检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：段志强陈坚许海旭何亮刘慧谋胡顺林王晓泉刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州 225009

M蛋白是新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)编码的病毒蛋白中含量最为丰富且高度保守的一种非糖基化膜相关蛋白,在NDV整个感染周期中扮演着重要的角色.M蛋白在病毒感染早期大量聚集在细胞核和核仁中,不仅持续抑制宿主细胞基因的... 详细信息

M蛋白是新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)编码的病毒蛋白中含量最为丰富且高度保守的一种非糖基化膜相关蛋白,在NDV整个感染周期中扮演着重要的角色.M蛋白在病毒感染早期大量聚集在细胞核和核仁中,不仅持续抑制宿主细胞基因的转录和翻译,还可调控病毒基因组的复制和转录;在病毒感染后期进入细胞质,协助子代病毒粒子的出芽和释放.但是目前对M蛋白的核仁定位机制、与核仁蛋白的相互作用及其对病毒的复制影响还不清楚.核仁素、核仁纤维蛋白和核磷蛋白B23是核仁中含量丰富且研究深入的三个蛋白,可介导蛋白的核仁定位并与具有核仁定位特性的病毒蛋白发生相互作用促进病毒的复制.本研究首先通过酵母双杂交方法在酵母体内证实核磷蛋白B23与M蛋白发生相互作用,并进一步通过GST pull-down、免疫共沉淀和荧光共定位证实两者的互作.对两个蛋白截短表达鉴定彼此相互作用结构域,发现B23蛋白通过其核酸结合结构域的aa188-245与M蛋白相互作用;M蛋白通过aa30-60与B23蛋白相互作用,同时该结构域介导M蛋白的核仁定位.此外,通过RNA干扰方法抑制DF1细胞内B23蛋白的表达或在DF1细胞内过表达B23蛋白均能显著抑制NDV的复制效率.以上结果证实,M蛋白通过其核仁定位信号基序结合B23蛋白进入核仁,并在核仁内持续破坏B23蛋白的结构与功能促进NDV的复制.

关键词：核磷蛋白B23 新城疫病毒 M蛋白相互作用

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猪源大肠杆菌(ETEC、STEC、AEEC)毒力基因及其与O抗原型的关系

猪源大肠杆菌(ETEC、STEC、AEEC)毒力基因及其与O抗原型的关系

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第七届南京农业大学畜牧兽医学术年会

作者：陈祥赵李祥高崧苗晓青焦新安刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室/江苏省人兽共患病学重点实验室江苏扬州225009

为揭示从我国部分地区仔猪腹泻或水肿病病猪体内分离到的300个大肠杆菌分离株所属病原型(pathotype)、毒力基因及其与O血清型的关系,O血清型采用常规的凝集试验进行测定,毒力基因采用PCR方法检测.结果显示:通过对这300个分离株的O血清... 详细信息

为揭示从我国部分地区仔猪腹泻或水肿病病猪体内分离到的300个大肠杆菌分离株所属病原型(pathotype)、毒力基因及其与O血清型的关系,O血清型采用常规的凝集试验进行测定,毒力基因采用PCR方法检测.结果显示:通过对这300个分离株的O血清型及其毒素、紧密素和黏附素基因进行鉴定,结果显示除50株未定型、17株自凝外,测定出233个分离株的血清型,这些分离株覆盖了45个血清型,其中以O149、O107、O139、O93和O91为主,共133株,占定型菌株的57.1％;拥有eatⅠ、estⅡ、elt、stx2e和eaeA基因的菌株分别为102 (34.0％)、190(63.3％)、81 (27.0％)、57 (19.0％)和54 (18.0％)株;分离株中有51株K88基因阳性(其中菌毛表达率为100％),75株F18基因阳性(其中菌毛表达率为50.7％),在K88菌株中,O149血清型与estⅠ或estⅡ+elt密切相关,在F18菌株中,O107血清型与estⅠ或estⅡ、O139血清型与stx2e紧密相关.依其毒力特征可将这些分离株分为以下6种类型:ETEC、STEC、AEEC、ETEC/STEC、AEEC/ETEC和AEEC/ETEC/STEC,分别拥有190、24、36、32、17和1个菌株,占分离株的63.3％、8.0％、12.0％、10.7％、5.7％和0.3％.通过分析这些分离株的O血清型、毒素类型和黏附素型之间的相关性:猪源ETEC以O149、O107、O93和O98等血清型为主,O149∶K88菌株主要与estⅡ或estⅡ+elt肠毒素相关,O107:F18菌株主要与estⅡ相关,O93和O98血清型菌株主要与estⅡ肠毒素相关;STEC菌株以O139:F18血清型为主,拥有stx2e;AEEC菌株拥有紧密素,无明显优势血清型;ETEC/STEC菌株以O107:F18和O116:F18血清型为主,主要与estⅠ +stx2e或estⅡ+stx2e密切相关,ETEC/AEEC菌株以O91和O107血清型为主,全部拥有肠毒素estⅠ和紧密素基因.结果表明我国至少存在6种病原型的猪肠道致病性大肠杆菌,其中ETEC为我国部分地区猪大肠杆菌病的主要病原,同时其病原型日益复杂.

关键词：猪源大肠杆菌病毒力测定 O血清型抗原基因

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OIE法典中必须报告的禽流感(notifiable avian influenza,NAI):H5和H7亚型禽流感病毒感染的防控策略

OIE法典中必须报告的禽流感(notifiable avian influenza,NAI):H5...

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江苏省畜牧兽医学会第十一次会员代表大会暨学术报告会

作者：刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州

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新城疫病毒同源重组现象的解析

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中国家禽 2013年第9期35卷 1-1页

作者：宋庆庆刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

近年来有报道显示NDV有些重组子代病毒基因组序列来自于多种基因型并发生多次基因重组现象,但学界对此存在争议。扬州大学的研究人员对此现象进行了分析验证,认为重组现象很可能是由于测序样品中含有不同基因型的NDV或是在测序过程中引... 详细信息

近年来有报道显示NDV有些重组子代病毒基因组序列来自于多种基因型并发生多次基因重组现象,但学界对此存在争议。扬州大学的研究人员对此现象进行了分析验证,认为重组现象很可能是由于测序样品中含有不同基因型的NDV或是在测序过程中引入了实验室污染导致。

关键词：新城疫病毒同源重组解析基因组序列实验室污染基因重组研究人员扬州大学

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检测禽网状内皮增生症病毒间接免疫荧光方法的建立及应用

检测禽网状内皮增生症病毒间接免疫荧光方法的建立及应用

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第三届全国禽病分子生物技术青年学术论坛

作者：李莉莉吴艳涛张小荣扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病重点开放实验室江苏扬州225009

随着研究的深入，禽网状内皮增生症病毒(REV)新的致病性不断被发现，如REV-JX0927 它不仅能引起网状内皮细胞增生和淋巴肉瘤，还能引起扁平细胞癌、腺癌、动脉瘤和动脉炎等。

关键词：

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新城疫病毒人工感染鹅脾脏差异表达蛋白质组初步分析

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畜牧兽医学报 2012年第7期43卷 1088-1095页

作者：王郁杨开妍段志强吴双胡顺林王晓泉刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

脾脏是新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)感染的重要靶器官,本试验旨在从分子水平上分析NDV与宿主之间的相互作用,探寻早期基因Ⅳ型强毒Herts/33和晚期基因Ⅶ型强毒JS5/05造成鹅脾脏病变差异的相关蛋白。30日龄非免疫鹅分别人工... 详细信息

脾脏是新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)感染的重要靶器官,本试验旨在从分子水平上分析NDV与宿主之间的相互作用,探寻早期基因Ⅳ型强毒Herts/33和晚期基因Ⅶ型强毒JS5/05造成鹅脾脏病变差异的相关蛋白。30日龄非免疫鹅分别人工感染NDV强毒株Herts/33和JS5/05,并于感染后36、72、108h采集2个感染组和对照组的鹅脾脏,提取脾脏蛋白,以17cm、pH5～8的IPG胶条进行二维电泳,运用PDQuest 8.0.1软件对凝胶图谱进行差异蛋白分析。结果显示:与对照组相比,Herts/33感染组和JS5/05感染组脾脏组织分别有154个和148个蛋白出现了显著的差异表达,其中有86个蛋白点是不同感染组共有的差异点,包括52个感染后上调表达蛋白点,34个下调表达蛋白点;另外,有130个差异蛋白点为NDV感染鹅后不同毒株之间产生的差异表达,包括71个感染后上调表达蛋白点,59个下调表达蛋白点。基因Ⅳ型NDV强毒和基因Ⅶd亚型NDV强毒分别感染鹅后,能引起宿主脾脏组织蛋白表达谱发生不同的改变,这为进一步研究Ⅶd亚型NDV对水禽致病性增强的机制提供了重要线索。

关键词：鹅脾脏蛋白质组新城疫病毒

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鸽源新城疫病毒JS/07/04/Pi株感染性分子克隆的构建及病毒拯救

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病毒学报 2012年第1期28卷 67-72页

作者：朱艳梅胡增垒宋庆庆段志强顾敏胡顺林王晓泉刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

参照GenBank上公布的鸽源Ⅵb亚型新城疫病毒JS/07/04/Pi株基因组全序列设计9对引物,RT-PCR扩增目的片段后,依次亚克隆至TVT7/R转录载体,成功构建出含JS/07/04/Pi株基因组全长cDNA的转录载体TVT/071204。然后将其与三个辅助表达质粒pCI-N... 详细信息

参照GenBank上公布的鸽源Ⅵb亚型新城疫病毒JS/07/04/Pi株基因组全序列设计9对引物,RT-PCR扩增目的片段后,依次亚克隆至TVT7/R转录载体,成功构建出含JS/07/04/Pi株基因组全长cDNA的转录载体TVT/071204。然后将其与三个辅助表达质粒pCI-NP、pCI-P和pCI-L共转染BSR-T7/5细胞,60h后将转染细胞及其上清接种鸡胚,收集死亡鸡胚尿囊液进行HA与HI试验。结果显示死亡鸡胚尿囊液HA呈阳性,并能被ND阳性血清所抑制,表明该病毒已成功拯救,且拯救病毒rNDV/071204在细胞上的生长增殖能力同母本病毒相似。该病毒的成功拯救为鸽源Ⅵb亚型NDV感染的宿主特异性及鸽用ND新型疫苗的研究提供了理想的生物材料。

关键词：鸽新城疫病毒共转染拯救

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超量添加头孢噻呋对马立克氏病疫苗的危害性评估

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中国家禽 2012年第24期34卷 63-64页

作者：张小荣许秋阳王义敏卜仕金吴艳涛扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

头孢噻呋（Ceffiofur）作为第一个动物专用的第三代头孢菌素类抗生素，其抗菌谱广、抗菌活性强，已经在动物细菌性疾病的预防和治疗中得到广泛应用。鸡白痢沙门菌是我国养鸡生产中的一种危害非常严重的病原菌，该菌既能水平传播，也能... 详细信息

头孢噻呋（Ceffiofur）作为第一个动物专用的第三代头孢菌素类抗生素，其抗菌谱广、抗菌活性强，已经在动物细菌性疾病的预防和治疗中得到广泛应用。鸡白痢沙门菌是我国养鸡生产中的一种危害非常严重的病原菌，该菌既能水平传播，也能垂直传播。研究表明，雏鸡出壳后早期注射头孢噻呋进行预防可有效控制鸡白痢沙门菌引起的雏鸡早期感染，该方法目前在生产中已经大规模推广应用。

关键词：危害性评估头孢噻呋马立克氏病疫苗头孢菌素类抗生素鸡白痢沙门菌超量养鸡生产早期感染

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动物源性沙门菌的血清型、生物被膜形成能力和耐药性分析

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畜牧兽医学报 2012年第10期43卷 1630-1638页

作者：孙化露姜逸李树纯陈素娟张华张晓平田艳娜吴艳涛焦库华彭大新扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

本研究旨在探讨动物源性沙门菌的血清型分布、生物被膜形成能力及其耐药性。从不同动物病料中分离细菌,以PCR方法鉴定沙门菌,结合玻片凝集法和16SrRNA序列测定确定沙门菌的血清型和分布,结晶紫染色定量法检测分离株的生物被膜形成能力,... 详细信息

本研究旨在探讨动物源性沙门菌的血清型分布、生物被膜形成能力及其耐药性。从不同动物病料中分离细菌,以PCR方法鉴定沙门菌,结合玻片凝集法和16SrRNA序列测定确定沙门菌的血清型和分布,结晶紫染色定量法检测分离株的生物被膜形成能力,药敏试验检测分离菌对常用药物的敏感性。结果共分离鉴定出58株沙门菌,包括鸡白痢沙门菌、鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、丙型副伤寒沙门菌、乙型副伤寒沙门菌、都柏林沙门菌和阿哥那沙门菌等7种血清型,其中鸡群以鸡白痢沙门菌感染为主,肠炎沙门菌次之;水禽以鼠伤寒沙门菌感染为主。生物被膜测定结果显示51.72%的沙门菌分离株可形成生物被膜,其中83.33%的鼠伤寒沙门菌可形成生物被膜。20种抗生素(氨基糖苷类、磺胺类、喹诺酮类、林可酰胺类、氯霉素类、青霉素类、四环素类和头孢菌素类)敏感性试验表明所有菌株对林可霉素耐药,51.72%对4种及其以上抗生素耐药,并出现了1株对所有受试抗生素均耐药的鼠伤寒沙门菌。结果表明鸡白痢沙门菌、鼠伤寒沙门菌和肠炎沙门菌是为目前在家禽中分离的优势血清型;同时具有生物被膜形成能力和多重耐药性的沙门菌将对家禽疾病控制和公共卫生带来更大的威胁。

关键词：沙门菌血清型生物被膜耐药性

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Clade2．3．2H5N1亚型禽流感疫苗候选株的构建

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畜牧兽医学报 2012年第6期43卷 915-921页

作者：张妍张文俊李群辉刘晓文刘文博刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

近年来Clade2.3.2H5N1亚型的禽流感病毒逐渐成为我国及越南等其他一些国家流行的优势毒株,并呈现出一定变化规律的氨基酸进化趋势。本研究以A/Puerto Rico/8/34(H1N1)(PR8)AIV为内部基因供体,以Clade2.3.2H5N1亚型AIV A/chicken/Yangzho... 详细信息

近年来Clade2.3.2H5N1亚型的禽流感病毒逐渐成为我国及越南等其他一些国家流行的优势毒株,并呈现出一定变化规律的氨基酸进化趋势。本研究以A/Puerto Rico/8/34(H1N1)(PR8)AIV为内部基因供体,以Clade2.3.2H5N1亚型AIV A/chicken/Yangzhou/1117/2011(YZC3)为表面抗原血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)基因供体,通过反向遗传操作,在符合人类疫苗生产标准的COS-1细胞中救获低致病性的疫苗毒株。结果成功拯救出1株重组病毒rYZC3,该病毒在鸡胚和MDCK细胞上均具有较好的繁殖能力,对SPF鸡和鸡胚无致病性。本研究为防控当代流行的H5亚型禽流感提供了良好的疫苗候选株。

关键词： H5亚型 Clade2.3.2 禽流感病毒反向遗传

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