于候鸟的迁徙和国际间贸易的日益频繁,使得该病呈全球性分布,给养禽业造成巨大的经济损失.1997年'香港禽流感'表明,AI已对人... 详细信息

A型流感病毒能引起各种鸟类、低等哺乳动物和人类的疾病.禽流感(AI)自1878年在意大利首次发现至今,由于候鸟的迁徙和国际间贸易的日益频繁,使得该病呈全球性分布,给养禽业造成巨大的经济损失.1997年'香港禽流感'表明,AI已对人类的健康造成了潜在的威胁.流感病毒(IV)血清亚型繁多,自从1966年Homme等人首次报道从火鸡中分离出H9N2亚型A型IV以来,陆续从鸡、野鸡、鸭、鸽子和鹌鹑中分离到该亚型AⅣ.除禽和人以外,还从其它动物中分离到.我国最早于1980年从鸭饮过的水中分离到.1994年以来,从我国鸡群中普遍分离出该亚型病毒,该病已严重威胁了我国养禽业的发展.

关键词： H9N2亚型 A型流感病毒禽流感致病性毒株流行病学

来源：评论

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