检索结果-内蒙古大学图书馆

中国预防兽医学报 2006年第4期28卷 450-453页

作者：邵炜慧贾红刘文博吴艳涛刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

选择一种新型载体阳离子化牛血清白蛋白(cBSA)与半抗原盐酸克伦特罗(CL)进行偶联,鉴定后作为免疫原免疫Balb/c小鼠,同时以卵清白蛋白(OVA)与CL偶联制备筛选抗原。应用杂交瘤细胞融合技术筛选后获得了1株稳定分泌抗CL单克隆抗体的杂交瘤... 详细信息

选择一种新型载体阳离子化牛血清白蛋白(cBSA)与半抗原盐酸克伦特罗(CL)进行偶联,鉴定后作为免疫原免疫Balb/c小鼠,同时以卵清白蛋白(OVA)与CL偶联制备筛选抗原。应用杂交瘤细胞融合技术筛选后获得了1株稳定分泌抗CL单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为2H5。抗体的亚类为IgM,腹水及细胞上清间接ELISA效价分别为1:20480和1:320,通过竞争阻断实验证明其具有良好的特异性及敏感性,将半抗原经酶标后应用竞争ELISA方法初步建立了CL的检测方法,检测限可达1ng/mL,为进一步制备CL残留检测试剂盒打下了基础。

关键词：盐酸克伦特罗阳离子化牛血清白蛋白单克隆抗体

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鹅源新城疫病毒F和HN基因的表达及功能鉴定

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扬州大学学报（农业与生命科学版） 2006年第4期27卷 8-11页

作者：胡顺林张艳梅孙庆吴艳涛刘玉良刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

鹅源新城疫病毒的F和HN基因经RT-PCR方法从尿囊液中扩增后分别克隆进pCR2．1载体,再分别亚克隆到真核表达载体pCI-neo上,构建了F基因的表达载体(pCI-F)和HN基因的表达载体(pCI-HN)。间接免疫荧光(IFA)鉴定结果表明:F和HN基因均能在细胞... 详细信息

鹅源新城疫病毒的F和HN基因经RT-PCR方法从尿囊液中扩增后分别克隆进pCR2．1载体,再分别亚克隆到真核表达载体pCI-neo上,构建了F基因的表达载体(pCI-F)和HN基因的表达载体(pCI-HN)。间接免疫荧光(IFA)鉴定结果表明:F和HN基因均能在细胞中得到较好的表达;将pCI-F和pCI-HN共转染CEF和COS细胞,转染的细胞中能形成明显的合胞体。而用pCI-F单独进行转染时,不能产生合胞体,说明F蛋白要发挥其融合作用必须要有HN蛋白的参与,同时也进一步证明F和HN蛋白与病毒的融合特性密切相关。

关键词：鹅新城疫病毒 F蛋白表达合胞体

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鹅源新城疫病毒ZJ1株拯救体系相关因素的探索

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中国家禽 2006年第13期28卷 26-30页

作者：张艳梅提金凤胡顺林刘玉良刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

在构建了鹅源新城疫病毒(NewcastleDiseaseVirus,NDV)ZJ1毒株的微型基因组和表达该病毒NP、P与L蛋白的辅助质粒的基础上,通过对该病毒拯救体系中的重要影响因素如ZJ1在易感细胞的增殖、热休克对拯救效率的影响、表达T7RNA聚合酶的重组... 详细信息

在构建了鹅源新城疫病毒(NewcastleDiseaseVirus,NDV)ZJ1毒株的微型基因组和表达该病毒NP、P与L蛋白的辅助质粒的基础上,通过对该病毒拯救体系中的重要影响因素如ZJ1在易感细胞的增殖、热休克对拯救效率的影响、表达T7RNA聚合酶的重组痘苗的感染复数、胞嘧啶阿拉伯呋喃糖苷(Arac)对重组痘苗复制的影响以及共转染质粒的比例和量等进行了探索。以上研究为该病毒的成功拯救及开展其它相关研究奠定了基础。

关键词：新城疫病毒病毒拯救体系探索鹅

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华东地区肉鸡大肠杆菌病的发病特点与防治策略浅析

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中国兽医杂志 2006年第3期42卷 18-19页

作者：唐一鸣张评浒陈祥高崧扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

2002—2004年我们对华东地区某些主要肉鸡饲养基地的肉鸡大肠杆菌病进行了系统的流行病学调查与防治研究,现就本病的发病特点与防治对策简述如下,以供同行参考。[第一段]

关键词：肉鸡大肠杆菌病防治策略发病特点华东地区流行病学调查饲养基地

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鸡大肠杆菌病并发新城疫的诊断与防治

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中国兽医杂志 2006年第7期42卷 53-54页

作者：唐一鸣张评浒陈祥高崧扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

2004年12月江苏淮北地区某农场养鸡专业户饲养的肉鸡群于15日龄时,突然暴发一种以呼吸困难、腹泻为主症,剖解变化主要以气囊炎、心包炎、肝周炎为特征的疾病。发病率约为80%,死亡率高达50%。现将结果汇报如下,以供同行参考。[第一段]

关键词：鸡大肠杆菌病新城疫防治诊断并发养鸡专业户淮北地区呼吸困难剖解变化肉鸡群

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利用反向遗传技术产生8基因全禽源流感病毒疫苗候选株

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病毒学报 2006年第2期22卷 126-130页

作者：石火英张小荣陈素娟吴艳涛刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

利用反向遗传技术将含有A／Chicken／Shanghai／F／98（H9N2）株禽流感病毒（avian influenza virus，AIV）的6个内部基因与H5N1亚型AIV的2个表面基因HA和NA共转染COS-1细胞，产生了6＋2全禽源的重配AIV。将H5N1亚型AIV的HA基因经基因... 详细信息

利用反向遗传技术将含有A／Chicken／Shanghai／F／98（H9N2）株禽流感病毒（avian influenza virus，AIV）的6个内部基因与H5N1亚型AIV的2个表面基因HA和NA共转染COS-1细胞，产生了6＋2全禽源的重配AIV。将H5N1亚型AIV的HA基因经基因突变致弱，然后将A／Chicken／Shanghai／F／98（H9N2）AIV的6个内部基因的cDNA和以上致弱的禽源HA基因及NA基因的cDNA分别克隆到转录／表达载体pHW2000中，构建成8个转录／表达质粒。将8个质粒共转染COS-1细胞，24h后收获细胞及上清接种SPF鸡胚，72～90h后鸡胚死亡，收取鸡胚尿囊液进行血凝、血凝抑制试验、序列分析、病毒致病性试验和动物免疫保护试验，最终证实产生了致弱的全禽源AIV瘩苗候诜株．

关键词：反向遗传技术 AIV 质粒转染

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重组减毒细菌运送CD8^+T细胞表位的效应分析

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细胞与分子免疫学杂志 2006年第6期22卷 730-733页

作者：潘志明张晓明焦新安 Richard Lo-Man Claude Leclerc 刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 法国巴斯德研究所免疫调节生物学实验室法国巴黎75015

目的:分析重组减毒菌体外运送CD8+T细胞表位的效应。方法:以表达卵清蛋白(OVA)和淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)CD8+T细胞表位的重组菌13A(ptG2F)、25A(ptG2F)和SL7207(ptG2F)感染抗原提呈细胞(APC)LKb、LLd和骨髓源树突状细胞(BMDC),... 详细信息

目的:分析重组减毒菌体外运送CD8+T细胞表位的效应。方法:以表达卵清蛋白(OVA)和淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)CD8+T细胞表位的重组菌13A(ptG2F)、25A(ptG2F)和SL7207(ptG2F)感染抗原提呈细胞(APC)LKb、LLd和骨髓源树突状细胞(BMDC),应用体外抗原提呈试验检测APC对重组菌运送的CD8+T细胞表位的提呈效应。结果:感染试验证实,减毒菌13A、25A和SL7207对LKb细胞或LLd细胞均具有良好的侵袭能力,BMDC对重组菌具有很好的摄取功能。抗原提呈试验结果显示,在感染的早期(2h),LKb、LLd细胞和BMDC均可提呈重组菌13A(ptG2F)或SL7207(ptG2F)运送的T细胞表位;在感染的晚期(48h),LKb细胞对OVA257-264CD8+T细胞表位的提呈效应降低,LLd细胞对LCMV118-132CD8+T细胞表位的提呈效应增强。3种APC均不能提呈25A(ptG2F)运送的T细胞表位。另外,在同样的作用条件下,BMDC对减毒菌运送的抗原表位的提呈效应要强于LKb和LLd细胞。结论:重组菌能运送CD8+T细胞表位,为基于减毒细菌的新型基因工程疫苗的分子设计提供了有益借鉴。

关键词： CD8^+T细胞表位减毒大肠杆菌减毒鼠伤寒沙门氏菌体外抗原提呈试验

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减毒鼠伤寒沙门氏菌介导的H5亚型禽流感病毒DNA疫苗的实验免疫效果研究

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病毒学报 2006年第1期22卷 6-10页

作者：焦凤超焦新安潘志明黄金林张小荣刘秀梵扬州大学生物科学与技术学院江苏扬州225009 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

将运送H5亚型禽流感病毒DNA疫苗重组减毒鼠伤寒沙门氏菌以1.0×1010CFU剂量口服接种1日龄SPF雏鸡,结果表明重组菌对雏鸡具有良好的安全性。将重组菌SL7207(pVAX1-HA)和X4550(asd-pVAX1-HA)以2×109CFU的剂量两次口服免疫1日龄... 详细信息

将运送H5亚型禽流感病毒DNA疫苗重组减毒鼠伤寒沙门氏菌以1.0×1010CFU剂量口服接种1日龄SPF雏鸡,结果表明重组菌对雏鸡具有良好的安全性。将重组菌SL7207(pVAX1-HA)和X4550(asd-pVAX1-HA)以2×109CFU的剂量两次口服免疫1日龄商品代伊莎褐蛋鸡,同时,将重组菌分别与pVAX1-IFN-γ或pVAX1-IL2(200μg/只)联合免疫,通过测定小肠粘膜抗体效价,结果显示,重组菌单独免疫组和联合免疫组能激发机体产生粘膜免疫应答,且与空载体组、空白对照组以及油苗组之间存在显著性差异(P<0.05)。攻毒后,免疫保护结果显示无论是重组菌单独免疫组还是联合免疫组均与空载体组和空白对照组之间存在显著性差异(P<0.05),而重组菌单独免疫组与联合免疫组之间不存在显著性差异,说明重组菌SL7207(pVAX1-HA)和X4550(asd-pVAX1-HA)能够提供机体抵抗HPAIV H5亚型强毒攻击的良好的免疫保护作用,这为进一步筛选出基于粘膜免疫途径的新型禽流感基因工程疫苗奠定了基础。

关键词：减毒沙门氏菌 DNA疫苗禽流感病毒免疫效力

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禽流感病毒H5和H9亚型多重RT-PCR快速检测方法的建立

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中国兽医学报 2006年第2期26卷 160-161页

作者：耿士忠曾显营潘志明黄金林焦新安刘秀梵扬州大学生物科学与技术学院江苏扬州225009 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

根据禽流感病毒(A IV)核蛋白(NP)和血凝素(HA)基因序列,设计1对用来鉴定A型A IV特异性引物(NP-F,NP-R)和2对用来鉴定A IV H 5和H 9不同亚型特异性引物(H 5-F,H 5-R;H 9-F,H 9-R),建立了多重RT-PCR快速检测方法。该方法能同时从一种病毒... 详细信息

根据禽流感病毒(A IV)核蛋白(NP)和血凝素(HA)基因序列,设计1对用来鉴定A型A IV特异性引物(NP-F,NP-R)和2对用来鉴定A IV H 5和H 9不同亚型特异性引物(H 5-F,H 5-R;H 9-F,H 9-R),建立了多重RT-PCR快速检测方法。该方法能同时从一种病毒扩增出2条核酸带,分别为型(NP:330 bp)和亚型(H 5A:550 bp,或H 9A:490 bp)。通过对105份样品进行检测,并与病毒分离及琼脂扩散(AGP)血清学方法作平行对比,两者之间符合率达100%;试验灵敏度为102ELD50。结果表明,建立的多重RT-PCR为检测H 5、H 9亚型A IV提供了一种快速、经济、易行的技术。

关键词：禽流感病毒核蛋白基因血凝素基因多重RT—PCR

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不同接种途径对H9亚型禽流感病毒在SPF鸡的致病性

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中国人兽共患病学报 2006年第8期22卷 716-719页

作者：高璐唐伟胡仁莉马林艳高崧刘秀梵扬州大学食品科学与工程学院扬州225009 扬州威克生物有限公司扬州225009 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

目的探讨H9亚型AIV不同接种途径对SPF鸡致病性的影响。方法以气管接种和静脉接种途径对SPF鸡进行人工感染。结果气管接种组死亡率为16.7%,而静脉接种组未见死亡;称重发现气管接种组平均体重显著低于静脉接种组;跟踪泄殖腔排毒发现气管... 详细信息

目的探讨H9亚型AIV不同接种途径对SPF鸡致病性的影响。方法以气管接种和静脉接种途径对SPF鸡进行人工感染。结果气管接种组死亡率为16.7%,而静脉接种组未见死亡;称重发现气管接种组平均体重显著低于静脉接种组;跟踪泄殖腔排毒发现气管接种组试验鸡排毒率高于静脉接种组,排毒时间也长于后者;病理切片观察可见气管接种组病变严重,恢复期长;在免疫组化试验中,气管接种组可在肺中检测到病毒存在,而静脉接种组各组织中均未检测到病毒的存在。结论气管接种H9亚型AIV组比静脉接种组致病性更强,是评价H9亚型AIV致病性更为有效的接种途径。

关键词： SPF鸡 H9亚型AIV 接种途径致病性

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