检索结果-内蒙古大学图书馆

中国预防兽医学报 2019年第2期41卷 174-178页

作者：赵冬王小波高清清郇长超王万彬高崧刘秀梵农业部禽用生物制品创制重点实验室江苏扬州225009 农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 扬州大学农业科技发展研究院江苏扬州225009 扬州大学兽医学院江苏扬州225009 江苏省研究生工作站江苏泰州225511

为制备猪圆环病毒3型(PCV3)Cap蛋白单克隆抗体(MAb),并初步应用于感染细胞或组织样品中PCV3抗原的间接免疫荧光试验(IFA)或免疫组化(IHC)检测,本研究将PCV3 Cap蛋白的去核定位信号肽基因克隆于原核表达载体pET-28a中,经IPTG诱导表达了... 详细信息

为制备猪圆环病毒3型(PCV3)Cap蛋白单克隆抗体(MAb),并初步应用于感染细胞或组织样品中PCV3抗原的间接免疫荧光试验(IFA)或免疫组化(IHC)检测,本研究将PCV3 Cap蛋白的去核定位信号肽基因克隆于原核表达载体pET-28a中,经IPTG诱导表达了具有免疫原性的融合蛋白。以表达的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,共获得8株能够稳定分泌针对PCV3 Cap蛋白的MAb杂交瘤细胞株。Western blot与IFA试验结果显示,8株MAbs均能够与真核表达的重组Cap蛋白反应。选取3株杂交瘤细胞制备3株MAbs,小鼠腹水效价分别为1∶409 600、1∶204 800和1∶409 600。利用3株MAbs对自然感染PCV3临床病猪的腹股沟淋巴结进行IHC检测,结果显示3株MAbs的腹水均能够与感染PCV3的临床样品发生特异性的免疫反应。本研究制备的MAbs具有较好的特异性,为深入研究Cap蛋白的结构和PCV3快速诊断奠定了基础。

关键词：猪圆环病毒3型 Cap蛋白单克隆抗体免疫组化

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基因Ⅶ型新城疫病毒调控基质蛋白酶(MMP)-14活性及诱导脾脏免疫病理的机制研究

基因Ⅶ型新城疫病毒调控基质蛋白酶(MMP)-14活性及诱导脾脏免疫病...

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江苏省畜牧兽医学会首届“青年科技论坛”

作者：胡增垒顾晗胡顺林焦新安刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州 225009 扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州 225009 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州 225009 江苏省人兽共患病学重点实验室扬州 225009 农业部农产

细胞外基质(ECM)重构对基因Ⅶ 型新城疫病毒(NDV)诱导鸡脾脏的免疫病理损伤具有重要影响.本研究旨在探讨基因Ⅶ 型NDV调控基质蛋白酶(MMP)-14活性及对ECM重塑的影响,进一步解析基因Ⅶ 型NDV的致病机理.首先,用荧光定量PCR与Western blo... 详细信息

细胞外基质(ECM)重构对基因Ⅶ 型新城疫病毒(NDV)诱导鸡脾脏的免疫病理损伤具有重要影响.本研究旨在探讨基因Ⅶ 型NDV调控基质蛋白酶(MMP)-14活性及对ECM重塑的影响,进一步解析基因Ⅶ 型NDV的致病机理.首先,用荧光定量PCR与Western blot方法对基因Ⅶ 型与Ⅳ型NDV感染脾脏中MMP-1、MMP-13与MMP-14的表达水平进行测定.其次,选用鸡外周血单个核细胞(PBMC)为细胞模型,测定不同MMP的表达水平及MMP-14的细胞定位与膜表达水平.最后,建立了评价PBMC侵袭力的Transwell模型与测定细胞降解胶原蛋白能力的模型,并测定了基因Ⅶ 型与Ⅳ型NDV感染对PBMC侵袭力与胶原降解能力的影响.结果表明,与基因Ⅳ型NDV Herts/33相比,基因Ⅶ 型NDV JS5/05株可显著上调鸡脾脏与PBMC中MMP-13与MMP-14的表达水平,尤其是***-14在JS5/05感染的PBMC中在细胞质、细胞核与细胞膜上均有定位,但是在细胞膜上的表达水平显著高于Herts/33感染的细胞.细胞侵袭实验表明,JS5/05感染的PBMC在趋化因子的诱导作用下,其侵袭力显著强于Herts/33感染细胞.此外,JS5/05感染的PBMC对Ⅰ型胶原蛋白的降解能力也显著高于Herts/33感染细胞.基因Ⅶ型NDV可显著上调PBMC中MMP-14的表达水平,激活其降解胶原蛋白的活性,使炎性细胞突破ECM屏障的侵袭力显著增强.因此,基因Ⅶ 型NDV调控MMP-14的活性可能对其诱导的脾脏免疫病理损伤有重要的影响.

关键词：基因Ⅶ型新城疫病毒基质蛋白酶14 细胞外基质脾脏免疫病理致病机制

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表达高致病性H7N9亚型禽流感病毒血凝素蛋白的重组杆状病毒疫苗候选株的构建与免疫效果评估

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中国家禽 2019年第18期41卷 18-23页

作者：孙一李如梦李军马春喜赵以恒范雪莲何丽红刘东胡娇刘秀梵扬州大学兽医学院动物传染病实验室江苏扬州225009 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 扬州大学农业农村部农产品质量安全生物性危害因子(动物源)控制重点实验室江苏扬州225009

为了有效防控H7N9亚型禽流感疫情,研制能够预防高致病性H7N9亚型禽流感的疫苗非常必要。研究基于昆虫杆状病毒表达载体系统(BEVS),构建并拯救了一株表达高致病性H7N9亚型禽流感病毒(AIV)血凝素蛋白(HA)的重组杆状病毒rBac-GD15HA。间接... 详细信息

为了有效防控H7N9亚型禽流感疫情,研制能够预防高致病性H7N9亚型禽流感的疫苗非常必要。研究基于昆虫杆状病毒表达载体系统(BEVS),构建并拯救了一株表达高致病性H7N9亚型禽流感病毒(AIV)血凝素蛋白(HA)的重组杆状病毒rBac-GD15HA。间接免疫荧光试验及免疫印迹试验鉴定结果表明rBac-GD15HA的HA蛋白在Sf9细胞中成功表达;重组病毒细胞传代试验结果表明rBac-GD15HA在传代过程中能保持较高的病毒滴度,且遗传稳定;鸡的免疫试验结果显示,重组疫苗在一次免疫后即能诱导较高水平的针对H7N9 AIV的抗体应答,并能提供针对高致病性H7N9 AIV 100%的临床保护。因此,研究结果可作为H7N9亚型禽流感疫苗研发策略的参考,为其防控提供一种安全有效的方法,也为今后广谱流感疫苗的研发奠定一定的基础。

关键词： H7N9亚型禽流感病毒 HA 重组杆状病毒 Sf9细胞疫苗

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2016—2017年华东地区活禽市场7株H9N2禽流感病毒遗传进化分析

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畜牧兽医学报 2018年第8期49卷 1789-1796页

作者：蒋大秀马静王晓泉胡顺林刘晓文刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病重点开放实验室扬州225009 江苏省重点动物传染病和人畜共患病预防控制联合创新中心扬州225009

活禽市场的家禽,特别是水禽在禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)的演化、维持和扩散过程中起重要作用,因此对活禽市场进行长期不间断的流行病学监测非常重要。2016年10月至2017年9月,每月定期采集华东地区某活禽市场家禽喉头和泄... 详细信息

活禽市场的家禽,特别是水禽在禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)的演化、维持和扩散过程中起重要作用,因此对活禽市场进行长期不间断的流行病学监测非常重要。2016年10月至2017年9月,每月定期采集华东地区某活禽市场家禽喉头和泄殖腔棉拭子,并接种10日龄SPF鸡胚,测定鸡胚尿囊液HA效价,取阳性尿囊液进行HI试验分型,应用RT-PCR对该样品进行全基因PCR并测序,利用DNASTAR、MEGA6.0分析序列,并绘制系统发生树。结果共采集样品1 178份,来自127群,H9N2AIV阳性样品100份。从水禽中分离到H9N2AIV 7株,对7株病毒全基因组进行测序和遗传进化分析,不同基因片段均存在不同的遗传进化趋势。活禽市场水禽体内携带的7株H9N2AIV与当前家禽优势流行基因型一致,因此对活禽市场家禽中循环存在的AIV进行的定期监测,对了解潜在的流行株的演化和出现有重要作用。

关键词：活禽市场 H9N2禽流感病毒监测遗传进化

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新城疫病毒作载体在禽用疫苗中的研究进展

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中国家禽 2018年第21期40卷 39-43页

作者：薛玲郭丽丽胡顺林刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

新城疫病毒(NDV)属于副黏病毒科禽腮腺炎病毒属,病毒的基因组为单股、负链、不分节段的RNA。NDV弱毒具有易繁殖、适合大规模免疫等优点。近年来,以NDV作为载体表达其它病原的保护性抗原来研制重组NDV载体疫苗,已成为当前家禽疫苗研究领... 详细信息

新城疫病毒(NDV)属于副黏病毒科禽腮腺炎病毒属,病毒的基因组为单股、负链、不分节段的RNA。NDV弱毒具有易繁殖、适合大规模免疫等优点。近年来,以NDV作为载体表达其它病原的保护性抗原来研制重组NDV载体疫苗,已成为当前家禽疫苗研究领域的热点之一。随着我国家禽养殖业的规模化和现代化,以NDV作载体研制出安全、高效、使用方便的新型禽用疫苗显示出了广阔的应用前景。文章综述了NDV载体系统的构建及优化,并介绍了该载体在禽用疫苗中的应用和发展趋势。

关键词：新城疫病毒载体禽用疫苗

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表达分泌型与膜结合型HH7N9 AIV血凝素蛋白重组NDV载体疫苗的免疫原性比较

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中国家禽 2018年第14期40卷 14-18页

作者：胡增垒刘晓文胡娇顾晗石磊李如梦甘军纪焦新安刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 扬州大学农业部农产品质量安全生物性危害因子(动物源)控制重点实验室江苏扬州225009 扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室江苏扬州225009

研究以新城疫病毒(NDV)弱毒株LX为载体,构建了一株表达H7N9亚型禽流感病毒(H7N9 AIV)血凝素(HA)胞外区的重组病毒(LXs HA),并与一株前期构建的表达膜结合型HA的重组病毒(LXHAF)进行比较。生物学特性评价显示,两株病毒均为弱毒且在鸡胚... 详细信息

研究以新城疫病毒(NDV)弱毒株LX为载体,构建了一株表达H7N9亚型禽流感病毒(H7N9 AIV)血凝素(HA)胞外区的重组病毒(LXs HA),并与一株前期构建的表达膜结合型HA的重组病毒(LXHAF)进行比较。生物学特性评价显示,两株病毒均为弱毒且在鸡胚中的繁殖性能较强。此外,LXs HA主要以分泌形式表达HA蛋白,而LXHAF则以膜结合形式表达HA。鸡的免疫试验显示,两株重组病毒在一次免疫后均能诱导针对NDV载体的血凝抑制抗体,但LXHAF能够诱导较高水平的H7N9 AIV特异性Ig Y抗体,而LXs HA不能诱导H7N9 AIV抗体应答。结果表明,表达膜结合型HA的重组病毒具有针对H7N9 AIV较好的免疫原性,而表达分泌型HA的重组病毒免疫原性较差。这为研发H7N9亚型禽流感载体疫苗提供新的信息与参考。

关键词： H7N9亚型禽流感病毒新城疫病毒载体疫苗分泌型HA 膜结合型HA 免疫原性

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2017年华东地区活禽市场和商品化养殖场新城疫病毒的流行病学调查

2017年华东地区活禽市场和商品化养殖场新城疫病毒的流行病学调查

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中国畜牧兽医学会2018年学术年会禽病学分会第十九次学术研讨会

作者：陆小龙王晓泉胡顺林刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室

引言新城疫(Newcastle disease,ND),是一种由禽副粘病毒血清Ⅰ型引起的急性、高度传染性疾病,对我国以及全球禽类养殖业具有重大危害,我国农业部将其列为一类动物疾病,世界动物卫生组织(OIE)也将其列为必须通报的动物疫病之一。为了研... 详细信息

引言新城疫(Newcastle disease,ND),是一种由禽副粘病毒血清Ⅰ型引起的急性、高度传染性疾病,对我国以及全球禽类养殖业具有重大危害,我国农业部将其列为一类动物疾病,世界动物卫生组织(OIE)也将其列为必须通报的动物疫病之一。为了研究华东地区活禽市场和商品化禽群中NDV的宿主和地区分布状况,我们实施了一项长期计划——在2017年对华东地区不同禽群进行流行病学调查。材料与方法

关键词：活禽市场新城疫病毒流行病学调查华东地区

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Importinα5负向调控importinβ1介导的新城疫病毒M蛋白细胞核定位以及病毒的复制和致病性

Importinα5负向调控importinβ1介导的新城疫病毒M蛋白细胞核定...

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中国畜牧兽医学会2018年学术年会禽病学分会第十九次学术研讨会

作者：段志强嵇辛勤赵佳福倪萌萌许海旭胡顺林刘秀梵贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

引言新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)属于副黏病毒科腮腺炎病毒属成员,是一种含有单股负链不分节段基因组的RNA病毒。M蛋白是NDV基因组编码分子量最小的一种病毒结构蛋白,构成了病毒RNP与囊膜连接的支架。与大多数副黏病毒M蛋... 详细信息

引言新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)属于副黏病毒科腮腺炎病毒属成员,是一种含有单股负链不分节段基因组的RNA病毒。M蛋白是NDV基因组编码分子量最小的一种病毒结构蛋白,构成了病毒RNP与囊膜连接的支架。与大多数副黏病毒M蛋白一样,NDVM蛋白也是一种细胞核质穿梭蛋白,在抑制宿主细胞基因转录以及促进子代病毒粒子的组装和出芽方面有重要作用。早期的研究表明,

关键词：新城疫病毒副黏病毒细胞核定位 importin Importin

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新城疫病毒基质蛋白与鸡importinβ1蛋白的相互作用验证

新城疫病毒基质蛋白与鸡importinβ1蛋白的相互作用验证

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中国畜牧兽医学会2018年学术年会禽病学分会第十九次学术研讨会

作者：胡焱段志强嵇辛勤赵佳福胡顺林刘秀梵贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

引言研究表明,新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)基质蛋白(matrix,M)是一种细胞核-细胞质穿梭蛋白:在病毒早期感染阶段通过其携带的核定位信号进入细胞核,主要作用是抑制细胞基因的转录和翻译;而在感染后期则通过其核输出信号以C... 详细信息

引言研究表明,新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)基质蛋白(matrix,M)是一种细胞核-细胞质穿梭蛋白:在病毒早期感染阶段通过其携带的核定位信号进入细胞核,主要作用是抑制细胞基因的转录和翻译;而在感染后期则通过其核输出信号以CRM-1非依赖的方式进入细胞质,在细胞膜内侧与病毒蛋白相互作用促进子代病毒粒子的组装和出芽。本课题组前期通过荧光共定位试验发现importinβ1

关键词：新城疫病毒 importin 重组蛋白基质蛋白

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表达MERS-CoVS1蛋白重组狂犬病病毒rSRV9-MERSS1纯化方法的建立

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中国兽医学报 2019年第9期39卷 1763-1769页

作者：刘川玉金宏丽迟航李恩涛胡星星冯娜赵永坤高玉伟王化磊杨松涛夏咸柱吉林农业大学动物科技学院吉林长春130118 军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所吉林长春130122 吉林大学动物医学院/人兽共患病研究教育部重点实验室吉林长春130062 华南农业大学兽医学院广东广州510642 扬州大学江苏省重大动物传染病与人畜共患病预防与控制联合创新中心江苏扬州225009

建立一种可线性放大、应用于表达中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)S1蛋白重组狂犬病病毒rSRV9-MERSS1的规模化纯化方法。将收获的病毒去除细胞碎片、灭活后,分别通过3种方法(醋酸锌沉淀+... 详细信息

建立一种可线性放大、应用于表达中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)S1蛋白重组狂犬病病毒rSRV9-MERSS1的规模化纯化方法。将收获的病毒去除细胞碎片、灭活后,分别通过3种方法(醋酸锌沉淀+Sepharose 4FF凝胶过滤层析、500 000中空纤维超滤柱+Sepharose 4FF凝胶过滤层析、500 000中空纤维超滤柱+CellufineTM Sulfate亲和层析)进行纯化,经比较筛选出一种温和、目的蛋白回收率高、纯度高的纯化方法。结果显示,500 000中空纤维超滤柱+Sepharose 4FF凝胶过滤层析回收的抗原含量最高,50 mL重组病毒原液经纯化后可得到1.82 mg蛋白,杂蛋白去除率达到97.02%,病毒纯度较高,电镜下可见到病毒囊膜刺突。结合成本等方面综合考虑,此方法优于其他2种纯化方法。本试验筛选获得了一种适用于rSRV9-MERSS1的纯化方法,为rSRV9-MERSS1规模化纯化工艺的建立与MERS新型疫苗的研制奠定了基础。

关键词： MERS-S1 纯化中空纤维超滤柱 Sepharose 4FF 亲和层析

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