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第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会

作者：张评浒唐应华薛锋刘晓文曹永忠高崧刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

本研究以H5N2和H5N1两种油乳灭活疫苗免疫鸭群对高致病性禽流感H5N1 AIV的攻毒保护效力进行了比较。结果表明,在同等剂量免疫条件下,从发病率、死亡率和泄殖腔排毒规律三项指标综合评价来看,H5N1疫苗免疫组对高致病性禽流感H5N1流行株... 详细信息

本研究以H5N2和H5N1两种油乳灭活疫苗免疫鸭群对高致病性禽流感H5N1 AIV的攻毒保护效力进行了比较。结果表明,在同等剂量免疫条件下,从发病率、死亡率和泄殖腔排毒规律三项指标综合评价来看,H5N1疫苗免疫组对高致病性禽流感H5N1流行株攻毒的保护效率较H5N2免疫组理想,且水禽禽流感母源抗体对灭活苗免疫具有一定的干扰作用。

关键词：禽流感鸭 H5亚型油乳灭活苗免疫攻毒

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鸡外周血淋巴细胞中马立克氏病疫苗病毒生产性感染的动态研究

鸡外周血淋巴细胞中马立克氏病疫苗病毒生产性感染的动态研究

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会

作者：梁萍甘军纪吴长新吴艳涛扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

本试验通过流式细胞术(Flow cytometry,FCM)分析了HVT、CVI988疫苗免疫鸡外周血淋巴细胞(PBLC)表面MDV相关抗原的动态分布,发现1日龄一次免疫鸡在免疫后6天左右MDV抗原阳性的淋巴细胞数达到高峰(分别为11.42%和14.92%),随后很快下降并... 详细信息

本试验通过流式细胞术(Flow cytometry,FCM)分析了HVT、CVI988疫苗免疫鸡外周血淋巴细胞(PBLC)表面MDV相关抗原的动态分布,发现1日龄一次免疫鸡在免疫后6天左右MDV抗原阳性的淋巴细胞数达到高峰(分别为11.42%和14.92%),随后很快下降并维持很低的水平;7日龄一次免疫鸡在免疫后7天左右MDV抗原阳性淋巴细胞数也达到高峰(分别为13.62%和11.6%),随后也很快下降并维持很低的水平;而1日龄和7日龄二次免疫鸡在第一次免疫后7天左右阳性细胞数达到高峰(分别为7.92%和13.29%),在第二次免疫后7天左右又达到另一个抗原表达高峰(分别为15.99%和18.43%),随后也下降并维持很低的水平。说明再次接种的MD疫苗毒也从生产性感染开始进行增殖,在经一段时间后也转为潜伏感染。二次免疫使免疫鸡群受到了再一次大量免疫原的刺激,在第一次免疫记忆存在的基础下,获得了更强的体液和细胞介导的免疫应答,大大增强了机体抗肿瘤的免疫力。

关键词：马立克氏病流式细胞术生产性感染

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抑制差减杂交筛选禽致病性大肠杆菌基因组差异片段及其分析

抑制差减杂交筛选禽致病性大肠杆菌基因组差异片段及其分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会

作者：陈祥赵娟高崧焦新安刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

采用抑制差减杂交技术(Suppression subtractive hybridization,SSH)对禽致病性大肠杆菌E037株(血清型O78)与非致病菌株K-12MG1655以及同一O2血清型高致病菌株E058与低致病菌株E526进行基因组差异片段克隆与分析。从E037株中共检出17个... 详细信息

采用抑制差减杂交技术(Suppression subtractive hybridization,SSH)对禽致病性大肠杆菌E037株(血清型O78)与非致病菌株K-12MG1655以及同一O2血清型高致病菌株E058与低致病菌株E526进行基因组差异片段克隆与分析。从E037株中共检出17个特异性差异片段,E058株中共检出32个特异性差异片段。经同源分析,这些序列可分为4类:质粒相关序列、噬菌体相关序列、已知功能序列、未知功能序列。这些差异片段包含许多重要的大肠杆菌毒力相关基因,如大肠杆菌素、气杆菌素受体、铁基因簇等。49个片段中,14个片段与其它微生物基因组同源性较高。结果表明,大肠杆菌高致病株与低致病菌株或非致病菌株基因组间存在较多差异基因,其中包括毒力、毒力相关基因、代谢以及噬菌体等基因成分。

关键词：禽致病性大肠杆菌抑制差减杂交基因组差异

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不同NA亚型H5禽流感疫苗在鸭群的免疫效力及母源抗体对免疫效力的影响

不同NA亚型H5禽流感疫苗在鸭群的免疫效力及母源抗体对免疫效力的...

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会

作者：张评浒唐应华薛锋刘晓文曹永忠高崧刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

本研究以H5N2和H5N1两种油乳灭活疫苗免疫鸭群对高致病性禽流感H5N1AIV的攻毒保护效力进行了比较。结果表明,在同等剂量免疫条件下,从发病率、死亡率和泄殖腔排毒规律三项指标综合评价来看,H5N1疫苗免疫组对高致病性禽流感H5N1流行株攻... 详细信息

本研究以H5N2和H5N1两种油乳灭活疫苗免疫鸭群对高致病性禽流感H5N1AIV的攻毒保护效力进行了比较。结果表明,在同等剂量免疫条件下,从发病率、死亡率和泄殖腔排毒规律三项指标综合评价来看,H5N1疫苗免疫组对高致病性禽流感H5N1流行株攻毒的保护效率较H5N2免疫组理想,且水禽禽流感母源抗体对灭活苗免疫具有一定的干扰作用。

关键词：禽流感鸭 H5亚型油乳灭活苗免疫攻毒

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表达PWD和ED保护性抗原的两种重组菌的免疫原性初步研究

表达PWD和ED保护性抗原的两种重组菌的免疫原性初步研究

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第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会

作者：杨健美高崧刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

已构建的能表达致PWD和ED大肠杆菌保护性抗原FedA-Stx 2e B-FaeG融合蛋白的重组菌BL21(pFSFaeG)和重组菌X4550(pFSFaeG),经IPTG诱导的重组菌制成抗原,经口服、及灭活后制成油乳剂苗免疫小鼠后,抗体检测结果表明,重组菌经灭活后免疫能够... 详细信息

已构建的能表达致PWD和ED大肠杆菌保护性抗原FedA-Stx 2e B-FaeG融合蛋白的重组菌BL21(pFSFaeG)和重组菌X4550(pFSFaeG),经IPTG诱导的重组菌制成抗原,经口服、及灭活后制成油乳剂苗免疫小鼠后,抗体检测结果表明,重组菌经灭活后免疫能够诱导小鼠产生针对上述三种保护性抗原的特异性抗体IgG。免疫效力试验结果显示,两种重组菌的最佳免疫途径均为灭活后经腹腔免疫。

关键词：大肠杆菌 PWD ED 重组菌抗体检测免疫效力

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拜特灭毒威对H_5亚型禽流感病毒的杀灭试验

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浙江畜牧兽医 2005年第3期30卷 7-8页

作者：卢建红邵卫星刘玉良刘秀凡韦栋平刘武杰张如宽江苏扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

禽流感是由正粘病毒科中的H5亚型禽流感病毒(AIV)引起的一种烈性传染病,一旦爆发会给养禽业带来毁灭性的危害。近年来,由于国内外时有从活禽市场检出H5亚型禽流感病毒或发生禽流感等情况,故加强对禽流感的防制工作极为重要。本试验采用... 详细信息

禽流感是由正粘病毒科中的H5亚型禽流感病毒(AIV)引起的一种烈性传染病,一旦爆发会给养禽业带来毁灭性的危害。近年来,由于国内外时有从活禽市场检出H5亚型禽流感病毒或发生禽流感等情况,故加强对禽流感的防制工作极为重要。本试验采用长沙拜特生物科技研究所生产的拜特灭毒威对H5亚型禽流感病毒进行灭毒试验。结果表明,拜特灭毒威在1∶4000至1∶15000或1∶4000至1∶20000的浓度范围内与AIV作用5min或10min,对AIV的杀灭率可达99.9%以上;稀释度在1∶8000以下作用5min或1∶10000以下作用10min,杀灭率均为100%。

关键词：拜特灭毒威 H5禽流感病毒杀灭率禽

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表达致PWD和ED大肠杆菌保护性抗原基因的重组菌的构建与免疫保护试验

表达致PWD和ED大肠杆菌保护性抗原基因的重组菌的构建与免疫保护...

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中国畜牧兽医学会第一届中国养猪生产和疾病控制技术大会

作者：杨健美施慧高崧陈祥刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

本文运用PCR技术,分别从大肠杆菌TB1、107/86和C83907菌株中扩增出不舍信号肽序列的Stx2eB亚单位基因(stx2eB)、F18菌毛的A亚单位基因(fedA)和F4菌毛亚单位基因(faeG),将这3个基因的PCR扩增产物按预定阅读框架克隆入pGEX-6P-1载体的谷... 详细信息

本文运用PCR技术,分别从大肠杆菌TB1、107/86和C83907菌株中扩增出不舍信号肽序列的Stx2eB亚单位基因(stx2eB)、F18菌毛的A亚单位基因(fedA)和F4菌毛亚单位基因(faeG),将这3个基因的PCR扩增产物按预定阅读框架克隆入pGEX-6P-1载体的谷胱甘肽S-转移酶(GST)基因的下游,对构建的重组质粒pFSFaeG进行酶切分析和核苷酸序列分析,结果表明,插入的片段与预期一致,且阅读框正确.重组质粒在宿主菌BL21中的表达产物经SDS-PAGE初步分析,发现表达产物与谷胱甘肽转移酶相融合,重组融合蛋白的分子量约为80kD.用表达FedA-Stx2eB-FaeG的重组菌BL21(pFSFaeG)灭活苗对5周龄的ICR小鼠进行腹腔免疫,结果显示经重组菌免疫后的小鼠血清中,产生了分别针对F4、F18、Stx2e抗原特异性的IgG,相应的抗体水平从免疫后7d开始逐步升高,在第二次免疫后21d左右达到了较高的水平,并且在攻毒后对小鼠提供了较好的保护,免疫保护率均达80％以上.

关键词：仔猪腹泻大肠杆菌菌毛亚单位基因毒素融合蛋白重组菌免疫保护

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江苏地区猪圆环病毒Ⅱ型流行病学调查

江苏地区猪圆环病毒Ⅱ型流行病学调查

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中国畜牧兽医学会第一届中国养猪生产和疾病控制技术大会

作者：李文杰高崧刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

应用复合PCR方法,对江苏地区的162份可疑病料进行了检测,结果72份病料为PCV2阳性,17份为PCV1阳性,其中7份同时感染PCV1、PCV2.从发病时间看,以9月至11月发病最多,阳性率高达54.67％.样品较多的保育猪和育肥猪的阳性率分别是26.03％和68... 详细信息

应用复合PCR方法,对江苏地区的162份可疑病料进行了检测,结果72份病料为PCV2阳性,17份为PCV1阳性,其中7份同时感染PCV1、PCV2.从发病时间看,以9月至11月发病最多,阳性率高达54.67％.样品较多的保育猪和育肥猪的阳性率分别是26.03％和68.12％.通过流行病学调查,表明该病已在江苏地区呈流行趋势。

关键词：猪圆环病毒Ⅱ型流行病学 PCR检测

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对病猪多脏器PCV-2的PCR检测

对病猪多脏器PCV-2的PCR检测

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中国畜牧兽医学会第一届中国养猪生产和疾病控制技术大会

作者：李文杰高崧刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

应用复合PCR方法,对18头PCV-2阳性猪病料的心、肝、脾、肺、肾、脑、腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结、扁桃体进行检测,结果有7头PCV-2阳性猪的各个脏器都能检测出PCV-2;在这些脏器中,肺、腹股沟淋巴结、扁桃体的检出率都为100％,较其他受... 详细信息

应用复合PCR方法,对18头PCV-2阳性猪病料的心、肝、脾、肺、肾、脑、腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结、扁桃体进行检测,结果有7头PCV-2阳性猪的各个脏器都能检测出PCV-2;在这些脏器中,肺、腹股沟淋巴结、扁桃体的检出率都为100％,较其他受检脏器更适合作为PCV-2的检测样品。

关键词： PCV-2 复合PCR检测脏器检测猪多脏器衰竭

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直接ELISA和PCR相结合快速检沙门氏菌的研究

直接ELISA和PCR相结合快速检沙门氏菌的研究

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第二届全国现代免疫诊断技术学术研讨会

作者：黄金林焦新安文其乙潘志明张小荣张如宽刘秀梵扬州大学畜禽传染病学农业部重点开放实验室扬州225009 扬州大学生物科学与技术学院扬州大学畜禽传染病学农业部重点开放实验室扬州225009

目的：通过样品试验,得到优化的沙门氏菌检测方法. 方法：在单抗直接ELISA和PCR法检测沙门氏菌的基础上,将PCR法和单抗直接ELISA两种快速检测方法进行了比较研究. 结果：直接ELISA方法结合PCR方法对城区141份水样、2002年春季饮... 详细信息

目的：通过样品试验,得到优化的沙门氏菌检测方法. 方法：在单抗直接ELISA和PCR法检测沙门氏菌的基础上,将PCR法和单抗直接ELISA两种快速检测方法进行了比较研究. 结果：直接ELISA方法结合PCR方法对城区141份水样、2002年春季饮食行业工作人员健康检查的1426份人粪便样品,并与常规国标方法对比,直接ELISA法的敏感性和特异性达100﹪和97.2﹪,PCR法的敏感性和特异性均为100﹪.通过对鲜牛奶样、龙虾、虾仁、熟食制品、水样、人粪样测试,最终确定较优化的沙门氏菌检测程序. 结论：PCR法的敏感性优于直接ELISA法.对大量样品采用直接ELISA筛检,除去大量阴性样品,阳性样品用PCR法作进一步鉴定;需要确定血清型时则用国标方法。

关键词：沙门氏菌检测 PCR法直接ELISA法快速检测

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