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中国畜牧兽医学会禽病学分会第十次学术研讨会

作者：吴艳涛刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室(扬州) 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室(扬州)

将新城疫病毒(NDV)F48E8株融合蛋白基因导入鸡痘病毒(FPV)插入载体pFG1175-1的P7.5启动子下游，得到转移载体pFGF1175-1重组质粒。采用脂质体转染技术，将该质粒转染FPV282E4株感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)。经过多次蓝斑筛选纯化，获稳... 详细信息

将新城疫病毒(NDV)F48E8株融合蛋白基因导入鸡痘病毒(FPV)插入载体pFG1175-1的P7.5启动子下游，得到转移载体pFGF1175-1重组质粒。采用脂质体转染技术，将该质粒转染FPV282E4株感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)。经过多次蓝斑筛选纯化，获稳定的重组病毒rFPV-NDF。间接免疫荧光试验表明，rFPV-NDF感染的CEF中表达了NDV的融合蛋白。用rFPV-NDF免疫的SPF试验鸡能产生对NDV强毒攻击的免疫力，保护率达96.3℅。

关键词：基因重组鸡痘病毒新城疫病毒融合蛋白

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表达鸡马立克氏病病毒糖蛋白B基因重组鸡痘病毒的遗传稳定性及生物安全性评价试验

表达鸡马立克氏病病毒糖蛋白B基因重组鸡痘病毒的遗传稳定性及生...

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会

作者：卢军胡传伟刘文博高崧彭大新张如宽刘秀梵扬州大学畜牧兽医学院农业部畜禽传染病重点开放实验室扬州大学畜牧兽医学院农业部畜禽传染病重点开放实验室扬州大学畜牧兽医学院农业部畜禽传染病重点开放实验室扬州大学畜牧兽医学院农业部畜禽传染病重点开放实验室扬州大学畜牧兽医学院农业部畜禽传染病重点开放实验室扬州大学畜牧兽医学院农业部畜禽传染病重点开放实验室扬州大学畜牧兽医学院农业部畜禽传染病重点开放实验室

马立克氏病(Marek’s disease,MD)是鸡最常见的淋巴组织增生性疾病,在世界各主要养禽国家和地区均有流行。传统疫苗在防制MD上起到了积极的作用,但是使用方便的HVT冻干苗已难以应付毒力不断增强的MDV,而免疫效果良好的CVI988/Rispens液... 详细信息

马立克氏病(Marek’s disease,MD)是鸡最常见的淋巴组织增生性疾病,在世界各主要养禽国家和地区均有流行。传统疫苗在防制MD上起到了积极的作用,但是使用方便的HVT冻干苗已难以应付毒力不断增强的MDV,而免疫效果良好的CVI988/Rispens液氮疫苗成本高,不便于保存、运输和使用。

关键词：重组鸡痘病毒 FPV 生物安全性评价鸡马立克氏病病毒重组病毒狼山鸡痘病毒载体免疫保护效果糖蛋白

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鸭源H5亚型禽流感全禽源分子标记疫苗候选株的构建

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畜牧兽医学报 2011年第5期42卷 685-691页

作者：张文俊薛涛吴小伟唐应华彭大新刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009 江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014

为了开发用于南方水禽且适合血清学监测的H5亚型禽流感疫苗,作者通过反向遗传技术,删除A/mal-lard/Huadong/S/2005(H5N1,S株)病毒HA编码多碱性氨基酸序列,使之成为低致病特征,分别与A/duck/Eng-land/1/1956(H11N6,E株)和A/Chicken/Shanghai/F/98(H9N2,F株)的NA组合,再以本室禽源高产病毒F株的6个内部片段为骨架,构建全部基因都来自禽流感的疫苗株。成功拯救出2株重组病毒,分别命名为rH5N6/F和rH5N2/F,并引入分子标记N6和N2。重组病毒在鸡胚和MDCK细胞上均具有较好的繁殖能力,且rH5N6/F更适合在鸡胚中生产,对SPF鸡和鸡胚无致病性。重组病毒在clade2.3.4毒株中具有很好的抗原代表性,引入的分子标记有利于血清学监测的区分,为防控水禽H5亚型禽流感提供了良好的疫苗候选株。

关键词：禽流感病毒反向遗传 H5 DIVA疫苗

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禽流感病毒感染鸽的流行病学与致病机理研究进展

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病毒学报 2021年第2期37卷 483-493页

作者：刘开拓高如一王晓泉刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州225009 江苏省人畜共患病重点实验室扬州225009

禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)不仅严重危害禽类,而且对人类生命健康造成严重威胁。鸽作为留鸟,具有作为AIV从野生鸟类传播至人类中间宿主的潜能。鸽对AIV的易感性以及在病毒传播中的作用却存在争议。通过分析AIV自然感染、人... 详细信息

禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)不仅严重危害禽类,而且对人类生命健康造成严重威胁。鸽作为留鸟,具有作为AIV从野生鸟类传播至人类中间宿主的潜能。鸽对AIV的易感性以及在病毒传播中的作用却存在争议。通过分析AIV自然感染、人工感染鸽的流行病学以及实验研究数据,同时回顾了禽流感病毒感染鸽的机制,发现随着病毒的进化和时间的推移,鸽群AIV的感染率也在递增;尤其随着近年具有双受体结合特性的高致病性禽流感病毒(highly pathogenic avian influenza virus,HPAIV)clade2.3.4.4分支H5Nx毒株的出现,其感染鸽后排毒量上升以及鸽体间直接接触传播能力增强。为了有效防控AIV的跨种间传播,有必要加强对鸽感染AIV的流行病学监测和传播特性的研究,特别需要密切关注具双受体结合特性的H5Nx和H7N9 HPAIV对鸽易感性的发展趋势。

关键词：禽流感病毒鸽流行病学致病性

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贵州省鸭源新城疫病毒强毒株的遗传变异分析及致病性研究

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畜牧兽医学报 2016年第8期47卷 1623-1634页

作者：段志强许厚强嵇辛勤陈强胡炎胡顺林刘秀梵贵州大学动物科学学院贵阳550025 贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室贵阳550025 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

为了科学理解家鸭在新城疫病毒（NDV）流行和传播中的作用,对贵州不同地区分离的5株鸭源NDV强毒株进行遗传变异分析以及对鸭和SPF鸡的致病性研究。结果显示：5株NDV分离株均属于基因Ⅶd亚型,其F蛋白裂解位点基序均为112 RRQKRF117,符合... 详细信息

为了科学理解家鸭在新城疫病毒（NDV）流行和传播中的作用,对贵州不同地区分离的5株鸭源NDV强毒株进行遗传变异分析以及对鸭和SPF鸡的致病性研究。结果显示：5株NDV分离株均属于基因Ⅶd亚型,其F蛋白裂解位点基序均为112 RRQKRF117,符合强毒株序列特征,与病毒致病性指数测定结果相符;F和HN蛋白中功能性氨基酸位点均高度保守,但在HN蛋白线性表位区有3株发生E347K突变。交叉血凝抑制试验发现分离株与传统疫苗株LaSota的抗原同源性较低（为83.3%~87.0%）,而与新型基因Ⅶ型疫苗株A-Ⅶ的抗原同源性较高（为93.5%~100%）。将5株NDV分离株以0.5mL病毒尿囊液原液通过肌肉注射感染鸭后未见明显发病死亡和病理变化,并且除脾外在其他多个组织脏器未能检测到病毒复制;而以106.0 ELD50·0.1mL-1剂量通过滴鼻点眼感染SPF鸡后6d内100%发病死亡,病死鸡表现出新城疫典型的临床症状和病理变化,病毒在多个组织脏器中均能复制且对脾、胸腺和法氏囊等免疫器官损伤严重。另外,SPF鸡攻毒后喉头和泄殖腔棉拭病毒分离率明显高于试验鸭。本研究结果表明,贵州省鸭群中流行的基因Ⅶd亚型NDV强毒株HN蛋白发生E347K突变的变异株呈上升趋势,并与传统疫苗株产生抗原差异;5株鸭源NDV强毒株对鸭和鸡致病性差异显著,虽然对鸭无明显致病性,但鸭感染后可在较长时间内通过喉头或泄殖腔向体外排毒,因此必须采取有效措施防止NDV强毒由鸭群向鸡群的传播。

关键词：新城疫病毒基因Ⅶd亚型遗传变异致病性

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新城疫病毒基质蛋白第23位苯丙氨酸对病毒复制与细胞致病性的作用

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中国家禽 2012年第9期34卷 17-20页

作者：高海岗陆建荣胡增垒胡娇刘晓文王晓泉朱杰苏州市动物卫生监督所江苏苏州215100 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

副黏病毒科的副流感病毒5型(Parainfluenza virus5,SV5)和腮腺炎病毒(Mumps virus,MuV)的基质蛋白(Matrix protein,M)都编码FPIV-like晚期结构域(Late-domain,L-domain),L-domain中的苯丙氨酸(Phenylalanine,F)对病毒出芽与复制有很重要的作用。新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)M蛋白也包含潜在的L-domain23FPIV26,但23F对NDV的出芽及复制的作用尚不明确。本试验应用反向遗传学技术,以NDV ZJ1株为母本病毒,拯救一株M蛋白F23A突变的重组病毒ZJ1F23A,并在DF1细胞上对ZJ1F23A的复制性能和细胞致病性进行评价。结果显示,ZJ1F23A在DF1上的复制水平显著低于母本病毒ZJ1,ZJ1F23A对DF1的致病性比ZJ1弱。试验结果说明NDV M蛋白23F对病毒复制及病毒的细胞致病性具有重要作用。

关键词：新城疫病毒基质蛋白晚期结构域病毒复制细胞致病性

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二种产气荚膜梭菌培养基的计数效果的实验研究

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中国卫生检验杂志 2002年第1期12卷 8-10页

作者：文其乙刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏225009

本次试验研究了ISC培养基和m-CP培养基对四种方法处理的产气荚膜梭菌进行细菌计数,并以RCM培养基作为对照培养基。测出了两种选择性培养基对经四种不同处理后的产气荚膜梭菌的计数能力,从试验结果可知,l兀培养基在对采用四种方法处理后... 详细信息

本次试验研究了ISC培养基和m-CP培养基对四种方法处理的产气荚膜梭菌进行细菌计数,并以RCM培养基作为对照培养基。测出了两种选择性培养基对经四种不同处理后的产气荚膜梭菌的计数能力,从试验结果可知,l兀培养基在对采用四种方法处理后的产气荚膜梭菌计数总能力大于m-MP培养基14倍,因此,我们认为采用hC培养基作为检测和计数环境中各种样品中产气荚膜梭菌的数量时,要优于使用m-CP培养基。

关键词： TSC培养基 m-CP培养基产气荚膜梭菌细菌计数

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抗菌药对马立克氏病活疫苗毒性的作用

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中国兽医学报 1999年第3期19卷 215-217页

作者：吴长新甘军纪高以明扬州大学国家农业部畜禽传染病学重点开放实验室中华人民共和国南通市动植物检疫局

用不同剂量的青霉素钾、硫酸链霉素、硫酸卡那霉素、硫酸庆大霉素和恩诺沙星等５种常见抗菌药加入ＨＶＴ冻干菌、ＣＶＩ９８８细胞结合苗和Ｚ４＋ＦＣ１２６双价活疫苗中，作用１ｈ后，分别取样计数，研究其对马立克氏病（ＭＤ）疫苗的... 详细信息

用不同剂量的青霉素钾、硫酸链霉素、硫酸卡那霉素、硫酸庆大霉素和恩诺沙星等５种常见抗菌药加入ＨＶＴ冻干菌、ＣＶＩ９８８细胞结合苗和Ｚ４＋ＦＣ１２６双价活疫苗中，作用１ｈ后，分别取样计数，研究其对马立克氏病（ＭＤ）疫苗的毒性作用。结果表明：５种抗菌药加入ＭＤ疫苗稀释液后，ｐＨ值变化较大，ＭＤ疫苗空斑数显著减少，以至使ＭＤ疫苗失效。

关键词：抗菌药马立克氏病疫苗毒性作用

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HA蛋白S227N突变对基于新城疫病毒载体的H7N9亚型禽流感疫苗免疫原性的影响

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中国兽医科学 2024年第6期54卷 711-717页

作者：傅彦贇石磊杨星竹胡娇胡增垒扬州大学教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室江苏扬州225009 扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

为了评价HA蛋白S227N突变对基于新城疫病毒(NDV)载体的H7N9亚型禽流感疫苗免疫原性的影响,本研究向NDV载体携带的H7N9 HA蛋白中引入S227N突变,用反向遗传学技术拯救重组NDV,评价重组病毒的生物学特性与对鸡的免疫原性。结果显示,表达HAS... 详细信息

为了评价HA蛋白S227N突变对基于新城疫病毒(NDV)载体的H7N9亚型禽流感疫苗免疫原性的影响,本研究向NDV载体携带的H7N9 HA蛋白中引入S227N突变,用反向遗传学技术拯救重组NDV,评价重组病毒的生物学特性与对鸡的免疫原性。结果显示,表达HAS227N的重组NDV的毒力弱(MDT>120 h),在鸡胚中的病毒效价高(HA效价:512;EID_(50):10^(9.3)/m L),复制性能较强,这些生物学特征与载体病毒及表达野生型HA蛋白的重组NDV相似。S227N突变不影响HA蛋白在重组NDV感染细胞中的表达。此外,表达HAS227N与野生型HA蛋白的重组NDV均能诱导产生较高的抗NDV血凝抑制(HI)抗体;HA蛋白S227N突变能够提高重组NDV免疫鸡的血清转化率,却不能显著提升针对H7N9的HI抗体效价。上述结果表明,HA蛋白S227N突变对基于NDV载体的H7N9亚型禽流感疫苗的免疫原性没有显著的增强作用。本研究对H7N9亚型禽流感疫苗的设计、优化与效力评估有参考意义。

关键词： H7N9亚型禽流感病毒疫苗新城疫病毒载体 HA蛋白 S227N突变免疫原性

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牛奶中雌激素类化合物对前列腺和睾丸的影响

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中华男科学杂志 2003年第3期9卷 186-190页

作者：李湘鸣 Davaasambuu Ganmaa 秦立强刘秀梵 Akio Sato 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 日本山梨医科大学环境卫生保健教研室日本山梨县4093898

目的 :研究牛奶中雌激素样物质对男性生殖系统的影响。　方法 :利用世界五大洲肿瘤发病数据库和联合国粮农组织 (FAO)数据库 ,对 42个国家 (地区 )前列腺癌和睾丸癌发病率 ( 1988～ 1992 )与相应的食物消费量资料 ( 1961～ 1990 )进行... 详细信息

目的 :研究牛奶中雌激素样物质对男性生殖系统的影响。　方法 :利用世界五大洲肿瘤发病数据库和联合国粮农组织 (FAO)数据库 ,对 42个国家 (地区 )前列腺癌和睾丸癌发病率 ( 1988～ 1992 )与相应的食物消费量资料 ( 1961～ 1990 )进行相关分析 ;根据美国食品药品管理局 (FDA)标准 ,选用Wistar大鼠 ,进行两代繁殖实验 ,主要研究牛奶中雌激素化合物对生殖器官的影响。　结果 :在所分析的食物中 ,前列腺癌与牛奶消费量的关系最密切(r =0 .711) ,其次是肉类与咖啡 ;奶酪与 2 0～ 3 9岁的睾丸癌标化发病率关系最密切 (r =0 .80 4) ,其次是动物性脂肪和牛奶 ;动物实验研究发现 ,大鼠经长期、大量地饮用牛奶后 ,未发现生殖器官明显减轻的现象。　结论

关键词：牛奶前列腺癌睾丸癌雌激素样物质两代繁殖实验

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