检索结果-内蒙古大学图书馆

禽细胞因子作为免疫佐剂的作用机理研究进展

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中国禽业导刊 2005年第15期22卷 36-37页

作者：薛峰邵卫星姚春峰刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

细胞因子是免疫系统的重要调节因子,病原感染或免疫接种诱导产生的细胞因子决定免疫反应的类型和程度。细胞因子作为一类新型分子免疫佐剂正成为研究热点,本文对几种禽细胞因子的生物学活性与功能作了综述。

关键词：细胞因子免疫佐剂机理研究小分子肽疫苗接种生物学活性免疫球蛋白免疫细胞免疫系统免疫反应

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禽流感病毒感染的宿主免疫应答

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动物医学进展 2004年第5期25卷 37-40页

作者：卢建红邵卫星韦栋平刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

禽流感病毒(AIV)亚型众多、宿主广泛、抗原易变,不同种类的宿主对AIV的反应差异很大。体液免疫可提供抗疫病的保护,抗血凝素的中和抗体是主要的决定因素。细胞毒性T细胞(CTL)反应主要是针对比较保守的内部蛋白,细胞免疫在不同亚型或不... 详细信息

禽流感病毒(AIV)亚型众多、宿主广泛、抗原易变,不同种类的宿主对AIV的反应差异很大。体液免疫可提供抗疫病的保护,抗血凝素的中和抗体是主要的决定因素。细胞毒性T细胞(CTL)反应主要是针对比较保守的内部蛋白,细胞免疫在不同亚型或不同毒株间有交叉反应性,但保护性低。AIV感染的早期,CTL和细胞因子等细胞免疫对限制病毒扩散等起一定作用;感染后期,中和抗体的产生对病毒的清除和宿主恢复起重要作用。

关键词：禽流感病毒宿主免疫应答禽流感体液免疫血凝素细胞免疫

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抗猪肺炎支原体特异性P36蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

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中国兽医学报 2006年第6期26卷 619-621页

作者：胡茂志焦新安潘志明邵国青刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 扬州大学生物科学与技术学院江苏省农业科学院兽医研究所江苏扬州225009

表达P36基因的重组菌BL21(6P-1-P36)经诱导表达,超声波裂解后高速离心,分别收集上清和沉淀。可溶性表达产物亲和层析纯化后用于单抗筛选;同时,用GST-P36包涵体抗原腹腔注射免疫BALB/c小鼠(400μg/只)。利用淋巴细胞杂交瘤技术,获得了1... 详细信息

表达P36基因的重组菌BL21(6P-1-P36)经诱导表达,超声波裂解后高速离心,分别收集上清和沉淀。可溶性表达产物亲和层析纯化后用于单抗筛选;同时,用GST-P36包涵体抗原腹腔注射免疫BALB/c小鼠(400μg/只)。利用淋巴细胞杂交瘤技术,获得了1株能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株5A7-2。生物学特性鉴定表明,腹水单抗的间接ELISA效价为1∶2.5×106;免疫球蛋白亚类为IgG2a。免疫印迹结果显示,腹水单抗能与GST-P36融合蛋白反应而不与谷胱苷肽转移酶(GST)反应,并且在猪肺炎支原体(Mycop lasma hyopneumoniae,Mhp)蛋白36000位置也有明显的条带,说明5A7-2所分泌的是针对MhpP36蛋白的单抗。P36蛋白是Mhp种特异性蛋白,其单克隆抗体的制备,为Mhp种特异性检测方法的建立奠定了基础。

关键词：猪肺炎支原体 P36蛋白单克隆抗体

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鸭肠炎病毒囊膜蛋白gB和gC主要抗原域的原核表达与鉴定

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中国家禽 2011年第2期34卷 22-25,28页

作者：张小荣董广阔成大荣朱善元吴艳涛扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 江苏省畜牧兽医职业技术学院江苏泰州225300

根据GenBank中已经发表的鸭肠炎病毒(DEV)基因组序列,在抗原性分析的基础上,设计5对引物,以DEV标准强毒株DPV-F37基因组DNA作为模板分别扩增DEVgB基因主要抗原域编码区(328～552nt、667～1164nt和1519～1797nt)和gC基因主要抗原域编码区... 详细信息

根据GenBank中已经发表的鸭肠炎病毒(DEV)基因组序列,在抗原性分析的基础上,设计5对引物,以DEV标准强毒株DPV-F37基因组DNA作为模板分别扩增DEVgB基因主要抗原域编码区(328～552nt、667～1164nt和1519～1797nt)和gC基因主要抗原域编码区(67～402nt和472～837nt)。将目的片段克隆入原核表达载体pGEX-6P1中获得重组表达载体pGEX-6P1-gB1、pGEX-6P1-gB2、pGEX-6P1-gB3、pGEX-6P1-gC1和pGEX-6P1-gC2。将重组表达载体转化至BL21宿主菌,经IPTG诱导,外源基因获得了良好表达,融合蛋白大小分别为35、45、37、38和40ku左右。以兔抗DEV多抗血清进行Western blot分析,抗血清与表达的5种融合蛋白均能发生特异性反应。结果提示所有表达出的目的蛋白均具有与天然蛋白相似的反应原性。

关键词：鸭肠炎病毒 gB基因 gC基因原核表达

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鸭源新城疫病毒P基因遗传变异分析

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中国动物传染病学报 2009年第4期17卷 1-6页

作者：刘晓文王晓泉吴双胡顺林刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

为分析2002-2007年分离的鸭源弱毒新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）磷蛋白（P）基因的分子特征,以及在新城疫病毒演化过程中所起的作用,采用RT-PCR方法扩增NDV弱毒分离株的P基因,进行测序,并应用生物信息学软件（SNAP和CODEM... 详细信息

为分析2002-2007年分离的鸭源弱毒新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）磷蛋白（P）基因的分子特征,以及在新城疫病毒演化过程中所起的作用,采用RT-PCR方法扩增NDV弱毒分离株的P基因,进行测序,并应用生物信息学软件（SNAP和CODEML）研究了作用于NDV P基因的选择压力。根据P基因序列的遗传发生分析表明,NDV I类（Class I）2型毒株与德国鸭源毒株DE/R49-99和美国株亲缘关系较近,而3b型毒株与其他I类病毒遗传关系较远,具有地区特色,形成一个独特的分支;NDV II类（Class II）中基因Ib型与中国广泛使用的基因I型疫苗毒Qeensland V4（QV4）以及I型代表株亲缘关系较远。生物信息学软件分析表明,P基因不同片段受到正选择压力的作用不一样,P基因的两端受到负选择压力的作用不易发生变异,而中间（aa62~113和137~198）片段多个位点受到正选择压力的作用。可见,I类病毒中3b具有地域特色,不同基因型P蛋白之间变异较大,而且P蛋白不同位置变异不均匀。

关键词：新城疫病毒 ClassI和ClassII 磷(P)蛋白正选择压力

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体外重组表达血管生长因子VEGF165单克隆抗体的制备及鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2011年第10期27卷 1098-1102页

作者：孔桂美张小荣刁亚利吴克艳刘秋云卜平扬州大学医学院中医系中西医结合临床教研室江苏扬州225001 扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 扬州大学医学院附属第二医院胸心外科江苏扬州225001

目的:研制人VEGF165单克隆抗体(mAb),为研究VEGF165的生物学活性提供基础。方法:应用RT-PCR从脐静脉内皮细胞中克隆人VEGF165基因,克隆入原核表达载体pGEX-6P1中获得重组表达载体pGEX-6P1-VEGF165,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达获得... 详细信息

目的:研制人VEGF165单克隆抗体(mAb),为研究VEGF165的生物学活性提供基础。方法:应用RT-PCR从脐静脉内皮细胞中克隆人VEGF165基因,克隆入原核表达载体pGEX-6P1中获得重组表达载体pGEX-6P1-VEGF165,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达获得重组人VEGF165蛋白,将重组蛋白纯化后免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术,制备人VEGF165高效价的mAb。通过鸡胚血管形成抑制实验、HUVEC迁移抑制实验以及HUVEC血管形成抑制实验,对获得的人VEGF165特异性mAb进行进一步鉴定。结果:成功地从脐静脉血管内皮细胞中克隆出人VEGF165基因,并在大肠杆菌表达系统中获得高效表达,以纯化重组蛋白作为免疫原免疫小鼠,筛选获得5株分泌人VEGF165特异性mAb的杂交瘤细胞株,分别命名为5A6、3F5、6H3、7D10、7A10,其中5A6、3F5、6H3、7D10分泌的mAb亚类为IgG2a,7A10分泌的mAb亚类为IgG2b,抗体轻链均为κ链。5株mAb均能抑制鸡胚血管形成、抑制HUVEC迁移和及血管形成。结论:所获得的mAb具有效价高,活性强的优点,为抗肿瘤血管研究中进一步研究VEGF165的生物学作用提供了重要的基础。

关键词：人VEGF165 单克隆抗体 HUVEC 血管形成细胞迁移

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趋化因子IP-10在介导病毒感染性疾病中的研究进展

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病毒学报 2019年第4期35卷 672-678页

作者：胡艮娣王晓泉陈祥张评浒江苏省新药筛选重点实验室中国药科大学南京210009 农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学扬州225009 江苏省人兽共患病重点实验室扬州大学扬州225009 转化医学研究院江苏省中西医结合老年病防治重点实验室扬州大学医学院扬州225009

干扰素诱生蛋白10(Interferon-inducible protein-10,IP-10)是由IFN-γ诱导产生的一个分子量为10kD的趋化因子,通过与受体CXCR3作用,发挥趋化作用与多种生物学功能。IP-10作为Th1型促炎趋化因子,招募多种细胞到达炎症部位,在炎症中发挥... 详细信息

干扰素诱生蛋白10(Interferon-inducible protein-10,IP-10)是由IFN-γ诱导产生的一个分子量为10kD的趋化因子,通过与受体CXCR3作用,发挥趋化作用与多种生物学功能。IP-10作为Th1型促炎趋化因子,招募多种细胞到达炎症部位,在炎症中发挥作用。同时IP-10在包括危害人类较大的病毒性疾病如乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)、人类免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)、H7N9禽流感病毒、呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)等感染所致的炎症中也发挥重要作用。本研究就IP-10与病毒感染性疾病中炎症产生的密切关系作一综述,以供同行参考。

关键词：干扰素诱生蛋白10(IP-10) 乙型肝炎病毒(HBV) 人类免疫缺陷病毒(HIV) H7N9 炎症

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2017年国内大型鸡场分离的H9N2禽流感病毒的遗传进化和分子特征分析

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中国兽医学报 2019年第8期39卷 1513-1525页

作者：孙王杨吉朱睿张建军石火英扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室/江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心

H9N2禽流感病毒自1994年在广东首次报道暴发以来,已在国内广泛地流行,给养禽业带来了极大的损失,甚至威胁着人类的健康。为了解2017年国内H9N2亚型禽流感病毒的遗传进化和分子特征变化,本研究从江苏、安徽、山东等地区的大型鸡场中分离... 详细信息

H9N2禽流感病毒自1994年在广东首次报道暴发以来,已在国内广泛地流行,给养禽业带来了极大的损失,甚至威胁着人类的健康。为了解2017年国内H9N2亚型禽流感病毒的遗传进化和分子特征变化,本研究从江苏、安徽、山东等地区的大型鸡场中分离到了10株H9N2亚型禽流感病毒。对10株分离株的基因分析表明,所有分离株均属于在2013年后占主导地位的G57型,由BJ/94系的HA、NA和NS基因,DK1系的PB2基因,F/98系的PB1,PA和NP基因以及G1/97系的M基因的四重组病毒组成,并且分离株的EID50显著低于早期分离的H9N2禽流感病毒。10株分离株中有7株受体结合位点的198位发生了A到T,或者A到V的替换,并发生糖基化位点在218位的缺失,313位的增加。与近5年已经发表的流行株HA蛋白比较,所有分离株的抗原位点均发生了S127R、S183N、D216E、T220I、Q235M、S283R突变,NA基因在61~63位缺失NIT;表明分离株的抗原发生了变异。而分离株内部基因PB2上的K318R突变,PB1上的L13P突变,PA上的K356R突变、Q/T/S400P突变,NS上的E227K突变,NP上的D34S、K398Q突变,M1上的V15I突变以及M2上的I28V、L55F突变,使分离株更易感染哺乳动物,说明必需要继续加强H9N2禽流感病毒的监测,密切关注其对人类可能造成的影响。特别是10株分离株中首次出现的NA基因的E433D突变和PB2基因的E627V突变是否会给H9N2禽流感病毒增加新的生物学特性还有待进一步研究。

关键词： H9N2亚型禽流感病毒遗传进化分子特征分析

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华东地区6株不同年份的H9N2亚型禽流感病毒的遗传进化分析

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中国动物传染病学报 2021年第5期29卷 83-91页

作者：裴宇茹王晓泉刘晓文胡顺林顾敏胡娇刘秀梵扬州大学兽医学院农业农村部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009 江苏省重点动物传染病和人畜共患病预防控制联合创新中心扬州225009

为了解H9N2亚型禽流感病毒(AIV)遗传演化趋势,本研究选用6株分布于2011-2019年华东地区H9N2分离株来进行基因组遗传进化分析。6株H9N2分离株均属于S基因型、低致病性,但毒株之间核苷酸和氨基酸同源性低。系统发生树上不同年份毒株各基... 详细信息

为了解H9N2亚型禽流感病毒(AIV)遗传演化趋势,本研究选用6株分布于2011-2019年华东地区H9N2分离株来进行基因组遗传进化分析。6株H9N2分离株均属于S基因型、低致病性,但毒株之间核苷酸和氨基酸同源性低。系统发生树上不同年份毒株各基因片段虽起源相同,但分布于不同分支。关键氨基酸位点分析表明,6株毒株均具有优先结合哺乳动物α-2、6 Gal受体的关键氨基酸位点:HA 226L、155T;内部基因片段出现多个哺乳动物适应性的关键位点变异,如PB2蛋白的I292V和A588V、PA蛋白的K356R、S409N等;M2蛋白均存在对金刚烷抗性的S31N突变。综上,H9N2亚型AIV近10年基因组相对稳定,但不同蛋白均出现一致的位点变异,使其对哺乳动物宿主适应性增强,提示我们应进一步加强对H9N2亚型AIV的监测。

关键词：禽流感病毒 H9N2亚型遗传进化

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猪源H9N2亚型流感病毒的分离鉴定和遗传进化分析

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中国动物传染病学报 2010年第4期18卷 19-25页

作者：赵国赵明军鹿欣伦钟蕾刘晓文刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

2008年10月~2009年3月采集剖检病死猪喉拭样品41份,从中分离鉴定了2株H9N2亚型猪流感病毒,对其进行部分生物学特性的研究、全基因测序和遗传演化分析,发现血凝素（hemagglutinin,HA）蛋白335~338的裂解位点上,A/Swine/Yangzhou/1/08为RS... 详细信息

2008年10月~2009年3月采集剖检病死猪喉拭样品41份,从中分离鉴定了2株H9N2亚型猪流感病毒,对其进行部分生物学特性的研究、全基因测序和遗传演化分析,发现血凝素（hemagglutinin,HA）蛋白335~338的裂解位点上,A/Swine/Yangzhou/1/08为RSNR,A/Swine/Taizhou/5/08为RSSR,均为典型低致病性禽流感病毒的特征性序列。2株病毒的HA、神经氨酸酶（neuraminidase,NA）、核衣壳蛋白（nucleocapsid protein,NP）、非结构蛋白（nonstructural protein,NS）、血清前白蛋白（prealbumin,PA）和多聚酶蛋白（polymerase protein1,PB1）基因均来源于A/Chicken/Shanghai/F/98,基质蛋白（matrix,M）基因与A/Swine/Yangzhou/1/08的PB2基因来源于A/Quai/Hong Kong/G1/97,值得注意的是A/Swine/Taizhou/5/08的PB2基因虽然可能来源于A/Chicken/Shanghai/F/98但与A/environment/Hunan/1-35/2007（H5N1）的高度同源,生物学特性试验也表明A/Swine/Taizhou/5/08比A/Swine/Yangzhou/1/08毒力强。

关键词：猪流感病毒 H9N2亚型基因分析

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