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家畜传染病学会第六次人畜共患病学术交流会

作者：黄金林焦新安潘志明文其乙刘秀梵扬州大学生物科学与技术学院扬州大学生物科学与技术学院扬州大学生物科学与技术学院扬州大学生物科学与技术学院扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

目的通过比较试验,得到准确、快速的沙门氏菌检测方法。方法在PCR和ELISA检测沙门氏菌的基础上,将两种快速检测方法进行比较研究。结果PCR法的敏感性优于直接ELISA法。直接ELISA结合PCR法对饮食行业工作人员健康检查的1546份人粪便样品... 详细信息

目的通过比较试验,得到准确、快速的沙门氏菌检测方法。方法在PCR和ELISA检测沙门氏菌的基础上,将两种快速检测方法进行比较研究。结果PCR法的敏感性优于直接ELISA法。直接ELISA结合PCR法对饮食行业工作人员健康检查的1546份人粪便样品进行检测,同时以国标方法为参照,直接ELISA法的敏感性和特异性达100%和97.14%,PCR法的敏感性和特异性均为100%。结论确定了优化的沙门氏菌检测程序:对大量样品采用直接ELISA筛检,除去大量阴性样品,阳性样品用PCR法作进一步鉴定;血清型的确定用国标方法。

关键词：沙门氏菌 PCR ELISA 快速检测

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Pas Reform——生产孵化新产品的跨国公司

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中国禽业导刊 2004年第7期21卷 23-23页

作者：张艳梅提金凤扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室 225009

PasReform是一家基地在荷兰的私营跨国集团,是腾凯特(TenCate)集团公司的一分子。自1919年起专门从事家禽孵化新技术的开发研究。

关键词： Pas Reform 生产孵化跨国公司家禽孵化技术

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树突状细胞在沙门氏菌感染获得性免疫中的作用

树突状细胞在沙门氏菌感染获得性免疫中的作用

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家畜传染病学会第六次人畜共患病学术交流会

作者：潘志明焦新安黄金林唐丽华刘秀梵扬州大学生物科学与技术学院扬州大学生物科学与技术学院扬州大学生物科学与技术学院扬州大学生物科学与技术学院扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

对于沙门氏菌感染的免疫反应是天然免疫系统和获得性免疫系统共同发挥作用的结果。天然免疫系统中的许多成分以协调的方式来防御沙门氏菌的感染。其中发挥作用的细胞有吞噬性和非吞噬性的两种细胞组分,如中性粒细胞、巨噬细胞、自然杀... 详细信息

对于沙门氏菌感染的免疫反应是天然免疫系统和获得性免疫系统共同发挥作用的结果。天然免疫系统中的许多成分以协调的方式来防御沙门氏菌的感染。其中发挥作用的细胞有吞噬性和非吞噬性的两种细胞组分,如中性粒细胞、巨噬细胞、自然杀伤细胞(NK)和NKT细胞等。这些细胞通过吞噬并杀死感染的细菌。最先是由中性粒细胞和巨噬细胞(Mφ)发挥这一功能。另外,这些细胞分泌产生的细胞因子和

关键词：沙门氏菌感染特异性免疫应答经口感染

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携带新城疫病毒DNA疫苗鼠伤寒沙门氏菌的安全性和免疫效力试验

携带新城疫病毒DNA疫苗鼠伤寒沙门氏菌的安全性和免疫效力试验

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中国畜牧兽医学会2004学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会

作者：潘志明焦新安黄金林唐丽华张辉张成全刘秀梵扬州大学生物科学与技术学院扬州大学生物科学与技术学院扬州大学生物科学与技术学院扬州大学生物科学与技术学院扬州大学生物科学与技术学院扬州大学生物科学与技术学院扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

将重组减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207(pVAX1-F)分别以不同剂量口服免疫1日龄雏鸡,结果表明,重组菌SL7207(pVAX1-F)对雏鸡具有良好的安全性,且不影响鸡的增重。将重组菌SL7207(pVAX1-F)分别以108CFU和109CFU的剂量三次口服免疫1日龄商品代伊... 详细信息

将重组减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207(pVAX1-F)分别以不同剂量口服免疫1日龄雏鸡,结果表明,重组菌SL7207(pVAX1-F)对雏鸡具有良好的安全性,且不影响鸡的增重。将重组菌SL7207(pVAX1-F)分别以108CFU和109CFU的剂量三次口服免疫1日龄商品代伊莎褐蛋鸡,血清和小肠粘膜抗体效价检测结果显示,SL7207(pVAX1-F)能激发机体产生体液免疫应答,在三免后1周,SL7207(pVAX1-F)109CFU剂量组的血清抗体效价与空载体组和空白对照组之间存在显著性差异(p<0.05)。重组菌SL7207(pVAX1-F)108CFU和109CFU两个剂量组在首免后2周开始出现粘膜抗体,并于二免后2周和3周达到较高水平。免疫保护试验结果显示,SL7207(pVAX1-F)109 CFU剂量组对鸡具有良好的保护率(77.27%),与空白对照组和SL7207(pVAX1)空载体组之间存在显著性差异(p<0.05),说明重组细菌SL7207(pVAX1-F)能提供NDV强毒攻击良好的免疫保护作用,预示着该疫苗候选株在新城疫控制中有重要应用前景。

关键词：减毒沙门氏菌 DNA疫苗新城疫病毒安全性免疫效力

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H9N2亚型禽流感病毒基因组全长序列测定和各基因的遗传分析

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微生物学报 2003年第4期43卷 434-441页

作者：卢建红刘秀梵邵卫星张评浒韦栋平扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

用RT PCR技术及cDNA末端快速扩增法获得禽流感病毒分离株A Chicken Shanghai F 98(H9N2 )代表基因组全长的 8个基因片段。基因组序列比较及遗传进化分析结果表明 ,Chicken Shanghai F 98的 8个基因均不属于Quail HongKong G1 97亚系 ,... 详细信息

用RT PCR技术及cDNA末端快速扩增法获得禽流感病毒分离株A Chicken Shanghai F 98(H9N2 )代表基因组全长的 8个基因片段。基因组序列比较及遗传进化分析结果表明 ,Chicken Shanghai F 98的 8个基因均不属于Quail HongKong G1 97亚系 ,与香港禽流感事件没有直接关系。它与Chicken Beijing 1 94的HA、NA、M、NS基因同源率分别为 96 7%、96 4%、97 5 %和 98 0 % ,这 4个基因属于Chicken Beijing 1 94亚系 ,其中 ,NA基因与Duck HongKong Y2 80 97的同源率为 97 4% ,而且它们均在 2 0 5位后缺失 9个核苷酸。而PB2、PB1、PA和NP基因与已知的 3个亚系关系较远 ,分别在相应的进化树上另成分支。因此 ,Chicken Shanghai F 98是两个以上不同基因亚系间发生自然重排的产物。

关键词： H9N2亚型禽流感病毒基因组序列测定遗传分析

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封闭式饲养鸡场H9N2亚型禽流感病毒HA基因在5年内的遗传变异

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微生物学报 2003年第6期43卷 706-711页

作者：刘红旗张评浒刘秀梵刘文博贾立军彭大新程坚扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

选择一个于 1 998年开始发生H9亚型禽流感的封闭式大型养鸡场 ,连续 5年内分离到 2 2株H9N2亚型病毒 ,对其中 9株与 1 998年分离株进行HA基因序列和病毒抗原性的比较结果表明 ,这些分离株均与 1 998年的具有较高的序列同源性 ,且在本研... 详细信息

选择一个于 1 998年开始发生H9亚型禽流感的封闭式大型养鸡场 ,连续 5年内分离到 2 2株H9N2亚型病毒 ,对其中 9株与 1 998年分离株进行HA基因序列和病毒抗原性的比较结果表明 ,这些分离株均与 1 998年的具有较高的序列同源性 ,且在本研究期内HA基因的这些变化尚未产生引起交叉保护性改变。初步推断这些分离株均系 1 998年分离株在场内循环传播变化得来 ,其HA基因的变异可能与频繁的疫苗免疫选择压力有关。这为进一步研究禽流感病毒变异的规律和制定正确的禽流感防治对策具有重要意义。

关键词： H9N2亚型禽流感病毒血凝素基因遗传变异 HA基因

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鹅源新城疫病毒ZJ1株全基因组的序列测定

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病毒学报 2003年第4期19卷 348-354页

作者：黄勇万洪全刘红旗吴艳涛刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

依据GenBank上公布的新城疫病毒(NDV)的基因序列,自行设计了9对引物,运用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)获取覆盖NDV鹅源毒株ZJ1株全基因组的部分重叠片段。病毒RNA的5′及3′端的序列由cDNA末端快速扩增技术(RACE)获取。整个病毒基因组... 详细信息

依据GenBank上公布的新城疫病毒(NDV)的基因序列,自行设计了9对引物,运用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)获取覆盖NDV鹅源毒株ZJ1株全基因组的部分重叠片段。病毒RNA的5′及3′端的序列由cDNA末端快速扩增技术(RACE)获取。整个病毒基因组序列由15192个碱基组成,比GenBank上公布的其它4个NDV毒株BeaudetteC、B1、Lasota及Clone-30的全基因组序列长6个核苷酸。这6个核苷酸位于核衣壳蛋白(NP)基因内,相对于NDV毒株Lasota株全基因序列的1647nt～1648nt位。其它10个NDV毒株中的9个毒株也被验证具有此特征,且它们分属于3个不同的基因型。

关键词：新城疫病毒基因组鹅源序列测定

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利用噬菌体展示肽库筛选和鉴定沙门氏菌O9抗原的模拟表位

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中国人兽共患病杂志 2003年第1期19卷 60-63页

作者：张扬焦新安刘文博潘志明高崧张如宽刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

目的　用生物素标记沙门氏菌O9单克隆抗体 (3- 4 7-O)作为分子探针 ,从两个九肽噬菌体展示文库中筛选鉴定该抗体所识别的抗原模拟表位 ,从而为模拟多糖的多肽疫苗或编码该模拟表位的DNA疫苗研制奠定基础。方法与结果　经过三轮的亲和筛... 详细信息

目的　用生物素标记沙门氏菌O9单克隆抗体 (3- 4 7-O)作为分子探针 ,从两个九肽噬菌体展示文库中筛选鉴定该抗体所识别的抗原模拟表位 ,从而为模拟多糖的多肽疫苗或编码该模拟表位的DNA疫苗研制奠定基础。方法与结果　经过三轮的亲和筛选 ,得到了两个能与O9单抗反应的强阳性单克隆扩增物gm6 2和 gm6 8,其序列分别为SHHVRGGGG和YQKWYLPKS。竞争ELISA实验表明 ,10 10转导单位噬菌体 gm6 8对肠炎沙门氏菌与 3- 4 7-O结合的抑制率达到 6 5 % ,而噬菌体 gm6 2的抑制率仅为 2 0 % ,且 gm6 8可以诱导产生针对沙门氏菌O9的抗体 ,而gm6 2则不能。结论　实验结果显示九肽YQKWYLPKS是具有免疫原性的O9抗原模拟表位。

关键词：沙门氏菌 O9抗原模拟表位噬菌体展示肽库

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炭疽杆菌毒力因子作用机制研究进展

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中国人兽共患病杂志 2003年第1期19卷 105-107页

作者：冀德君高崧吴艳涛彭大新杨玲焦新安扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

炭疽杆菌及其芽孢感染人兽,引起高热、皮肤溃疡及焦痂,亦可因不同侵入途径而引起肺炎、肠炎或全身性败血症,是一类重要的烈性人畜共患病病原.本菌存在于感染动物及人的各个组织及排泄物中,其芽孢存在于受污染的土壤、水草、皮毛及其制品... 详细信息

炭疽杆菌及其芽孢感染人兽,引起高热、皮肤溃疡及焦痂,亦可因不同侵入途径而引起肺炎、肠炎或全身性败血症,是一类重要的烈性人畜共患病病原.本菌存在于感染动物及人的各个组织及排泄物中,其芽孢存在于受污染的土壤、水草、皮毛及其制品中.本菌及其芽孢常从破损皮肤及伤口处或从呼吸道、消化道侵入草食兽及人,迅速繁殖而产生各种毒力因子,使局部组织出血、坏死及周围组织水肿甚至导致全身性症状,使动物及人休克及死亡.本菌致病作用主要依赖于其分泌的外毒素,即使在感染的某一时期使用抗生素消灭了体内所有的炭疽杆菌,亦很难保证患畜及人免于死亡,而且抗药性的存在令其危害更大.由于这一特点,炭疽杆菌及其芽孢成为一种生物武器的材料,并被应用于恐怖活动,也正是由于这一公共卫生意义,对炭疽杆菌毒力因子及其作用机制的研究较为深入,在美国炭疽热事件之后进展更快,即将推出抑制毒素作用的新药.本文对炭疽杆菌的毒力因子研究进展作一综述.

关键词：炭疽杆菌毒力因子作用机制研究进展荚膜

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应用噬菌体肽库技术定位沙门氏菌鞭毛蛋白上属特异性共同抗原表位

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畜牧兽医学报 2003年第2期34卷 183-187页

作者：刘文博焦新安高崧张扬潘志明王芳张如宽刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

用生物素标记的沙门氏菌属特异性单克隆抗体de7作为分子探针 ,应用亲和筛选法从噬菌体肽库中筛选该单抗所针对的表位克隆 ,最终进行定位。经三轮筛选后 ,用斑点印迹法检测 ,得到良好的富集效果。通过免疫筛选法从第三轮筛选物中挑取了 ... 详细信息

用生物素标记的沙门氏菌属特异性单克隆抗体de7作为分子探针 ,应用亲和筛选法从噬菌体肽库中筛选该单抗所针对的表位克隆 ,最终进行定位。经三轮筛选后 ,用斑点印迹法检测 ,得到良好的富集效果。通过免疫筛选法从第三轮筛选物中挑取了 2 4个阳性克隆 ,再以斑点印迹、竞争ELISA进一步鉴定阳性克隆 ,证实已获得了沙门氏菌鞭毛属特异性共同抗原的模拟表位。测得的序列为SRRSFTTTE ,将其与沙门氏菌鞭毛蛋白氨基酸序列相比较 ,同源性较小 ,但在不同血清型沙门氏菌鞭毛蛋白氨基酸序列的Ⅰ区高度保守序列中 ,发现 6 1 6 5位氨基酸的RSXXT序列与所得的线性表位有相同的排列 ,而大肠杆菌鞭毛蛋白氨基酸在此段的序列为RAXXT ,且这种序列排列的几率为 1/2 0 5,因此推断该单抗所针对的表位在该区段上。此外 ,以阳性克隆免疫Balb/c小鼠 ,并制备高免血清进行间接荧光检测和竞争ELISA鉴定 ,结果表明其具有优良的免疫原性和高度的特异性 ,这亦为模拟表位疫苗的研究提供了新思路。

关键词：沙门氏菌鞭毛蛋白属共同抗原位表位模拟表位噬菌体肽库表位定位

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