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第八届全国分析微生物学学术研讨会

作者：黄金林焦新安文其乙潘志明张小荣张如宽刘秀梵扬州大学畜禽传染病学农业部重点开放实验室扬州225009 扬州大学生物科学与技术学院扬州225009 扬州大学畜禽传染病学农业部重点开放实验室扬州225009

目的:通过样品试验,得到优化的沙门氏菌检测方法.方法:在单抗直接ELISA和PCR法检测沙门氏菌的基础上,将PCR法和单抗直接ELISA两种快速检测方法进行了比较研究.结果:直接ELISA方法结合PCR方法对城区141份水样、2002年春季饮食行业工作人... 详细信息

目的:通过样品试验,得到优化的沙门氏菌检测方法. 方法:在单抗直接ELISA和PCR法检测沙门氏菌的基础上,将PCR法和单抗直接ELISA两种快速检测方法进行了比较研究. 结果:直接ELISA方法结合PCR方法对城区141份水样、2002年春季饮食行业工作人员健康检查的1426份人粪便样品,并与常规国标方法对比,直接ELISA法的敏感性和特异性达100％和97.2％,PCR法的敏感性和特异性均为100％.通过对鲜牛奶样、龙虾、虾仁、熟食制品、水样、人粪样测试,最终确定较优化的沙门氏菌检测程序. 结论:PCR法的敏感性优于直接ELISA法.对大量样品采用直接ELISA筛检,除去大量阴性样品,阳性样品用PCR法作进一步鉴定;需要确定血清型时则用国标方法.

关键词：沙门氏菌 PCR法 ELISA法快速检测方法

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动物疫苗现状和研究展望

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中国禽业导刊 2005年第19期22卷 10-11页

作者：刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225000

我国畜禽疫苗的研究应着重抓好两个方面的工作,一是常规疫苗的研究,用新的常规疫苗补充丰富或替代现有的常规疫苗;二是加大新型疫苗如基因缺失疫苗、DNA疫苗和反向疫苗等的研究开发的力度,研制出能用于畜禽传染病控制和消灭计划的高效... 详细信息

我国畜禽疫苗的研究应着重抓好两个方面的工作,一是常规疫苗的研究,用新的常规疫苗补充丰富或替代现有的常规疫苗;二是加大新型疫苗如基因缺失疫苗、DNA疫苗和反向疫苗等的研究开发的力度,研制出能用于畜禽传染病控制和消灭计划的高效疫苗。著名动物疫病防控专家刘秀梵教授对常规疫苗的生产研究现状和新型疫苗的研究展望作了比较权威的阐述,科学客观,观点鲜明,论述充分,对业界具有较强的指导作用。

关键词：动物疫苗传染病控制畜禽传染病传播途径疫苗免疫畜禽疫病疫苗控制技术人员

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H5亚型禽流感疫苗免疫水禽抗体消长规律及其最佳免疫程序

H5亚型禽流感疫苗免疫水禽抗体消长规律及其最佳免疫程序

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会

作者：张评浒任涛唐应华薛峰仇旭升曹永忠刘晓文辛朝安刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室华南农业大学

通过对不同日龄免疫H5亚型禽流感疫苗水禽(鸭和鹅)的抗体消长情况的比较以及雏鹅禽流感母源抗体消长的动态观察,结果发现,雏鹅母源抗体几乎以每4天下降1log2HI抗体滴度的速度消退;初生水禽3日龄首免即可对禽流感疫苗(H5亚型)产生良好的... 详细信息

通过对不同日龄免疫H5亚型禽流感疫苗水禽(鸭和鹅)的抗体消长情况的比较以及雏鹅禽流感母源抗体消长的动态观察,结果发现,雏鹅母源抗体几乎以每4天下降1log2HI抗体滴度的速度消退;初生水禽3日龄首免即可对禽流感疫苗(H5亚型)产生良好的免疫应答,免后25-30天达到抗体高峰,但水禽血清抗体维持时间不长(尤其是鹅),最佳二免时间宜选择在初免后30天左右进行。这对预防和控制我国水禽禽流感的发生具有重要参考意义。

关键词：禽流感灭活疫苗 H5亚型免疫母源抗体

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H5亚型禽流感疫苗免疫水禽抗体消长规律及其最佳免疫程序

H5亚型禽流感疫苗免疫水禽抗体消长规律及其最佳免疫程序

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第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会

作者：张评浒任涛唐应华薛峰仇旭升曹永忠刘晓文辛朝安刘秀梵华南农业大学扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

通过对不同日龄免疫H5亚型禽流感疫苗水禽(鸭和鹅)的抗体消长情况的比较以及雏鹅禽流感母源抗体消长的动态观察,结果发现,雏鹅母源抗体几乎以每4天下降11og2HI抗体滴度的速度消退;初生水禽3日龄首免即可对禽流感疫苗(H5亚型)产生良好的... 详细信息

通过对不同日龄免疫H5亚型禽流感疫苗水禽(鸭和鹅)的抗体消长情况的比较以及雏鹅禽流感母源抗体消长的动态观察,结果发现,雏鹅母源抗体几乎以每4天下降11og2HI抗体滴度的速度消退;初生水禽3日龄首免即可对禽流感疫苗(H5亚型)产生良好的免疫应答,免后25-30天达到抗体高峰,但水禽血清抗体维持时间不长(尤其是鹅),最佳二免时间宜选择在初免后30天左右进行。这对预防和控制我国水禽禽流感的发生具有重要参考意义。

关键词：禽流感灭活疫苗 H5亚型免疫母源抗体

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H9N2亚型禽流感病毒传播途径特性的比较和其表面基因序列的测定和分析

H9N2亚型禽流感病毒传播途径特性的比较和其表面基因序列的测定和...

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第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会

作者：石火英陈素娟高崧刘武杰刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室

选择中国大陆最早分离的H9N2业型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)A/Chicken/Guangdong/SS/94(H9N2)(缩写为SS株)和1998年大流行时期分离的H9N2亚型AIVA/Chicken/Shanghai/F/98(H9N2)(缩写为F株)为研究对象,对其在SPF鸡体内的复制能力和传播途径特性作了系统的比较,发现F株在4周龄SPF鸡气管中的复制能力高于SS株,F株可以经气溶胶传播途径传播,SS株不能经气溶胶传播途径传播;利用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法获取SS株的HA和NA基因的cDNA,序列分析得知:SS株HA基因的裂解位点氨基酸序列是PARSSR↓GL;F株和SS株的HA和NA-基因的同源性都很高;SS株与F株的NA基因红细胞吸附位点的氨基酸序列不同;SS株和F株的NA基因在63-65位存在氨基酸缺失。

关键词： H9N2亚型AIV F株 SS株传播途径 HA和NA基因序列

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H9N2亚型禽流感病毒传播途径特性的比较和其表面基因序列的测定和分析

H9N2亚型禽流感病毒传播途径特性的比较和其表面基因序列的测定和...

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会

作者：石火英陈素娟高崧刘武杰刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室

选择中国大陆最早分离的H9N2亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)A/Chicken/Guangdong/SS/94(H9N2)(缩写为SS株)和1998年大流行时期分离的H9N2亚型AIVA/Chicken/Shanghai/F/98(H9N2)(缩写为F株)为研究对象,对其在SPF鸡体内的复制能力和传播途径特性作了系统的比较,发现F株在4周龄SPF鸡气管中的复制能力高于SS株,F株可以经气溶胶传播途径传播,SS株不能经气溶胶传播途径传播;利用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法获取SS株的HA和NA基因的cDNA,序列分析得知:SS株HA基因的裂解位点氨基酸序列是PARSSR↓GL;F株和SS株的HA和NA基因的同源性都很高;SS株与F株的NA基因红细胞吸附位点的氨基酸序列不同;SS株和F株的NA基因在63-65位存在氨基酸缺失。

关键词： H9N2亚型AIV F株 SS株传播途径 HA和NA基因序列

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减毒鼠伤寒沙门氏菌运送CD8+T细胞表位的细胞免疫应答规律研究

减毒鼠伤寒沙门氏菌运送CD8+T细胞表位的细胞免疫应答规律研究

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会

作者：张辉焦新安潘志明张晓明扬州大学人兽共患病与免疫学实验室农业部畜禽传染病学重点开放实验室

目的分析减毒沙门氏菌运送CD8+T细胞表位诱导机体产生特异性细胞免疫应答。方法通过构建融合表达OVA257-264aa和LCMVNP118-132aaCD8+T细胞表位的原核表达质粒ptG2F,以电穿孔法转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,筛选重组菌SL7207(ptG2F)。... 详细信息

目的分析减毒沙门氏菌运送CD8+T细胞表位诱导机体产生特异性细胞免疫应答。方法通过构建融合表达OVA257-264aa和LCMVNP118-132aaCD8+T细胞表位的原核表达质粒ptG2F,以电穿孔法转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,筛选重组菌SL7207(ptG2F)。采用静脉注射免疫C57BL/6和BALB/c小鼠,间隔2周,分别于第2次和第3次免疫后取免疫小鼠脾细胞,用ELISPOT法检测特异性IFN-γ分泌细胞和IL-4分泌细胞。结果携带CD8+T细胞表位的重组菌SL7207(ptG2F)能诱导产生细胞免疫应答。在递呈OVACD8+T细胞表位时,2次免疫后,诱导产生的细胞免疫应答趋向于Th1;而在3次免疫后,呈现Th1/Th2的平衡转换。在递呈LCMVNPCD8+T细胞表位过程中,Th2免疫应答水平高于Th1,且有增强趋势。结论减毒沙门氏菌可以有效运送CD8+T细胞表位并诱导产生特异细胞免疫应答,这为减毒细菌作为运送载体的研究提供了参考依据。

关键词：减毒沙门氏菌 ELISPOT 细胞因子分泌细胞 Th1/Th2

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减毒鼠伤寒沙门氏菌运送CD8+T细胞表位的细胞免疫应答

减毒鼠伤寒沙门氏菌运送CD8+T细胞表位的细胞免疫应答

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第二届全国现代免疫诊断技术学术研讨会

作者：张辉焦新安潘志明张晓明扬州大学人兽共患病与免疫学实验室农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

目的：探索减毒沙门氏菌运送CD8+T细胞表位诱导机体产生特异性细胞免疫应答一些规律性. 方法:通过构建融合表达OVA257～264aa和LCMVNP118～132aaCD8+T细胞表位的原核表达质粒ptG2F,以电穿孔法转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,筛选重组... 详细信息

目的：探索减毒沙门氏菌运送CD8+T细胞表位诱导机体产生特异性细胞免疫应答一些规律性. 方法:通过构建融合表达OVA257～264aa和LCMVNP118～132aaCD8+T细胞表位的原核表达质粒ptG2F,以电穿孔法转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,筛选重组菌SL7207(ptG2F).采用静脉注射免疫C57BL/6和BALB/c小鼠,间隔2wk,分别于第2次和第3次免疫后,取免疫小鼠脾细胞,用ELISPOT法检测特异性IFN-γ分泌细胞和IL-4分泌细胞. 结果:携带CD8+T细胞表位的重组菌SL7207(ptG2F)能诱导产生细胞免疫应答.在呈递OVACD8+T细胞表位时,2次免疫后,诱导产生的细胞免疫应答趋向于Th1;而在3次免疫后,呈现Th1/Th2的平衡转换.在呈递LCMVNPCD8+T细胞表位过程中,Th2免疫应答水平高于Th1,且有增强趋势. 结论:减毒沙门氏菌可以有效运送CD8+T细胞表位并诱导产生特异细胞免疫应答,这为减毒细菌作为运送载体的研究提供了参考依据。

关键词：减毒沙门氏菌 ELISPOT 细胞因子 Th1/Th2细胞细胞免疫应答 T细胞表位免疫诊断

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运送H5亚型禽流感病毒DNA疫苗减毒鼠伤寒沙门氏菌的实验室免疫效力研究

运送H5亚型禽流感病毒DNA疫苗减毒鼠伤寒沙门氏菌的实验室免疫效...

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中国畜牧兽医学会禽病学分会禽流感及免疫抑制病论坛

作者：焦凤超焦新安潘志明黄金林张小荣刘秀梵扬州大学生物科学与技术学院扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 扬州大学生物科学与技术学院扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

本文将运送H5亚型禽流感病毒DNA疫苗重组减毒鼠伤寒沙门氏菌以1010CFU剂量口服接种1日龄SPF雏鸡,结果表明重组菌对雏鸡具有良好的安全性.将重组菌SL7207(pVAX1-HA)和X4550(asd-pVAX1-HA)以2×109CFU的剂量两次口服免疫1日龄商品代... 详细信息

本文将运送H5亚型禽流感病毒DNA疫苗重组减毒鼠伤寒沙门氏菌以1010CFU剂量口服接种1日龄SPF雏鸡,结果表明重组菌对雏鸡具有良好的安全性.将重组菌SL7207(pVAX1-HA)和X4550(asd-pVAX1-HA)以2×109CFU的剂量两次口服免疫1日龄商品代伊莎褐蛋鸡,同时,将重组菌分别与pVAX1-IFN-γ或pVAX1-IL2(200μg/只)联合免疫,通过测定小肠黏膜抗体效价,结果显示,重组菌单独免疫组和联合免疫组能激发机体产生黏膜免疫应答,且与空载体组、空白对照组以及油苗组之间存在显著性差异(p＜0.05).攻毒后,免疫保护结果显示无论是重组菌单独免疫组还是联合免疫组均与空载体组和空白对照组之间存在显著性差异(p＜0.05),而重组菌单独免疫组与联合免疫组之间不存在显著性差异,说明重组菌SL7207(pVAX1-HA)和X4550(asd-pVAX1-HA)能够提供机体抵抗HPAIVH5亚型强毒攻击的良好的免疫保护作用,这为进一步筛选出基于黏膜免疫途径的新型禽流感基因工程疫苗奠定了基础.

关键词：减毒沙门氏菌 DNA疫苗禽流感病毒免疫效力

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运送H5亚型禽流感病毒DNA疫苗减毒鼠伤寒沙门氏菌的实验室免疫效力研究

运送H5亚型禽流感病毒DNA疫苗减毒鼠伤寒沙门氏菌的实验室免疫效...

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会

作者：焦凤超焦新安潘志明黄金林张小荣刘秀梵扬州大学生物科学与技术学院扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

将运送H5亚型禽流感病毒DNA疫苗重组减毒鼠伤寒沙门氏菌以1010CFU剂量口服接种1日龄SPF雏鸡,结果表明重组菌对雏鸡具有良好的安全性。将重组菌SL7207(pVAX1-HA)和X4550(asd-pVAX1-HA)以2×109CFU的剂量两次口服免疫1日龄商品代伊莎... 详细信息

将运送H5亚型禽流感病毒DNA疫苗重组减毒鼠伤寒沙门氏菌以1010CFU剂量口服接种1日龄SPF雏鸡,结果表明重组菌对雏鸡具有良好的安全性。将重组菌SL7207(pVAX1-HA)和X4550(asd-pVAX1-HA)以2×109CFU的剂量两次口服免疫1日龄商品代伊莎褐蛋鸡,同时,将重组菌分别与pVAX1-IFN-γ或pVAX1-IL2(200μg/只)联合免疫,通过测定小肠黏膜抗体效价,结果显示,重组菌单独免疫组和联合免疫组能激发机体产生黏膜免疫应答,且与空载体组、空白对照组以及油苗组之间存在显著性差异(p<0.05)。攻毒后,免疫保护结果显示无论是重组菌单独免疫组还是联合免疫组均与空载体组和空白对照组之间存在显著性差异(p<0.05),而重组菌单独免疫组与联合免疫组之间不存在显著性差异,说明重组菌SL7207(pVAX1-HA)和X4550(asd-pVAX1-HA)能够提供机体抵抗HPAIVH5亚型强毒攻击的良好的免疫保护作用,这为进一步筛选出基于黏膜免疫途径的新型禽流感基因工程疫苗奠定了基础。

关键词：减毒沙门氏菌 DNA疫苗禽流感病毒免疫效力

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