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第二届全国现代免疫诊断技术学术研讨会

作者：张辉焦新安潘志明张晓明扬州大学人兽共患病与免疫学实验室农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

目的：探索减毒沙门氏菌运送CD8+T细胞表位诱导机体产生特异性细胞免疫应答一些规律性. 方法:通过构建融合表达OVA257～264aa和LCMVNP118～132aaCD8+T细胞表位的原核表达质粒ptG2F,以电穿孔法转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,筛选重组... 详细信息

目的：探索减毒沙门氏菌运送CD8+T细胞表位诱导机体产生特异性细胞免疫应答一些规律性. 方法:通过构建融合表达OVA257～264aa和LCMVNP118～132aaCD8+T细胞表位的原核表达质粒ptG2F,以电穿孔法转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,筛选重组菌SL7207(ptG2F).采用静脉注射免疫C57BL/6和BALB/c小鼠,间隔2wk,分别于第2次和第3次免疫后,取免疫小鼠脾细胞,用ELISPOT法检测特异性IFN-γ分泌细胞和IL-4分泌细胞. 结果:携带CD8+T细胞表位的重组菌SL7207(ptG2F)能诱导产生细胞免疫应答.在呈递OVACD8+T细胞表位时,2次免疫后,诱导产生的细胞免疫应答趋向于Th1;而在3次免疫后,呈现Th1/Th2的平衡转换.在呈递LCMVNPCD8+T细胞表位过程中,Th2免疫应答水平高于Th1,且有增强趋势. 结论:减毒沙门氏菌可以有效运送CD8+T细胞表位并诱导产生特异细胞免疫应答,这为减毒细菌作为运送载体的研究提供了参考依据。

关键词：减毒沙门氏菌 ELISPOT 细胞因子 Th1/Th2细胞细胞免疫应答 T细胞表位免疫诊断

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运送H5亚型禽流感病毒DNA疫苗减毒鼠伤寒沙门氏菌的实验室免疫效力研究

运送H5亚型禽流感病毒DNA疫苗减毒鼠伤寒沙门氏菌的实验室免疫效...

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中国畜牧兽医学会禽病学分会禽流感及免疫抑制病论坛

作者：焦凤超焦新安潘志明黄金林张小荣刘秀梵扬州大学生物科学与技术学院扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 扬州大学生物科学与技术学院扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

本文将运送H5亚型禽流感病毒DNA疫苗重组减毒鼠伤寒沙门氏菌以1010CFU剂量口服接种1日龄SPF雏鸡,结果表明重组菌对雏鸡具有良好的安全性.将重组菌SL7207(pVAX1-HA)和X4550(asd-pVAX1-HA)以2×109CFU的剂量两次口服免疫1日龄商品代... 详细信息

本文将运送H5亚型禽流感病毒DNA疫苗重组减毒鼠伤寒沙门氏菌以1010CFU剂量口服接种1日龄SPF雏鸡,结果表明重组菌对雏鸡具有良好的安全性.将重组菌SL7207(pVAX1-HA)和X4550(asd-pVAX1-HA)以2×109CFU的剂量两次口服免疫1日龄商品代伊莎褐蛋鸡,同时,将重组菌分别与pVAX1-IFN-γ或pVAX1-IL2(200μg/只)联合免疫,通过测定小肠黏膜抗体效价,结果显示,重组菌单独免疫组和联合免疫组能激发机体产生黏膜免疫应答,且与空载体组、空白对照组以及油苗组之间存在显著性差异(p＜0.05).攻毒后,免疫保护结果显示无论是重组菌单独免疫组还是联合免疫组均与空载体组和空白对照组之间存在显著性差异(p＜0.05),而重组菌单独免疫组与联合免疫组之间不存在显著性差异,说明重组菌SL7207(pVAX1-HA)和X4550(asd-pVAX1-HA)能够提供机体抵抗HPAIVH5亚型强毒攻击的良好的免疫保护作用,这为进一步筛选出基于黏膜免疫途径的新型禽流感基因工程疫苗奠定了基础.

关键词：减毒沙门氏菌 DNA疫苗禽流感病毒免疫效力

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表达鸡马立克氏病病毒gB基因重组鸡痘病毒的遗传稳定性及生物安全性评价

表达鸡马立克氏病病毒gB基因重组鸡痘病毒的遗传稳定性及生物安全...

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会

作者：卢军周锦萍刘佩红孙泉云彭大新张如宽刘秀梵上海市畜牧兽医站扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

为了评价表达鸡马立克氏病病毒gB基因重组鸡痘病毒(rFPV-gB/R)的遗传稳定性,我们将纯化后的重组病毒在CEF单层上连续传30代,引起细胞病变的速度和形态均未发生明显变化;覆盖含X-Gal的琼脂引起的空斑均为蓝色;间接免疫荧光实验证明rFPV-g... 详细信息

为了评价表达鸡马立克氏病病毒gB基因重组鸡痘病毒(rFPV-gB/R)的遗传稳定性,我们将纯化后的重组病毒在CEF单层上连续传30代,引起细胞病变的速度和形态均未发生明显变化;覆盖含X-Gal的琼脂引起的空斑均为蓝色;间接免疫荧光实验证明rFPV-gB/R中的gB基因始终能稳定表达;序列测定结果表明,重组病毒在细胞上连续传30代、在SPF鸡上连续传5代后,gB基因序列没有发生任何变化;以0、10、20、30代重组病毒制成冻干疫苗进行的实验室免疫效力实验表明,细胞连续传代后rFPV-gB/R仍然保持了原有的免疫原性。可见重组鸡痘病毒的gB基因的结构和免疫原性都是高度稳定的。为了评价rFPV-gB/R的生物安全性,我们将rFPV-gB/R通过SPF鸡连续传5代,检测病毒在鸡体的存在部位及其消长、生长繁殖性能和毒力变化;将rFPV-gB/R免疫鸡与未免疫鸡同笼饲养,攻击FPV-102E6强毒,以检测rFPV-gB/R感染鸡的接触传染性。结果显示,rFPV-gB/R在鸡体的存在时间大约为7天,在体内仅存在于接种部位;鸡体传代后痘病毒毒力有一定程度下降,gB基因核苷酸序列未发生任何变化;同居未免疫SPF鸡在痘病毒强毒攻击后全部发痘,可见重组病毒免疫鸡没有接触传染性,能在鸡体内稳定地传代。rFPV-gB/R具有高度的生物安全性。

关键词：鸡马立克氏病重组鸡痘病毒 gB基因遗传稳定性生物安全性

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表达鸡马立克氏病病毒gB基因重组鸡痘病毒的遗传稳定性及生物安全性评价

表达鸡马立克氏病病毒gB基因重组鸡痘病毒的遗传稳定性及生物安全...

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第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会

作者：卢军周锦萍刘佩红孙泉云彭大新张如宽刘秀梵上海市畜牧兽医站扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

为了评价表达鸡马立克氏病病毒gB基因重组鸡痘病毒(rFPV-gB/R)的遗传稳定性,我们将纯化后的重组病毒在CEF单层上连续传30代,引起细胞病变的速度和形态均未发生明显变化;覆盖含X-Gal的琼脂引起的空斑均为蓝色:间接免疫荧光实验证明rFPV-g... 详细信息

为了评价表达鸡马立克氏病病毒gB基因重组鸡痘病毒(rFPV-gB/R)的遗传稳定性,我们将纯化后的重组病毒在CEF单层上连续传30代,引起细胞病变的速度和形态均未发生明显变化;覆盖含X-Gal的琼脂引起的空斑均为蓝色:间接免疫荧光实验证明rFPV-gB/R中的gB基因始终能稳定表达:序列测定结果表明,重组病毒在细胞上连续传30代、在SPF鸡上连续传5代后,gB基因序列没有发生任何变化;以0、10、20、30代重组病毒制成冻干疫苗进行的实验室免疫效力实验表明,细胞连续传代后rFPV-gB/R仍然保持了原有的免疫原性。可见重组鸡痘病毒的gB基因的结构和免疫原性都是高度稳定的。为了评价rFPV-gB/R的生物安全性,我们将rFPV-gB/R通过SPF鸡连续传5代,检测病毒在鸡体的存在部位及其消长、生长繁殖性能和毒力变化;将rFPV-gB/R免疫鸡与未免疫鸡同笼饲养,攻击FPV-102E6强毒,以检测rFPV-gB/R感染鸡的接触传染性。结果显示,rFPV-gB/R在鸡体的存在时间大约为7天,在体内仅存在于接种部位;鸡体传代后痘病毒毒力有一定程度下降,gB基因核苷酸序列未发生任何变化;同居未免疫SPF鸡在痘病毒强毒攻击后全部发痘,可见重组病毒免疫鸡没有接触传染性,能在鸡体内稳定地传代。rFPV-gB/R具有高度的生物安全性。

关键词：鸡马立克氏病重组鸡痘病毒 gB基因遗传稳定性生物安全性

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运送H5亚型禽流感病毒DNA疫苗减毒鼠伤寒沙门氏菌的实验室免疫效力研究

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第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会

作者：焦凤超焦新安潘志明黄金林张小荣刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学生物科学与技术学院

将运送H5亚型禽流感病毒DNA疫苗重组减毒鼠伤寒沙门氏菌以1010CFU剂量口服接种1日龄SPF雏鸡,结果表明重组菌对雏鸡具有良好的安全性。将重组菌SL7207(pVAX1-HA)和X4550(asd-pVAX1-HA) 以2×109CFU的剂量两次口服免疫1日龄商品代伊... 详细信息

将运送H5亚型禽流感病毒DNA疫苗重组减毒鼠伤寒沙门氏菌以1010CFU剂量口服接种1日龄SPF雏鸡,结果表明重组菌对雏鸡具有良好的安全性。将重组菌SL7207(pVAX1-HA)和X4550(asd-pVAX1-HA) 以2×109CFU的剂量两次口服免疫1日龄商品代伊莎褐蛋鸡,同时,将重组菌分别与pVAX1-IFN-γ或pVAX1-IL2(200μg/只)联合免疫,通过测定小肠黏膜抗体效价,结果显示,重组菌单独免疫组和联合免疫组能激发机体产生黏膜免疫应答,且与空载体组、空白对照组以及油苗组之间存在显著性差异(p<0.05)。攻毒后,免疫保护结果显示无论是重组菌单独免疫组还是联合免疫组均与空载体组和空白对照组之间存在显著性差异(p<0.05),而重组菌单独免疫组与联合免疫组之间不存在显著性差异,说明重组菌SL7207(pVAX1-HA)和X4550(asd-pVAX1-HA)能够提供机体抵抗HPAIV H5亚型强毒攻击的良好的免疫保护作用,这为进一步筛选出基于黏膜免疫途径的新型禽流感基因工程疫苗奠定了基础。

关键词：减毒沙门氏菌 DNA疫苗禽流感病毒免疫效力

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运送H5亚型禽流感病毒DNA疫苗减毒鼠伤寒沙门氏菌的实验室免疫效力研究

运送H5亚型禽流感病毒DNA疫苗减毒鼠伤寒沙门氏菌的实验室免疫效...

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会

作者：焦凤超焦新安潘志明黄金林张小荣刘秀梵扬州大学生物科学与技术学院扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

将运送H5亚型禽流感病毒DNA疫苗重组减毒鼠伤寒沙门氏菌以1010CFU剂量口服接种1日龄SPF雏鸡,结果表明重组菌对雏鸡具有良好的安全性。将重组菌SL7207(pVAX1-HA)和X4550(asd-pVAX1-HA)以2×109CFU的剂量两次口服免疫1日龄商品代伊莎... 详细信息

将运送H5亚型禽流感病毒DNA疫苗重组减毒鼠伤寒沙门氏菌以1010CFU剂量口服接种1日龄SPF雏鸡,结果表明重组菌对雏鸡具有良好的安全性。将重组菌SL7207(pVAX1-HA)和X4550(asd-pVAX1-HA)以2×109CFU的剂量两次口服免疫1日龄商品代伊莎褐蛋鸡,同时,将重组菌分别与pVAX1-IFN-γ或pVAX1-IL2(200μg/只)联合免疫,通过测定小肠黏膜抗体效价,结果显示,重组菌单独免疫组和联合免疫组能激发机体产生黏膜免疫应答,且与空载体组、空白对照组以及油苗组之间存在显著性差异(p<0.05)。攻毒后,免疫保护结果显示无论是重组菌单独免疫组还是联合免疫组均与空载体组和空白对照组之间存在显著性差异(p<0.05),而重组菌单独免疫组与联合免疫组之间不存在显著性差异,说明重组菌SL7207(pVAX1-HA)和X4550(asd-pVAX1-HA)能够提供机体抵抗HPAIVH5亚型强毒攻击的良好的免疫保护作用,这为进一步筛选出基于黏膜免疫途径的新型禽流感基因工程疫苗奠定了基础。

关键词：减毒沙门氏菌 DNA疫苗禽流感病毒免疫效力

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产蛋鸡非典型性新城疫并发鸡白痢沙门氏菌病的诊治

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中国家禽 2005年第24期27卷 20-20页

作者：夏晓莉薛峰刘慧谋刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

1 发病情况及流行病学山东某鸡场蛋鸡4000只于5月龄开始产蛋,7月龄产蛋率达65%,从25周龄开始发病,到32周龄达发病高峰,这期间产蛋率在50%徘徊很久,且软皮蛋和破蛋比例居高不下.

关键词：鸡白痢沙门氏菌病非典型性新城疫产蛋鸡诊治并发发病情况流行病学产蛋率软皮蛋月龄

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海安县猪水肿病的流行病学与病原特性研究

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畜牧兽医科技信息 2005年第3期21卷 75-79页

作者：洪小花朱润芝庞全海李宏全高崧杨宏伟丁永龙山西农业大学动物科技学院太谷030801 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009 江苏省海安县兽医站海安226000

水肿病(Edema disease，ED)是指由某种定殖于小肠的大肠杆菌引起的传染性肠毒素血症。这种大肠杆菌可产生能侵入血流并破坏血管壁的外毒素。由于胃粘膜下层及结肠系膜水肿是此病的主要特点，因此称为“水肿病”或“肠水肿”。其特征为... 详细信息

水肿病(Edema disease，ED)是指由某种定殖于小肠的大肠杆菌引起的传染性肠毒素血症。这种大肠杆菌可产生能侵入血流并破坏血管壁的外毒素。由于胃粘膜下层及结肠系膜水肿是此病的主要特点，因此称为“水肿病”或“肠水肿”。其特征为发病突然、病程短促、全身或局部麻痹、行走困难、共济失调，眼脸和喉头、胃、肠等组织器官水肿。本病通常散发，传染性不明显。在一窝仔猪中，营养良好、较肥壮而生长快者先发病。

关键词：猪水肿病发病传染性流行病学共济失调麻痹血流病原特性仔猪定殖

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海安县猪水肿病的流行病学与病原特性研究

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吉林畜牧兽医 2005年第3期27卷 6-10,12页

作者：洪小花朱润芝庞全海李宏全高崧杨宏伟丁永龙山西农业大学动物科技学院山西太谷030801 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 江苏省海安县兽医站江苏海安226000

对江苏省海安县2003年5月-2004年5月各乡镇猪水肿病的发病和死亡情况进行了流行病学调查,发现猪水肿病在海安地区呈零星散发性发生,发病率为0.31%-1.84%,死亡率为0.07%-0.56%,病死率为16.0%-35.0%。水肿病主要侵害仔猪,育成猪也偶有发生... 详细信息

对江苏省海安县2003年5月-2004年5月各乡镇猪水肿病的发病和死亡情况进行了流行病学调查,发现猪水肿病在海安地区呈零星散发性发生,发病率为0.31%-1.84%,死亡率为0.07%-0.56%,病死率为16.0%-35.0%。水肿病主要侵害仔猪,育成猪也偶有发生,一般以气温比较高的季节多发。同时从疑似猪水肿病的病料中分离到12株大肠杆菌,经O血清型鉴定,5株为O139,2株为O45,O55、O93、O9、O101、O119各1株。经多重PCR检测毒素基因(STa、STb、LT、SLT-2e)和大肠杆菌粘附素单抗(F4、F5、F6,F41、F18)检测菌毛,共6个分离株带有SLT-2e基因,其中O139分离株5株,O55分离株1株,其余6株均带STb基因。12个分离株中,单独表达F18菌毛的4株(O1392株,O45、O119各1株),F5+F411株(O93),F41+F181株(O139),F5+F41+F182株(均为O139)。经药敏试验,多数分离株对壮观霉素和新霉素高度敏感。

关键词：分离株 SLT 流行病学多发 e基因多重PCR检测发病猪水肿病病原特性病料

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海安县猪水肿病的流行病学与病原特性研究

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广东畜牧兽医科技 2005年第2期30卷 34-38页

作者：朱润芝洪小花庞全海李宏全高崧杨宏伟丁永龙山西农业大学动物科技学院山西太谷030801 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 江苏省海安县兽医站江苏海安226000

对江苏省海安县2003年5月-2004年5月各乡镇猪水肿病的发病和死亡情况进行了流行病学调查,发现猪水肿病在该地区呈零星散发性发生,发病率为0.31%～1.84%,死亡率为0.07%～0.56%,病死率为16.0%～35.0%。水肿病主要侵害仔猪,育成猪也偶有发... 详细信息

对江苏省海安县2003年5月-2004年5月各乡镇猪水肿病的发病和死亡情况进行了流行病学调查,发现猪水肿病在该地区呈零星散发性发生,发病率为0.31%～1.84%,死亡率为0.07%～0.56%,病死率为16.0%～35.0%。水肿病主要侵害仔猪,育成猪也偶有发生,一般以气温比较高的季节多发。同时从疑似猪水肿病的病料中分离到12株大肠杆菌,经O血清型鉴定,5株为O139,2株为O45,O55、O93、O9、O101、O119各1株。经多重PCR检测毒素基因(STa、STb、LT、SLT-2e)和大肠杆菌粘附素单抗(F4、F5、F6、F41、F18)检测菌毛,共6个分离株带有SLT-2e基因,其中O139分离株5株,O55分离株1株,其余6株均带STb基因。12个分离株中,单独表达F18菌毛的4株(O1392株,O45、O119各1株),F5+F411株(O93),F41+F181株(O139),F5+F41+F182株(均为O139)。经药敏试验,多数分离菌株对壮观霉素和新霉素高度敏感。

关键词：猪水肿病大肠杆菌 O血清型 F38菌毛致水肿病2型类志贺毒素流行病学海安县

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