检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医学报 2010年第2期30卷 145-149页

作者：迟兰崔盟王寿利吴艳涛刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 徐州生物工程高等职业学校江苏徐州221006

对2006—2007年分离于江苏省部分发病猪场的PRRSV,采用RT-PCR技术,进行ORF5基因序列以及Nsp2基因部分序列的扩增、克隆并测序。应用DNAStar软件将测序结果与已发表的国内外参考毒株进行比对分析。结果表明,分离的21株病毒ORF5基因大小均... 详细信息

对2006—2007年分离于江苏省部分发病猪场的PRRSV,采用RT-PCR技术,进行ORF5基因序列以及Nsp2基因部分序列的扩增、克隆并测序。应用DNAStar软件将测序结果与已发表的国内外参考毒株进行比对分析。结果表明,分离的21株病毒ORF5基因大小均为603bp;与国内分离株之间同源性为87.7%～97.0%,与国外美洲型分离株同源性为85.6%～90.5%;21株PRRSV分离株与欧洲型毒株之间的同源性仅为54.1%～56.6%。14株用于扩增Nsp2基因部分序列的PRRSV在全基因组第2778～2780位及第2947～3033位分别缺3个和87个碱基,其中的2个江苏扬州分离株在第2747～2836位又缺失了90个碱基;14个毒株之间同源性为93.2%～99.0%,与VR-2332相比同源性为74.9%～78.5%,与国内河北、河南等地2006年的PRRSV分离株相比同源性为94.1%～99.1%。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF5 Nsp2 序列分析

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免疫鸡群新城疫强毒感染排毒与HI抗体变化规律

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扬州大学学报（自然科学版） 2001年第2期4卷 23-26页

作者：赵虎文其乙吴艳涛张如宽刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病重点开放实验室江苏扬州225009

利用新城疫 ( ND)强毒感染快速检测试剂盒跟踪监测 4个免疫鸡群中的个体 ND强毒感染情况 ,并平行测定 HI抗体水平 ,通过对个体 HI抗体的消长与强毒感染及感染后带毒、排毒之间关系的分析 ,探讨鸡群 ND免疫失败的原因和免疫鸡群发生强毒... 详细信息

利用新城疫 ( ND)强毒感染快速检测试剂盒跟踪监测 4个免疫鸡群中的个体 ND强毒感染情况 ,并平行测定 HI抗体水平 ,通过对个体 HI抗体的消长与强毒感染及感染后带毒、排毒之间关系的分析 ,探讨鸡群 ND免疫失败的原因和免疫鸡群发生强毒感染流行的机制 .结果表明 :具有较高 HI抗体水平 (≥ 6)的鸡仍能感染强毒 ,个体感染强毒后一般排毒 1～ 3周 ,少数鸡有间歇排毒现象 ;强毒一旦侵入鸡群 ,很可能长期传染 .ND免疫失败主要是饲养管理不善和免疫程序不科学 ;免疫鸡群发生 ND的原因主要是自然界中广泛存在

关键词：新城疫强毒感染禽病个体排毒诊断试剂盒

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三种重组鸡痘病毒联合与单独免疫效力比较

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中国免疫学杂志 2008年第6期24卷 538-541页

作者：刘武杰仇旭升马怀良孙蕾陈素娟彭大新刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病重点开放实验室扬州225009 中国科学院微生物研究所分子病毒中心北京100101

目的:利用针对不同病原的重组鸡痘病毒(rFPV)在鸡群进行间隔性的多次免疫时,后期免疫会受到前期免疫所诱生的载体特异性免疫反应的干扰,并导致其免疫效力下降。将这些rFPVs进行联合免疫或许是解决此问题的一种策略。为验证rFPVs联合免... 详细信息

目的:利用针对不同病原的重组鸡痘病毒(rFPV)在鸡群进行间隔性的多次免疫时,后期免疫会受到前期免疫所诱生的载体特异性免疫反应的干扰,并导致其免疫效力下降。将这些rFPVs进行联合免疫或许是解决此问题的一种策略。为验证rFPVs联合免疫的可行性,研究中将三种针对不同病原的rFPVs以联合或单独的方式分别进行免疫,并对它们的免疫效力进行比较。方法:rFPV-12LSH9A、rFPV-12LSH5NA及rFPV-12LSHN为分别表达H9亚型禽流感病毒(AIV)HA基因、H5亚型AIV的HA和NA基因及新城疫病毒(NDV)HN基因的三种rFPVs。将这三种rFPVs分别在SPF鸡和带有针对H9、H5亚型AIV及NDV三种病原母源抗体的商品鸡上进行联合或单独免疫。结果:这三株rFPVs在SPF鸡上进行联合免疫时,所诱生的体液免疫应答受到了一定程度的抑制;个别成员株的排毒及死亡保护也受到了显著的干扰。结论:在进行rFPVs联合免疫时,有必要对各成员株rFPV的免疫效力进行比较分析,以确定其可行性。

关键词：重组鸡痘病毒联合免疫 H5亚型禽流感病毒 H9亚型禽流感病毒新城疫病毒

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禽流感油乳剂灭活苗免疫效力试验

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动物科学与动物医学 2000年第3期17卷 40-42页

作者：宋红芹王利宏刘慧谋张如宽扬州大学农业部畜禽传染病重点开放实验室江苏扬州225009

用禽流感病毒 ( AIV) F株尿囊腔接种非免疫鸡胚 ,取死亡胚的胚液、尿囊膜、胚体及三者混合处理物 ,分别制成油乳剂灭活苗。免疫 5日龄普通蛋雏鸡 ,免疫后一周开始检测 AI血凝抑制 ( HI)抗体。检测结果是 :免疫后 2 1d,各免疫组鸡的 HI... 详细信息

用禽流感病毒 ( AIV) F株尿囊腔接种非免疫鸡胚 ,取死亡胚的胚液、尿囊膜、胚体及三者混合处理物 ,分别制成油乳剂灭活苗。免疫 5日龄普通蛋雏鸡 ,免疫后一周开始检测 AI血凝抑制 ( HI)抗体。检测结果是 :免疫后 2 1d,各免疫组鸡的 HI抗体效价均达到 5log2以上 ,2 5d左右达高峰 ,后维持较高水平 3 0 d以上。 18日龄以制苗用 F株攻毒 ,4 9日龄和 64日龄时用 F株和禽源病原大肠杆菌 ( O18)单独或联合攻毒 ,结果是 :18日龄试验组鸡无症状和死亡 ,对照组鸡明显发病但未死亡。 4 9和 64日龄用 F株单独攻击的鸡未发病 ,用大肠杆菌单独或与 F株联合攻击的试验组和对照组均出现死亡。试验结果表明 ,以 F株病毒经鸡胚繁殖后制成的油乳剂灭活苗免疫原性良好。

关键词：禽流感病毒油乳剂灭活苗免疫保护力

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减毒鸡沙门氏菌97A疫苗株安全性和免疫效力试验

减毒鸡沙门氏菌97A疫苗株安全性和免疫效力试验

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中国畜牧兽医学会禽病学会分会第十次学术研讨会

本试验将减毒鸡沙门氏菌97A疫苗株分别以不同剂量经口服和肌肉注射接种10日龄AA肉鸡,结果表明,97A对10日龄雏鸡有良好安全性。将97A分别以108、5×108、109个细菌的免疫剂量口服接种10日龄AA肉鸡,抗体检测结果显示,所有试验组鸡在第... 详细信息

本试验将减毒鸡沙门氏菌97A疫苗株分别以不同剂量经口服和肌肉注射接种10日龄AA肉鸡,结果表明,97A对10日龄雏鸡有良好安全性。将97A分别以108、5×108、109个细菌的免疫剂量口服接种10日龄AA肉鸡,抗体检测结果显示,所有试验组鸡在第7天均能检测到抗体,第14天抗体水平均有不同程度的提高。于接种后14天,用强毒鸡沙门氏菌Sg9按口服或肌肉注射的方

关键词：效力试验疫苗株鸡沙门氏菌

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表达PCV2 Cap蛋白重组杆状病毒对小鼠的保护力试验

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扬州大学学报（农业与生命科学版） 2008年第2期29卷 1-5页

作者：王海燕郭振光盛瑜陈义平吴艳涛高崧刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 中国动物卫生与流行病学中心山东青岛266002

PCR扩增猪圆环病毒2型(PCV2)的衣壳蛋白(Capsid)基因,鉴定后克隆到杆状病毒转移载体pFastBacTM1中,获得重组转移载体pFastBac-Cap,转化进含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac中,经转座作用,蓝白菌落筛选得到含cap基因的重组穿梭载体Bac... 详细信息

PCR扩增猪圆环病毒2型(PCV2)的衣壳蛋白(Capsid)基因,鉴定后克隆到杆状病毒转移载体pFastBacTM1中,获得重组转移载体pFastBac-Cap,转化进含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac中,经转座作用,蓝白菌落筛选得到含cap基因的重组穿梭载体Bacmid-Cap,以脂质体介导的方法将重组穿梭载体转染Sf9昆虫细胞,获得重组病毒reBac-Cap,PCR能够扩增出相应大小的片段,间接免疫荧光分析表明,PCV2阳性血清能使reBac-Cap感染的Sf9昆虫细胞出现特异性绿色荧光,表明reBac-Cap在Sf9细胞中成功表达PCV2-Cap蛋白。动物试验表明该重组病毒对小鼠有一定的保护力。

关键词：猪圆环病毒2型衣壳蛋白重组杆状病毒保护力

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PRRSV血清抗体间接ELISA检测方法的建立

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扬州大学学报（农业与生命科学版） 2006年第4期27卷 1-4页

作者：陈义平邓珣彭长凌刘文博吴晓东李林王志亮刘秀梵中国动物卫生与流行病学中心山东青岛266032 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

用亲和层析纯化的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组核衣壳蛋白GST-N作为诊断抗原,建立检测PRRS血清抗体的间接ELISA方法。抗原最佳包被量为每孔400 ng,待检血清最佳稀释度为1∶100,待检血清样品的D_(490 nm)≥0．43D_(po■)+0．57D_(n... 详细信息

用亲和层析纯化的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组核衣壳蛋白GST-N作为诊断抗原,建立检测PRRS血清抗体的间接ELISA方法。抗原最佳包被量为每孔400 ng,待检血清最佳稀释度为1∶100,待检血清样品的D_(490 nm)≥0．43D_(po■)+0．57D_(neg)判为阳性,反之判为阴性。对采自14个猪场的364份猪血清样品进行检测,PRRS阳性率为51．4%,略高于HerdChek ELISA的阳性检出率49．7%。与HerdChek ELISA相比,间接ELISA的敏感性为94．5%,特异性为91．3%,总符合率为92．9%,Youden指数为0．86。同时还证明该方法具有良好的批间和批内重复性,并且不与猪瘟、猪伪狂犬病等阳性血清发生反应。该方法的成功建立将为我国PRRS的防制工作作出贡献。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒重组核衣壳蛋白间接ELISA

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免疫鸽群中2株新城疫病毒的分离鉴定及遗传进化分析

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中国兽医科学 2012年第10期42卷 998-1001页

作者：朱杰赵晴晴陈广仁宋庆庆胡顺林王晓泉李群辉刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病重点开放实验室江苏扬州225009 建湖县上冈镇畜牧兽医站江苏建湖224733

为了研究目前免疫鸽群中新城疫病毒(NDV)感染发病的原因,对2011年从江苏省和湖南省2个免疫过的发病鸽场分离到的2株鸽源NDV进行了生物学特性的测定以及遗传进化分析,并将其与疫苗株La Sota进行交叉中和试验。结果显示,NT-10株为强毒株,... 详细信息

为了研究目前免疫鸽群中新城疫病毒(NDV)感染发病的原因,对2011年从江苏省和湖南省2个免疫过的发病鸽场分离到的2株鸽源NDV进行了生物学特性的测定以及遗传进化分析,并将其与疫苗株La Sota进行交叉中和试验。结果显示,NT-10株为强毒株,HuN株为中等毒力。对其F基因的遗传进化分析表明,二者均为Ⅵb亚型NDV,均为强毒裂解位点,F蛋白上有3个区别于其他基因型的特征性氨基酸位点,即132S,259H,380N。中和试验结果表明,2个NDV分离株与La Sota的抗原性差异很大。结果表明,Ⅵb亚型仍然是鸽群中新城疫病毒的主要流行株,该亚型具有明显的宿主感染特异性;鸽源Ⅵb亚型NDV分离株与La Sota的抗原性差异较大,这可能是免疫鸽群中发生NDV感染的重要原因之一,有必要研制用于预防鸽群中Ⅵb亚型NDV感染的新型疫苗。

关键词：鸽 Ⅵb亚型新城疫 F蛋白交叉中和试验

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鹅源新城疫病毒ZJI株基因组cDNA克隆的序列修饰

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微生物学通报 2005年第6期32卷 1-6页

作者：刘玉良胡顺林张艳梅吴艳涛刘秀梵 Rmer-Oberdrfer Angela Weits Jutta Lange Martina 黄勇龙进学扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009 德国Friedrich-Lffler研究所国家动物病毒病研究中心分子生物学实验室

将鹅源新城疫病毒ZJI株全基因组cDNA克隆通过酶切切下包含T7启动子区域和转录载体的片段,将其自身环化后获得约6.5kb的质粒。设计引物,利用基因定点突变技术,在此质粒上T7启动子与NDV Leader序列之间突变插入额外的3个G碱基,将此突变最... 详细信息

将鹅源新城疫病毒ZJI株全基因组cDNA克隆通过酶切切下包含T7启动子区域和转录载体的片段,将其自身环化后获得约6.5kb的质粒。设计引物,利用基因定点突变技术,在此质粒上T7启动子与NDV Leader序列之间突变插入额外的3个G碱基,将此突变最终引入到原基因组cDNA克隆中。应用RT-PCR技术从尿囊液中扩增NDV基因组F/HN基因区域部分片段,利用限制性内切酶BsmB I将扩增片段连接,最终将原cDNA克隆中相应片段替换下。测序结果表明,原基因组cDNA克隆中特定位置碱基插入突变成功,F/HN基因区域碱基突变均得以纠正。以上cDNA克隆的修饰与替换为该毒株的反向遗传研究打下了基础。

关键词：鹅源新城疫病毒基因定点突变基因组cDNA克隆改造

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2006～2008年华东地区新城疫病毒HN基因序列分析

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中国动物传染病学报 2010年第2期18卷 61-66页

作者：吴双胡增磊王伟伟王晓泉胡顺林刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

为研究新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）的HN（血凝素-神经氨酸酶，hemagglutinin—neuraminidase）基因分子流行病学规律，利用RT—PCR扩增了2006～2008年间分离自我国华东地区的43株NDV的HN基因片段。基因序列分析显示，... 详细信息

为研究新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）的HN（血凝素-神经氨酸酶，hemagglutinin—neuraminidase）基因分子流行病学规律，利用RT—PCR扩增了2006～2008年间分离自我国华东地区的43株NDV的HN基因片段。基因序列分析显示，分离株中基因Ⅰ型2株，基因Ⅱ型3株，基因Ⅵ型1株，其它37株都属于基因Ⅶd亚型。根据遗传发生进化树可将基因Ⅶd亚型进一步分为Ⅶd1和Ⅶd2两个亚型，基因Ⅶd1亚型HN蛋白的第102、118、443位氨基酸分别为T，A和T，而基因Ⅶd2亚型则分别为I，E和M。另外，研究表明HN蛋白线性表位发生E347K突变的变异株的分离率在我国呈上升趋势。

关键词：新城疫病毒血凝素-神经氨酸酶基因变异株

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