检索结果-内蒙古大学图书馆

扬州大学学报（农业与生命科学版） 2015年第3期36卷 36-40页

作者：刘建宇高强谢恺舟崔璐璐刘亚楠王波张扬扬张跟喜戴国俊王金玉扬州大学动物科学与技术学院/江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009

为建立鸡排泄物中阿莫西林（AMO）和氨苄西林（AMP）残留同时检测的高效液相色谱荧光法,将鸡排泄物先经乙腈提取、饱和二氯甲烷萃取、酸性条件下经水杨醛沸水浴衍生化后,以0.01mol·L^-1磷酸二氢钾溶液（A）和乙腈溶液（B）为流动相... 详细信息

为建立鸡排泄物中阿莫西林（AMO）和氨苄西林（AMP）残留同时检测的高效液相色谱荧光法,将鸡排泄物先经乙腈提取、饱和二氯甲烷萃取、酸性条件下经水杨醛沸水浴衍生化后,以0.01mol·L^-1磷酸二氢钾溶液（A）和乙腈溶液（B）为流动相,梯度洗脱,流速为1.0mL·min^-1,荧光检测激发波长为354nm、发射波长为445nm。当AMO和AMP浓度为0.1-250.0μg·g^-1时,该方法呈良好的线性相关,相关系数均为0.999 8。当AMO和AMP添加水平为5.0-125.0μg·g-1时,鸡排泄物中AMO和AMP的回收率均高于71.52%,相对标准偏差均低于9.77%。AMO检测限（S/N=3）为3.0ng·g^-1、定量限（S/N=10）为6.0ng·g^-1;AMP检测限（S/N=3）为1.2ng·g^-1、定量限（S/N=10）为3.5ng·g^-1。该方法简便、灵敏、准确、快速,可满足鸡排泄物中AMO和AMP残留同时提取和检测的要求。

关键词：鸡排泄物阿莫西林氨苄西林残留高效液相色谱荧光检测法

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京海黄鸡新城疫和传染性支气管炎抗病性状的全基因组关联分析

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畜牧兽医学报 2015年第2期46卷 196-203页

作者：王文浩张涛王金玉张跟喜樊庆灿陈学森韩鲲鹏王永娟扬州大学动物科学与技术学院扬州225009 江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室扬州225009 江苏京海禽业集团南通226103

旨在寻找影响京海黄鸡新城疫和传染性支气管炎抗病性状的SNP位点。本研究采用简化基因组测序的方法,检测京海黄鸡基因组的SNP位点,并对这些位点与新城疫和传染性支气管炎性状进行关联分析。结果表明:在基因组水平上有1个与京海黄鸡新城... 详细信息

旨在寻找影响京海黄鸡新城疫和传染性支气管炎抗病性状的SNP位点。本研究采用简化基因组测序的方法,检测京海黄鸡基因组的SNP位点,并对这些位点与新城疫和传染性支气管炎性状进行关联分析。结果表明:在基因组水平上有1个与京海黄鸡新城疫抗病性状显著相关的SNP位点,7个与该性状潜在显著的SNPs位点,并将这些位点定位到5个基因上,分别为EEA1、CARS2、SCML2、GRP20以及TOMIL2基因,这些基因均可能影响或调控机体的抗病及免疫能力,可以考虑作为京海黄鸡新城疫抗病性状的候选基因作为后续研究。没有发现与京海黄鸡传染性支气管炎显著相关的SNP位点,该性状可能是复杂性状,受到多种因素的影响。因此,本研究发现的几个标记位点可能对京海黄鸡的新城疫抗病性状存在一定的影响,可以作为候选基因,为京海黄鸡抗病育种过程中的标记辅助选择提供参考资料。

关键词：京海黄鸡简化基因组测序抗病性状 SNPs

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鸡蛋开窗法对嵌合体鸡制备效率的影响

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中国家禽 2015年第12期37卷 5-8页

作者：王颖洁张文慧左其生李东张蕾汤贝贝连超肖天荣张亚妮李碧春扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009

将受体种蛋分为3组,分别经换壳法、钝端开窗法和赤道面开窗后,比较3种开窗方法对孵化率的影响;分离培养鸡胚胎干细胞(ESCs),体外培养传代后用线性化的质粒p EGFP-N1转染鸡ESCs,比较显微注射时3种不同的处理方法对孵化率的影响;对获得的... 详细信息

将受体种蛋分为3组,分别经换壳法、钝端开窗法和赤道面开窗后,比较3种开窗方法对孵化率的影响;分离培养鸡胚胎干细胞(ESCs),体外培养传代后用线性化的质粒p EGFP-N1转染鸡ESCs,比较显微注射时3种不同的处理方法对孵化率的影响;对获得的嵌合体鸡分别提取血液和组织DNA后进行PCR检测。结果表明:赤道面开窗法的孵化率显著高于换壳法和钝端开窗法(P<0.01);开窗后,显微注射经转染的ESCs组孵化率显著低于其他2组(P<0.01);PCR检测结果显示,有四只嵌合体鸡的部分器官表达了EGFP基因,其中两只鸡的性腺发生EGFP基因的嵌合。表明赤道面开窗后,对受体鸡胚下腔显微注射经转染的ESCs可以生产嵌合体鸡,产生嵌合体鸡的效率为4.17%。

关键词：开窗法显微注射嵌合体鸡

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京海黄鸡γ-干扰素水平的全基因组关联分析

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中国畜牧兽医 2015年第2期42卷 245-250页

作者：王文浩张涛张跟喜王金玉李国辉王永娟扬州大学动物科学与技术学院扬州225009 江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室扬州225009 江苏京海集团南通226103

试验旨在寻找影响京海黄鸡γ-干扰素(IFN-γ)水平的分子标记。本研究以京海黄鸡核心群母鸡为基础,测定了血清中INF-γ的浓度,利用简化基因组测序技术进行全基因组关联分析(GWAS),检测与INF-γ浓度相关的SNPs位点。结果共检测到1个在基... 详细信息

试验旨在寻找影响京海黄鸡γ-干扰素(IFN-γ)水平的分子标记。本研究以京海黄鸡核心群母鸡为基础,测定了血清中INF-γ的浓度,利用简化基因组测序技术进行全基因组关联分析(GWAS),检测与INF-γ浓度相关的SNPs位点。结果共检测到1个在基因组水平上与其潜在显著相关的SNP位点,并达到染色体显著水平。该SNP位于2号染色体上MYOM1基因内部。使用GO数据库对该基因的细胞组分、分子功能和参与的生物进程进行分析,由结果推断MYOM1基因可能为影响京海黄鸡细胞因子INF-γ水平的重要候选基因。

关键词：简化基因组测序京海黄鸡 INF—γ 全基因组关联分析

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氨苄西林在鸡组织中的残留消除规律

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畜牧兽医学报 2015年第1期46卷 130-137页

作者：孙礼瑞谢星谢恺舟张小杰王剑锋崔璐璐刘建宇张跟喜戴国俊王金玉扬州大学动物科学与技术学院扬州225009 江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室扬州225009 南京农业大学动物医学院南京210095

旨在研究氨苄西林在鸡组织中残留消除规律。鸡组织样品经磷酸二氢钠溶液提取,乙腈去蛋白质,正己烷去脂肪,饱和二氯甲烷萃取,上清液经甲醛在酸性条件下沸水浴衍生化后,在激发波长327nm、发射波长409nm处用高效液相色谱荧光检测器检测。... 详细信息

旨在研究氨苄西林在鸡组织中残留消除规律。鸡组织样品经磷酸二氢钠溶液提取,乙腈去蛋白质,正己烷去脂肪,饱和二氯甲烷萃取,上清液经甲醛在酸性条件下沸水浴衍生化后,在激发波长327nm、发射波长409nm处用高效液相色谱荧光检测器检测。结果显示:该方法测定鸡组织中氨苄西林的检测限为3.5μg·kg-1(S/N=3)、定量限为10.0μg·kg-1(S/N=10)。氨苄西林在鸡组织样品中平均回收率在75.31%~85.87%,变异系数均低于10.20%。各试验组京海黄鸡分别按体重以120、240mg·(kg·d)-1剂量内服氨苄西林,每天1次,连续7d给药后,休药4h(零休药期),各组织中氨苄西林的残留量最高,并在休药后第3天迅速降低。休药第5天后所有组织中氨苄西林残留量均低于最高残留限量(50μg·kg-1),休药第9天各组织中氨苄西林残留量均低于检测限。休药后相同时间点鸡肌肉中药物残留量最低,肝中的药物残留量最高;氨苄西林在肾中残留比肌肉、肝消除缓慢且消除时间长。氨苄西林在鸡肌肉、肝和肾中的残留量均与给药剂量呈正相关。根据WT1.4软件按95%置信区间计算所得,建议黄羽肉鸡按体重以120、240mg·(kg·d)-1剂量给药,每天1次,连续7d后,其休药期(WT)分别为4和5d。

关键词：氨苄西林高效液相色谱荧光检测法残留消除鸡组织

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猪LTβR基因克隆、结构功能预测、组织表达谱分析及真核表达载体构建

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畜牧兽医学报 2015年第12期46卷 2135-2145页

作者：吴正常戴超辉殷学梅孙寿永包文斌吴圣龙扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室扬州225009 江苏省种猪繁育和健康养殖工程技术研究中心扬州225009

为了进一步探究猪LTβR基因的生物学功能,本研究以猪淋巴组织cDNA为模板扩增LTβR基因CDS区,进一步利用生物信息学对猪LTβR蛋白结构与功能以及参与的GO和Pathway通路进行分析,利用Real-time PCR检测LTβR基因在大白猪不同组织中的表达... 详细信息

为了进一步探究猪LTβR基因的生物学功能,本研究以猪淋巴组织cDNA为模板扩增LTβR基因CDS区,进一步利用生物信息学对猪LTβR蛋白结构与功能以及参与的GO和Pathway通路进行分析,利用Real-time PCR检测LTβR基因在大白猪不同组织中的表达水平,同时将LTβR基因扩增产物克隆至真核表达载体pEGFPC1中,并分别转染猪HEK293和IPEC-J2小肠上皮细胞系,通过显微镜观察其表达情况。结果表明,克隆获得猪LTβR基因CDS区全长为1 209bp,编码402个氨基酸,发现LTβR为脂溶亲水性的不稳定蛋白,存在1个跨膜结构(205~227aa),不存在信号肽,亚细胞定位表明LTβR为非分泌型蛋白。LTβR蛋白具有2个糖基化位点,18个潜在的磷酸化位点,其中包括PKC、CKI、CDC2、GSK3、CDK5、INSR等10种保守的特异性蛋白质激酶的结合位点。该蛋白保守区域为2个TNFR superfamily,分别位于32~125和128~192位氨基酸,并发现C422T>A141V突变位于该区域内。KEGG和GO分析发现,LTβR基因共参与12项GO功能分类,同时还参与NF-kappa B信号通路、IgA合成的肠道免疫网络等5项调控通路。定量检测发现,LTβR基因在大白猪肺中的表达水平极显著高于其他组织(P<0.01),在肾和脾等免疫器官,十二指肠和空肠等肠道组织中也均有较高的表达水平。细胞水平转染试验及显微镜观察发现其在猪HEK293和IPEC-J2两种细胞中均表达。本研究为猪LTβR基因及其介导的信号通路的功能分析提供了材料和依据,今后有必要在细胞水平上进一步验证分析猪LTβR基因及其介导的信号通路在猪抵抗细菌感染过程中发挥的重要作用,同时将C422T突变作为猪抗病育种的一个潜在遗传标记进行系统分析。

关键词：猪 LTβR基因克隆真核表达载体蛋白结构与功能

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京海黄鸡翅重性状的全基因组关联分析

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中国畜牧杂志 2015年第5期51卷 6-12页

作者：王文浩张涛张跟喜王金玉韩昆鹏王永娟扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009 江苏京海集团江苏南通226103

试验旨在揭示京海黄鸡翅重性状的遗传基础,寻找可用于京海黄鸡翅重性状改良的分子标记。本研究以京海黄鸡核心群母鸡为基础,测定了屠宰时的单侧翅重,利用简化基因组测序技术进行全基因组关联研究（GWAS）,检测与翅重相关的SNPs位点。结... 详细信息

试验旨在揭示京海黄鸡翅重性状的遗传基础,寻找可用于京海黄鸡翅重性状改良的分子标记。本研究以京海黄鸡核心群母鸡为基础,测定了屠宰时的单侧翅重,利用简化基因组测序技术进行全基因组关联研究（GWAS）,检测与翅重相关的SNPs位点。结果表明：共检测到7个与翅重相关的SNPs位点,其中,rs2011502599、rsz26128672、rs1830645和rs475641139 4个SNP位点达到全基因组显著水平（P〈5.5E-07）,rs476249085、rs475679707和rs473712263 3个SNP位点达到全基因组潜在显著水平（P〈1.1E-05）;筛选每个显著SNP周围1Mb区域内的基因,共找到7个可能的候选基因,分别为PGO2、SMARCA2、ZNF302、QDPR、FBXL5、LDB2、PPARGCIA 7个基因;使用G0数据库对7个候选基因的细胞组分、分子功能和参与的生物进程进行分析发现,4个SNPs集中分布在4号染色体上的73.71~76.25Mb的区域内。表明PGO2、SMARCA2、ZNF302、QDPR、FBXL5、LDB2、PPARGC1A 7个基因和4号染色体73.71~76.25Mb区域可能为影响京海黄鸡翅重性状的重要候选基因和区域。

关键词：简化基因组测序翅重全基因组关联分析京海黄鸡

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京海黄鸡4个肉质性状的全基因组关联分析

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中国畜牧杂志 2015年第21期51卷 9-14页

作者：张向前董新龙凌姣姣樊庆灿张跟喜王金玉王永娟扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009 江苏京海集团江苏南通226103

肉质性状对于家禽产业来说非常重要。为了获得影响鸡肉质性状的SNPs以及候选基因,本研究使用Illumina公司的鸡60K SNP芯片,对京海黄鸡的4个肉质性状(FLM、FBM、PLM、PBM)进行全基因组关联分析。结果表明:共鉴定出9个与肉质性状显著关联... 详细信息

肉质性状对于家禽产业来说非常重要。为了获得影响鸡肉质性状的SNPs以及候选基因,本研究使用Illumina公司的鸡60K SNP芯片,对京海黄鸡的4个肉质性状(FLM、FBM、PLM、PBM)进行全基因组关联分析。结果表明:共鉴定出9个与肉质性状显著关联的SNPs位点,其中,有2个SNPs达到5%Bonferroni全基因组显著水平(P<1.8E-6),7个SNPs位点达到5%Bonferroni全基因组潜在显著水平(P<3.59E-6)。9个SNPs定位于LOC101747478、CBLN2、HPGDS、SETD2、ANKRD46、ZFPM2和GRM4 7个基因的附近或内部,该7个基因可能为影响京海黄鸡4个肉质性状的重要候选基因。构建5 650种单倍型,单倍型分析表明,只有一种单倍型与FLM性状显著相关。以上结果显示,本研究发现的9个SNPs和7个基因可能为影响京海黄鸡4个肉质性状的重要候选标记和基因。

关键词：京海黄鸡全基因组关联分析肉质性状单倍型

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FSHβ基因多态性与京海黄鸡生产性能的遗传相关研究

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中国畜牧杂志 2015年第3期51卷 8-12页

作者：王亚男王金玉张跟喜薛倩唐莹魏岳施会强扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009 江苏京海集团江苏南通226103

研究旨在探讨促卵泡素β亚基(FSHβ)基因与鸡生长和繁殖性状的关联性。以365只京海黄鸡为样本,采用PCR-SSCP技术和DNA测序技术探讨京海黄鸡FSHβ基因全部外显子的多态性。结果表明:7对引物中,P4扩增产物测序发现FSHβ基因2 049 bp处发生... 详细信息

研究旨在探讨促卵泡素β亚基(FSHβ)基因与鸡生长和繁殖性状的关联性。以365只京海黄鸡为样本,采用PCR-SSCP技术和DNA测序技术探讨京海黄鸡FSHβ基因全部外显子的多态性。结果表明:7对引物中,P4扩增产物测序发现FSHβ基因2 049 bp处发生C→T突变和2 050 bp处发生A→T突变,形成AA、AB和BB 3种基因型;A等位基因频率为0.2917,B等位基因频率为0.7082;P6扩增产物测序发现FSHβ基因2 341 bp处发生T→C突变,呈现CC、CD和DD 3种基因型;C等位基因频率为0.8466,D等位基因频率为0.1534;关联分析发现AB型鸡12周龄体重显著高于BB型鸡(P<0.05),CC型鸡2周龄体重极显著高于CD型鸡(P<0.01)。可初步推断,FSHβ基因可能对京海黄鸡的生长性能有一定影响。

关键词： FSHβ基因多态性相关性京海黄鸡

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10个SNPs与京海黄鸡生长性状的关联性分析

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中国兽医学报 2015年第12期35卷 2061-2067,2074页

作者：张涛樊庆灿张向前张跟喜王金玉唐莹薛倩王永娟扬州大学动物科学与技术学院江苏扬州225009 江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009 江苏京海集团江苏南通226103

为了筛选影响京海黄鸡生长性状的SNP标记，寻找影响生长性状的关键基因，本研究利用定制的SNP芯片，对396只京海黄鸡10个SNPs住点直接进行SNP分型，并与京海黄鸡12个生长性状进行关联分析。结果显示，10个SNPs中，共检测到9个SNPs与京... 详细信息

为了筛选影响京海黄鸡生长性状的SNP标记，寻找影响生长性状的关键基因，本研究利用定制的SNP芯片，对396只京海黄鸡10个SNPs住点直接进行SNP分型，并与京海黄鸡12个生长性状进行关联分析。结果显示，10个SNPs中，共检测到9个SNPs与京海黄鸡1个或多个生长性状显著相关（P〈0．05），这其中有6个SNPs与2个以上的生长性状显著相关（P〈0．05），另外3个SNPs（rs431883888，rs16432721和rs16434767）分别与8周龄体质量（BW8）、0-4周龄平均日增重以及2周龄体质量（BW2）显著相关（P〈0．05）。此外，rs15618356，rs15618356和rs15620544与很长一段时期内（2-16周龄）的生长性状相关（P〈0．05）。rs431883888，rs16438236，rs16432721和rs16434767对京海黄鸡早期生长性状（2-8周龄体质量）有显著影响（P〈0．05），而rs14489341和rs13939265与京海黄鸡后期生长性状（8-16周龄体质量）显著相关（P〈0.05）。遗传学参数表明需要进一步对京海黄鸡进行选育来增加有利基因型的频率。在显著SNPs位点附近共找到8个可能的候选基因，大部分基因在鸡尚属首次报道，其功能尚需进一步研究。本研究验证了之前鸡生长性状的GwAS结果，为京海黄鸡乃至地方鸡种的分子标记辅助选择奠定了基础。

关键词：京海黄鸡单链核苷酸多态性生长性状关联分析

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