检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医科技 2005年第8期35卷 638-642页

作者：张评浒任涛唐应华薛峰仇旭升曹永忠刘晓文辛朝安刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 华南农业大学兽医学院广东广州510642

对不同日龄与母源抗体水平的鸭和鹅,用H5亚型禽流感疫苗免疫后,其HI抗体消长情况进行了比较和观察,结果,初生水禽3日龄首免即可对禽流感疫苗(H5亚型)产生良好的免疫应答;雏鹅母源抗体几乎以每4d下降1个HI抗体效价单位的速度消退;母源抗... 详细信息

对不同日龄与母源抗体水平的鸭和鹅,用H5亚型禽流感疫苗免疫后,其HI抗体消长情况进行了比较和观察,结果,初生水禽3日龄首免即可对禽流感疫苗(H5亚型)产生良好的免疫应答;雏鹅母源抗体几乎以每4d下降1个HI抗体效价单位的速度消退;母源抗体对H5禽流感疫苗免疫后的HI抗体水平存在一定的干扰作用;加强免疫鸭和鹅所产生的H5 HI抗体水平及其维持时间与仅免疫一次的鸭和鹅所产生的抗体水平之间存在显著差异;鸭和鹅免疫H5禽流感疫苗后第25～30d H5 HI抗体水平达到高峰.

关键词：禽流感 H5亚型灭活疫苗免疫母源抗体

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表达致PWD和ED大肠杆菌保护性抗原基因的重组菌的构建与免疫保护试验

表达致PWD和ED大肠杆菌保护性抗原基因的重组菌的构建与免疫保护...

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第一届中国养猪生产和疾病控制技术大会——2005中国畜牧兽医学会学术年会

作者：杨健美施慧高崧陈祥刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

运用PCR技术,分别从大肠杆菌TB1、107/86和C83907菌株中扩增出不含信号肽序列的Stx 2e B亚单位基因(stx 2e B)、F18茵毛的A亚单位基因(fedA)和F4茵毛亚单位基因(faeG),将这3个基因的PCR扩增产物按预定阅读框架克隆入pGEX-6P-1载体的谷... 详细信息

运用PCR技术,分别从大肠杆菌TB1、107/86和C83907菌株中扩增出不含信号肽序列的Stx 2e B亚单位基因(stx 2e B)、F18茵毛的A亚单位基因(fedA)和F4茵毛亚单位基因(faeG),将这3个基因的PCR扩增产物按预定阅读框架克隆入pGEX-6P-1载体的谷胱甘肽S-转移酶(GST)基因的下游,对构建的重组质粒pFSFaeG进行酶切分析和核苷酸序列分析,结果表明,插入的片段与预期一致,且阅读框正确。重组质粒在宿主茵BL21中的表达产物经SDS-PAGE初步分析,发现表达产物与谷胱甘肽转移酶相融合,重组融合蛋白的分子量约为80kD。用表达FedA-Stx 2e B-FaeG的重组茵BL21(pFSFaeG)灭活苗对5周龄的ICR小鼠进行腹腔免疫,结果显示经重组菌免疫后的小鼠血清中,产生了分别针对F4、F18、Stx2e抗原特异性的IgG,相应的抗体水平从免疫后7d开始逐步升高,在第二次免疫后21d左右达到了较高的水平,并且在攻毒后对小鼠提供了较好的保护,免疫保护率均达80%以上。

关键词：大肠杆菌菌毛亚单位基因毒素融合蛋白重组菌免疫保护

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鹅源新城疫病毒ZJI株基因组cDNA克隆的序列修饰

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微生物学通报 2005年第6期32卷 1-6页

作者：刘玉良胡顺林张艳梅吴艳涛刘秀梵 Rmer-Oberdrfer Angela Weits Jutta Lange Martina 黄勇龙进学扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009 德国Friedrich-Lffler研究所国家动物病毒病研究中心分子生物学实验室

将鹅源新城疫病毒ZJI株全基因组cDNA克隆通过酶切切下包含T7启动子区域和转录载体的片段,将其自身环化后获得约6.5kb的质粒。设计引物,利用基因定点突变技术,在此质粒上T7启动子与NDV Leader序列之间突变插入额外的3个G碱基,将此突变最... 详细信息

将鹅源新城疫病毒ZJI株全基因组cDNA克隆通过酶切切下包含T7启动子区域和转录载体的片段,将其自身环化后获得约6.5kb的质粒。设计引物,利用基因定点突变技术,在此质粒上T7启动子与NDV Leader序列之间突变插入额外的3个G碱基,将此突变最终引入到原基因组cDNA克隆中。应用RT-PCR技术从尿囊液中扩增NDV基因组F/HN基因区域部分片段,利用限制性内切酶BsmB I将扩增片段连接,最终将原cDNA克隆中相应片段替换下。测序结果表明,原基因组cDNA克隆中特定位置碱基插入突变成功,F/HN基因区域碱基突变均得以纠正。以上cDNA克隆的修饰与替换为该毒株的反向遗传研究打下了基础。

关键词：鹅源新城疫病毒基因定点突变基因组cDNA克隆改造

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对病猪多脏器PCV-2的PCR检测

对病猪多脏器PCV-2的PCR检测

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第一届中国养猪生产和疾病控制技术大会——2005中国畜牧兽医学会学术年会

作者：李文杰高崧刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

应用复合PCR方法,对18头PCV-2阳性猪病料的心、肝、脾、肺、肾、脑、腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结、扁桃体进行检测,结果有7头PCV-2阳性猪的各个脏器都能检测出PCV-2;在这些脏器中,肺、腹股沟淋巴结、扁桃体的检出率都为100%,较其他受检... 详细信息

应用复合PCR方法,对18头PCV-2阳性猪病料的心、肝、脾、肺、肾、脑、腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结、扁桃体进行检测,结果有7头PCV-2阳性猪的各个脏器都能检测出PCV-2;在这些脏器中,肺、腹股沟淋巴结、扁桃体的检出率都为100%,较其他受检脏器更适合作为PCV-2的检测样品。

关键词： PCV-2 复合PCR方法脏器检测

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一种细胞因子检测新方法:ELISPOT技术

一种细胞因子检测新方法:ELISPOT技术

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会

作者：张辉潘志明焦新安扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

抗原特异性细胞毒T细胞在控制病毒感染和某些肿瘤中具有重要作用,如何准确的定量、定性抗原特异的T细胞反应及评价其作用,是细胞免疫学中的一项重要课题。ELISPOT技术是近年来正为众多研究者所认可的一项通过检测细胞因子,评价T淋巴细... 详细信息

抗原特异性细胞毒T细胞在控制病毒感染和某些肿瘤中具有重要作用,如何准确的定量、定性抗原特异的T细胞反应及评价其作用,是细胞免疫学中的一项重要课题。ELISPOT技术是近年来正为众多研究者所认可的一项通过检测细胞因子,评价T淋巴细胞功能和特异性的新方法。与其它细胞免疫学方法相比较,该法特异性强、灵敏度高、能够直接检测分泌细胞因子细胞,而无需体外扩增。ELISPOT技术对病毒性疾病和肿瘤的发病机制、及体内细胞免疫功能的了解具有重要的意义,也为这些疾病的细胞免疫治疗提供了理论依据。目前,有研究显示该法不仅用于肿瘤疫苗及其治疗中,而且在细胞内感染微生物、自身免疫性疾病发病机制、治疗等方面均有巨大的发展潜力。

关键词： ELISPOT CTL ASC

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江苏地区猪圆环病毒Ⅱ型流行病学调查

江苏地区猪圆环病毒Ⅱ型流行病学调查

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第一届中国养猪生产和疾病控制技术大会——2005中国畜牧兽医学会学术年会

应用复合PCR方法,对江苏地区的162份可疑病料进行了检测,结果72份病料为PCV2阳性,17份为PCV1阳性,其中7份同时感染PCV1、PCV2。从发病时间看,以9月至11月发病最多,阳性率高达54.67%。样品较多的保育猪和育肥猪的阳性率分别是26.03%和68.... 详细信息

应用复合PCR方法,对江苏地区的162份可疑病料进行了检测,结果72份病料为PCV2阳性,17份为PCV1阳性,其中7份同时感染PCV1、PCV2。从发病时间看,以9月至11月发病最多,阳性率高达54.67%。样品较多的保育猪和育肥猪的阳性率分别是26.03%和68.12%。通过流行病学调查,表明该病已在江苏地区呈流行趋势。

关键词：猪圆环病毒Ⅱ型流行病学复合PCR方法

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不同免疫程序的鸡群新城疫和禽流感抗体水平与免疫保护之间的相关性试验

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中国兽医杂志 2005年第9期41卷 23-25页

作者：薛峰吴圣龙唐应华张评浒丁浩高崧刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 江苏省畜牧兽医总站江苏南京210036

新城疫(Newcastle disease, ND)是由新城疫病毒(NDV)引起的禽类的一种急性高度接触性传染病,禽流感(avian influenza,AI)是由A型流感病毒中一些血清亚型毒株引起各种家禽及野生禽类的全身性和/或呼吸系统综合征的传染病,两种疫病均给养... 详细信息

新城疫(Newcastle disease, ND)是由新城疫病毒(NDV)引起的禽类的一种急性高度接触性传染病,禽流感(avian influenza,AI)是由A型流感病毒中一些血清亚型毒株引起各种家禽及野生禽类的全身性和/或呼吸系统综合征的传染病,两种疫病均给养禽业造成巨大的经济损失,实施严格的生物安全措施和在流行地区使用疫苗是控制两种疫病的主要方法.

关键词：鸡群新城疫禽流感抗体水平免疫保护免疫程序生物安全措施

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朊蛋白基因结构与功能研究进展

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中国人兽共患病杂志 2005年第9期21卷 809-811,834页

作者：陶利明王志亮农业部动物检疫所国家外来动物疫病诊断中心国家疯牛病参考实验室扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学熏点开放实验室

朊蛋白存在两种结构形式。一种为正常细胞膜相关蛋白（PrP^c），另一种为朊病毒颗粒相关蛋白（PrP^ac）。两者一级结构完全相同．但高级结构具有较大差异：在PrP^c中α-螺旋结构含量较高．在PrP^ac中β-折叠结构含量较高。两者高级结构... 详细信息

朊蛋白存在两种结构形式。一种为正常细胞膜相关蛋白（PrP^c），另一种为朊病毒颗粒相关蛋白（PrP^ac）。两者一级结构完全相同．但高级结构具有较大差异：在PrP^c中α-螺旋结构含量较高．在PrP^ac中β-折叠结构含量较高。两者高级结构的不同使得它们在物理、化学性质以及生物学特性上产生很大差异。目前能区分这两种不同结构的蛋白方法之一是根据它们对蛋白酶K抗性的差异：PrP^ac能够抵抗该酶的消化．而PrP^c则不能。根据该蛋白因构象的转变而造成蛋白功能的改变，Prusiner提出了朊病毒假说和蛋白质构象病的观点，并因此获得了1997年诺贝尔生理学奖。

关键词：基因结构朊蛋白功能研究进展蛋白质构象病诺贝尔生理学奖 PrP^c 朊病毒假说颗粒相关蛋白膜相关蛋白

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检测新城疫病毒中和抗体的间接ELISA和竞争ELISA方法的初步建立

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中国兽医杂志 2005年第3期41卷 13-16页

作者：丁炜东曹丽萍张体银刘秀梵张如宽吴艳涛中国水产科学院淡水渔业研究中心扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

鸡新城疫(ND)是由鸡新城疫病毒引起的急性传染病，是对养禽业危害最大的禽病之一。融合蛋白(F)是NDV的主要保护性抗原，对新城疫的免疫保护起着重要的作用。基因工程苗是防治ND的一种新型疫苗，本室在前期研究中，以282E4株鸡痘病毒为... 详细信息

鸡新城疫(ND)是由鸡新城疫病毒引起的急性传染病，是对养禽业危害最大的禽病之一。融合蛋白(F)是NDV的主要保护性抗原，对新城疫的免疫保护起着重要的作用。基因工程苗是防治ND的一种新型疫苗，本室在前期研究中，以282E4株鸡痘病毒为载体表达了NDV F40E8株的F基因，在SPF鸡上显示了较好的保护效力，但F蛋白激发机体产生的中和抗体用常规的HI试验无法测出抗体效价。

关键词：间接ELISA 鸡新城疫病毒 NDV F基因 HI试验 SPF鸡禽病中和抗体 ELISA方法保护效力

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间接免疫荧光试验(IIF)检测PRRSV方法的应用

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上海畜牧兽医通讯 2005年第1期 18-20页

作者：彭长凌高崧刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

用PRRSVATCCVR - 2 332株人工单独感染了 3头 3周龄仔猪 ,并用PRRSVATCCVR - 2 332株和猪圆环病毒 2型 (PCV2 )联合感染了 2头 3周龄仔猪 ,同时设立了 3头健康对照猪。攻毒后每日记录试验猪体温、采食、临床表现等 ,并用HerdChekIDEXXKi... 详细信息

用PRRSVATCCVR - 2 332株人工单独感染了 3头 3周龄仔猪 ,并用PRRSVATCCVR - 2 332株和猪圆环病毒 2型 (PCV2 )联合感染了 2头 3周龄仔猪 ,同时设立了 3头健康对照猪。攻毒后每日记录试验猪体温、采食、临床表现等 ,并用HerdChekIDEXXKit测其血清抗体。PRRSV +PCV2联合感染猪分别在感染后 1周、3周剖杀 ,PRRSV单独感染猪和健康对照猪分别在感染后 1周、2周和 3周剖杀。对肺组织进行灌洗处理以获得肺泡巨噬细胞 (PAM) ,用PAM进行抹片 ,同时用肺组织直接进行触片作IIF检测。IIF试验结果表明 ,用所获得的 3株单抗均检测到了人工感染猪肺组织中的PRRSV抗原。另外 ,用IIF检测临床疑似PRRS的 7头猪的PAM抹片 ,其中沭阳 2头猪呈现阳性反应。对这 2头猪的肺组织进行病毒分离 ,结果在盲传到第四代时在Marc- 14 5细胞上产生明显的细胞病变 ,进一步证实了所获得的 3株单抗检测临床样品的准确性和可靠性。综合以上试验结果 ,证实了所获得的 3株单抗均可通过IIF试验用于临床检测肺组织中的PRRSV抗原。

关键词：肺组织单抗感染后临床联合抗原对照 PRRSV PCV2 仔猪

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