检索结果-内蒙古大学图书馆

中国家禽 2009年第23期31卷 11-14页

作者：刘晓文吴双胡顺林王晓泉刘慧谋刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

为分析2002～2007年Class Ⅰ新城疫病毒分离株NP基因的分子特征,以及其在新城疫病毒演化过程中所起的作用,采用RT-PCR方法扩增分离株的核衣壳蛋白(NP)基因,并进行了测序,应用生物信息学软件分析NDVNP基因的分子特征。根据NP基因序列的... 详细信息

为分析2002～2007年Class Ⅰ新城疫病毒分离株NP基因的分子特征,以及其在新城疫病毒演化过程中所起的作用,采用RT-PCR方法扩增分离株的核衣壳蛋白(NP)基因,并进行了测序,应用生物信息学软件分析NDVNP基因的分子特征。根据NP基因序列的遗传发生分析表明,ClassⅠ NDV2型毒株与DE/R49-99和美国株亲缘关系较近,而3型毒株与其他ClassⅠ毒株遗传关系较远,具有地区特色,形成一个独立的分支。生物信息学软件分析表明,NP蛋白N端1～400氨基酸比较保守,而C端序列(特别是氨基酸残基400～480)高度变异。ClassⅠ病毒2型毒株与国外分离株亲缘关系较近,可能有共同的起源;而3型毒株独立于其他ClassⅠ毒株,具有独特性,这两种毒株的来源不同;不同基因型NP蛋白之间比较保守,但是P蛋白的C端发生了多个氨基酸的变异,对其功能的影响还需进一步探讨。

关键词：新城疫病毒 ClassⅠ和Class Ⅱ 核蛋白基因发生分析

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2006--2008年华东地区家禽不同HA亚型低致病性禽流感的病原学监测

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中国人兽共患病学报 2009年第2期25卷 119-121页

作者：彭宜张伟薛峰汪文斌李彦芳孟春春张文俊刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009 江苏出入境检验检疫局南京210001

目的采用血清学试验和RT-PCR方法在2006-2008年5月期间从华东地区家禽中分离到473株禽流感病毒(AIVs),其中家鸭AIVs的分离率最高(14.7%),鸡AIVs分离率最低(2.92%)。共分离到H1、H3、H4、H6、H9、H10、H11七种HA亚型低致病性禽流感病毒(L... 详细信息

目的采用血清学试验和RT-PCR方法在2006-2008年5月期间从华东地区家禽中分离到473株禽流感病毒(AIVs),其中家鸭AIVs的分离率最高(14.7%),鸡AIVs分离率最低(2.92%)。共分离到H1、H3、H4、H6、H9、H10、H11七种HA亚型低致病性禽流感病毒(LPAIVs),其中H3亚型LPAIVs在家禽中的分布占优势。禽流感病毒的分离呈现一定的季节性,一般春秋冬三个季节分离率相对较高。

关键词：低致病性禽流感病毒分离率监测 HA亚型分布

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猪繁殖与呼吸综合征病毒江苏株的分离与鉴定

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动物医学进展 2009年第4期30卷 36-40页

作者：刘金彪孟庆华吴艳涛高崧彭大新刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 盐城生物工程高等学校江苏盐城224051

从暴发猪高热病的江苏盐城地区某养殖户送检病料中分离到一株致Marc-145细胞病变的病毒,细胞培养物裂解上清经浓缩、负染后电镜观察可见直径约50 nm,有囊膜的球形病毒粒子;间接免疫荧光试验结果表明,该分离株与美洲型猪繁殖与呼吸综合... 详细信息

从暴发猪高热病的江苏盐城地区某养殖户送检病料中分离到一株致Marc-145细胞病变的病毒,细胞培养物裂解上清经浓缩、负染后电镜观察可见直径约50 nm,有囊膜的球形病毒粒子;间接免疫荧光试验结果表明,该分离株与美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒阳性血清反应发出强特异性荧光;以特异性引物对分离的病毒进行RT-PCR扩增于600 bp^700 bp出现单一条带,序列分析显示Nsp2缺失了87 bp。结果表明,该分离株为美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株,暂命名为JYC。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒分离鉴定 RT—PCR

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高邮某鸡场2005～2008年新城疫、禽流感抗体与带毒状况跟踪监测

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中国家禽 2009年第24期31卷 59-60页

作者：刘慧谋秦廷安胡顺林孙庆高崧扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 高邮市畜牧兽医站江苏高邮225600

新城疫（ND）和禽流感（AI）是严重危害养禽业的重要病毒性疫病，在给养禽业造成巨大经济损失的同时，在公共卫生上有其重要性。目前，在我国主要通过广泛疫苗的免疫接种来控制ND与AI的发生与流行。但是，在临床上由于疫苗使用不当或滥... 详细信息

新城疫（ND）和禽流感（AI）是严重危害养禽业的重要病毒性疫病，在给养禽业造成巨大经济损失的同时，在公共卫生上有其重要性。目前，在我国主要通过广泛疫苗的免疫接种来控制ND与AI的发生与流行。但是，在临床上由于疫苗使用不当或滥用疫苗，造成免疫失败的现象屡有发生。因此，制定合理的免疫程序对预防上述疫病的暴发具有重要作用。

关键词：禽流感抗体新城疫跟踪监测病毒性疫病鸡场经济损失公共卫生免疫接种

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传染性支气管炎病毒分离株的生物学特性鉴定及其遗传变异分析

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畜牧兽医学报 2009年第1期40卷 89-92页

作者：吴培培唐应华刘文博陈义平张小荣吴艳涛刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009 中国动物卫生与流行病学中心青岛266032

通过鸡胚矮小试验、鸡胚气管环组织培养试验、干扰新城疫病毒复制试验和动物回归试验，将2006-2007年在江苏省分离的7株鸡传染性支气管炎病毒（IBV）鉴定为嗜肾型毒株。采用RT-PCR扩增IBV分离株的S1基因，并进行克隆和序列分析。结果显... 详细信息

通过鸡胚矮小试验、鸡胚气管环组织培养试验、干扰新城疫病毒复制试验和动物回归试验，将2006-2007年在江苏省分离的7株鸡传染性支气管炎病毒（IBV）鉴定为嗜肾型毒株。采用RT-PCR扩增IBV分离株的S1基因，并进行克隆和序列分析。结果显示7个IBV分离株S1基因的核苷酸同源性为94．6％-99．4％，处于同一个群，分别属于3个亚群。这些毒株与大多数国内近年分离株的同源性较高，而与Massachusetts、T、4／91和793B血清型毒株（包括H120和H52疫苗毒株）的同源性较低。IBV流行毒株和疫苗毒株的差异是造成免疫鸡群发生传染性支气管炎的重要原因。

关键词：传染性支气管炎病毒生物学特性 S1基因 RT—PCR

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冷适应减毒B型流感病毒疫苗候选株的制备及鉴定(英文)

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生物化学与生物物理进展 2009年第3期36卷 358-363页

作者：杨鹏辉安文琪石辛甫段跃强罗德炎张鹏飞唐冲邢丽张玉静刘秀梵王希良军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 吉林大学畜牧兽医学院长春130000 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

以冷适应、温度敏感、减毒的B/Ann Arbor/1/66流感病毒株作为重配病毒骨架,对其6个内部基因片段进行了全基因合成,同时人工引入9个氨基酸突变.构建了8个基因的拯救载体,经测序获得序列准确的拯救质粒,命名为:pAB121-PB1,pAB122-PB2,pAB1... 详细信息

以冷适应、温度敏感、减毒的B/Ann Arbor/1/66流感病毒株作为重配病毒骨架,对其6个内部基因片段进行了全基因合成,同时人工引入9个氨基酸突变.构建了8个基因的拯救载体,经测序获得序列准确的拯救质粒,命名为:pAB121-PB1,pAB122-PB2,pAB123-PA,pAB124-HA,pAB125-NP,pAB126-NA,pAB127-M和pAB128-NS.在成功拯救冷适应A型流感病毒的基础上,利用反向遗传学技术成功获救了具有感染性的重配B型流感病毒株,命名为rMDV-B.该重配病毒株以B/Ann Arbor/1/66为病毒骨架,其中HA和NA来源于2006～2007年当年流行株B/Malaysia/2506/***-B在鸡胚尿囊液和MDCK细胞中的HA效价可达1∶64～1∶512.实验结果暗示:从单一供体病毒株可以产生有效的减毒活B型流感病毒疫苗候选株,能够为将来人用流感疫苗的设计提供可借鉴的模型.

关键词： B型流感病毒反向遗传学 8质粒拯救系统重组流感病毒

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抗朊蛋白单克隆抗体的免疫学特性研究

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扬州大学学报（农业与生命科学版） 2009年第4期30卷 6-10页

作者：吴晓东张永强刘雨田邹艳丽刘珊李林王志亮扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 中国动物卫生与流行病学中心-国家外来动物疫病诊断中心-国家牛海绵状脑病参考实验室山东青岛266032

以牛、羊重组朊蛋白(PrP)、正常牛、羊的脑组织匀浆、牛海绵状脑病(BSE)及羊痒病阳性的脑组织匀浆及切片为抗原,测定9株抗朊蛋白单克隆抗体的ELISA、免疫印迹及免疫组化等免疫学反应特性。结果表明:5株单抗可用于BSE及羊痒病的ELISA、... 详细信息

以牛、羊重组朊蛋白(PrP)、正常牛、羊的脑组织匀浆、牛海绵状脑病(BSE)及羊痒病阳性的脑组织匀浆及切片为抗原,测定9株抗朊蛋白单克隆抗体的ELISA、免疫印迹及免疫组化等免疫学反应特性。结果表明:5株单抗可用于BSE及羊痒病的ELISA、免疫印迹检测;3株单抗可用于BSE及羊痒病的免疫组化检测;1株单抗在免疫印迹试验中只与羊痒病PrPSc的核心片段反应,结合该株单抗所识别的抗原表位PrP第78~93氨基酸(aa),证实BSE与羊痒病PrPSc的蛋白酶K消化位点存在差异。

关键词：传染性海绵状脑病朊蛋白单克隆抗体免疫学特性

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鸭源新城疫病毒P基因遗传变异分析

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中国动物传染病学报 2009年第4期17卷 1-6页

作者：刘晓文王晓泉吴双胡顺林刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

为分析2002-2007年分离的鸭源弱毒新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）磷蛋白（P）基因的分子特征,以及在新城疫病毒演化过程中所起的作用,采用RT-PCR方法扩增NDV弱毒分离株的P基因,进行测序,并应用生物信息学软件（SNAP和CODEM... 详细信息

为分析2002-2007年分离的鸭源弱毒新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）磷蛋白（P）基因的分子特征,以及在新城疫病毒演化过程中所起的作用,采用RT-PCR方法扩增NDV弱毒分离株的P基因,进行测序,并应用生物信息学软件（SNAP和CODEML）研究了作用于NDV P基因的选择压力。根据P基因序列的遗传发生分析表明,NDV I类（Class I）2型毒株与德国鸭源毒株DE/R49-99和美国株亲缘关系较近,而3b型毒株与其他I类病毒遗传关系较远,具有地区特色,形成一个独特的分支;NDV II类（Class II）中基因Ib型与中国广泛使用的基因I型疫苗毒Qeensland V4（QV4）以及I型代表株亲缘关系较远。生物信息学软件分析表明,P基因不同片段受到正选择压力的作用不一样,P基因的两端受到负选择压力的作用不易发生变异,而中间（aa62~113和137~198）片段多个位点受到正选择压力的作用。可见,I类病毒中3b具有地域特色,不同基因型P蛋白之间变异较大,而且P蛋白不同位置变异不均匀。

关键词：新城疫病毒 ClassI和ClassII 磷(P)蛋白正选择压力

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一株野鸭源H4N6亚型禽流感病毒A/mallard/Yancheng/2005的全基因组克隆和序列分析

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畜牧兽医学报 2009年第4期40卷 548-553页

作者：彭宜薛峰李彦芳陈浩彭大新刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009 江苏出入境检验检疫局南京210001 盐城国家级珍禽自然保护区管理处盐城224000

应用流感病毒通用引物对盐城珍禽自然保护区野鸭泄殖腔棉拭子分离株禽流感病毒A/mallard/Yancheng/2005(简称Mallard/YC/2005)(H4N6)进行全基因组序列扩增,结合GenBank中的相关序列进行遗传进化分析。结果表明,Mallard/YC/2005(H4N6)HA... 详细信息

应用流感病毒通用引物对盐城珍禽自然保护区野鸭泄殖腔棉拭子分离株禽流感病毒A/mallard/Yancheng/2005(简称Mallard/YC/2005)(H4N6)进行全基因组序列扩增,结合GenBank中的相关序列进行遗传进化分析。结果表明,Mallard/YC/2005(H4N6)HA基因与A/duck/Siberia/1701/1996(H4N6)的核苷酸同源性最高(97.5%),推导的氨基酸剪切位点序列为PEKASR,为典型低致病性禽流感病毒的特征序列;神经氨酸酶(NA)、非结构蛋白(NS)均没有氨基酸缺失;基质蛋白2(M2)与宿主特异性有关的位点及碱性聚合酶2(PB2)的627位都是亲禽类细胞的氨基酸;M基因与家鸭分离株A/duck/Yangzhou/02/2005(H8N4)的核苷酸同源性为99.4%,PA基因与家鸭分离株A/duck/Jiangxi/1286/2005(H5N2)的核苷酸同源性达98.9%,说明这2个基因已经在家鸭体内存在并参与了基因重排。

关键词： Mallard/YC/2005(H4N6) 禽流感病毒全基因组序列序列分析

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H9N2亚型禽流感病毒华东分离株的生物学特性及遗传进化分析

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中国兽医科学 2009年第8期39卷 665-668页

作者：刘慧谋吴培培吴双扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

对从华东地区分离的6株鸡源H9N2亚型禽流感病毒进行了生物学特性及血凝素(HA)基因和神经氨酸酶(NA)基因的分子遗传进化分析。发现这6株病毒对SPF鸡无致病性,IVPI均为0,可被单克隆抗体4E7分为2个亚群。序列分析表明,这6株病毒的HA基因裂... 详细信息

对从华东地区分离的6株鸡源H9N2亚型禽流感病毒进行了生物学特性及血凝素(HA)基因和神经氨酸酶(NA)基因的分子遗传进化分析。发现这6株病毒对SPF鸡无致病性,IVPI均为0,可被单克隆抗体4E7分为2个亚群。序列分析表明,这6株病毒的HA基因裂解位点处的氨基酸序列均为RSSR↓GLF,Ck/HD/16/07和Ck/HD/112/05的潜在糖基化位点与其他4株不一致;NA基因为N2亚型,其中4个毒株的茎部缺失3个氨基酸,而另2个毒株无缺失。

关键词： H9N2亚型禽流感病毒抗原性血凝素神经氨酸酶

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