检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医学报 2003年第6期23卷 557-559页

作者：王芳焦新安刘文博孟书霞张如宽刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

用表达绿色荧光蛋白 ( green fluorescentprotein,GFP)的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌 X4 5 5 0 ( p YAGFP)给 BAL B/c小鼠尾静脉注射和口服 ,对小鼠脏器进行细菌计数 ,并用间接 EL ISA法测定血清中抗细菌的抗体。结果表明 ,静脉注射重组菌... 详细信息

用表达绿色荧光蛋白 ( green fluorescentprotein,GFP)的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌 X4 5 5 0 ( p YAGFP)给 BAL B/c小鼠尾静脉注射和口服 ,对小鼠脏器进行细菌计数 ,并用间接 EL ISA法测定血清中抗细菌的抗体。结果表明 ,静脉注射重组菌的小鼠在肝脏、脾脏中重组菌数量有 2个峰值 ,总的趋势是越来越少 ,而血清中抗体效价越来越高 ,可以初步推断 ,肝脏、脾脏中的细菌数量与血清中的抗体水平呈一定的相关性 ;口服重组菌的小鼠 ,在各脏器中重组菌的数量呈现正态分布的变化趋势 ,其中派伊尔结 ( Peyer′s patches,PPs)中细菌数量与血清中的抗体水平呈一定的相关性 ,而脾脏、肝脏及肠系膜淋巴结中细菌数量与血清中的抗体滴度无关。

关键词：重组减毒鼠伤寒沙门氏菌绿色荧光蛋白动力学间接ELISA法抗体检测

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两株H_9N_2亚型禽流行性感冒病毒HA基因序列分析

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病毒学报 2002年第3期18卷 285-287页

作者：程坚刘红旗彭大新张如宽刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

The complete cDNA sequences of HA genes of two AIV isolates were presented in this paper The result of comparative sequence analysis seemed to suggest that these two isolates may be identical to three other AIV strains(H 9N 2) isolated from HongKong recently and these five strains may have the same origin in that the identity of the HA protein sequences of these AIV isolates is higher than 95%

关键词： H9N2亚型禽流行性感冒病毒 HA基因序列分析禽流感病毒血凝素基因

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检测鸭呼肠孤病毒抗体间接ELISA方法的建立

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中国兽医学报 2014年第1期34卷 26-29,38页

作者：孙陈莉杨瑞王义敏赵娜张小荣彭大新吴艳涛扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

RT-PCR扩增鸭呼肠孤病毒(Duck reovirus,DRV)的σB基因,克隆到pET-32a(+)表达载体,再转化大肠杆菌Transetta(DE3);含有重组质粒pET-σB的大肠杆菌经IPTG诱导,获得大小为55 000的以包涵体形式表达的σB重组蛋白。Western blotting显示,σ... 详细信息

RT-PCR扩增鸭呼肠孤病毒(Duck reovirus,DRV)的σB基因,克隆到pET-32a(+)表达载体,再转化大肠杆菌Transetta(DE3);含有重组质粒pET-σB的大肠杆菌经IPTG诱导,获得大小为55 000的以包涵体形式表达的σB重组蛋白。Western blotting显示,σB重组蛋白能够与兔抗DRV多抗血清特异性结合。以高亲和NI-NTA树脂在变性条件下纯化、梯度尿素复性的σB重组蛋白为包被抗原,建立了检测DRV抗体的间接ELSIA方法。分别以间接ELSIA方法和血清中和试验对DRV感染鸭血清和SPF鸭血清进行检测,两者的符合率为100%。该间接ELSIA方法对鸭瘟病毒、鸭病毒性肝炎病毒和禽流感病毒阳性血清均无交叉反应。

关键词：鸭呼肠孤病毒 σB重组蛋白原核表达间接ELISA

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鸡沙门氏菌弱毒苗与微生态制剂联合应用的效果

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中国兽医学报 2003年第2期23卷 155-156页

作者：潘志明张小荣焦新安刘文博甘军纪高崧张如宽刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

将鸡沙门氏菌弱毒苗分别与 2种不同的微生态制剂配合对 AA肉鸡实施免疫。结果表明 ,弱毒苗单独应用组、联合应用 1组和 2组的免疫保护效率分别为 75 %、90 %和 90 % ,均与攻毒对照组 (40 % )存在显著差异 (P <0 .0 5 ) ;攻毒 2 0 d... 详细信息

将鸡沙门氏菌弱毒苗分别与 2种不同的微生态制剂配合对 AA肉鸡实施免疫。结果表明 ,弱毒苗单独应用组、联合应用 1组和 2组的免疫保护效率分别为 75 %、90 %和 90 % ,均与攻毒对照组 (40 % )存在显著差异 (P <0 .0 5 ) ;攻毒 2 0 d后所有存活鸡细菌分离结果显示 ,上述 3个试验组细菌分离率分别为 5 3.5 %、5 5 %和 5 .5 % ,也均与攻毒对照组 (75 % )存在显著性差异 (P <0 .0 5 )。由此认为 ,该弱毒苗与上述微生态制剂联合应用的效果明显 ,具有较好的应用前景。

关键词：联合应用鸡沙门氏菌弱毒苗微生态制剂免疫效力

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40株新城疫病毒全基因组的比较研究

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扬州大学学报（农业与生命科学版） 2008年第1期29卷 1-5页

作者：曹永忠顾敏刘文博刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

利用作者单位测得的和从GenBank检索得到的40株新城疫病毒（NDV）全基因组序列,采用SMS、DNA Star等生物信息分析软件,比较分析NDV全基因组的基本特征和分子进化规律。结果表明：40株NDV全基因组核酸序列长度有3种：15186、15192、15198... 详细信息

利用作者单位测得的和从GenBank检索得到的40株新城疫病毒（NDV）全基因组序列,采用SMS、DNA Star等生物信息分析软件,比较分析NDV全基因组的基本特征和分子进化规律。结果表明：40株NDV全基因组核酸序列长度有3种：15186、15192、15198nt,均符合6倍数规律;基因组A＋T含量占53%～54%,C＋G含量占46%左右;NDV基因组前三分之一（4500nt前）序列存在高GC含量区,特别是在大约1200～2400nt区域,GC含量最高达到69%;F基因片段构建的分子进化树显示,40株NDV划分为两大类（ClassⅠ,ClassⅡ）,基因组长度为15198nt的毒株属于ClassⅠ,其余的属于ClassⅡ;ClassⅡ毒株又分为基因Ⅰ～Ⅶ型,这些已测序的毒株中没有基因和型;病毒6个基因CDS序列构建的进化树显示,各基因进化基本保持一致,仅少数毒株存在差异,可能与病毒分子的基因重组有关。

关键词：新城疫病毒全基因组生物信息学比较

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不同H_5亚型禽流感灭活苗对鸡H_5N_1株的免疫效力试验

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扬州大学学报（农业与生命科学版） 2006年第2期27卷 40-43页

作者：唐一鸣刘金彪张评浒刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

采用H5N2和H5N1两种类型的禽流感(A I)油乳灭活疫苗免疫鸡群对高致病性A I流行株H5N1A IV的攻毒保护效力进行了比较。结果表明:在同等免疫剂量条件下,H5N2和H5N1油乳灭活苗对鸡群具有相似或同等的免疫效力,均能抵抗对高致病性A IH5N1流... 详细信息

采用H5N2和H5N1两种类型的禽流感(A I)油乳灭活疫苗免疫鸡群对高致病性A I流行株H5N1A IV的攻毒保护效力进行了比较。结果表明:在同等免疫剂量条件下,H5N2和H5N1油乳灭活苗对鸡群具有相似或同等的免疫效力,均能抵抗对高致病性A IH5N1流行株的攻击;A I母源抗体对灭活苗免疫具有一定的干扰作用。

关键词：禽流感鸡 H5亚型油乳灭活苗免疫攻毒

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H_5亚型禽流感疫苗免疫肉鸡、水禽后抗体消长规律的研究

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扬州大学学报（农业与生命科学版） 2005年第2期26卷 1-3页

作者：薛峰张评浒刘晓文唐应华龙进学高崧刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

通过对父母代肉鸡、水禽禽流感病毒H5血清血凝抑制抗体水平连续跟踪监测。探讨H5亚型禽流感疫苗免疫肉鸡、水禽后抗体消长规律。结果表明:雏鸡7日龄时母源抗体水平达最大值,20日龄时母源抗体下降到极低水平,雏鸡最佳首次免疫日龄为10日... 详细信息

通过对父母代肉鸡、水禽禽流感病毒H5血清血凝抑制抗体水平连续跟踪监测。探讨H5亚型禽流感疫苗免疫肉鸡、水禽后抗体消长规律。结果表明:雏鸡7日龄时母源抗体水平达最大值,20日龄时母源抗体下降到极低水平,雏鸡最佳首次免疫日龄为10日龄左右,二次免疫应根据鸡群母源抗体水平于首次免疫后100d左右进行。雏鹅、鸭3日龄进行首次免疫,水禽对禽流感疫苗产生良好的免疫应答,并于免疫后25～30d达到抗体高峰,但首次免疫抗体维持时间不长,最佳二次免疫时间应在首次免疫后30d左右进行。

关键词：抗体消长规律疫苗免疫 H5亚型禽流感水禽肉鸡母源抗体水平血凝抑制抗体禽流感病毒禽流感疫苗跟踪监测水平连续 10日龄免疫日龄二次免疫免疫应答维持时间免疫抗体免疫时间父母代最大值 3日龄雏鸡最佳

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抗H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白特异性单克隆抗体的研制及鉴定

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中国兽医学报 2007年第5期27卷 664-666页

作者：郝贵杰提金凤陈清刘文博吴艳涛扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

以抗H5亚型禽流感病毒(AIV)JSD株鸡胚尿囊液免疫8周龄BALB/c小鼠,第4次免疫后取其脾淋巴细胞与SP2/0-Ag-14骨髓瘤细胞融合,用血凝抑制试验(HI)对杂交瘤进行筛选,经3次亚克隆后,共获得4株针对血凝素(HA)蛋白的特异性单克隆抗体,分别命名... 详细信息

以抗H5亚型禽流感病毒(AIV)JSD株鸡胚尿囊液免疫8周龄BALB/c小鼠,第4次免疫后取其脾淋巴细胞与SP2/0-Ag-14骨髓瘤细胞融合,用血凝抑制试验(HI)对杂交瘤进行筛选,经3次亚克隆后,共获得4株针对血凝素(HA)蛋白的特异性单克隆抗体,分别命名为:2D2、2C8、3D3和3D11。该4株单抗的小鼠腹水的HI效价在213～215,ELISA效价为1.2×105～5.1×105。亚类鉴定结果表明,2D2和3D11属于IgG1,2C8属于IgG3,3D3属于IgG2a亚类;特异性试验结果表明,上述4株单抗仅与H5 AIV毒株发生特异性反应,而不与其他亚型AIV以及NDV、IBV和EDSV-76等病毒反应;鸡胚中和试验结果显示,4株单抗均具有较好的中和活性。本研究成功获得4株针对H5 AIVHA蛋白的特异性单抗,为临床H5 AIV的血清学监测及鉴定提供了必需的试剂。

关键词：禽流感病毒单克隆抗体血凝抑制试验

来源：评论

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H5N2与H5N1禽流感油乳灭活疫苗免疫鹅群对H5N1流行株攻毒的保护效力及母源抗体对免疫效力的干扰

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中国兽医学报 2006年第3期26卷 268-270,274页

作者：张评浒唐应华薛峰曹永忠仇旭升孙学辉刘小文高崧刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

应用H5N2和H5N12种类型禽流感油乳灭活疫苗分别免疫鹅群,观察比较了二者对H5N1型高致病性禽流感病毒的攻毒保护效力。结果表明,在同等剂量免疫条件下,从发病率、死亡率和泄殖腔排毒规律3项指标综合评价来看,H5N1灭活苗水禽免疫组对高致... 详细信息

应用H5N2和H5N12种类型禽流感油乳灭活疫苗分别免疫鹅群,观察比较了二者对H5N1型高致病性禽流感病毒的攻毒保护效力。结果表明,在同等剂量免疫条件下,从发病率、死亡率和泄殖腔排毒规律3项指标综合评价来看,H5N1灭活苗水禽免疫组对高致病性禽流感H5N1流行株攻毒的保护效率较H5N2灭活苗理想,且水禽禽流感母源抗体对灭活苗免疫具有一定的干扰作用。

关键词：禽流感 H5亚型油乳灭活疫苗鹅免疫攻毒

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盐酸克伦特罗单克隆抗体的制备及检测方法的初步建立

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中国预防兽医学报 2006年第4期28卷 450-453页

作者：邵炜慧贾红刘文博吴艳涛刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

选择一种新型载体阳离子化牛血清白蛋白(cBSA)与半抗原盐酸克伦特罗(CL)进行偶联,鉴定后作为免疫原免疫Balb/c小鼠,同时以卵清白蛋白(OVA)与CL偶联制备筛选抗原。应用杂交瘤细胞融合技术筛选后获得了1株稳定分泌抗CL单克隆抗体的杂交瘤... 详细信息

选择一种新型载体阳离子化牛血清白蛋白(cBSA)与半抗原盐酸克伦特罗(CL)进行偶联,鉴定后作为免疫原免疫Balb/c小鼠,同时以卵清白蛋白(OVA)与CL偶联制备筛选抗原。应用杂交瘤细胞融合技术筛选后获得了1株稳定分泌抗CL单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为2H5。抗体的亚类为IgM,腹水及细胞上清间接ELISA效价分别为1:20480和1:320,通过竞争阻断实验证明其具有良好的特异性及敏感性,将半抗原经酶标后应用竞争ELISA方法初步建立了CL的检测方法,检测限可达1ng/mL,为进一步制备CL残留检测试剂盒打下了基础。

关键词：盐酸克伦特罗阳离子化牛血清白蛋白单克隆抗体

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