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中国畜牧兽医学会禽病学分会第12次学术研讨会

作者：钱忠明张评浒薛峰刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室(江苏扬州)

为了确定我国家鸭中禽流感病毒的流行和分布状况,对华东地区的家鸭进行了病毒学监测.在华东地区共采集到1603个鸭泄殖腔拭子.对这1603个泄殖腔拭子用鸡胚尿囊腔传代接种法分离鉴定禽流感病毒.从1603个鸭泄殖腔拭子中共分离到207株禽流... 详细信息

为了确定我国家鸭中禽流感病毒的流行和分布状况,对华东地区的家鸭进行了病毒学监测.在华东地区共采集到1603个鸭泄殖腔拭子.对这1603个泄殖腔拭子用鸡胚尿囊腔传代接种法分离鉴定禽流感病毒.从1603个鸭泄殖腔拭子中共分离到207株禽流感病毒,总分离率为12.9﹪.经HI试验和RT-PCR法鉴定,这207株禽流感病毒中共有8种HA亚型,包括H1、H3、H4、H5、H6、H9、H10和H11亚型.在这些禽流感病毒中,优势禽流感病毒是H5亚型禽流感病毒.不同月份的分离率显示,冬春季节的分离率特别高(大于40.0﹪),而夏季的分离率则很低(低于6.0﹪).H5亚型病毒的分离率也具有相似的特征.H3亚型病毒几乎每个季节都能分离到,但以春秋季节的分离率较高.通过比较发现,我国家鸭中禽流感病毒分布的季节性与国外野生水禽中禽流感病毒分布的季节性相反.本次调查的结果表明,我国家鸭在冬春季节时H5亚型病毒的高感染率.

关键词：禽流感病毒家鸭 HA亚型禽流感病毒学监测

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猪肺炎支原体单克隆抗体的制备与鉴定

猪肺炎支原体单克隆抗体的制备与鉴定

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家畜传染病学会第六次人畜共患病学术交流会

作者：胡茂志焦新安潘志明黄金林刘业兵邵国青刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学生物科学与技术学院扬州大学生物科学与技术学院扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

用KM2培养基(含马血清)培养猪肺炎支原体(Mhp)ZCF23株。高速离心收获培养物并用PBS悬浮,经反复冻融裂解后作为免疫原,腹腔注射免疫BALB/c小鼠。利用淋巴细胞杂交瘤技术,获得了5株分泌特异性抗体的单克隆细胞株,分别命名为:11C6、14C11、... 详细信息

用KM2培养基(含马血清)培养猪肺炎支原体(Mhp)ZCF23株。高速离心收获培养物并用PBS悬浮,经反复冻融裂解后作为免疫原,腹腔注射免疫BALB/c小鼠。利用淋巴细胞杂交瘤技术,获得了5株分泌特异性抗体的单克隆细胞株,分别命名为:11C6、14C11、1186-1、10C11-2和12E7-1。生物学特性鉴定表明,五株腹水单抗的间接ELISA效价均在1:10000左右:免疫球蛋白亚类均为IgG3。免疫印迹结果表明,五株单抗所针对的抗原表位在90 kD、40 kD、70 kD和60 kD左右,而且不与马血清蛋白反应,说明以上单抗均是针对Mhp蛋白的特异性单克隆抗体。

关键词：猪肺炎支原体全菌蛋白单克隆抗体

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畜禽疫苗研究展望

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动物科学与动物医学 2004年第1期21卷 1-2页

作者：刘秀梵扬州大学畜牧兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

畜禽传染病的控制和消灭对保证养殖业的健康发展至关重要。传染病控制的原理是针对引起流行的三个环节采取相应的措施,即消灭传染病,切断传播途径和保护易感群体。我们只有正确认识疫苗在控制乃至消灭畜禽传染病中的作用,才能把握疫苗... 详细信息

畜禽传染病的控制和消灭对保证养殖业的健康发展至关重要。传染病控制的原理是针对引起流行的三个环节采取相应的措施,即消灭传染病,切断传播途径和保护易感群体。我们只有正确认识疫苗在控制乃至消灭畜禽传染病中的作用,才能把握疫苗研究的方向,才能正确使用疫苗。

关键词：畜禽疫苗常规疫苗新型疫苗畜禽传染病控制免疫保护力

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猪肺炎支原体单克隆抗体的制备与鉴定

猪肺炎支原体单克隆抗体的制备与鉴定

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第六次人畜共患病学术交流会

作者：胡茂志焦新安潘志明黄金林刘业兵邵国青刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学生物科学与技术学院(扬州) 扬州大学生物科学与技术学院(扬州)

用KM2培养基(含马血清)培养猪肺炎支原体(Mhp)ZCF23株.高速离心收获培养物并用PBS悬浮,经反复冻融裂解后作为免疫原,腹腔注射免疫BALB/c小鼠.利用淋巴细胞杂交瘤技术,获得了5株分泌特异性抗体的单克隆细胞株,分别命名为:11C6、14C11、11... 详细信息

用KM2培养基(含马血清)培养猪肺炎支原体(Mhp)ZCF23株.高速离心收获培养物并用PBS悬浮,经反复冻融裂解后作为免疫原,腹腔注射免疫BALB/c小鼠.利用淋巴细胞杂交瘤技术,获得了5株分泌特异性抗体的单克隆细胞株,分别命名为:11C6、14C11、11B6-1、10C11-2和12E7-1.生物学特性鉴定表明,五株腹水单抗的间接ELISA效价均在1:10000左右;免疫球蛋白亚类均为IgG<,3>.免疫印迹结果表明,五株单抗所针对的抗原表位在90kD、40kD、70kD和60kD左右,而且不与马血清蛋白反应,说明以上单抗均是针对Mhp蛋白的特异性单克隆抗体.

关键词：猪肺炎支原体全菌蛋白单克隆抗体

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斑点免疫金渗滤法快速检测鸡白痢/鸡伤寒沙门氏菌抗体的应用研究

斑点免疫金渗滤法快速检测鸡白痢/鸡伤寒沙门氏菌抗体的应用研究

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家畜传染病学会第六次人畜共患病学术交流会

作者：曹春梅焦新安潘志明黄金林张晓明刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学生物科学与技术学院扬州大学生物科学与技术学院扬州大学生物科学与技术学院扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

将鸡伤寒沙门氏菌Sg9脂多糖(LPS)抗原包被于渗滤盒检测区(T区),针对沙门氏菌09抗原单克隆抗体3-47-0包被在质控区(C区),用胶体金标记鸡伤寒沙门氏菌LPS抗原,建立了一种抗原夹心法快速检测鸡白痢、鸡伤寒沙门氏菌抗体的斑点免疫金渗滤法(... 详细信息

将鸡伤寒沙门氏菌Sg9脂多糖(LPS)抗原包被于渗滤盒检测区(T区),针对沙门氏菌09抗原单克隆抗体3-47-0包被在质控区(C区),用胶体金标记鸡伤寒沙门氏菌LPS抗原,建立了一种抗原夹心法快速检测鸡白痢、鸡伤寒沙门氏菌抗体的斑点免疫金渗滤法(DIGFA)。人工感染鸡试验表明,DIGFA在感染后第7天即可从32只鸡中的7只检测到抗体,在时间上早于玻板凝集试验(PAT)。722份现场检测血清的检疫结果表明,斑点免疫金渗滤法比PAT有更高的阳性检出率,阳性样品抗体算术平均滴度DIGFA大于PAT法。本文建立的DIGFA快速、灵敏、准确,给鸡伤寒和鸡白痢的早期诊断提供了一个新的有效手段。

关键词：鸡白痢沙门氏菌鸡伤寒沙门氏菌斑点免疫金渗滤法(DIGFA)

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应用多重PCR方法鉴定粪样和食品中产气荚膜梭菌

应用多重PCR方法鉴定粪样和食品中产气荚膜梭菌

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第六次人畜共患病学术交流会

作者：梁光军赵李祥杨旭芹贾红张小荣文其乙刘秀梵扬州大学兽医学院畜禽传染病学农业部重点开放实验室(江苏扬州)

按国标方法从346份粪便样品分离出了69株产气荚膜梭菌,从275份食品样品分离到97株产气荚膜梭菌.经过生化试验鉴定和多重PCR方法鉴定,证实均为A型产气荚膜梭菌,携带β毒素的产气荚膜梭菌共为53株,另从检出了2株肠毒素阳性A型产气荚膜梭菌... 详细信息

按国标方法从346份粪便样品分离出了69株产气荚膜梭菌,从275份食品样品分离到97株产气荚膜梭菌.经过生化试验鉴定和多重PCR方法鉴定,证实均为A型产气荚膜梭菌,携带β<,2>毒素的产气荚膜梭菌共为53株,另从检出了2株肠毒素阳性A型产气荚膜梭菌.本实验初步摸清了我国的粪便中和食品中的产气荚膜梭菌的动态分布.并在食品中发现了导致人食物中毒的肠毒素阳性A型产气荚膜梭菌,为分子流行病学研究提供了重要理论依据.

关键词：产气荚膜梭菌肠毒素基因分型肠毒素分子流行病学

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抗猪肺炎支原体特异性P36蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

抗猪肺炎支原体特异性P36蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

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家畜传染病学会第六次人畜共患病学术交流会

作者：胡茂志焦新安潘志明黄金林邵国青刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学生物科学与技术学院扬州大学生物科学与技术学院江苏省农业科学院兽医研究所扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

表达P36基因的重组菌BL21(6P-1-P36)经诱导表达,超声波裂解后高速离心,分别收集上清和沉淀。可溶性表达产物亲和层析纯化后用于检测:同时,用GST-P36包涵体沉淀腹腔注射免疫BALB/c小鼠(400μg/只)。利用淋巴细胞杂交瘤技术,获得了一株能... 详细信息

表达P36基因的重组菌BL21(6P-1-P36)经诱导表达,超声波裂解后高速离心,分别收集上清和沉淀。可溶性表达产物亲和层析纯化后用于检测:同时,用GST-P36包涵体沉淀腹腔注射免疫BALB/c小鼠(400μg/只)。利用淋巴细胞杂交瘤技术,获得了一株能分泌特异性抗体的单克隆细胞株5A7-2。生物学特性鉴定表明,腹水单抗的间接ELISA效价为1:2.5×106;免疫球蛋白亚类为IgG2a。免疫印迹结果显示,腹水单抗与GST-P36融合蛋白反应而不与GST蛋白反应,并且在猪肺炎支原体(Mhp)蛋白36kD位置也有明显的条带,说明细胞株5A7-2所分泌的是针对Mhp P36蛋白的单抗。P36蛋白携带Mhp种特异性抗原表位,并且重组P36蛋白的抗体也不与其它支原体或细菌反应,因此,其单克隆抗体的制备,为Mhp种特异性检测方法的建立奠定了基础。

关键词：猪肺炎支原体 P36蛋白单克隆抗体

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携带新城疫病毒DNA疫苗减毒鼠伤寒沙门氏菌的构建及其免疫原性

携带新城疫病毒DNA疫苗减毒鼠伤寒沙门氏菌的构建及其免疫原性

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第12次学术研讨会

作者：潘志明焦新安黄金林唐丽华张晓明张小荣刘秀梵扬州大学生物科学与技术学院(扬州) 扬州大学生物科学与技术学院(扬州) 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室(扬州) 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室(扬州)

根据GenBank中发表的新城疫病毒融合蛋白(F)基因序列,设计一对引物,通过RT-PCR扩增出鹅源新城疫病毒分离株JS5 F基因,约1700bp,测序确认后,将其克隆入真核表达载体pVAX1,获得重组真核表达质料***1-F经脂质体转染COS-7细胞,间接免疫荧光... 详细信息

根据GenBank中发表的新城疫病毒融合蛋白(F)基因序列,设计一对引物,通过RT-PCR扩增出鹅源新城疫病毒分离株JS5 F基因,约1700bp,测序确认后,将其克隆入真核表达载体pVAX1,获得重组真核表达质料***1-F经脂质体转染COS-7细胞,间接免疫荧光试验检测出F基因在COS-7细胞中的表达产物.将pVAX1-F转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,构建成功携带DNA疫苗的重组沙门氏菌SL7207(pVAX1-F).以10<'9>CFU/只的剂量两次免疫BALB/c小鼠,免疫小鼠可以检测到特异性针对NDV F蛋白的血清抗体和小肠粘膜抗体应答,SL7207(pVAX1-F)免疫组抗体水平显著高于SL7207(pVAX1)组(p<0.05),表明该运送DNA疫苗的减毒沙门氏菌系统在体内能够成功释放所携带的质粒,并能够刺激机体产生免疫应答.

关键词：减毒沙门氏菌 DNA疫苗新城疫病毒免疫原性

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携带新城疫病毒DNA疫苗鼠伤寒沙门氏菌的安全性和免疫效力试验

携带新城疫病毒DNA疫苗鼠伤寒沙门氏菌的安全性和免疫效力试验

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中国畜牧兽医学会2004年学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会

作者：潘志明焦新安黄金林唐丽华张辉张成全刘秀梵扬州大学生物科学与技术学院扬州大学生物科学与技术学院扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室(江苏扬州) 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室(江苏扬州)

将重组减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207(pVAX1-F)分别以不同剂量口服免疫1日龄雏鸡,结果表明,重组菌SL7207(pVAX1-F)对雏鸡具有良好的安全性,且不影响鸡的增重.将重组菌SL7207(pVAX1-F)分别以10CFU的剂量三次口服免疫1日龄商品代伊莎褐蛋鸡,... 详细信息

将重组减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207(pVAX1-F)分别以不同剂量口服免疫1日龄雏鸡,结果表明,重组菌SL7207(pVAX1-F)对雏鸡具有良好的安全性,且不影响鸡的增重.将重组菌SL7207(pVAX1-F)分别以10<'8>CFU的剂量三次口服免疫1日龄商品代伊莎褐蛋鸡,血清和小肠粘膜抗体效价检测结果显示,SL7207(pVAX1-F)能激发机体产生体液免疫应答,在三免后1周,SL7207(pVAX1-F)10<'9>CFU剂量组的血清抗体效价与空载体组和空白对照组之间存在显著性差异(p<0.05).重组菌SL7207(pVAX1-F)10<'8>CFU和10<'9>CFU两个剂量组在首免后2周开始出现粘膜抗体,并于二免后2周和3周达到较高水平.免疫保护试验结果显示,SL7207(pVAX1-F)10<'9> CFU剂量组对鸡具有良好的保护率(77.27﹪),与空白对照组和SL7207(pVAX1)空载体组之间存在显著性差异(p<0.05),说明重组细菌SL7207(pVAX1-F)能提供NDV强毒攻击良好的免疫保护作用,预示着该疫苗候选株在新城疫控制中有重要应用前景.

关键词：减毒沙门氏菌 DNA疫苗新城疫病毒安全性免疫效力

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树突状细胞在沙门氏菌感染获得性免疫中的作用

树突状细胞在沙门氏菌感染获得性免疫中的作用

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第六次人畜共患病学术交流会

作者：潘志明焦新安黄金林唐丽华刘秀梵扬州大学生物科学与技术学院扬州大学生物科学与技术学院扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室(江苏扬州) 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室(江苏扬州)

对于沙门氏菌感染的免疫反应是天然免疫系统和获得性免疫系统共同发挥作用的结果.天然免疫系统中的许多成分以协调的方式来防御沙门氏菌的感染.其中发挥作用的细胞有吞噬性和非吞噬性的两种细胞组分,如中性粒细胞、巨噬细胞、自然杀伤细... 详细信息

对于沙门氏菌感染的免疫反应是天然免疫系统和获得性免疫系统共同发挥作用的结果.天然免疫系统中的许多成分以协调的方式来防御沙门氏菌的感染.其中发挥作用的细胞有吞噬性和非吞噬性的两种细胞组分,如中性粒细胞、巨噬细胞、自然杀伤细胞(NK)和NKT细胞等.这些细胞通过吞噬并杀死感染的细菌.最先是由中性粒细胞和巨噬细胞(MΦ)发挥这一功能.另外,这些细胞分泌产生的细胞因子和趋化因子也发挥重要作用,这些可溶性介质可以调控免疫应答并招募其它类型的细胞来帮助抵抗感染.

关键词：树突状细胞沙门氏菌感染免疫反应免疫应答

来源：评论

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