检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：张蕾扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物繁育与分子设计重点实验室扬州225009

(引言)旨在探索参与家鸡雄性生殖细胞分化过程中的相关基因以及信号通路的调控机制,以期为完善体外诱导体系提供依据.(材料与方法)采用性别鉴定和流式细胞分选法获得纯度较高的ESCs-male、PGCs-male 和SSCs,提取细胞总RNA.利用RNA-seq ... 详细信息

(引言)旨在探索参与家鸡雄性生殖细胞分化过程中的相关基因以及信号通路的调控机制,以期为完善体外诱导体系提供依据.(材料与方法)采用性别鉴定和流式细胞分选法获得纯度较高的ESCs-male、PGCs-male 和SSCs,提取细胞总RNA.利用RNA-seq 技术对这三种细胞进行转录组水平测序,进行KEGG 通路富集,发现鸡雄性生殖细胞分化过程中显著差异的信号通路;并利用BMP4 在体外诱导ESCs 向雄性生殖细胞分化,qRT-PCR 检测相关通路上差异基因的表达变化,验证RNA-seq 分析结果.(结果)KEGG 通路富集分析结果发现：在ESCs 向雄性生殖细胞分化过程中共检测到72 条表达显著差异信号通路中,其中包括JAK-STAT 信号通路.在JAK-STAT 信号通路中,JAK2 和STAT3 在整个发育过程中持续上调;BMP4 体外诱导ESCs 向SSCs 分化实验表明：在诱导分化过程中,JAK/STAT 信号通路上的JAK2 和STAT3 被持续激活,其表达趋势与体内分化过程基本一致.(讨论)JAK-STAT 信号通路在家鸡雄性生殖细胞体内分化过程中显著差异表达,并且BMP4 体外诱导家鸡ESCs 向雄性生殖细胞分化过程中该通路也被持续激活,表明JAK/STAT 信号通路在家鸡雄性生殖细胞生成过程中起重要作用.

关键词： RNA-seq 雄性生殖细胞 JAK-STAT信号通路分化

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鸡胚胎干细胞向雄性生殖细胞分化中的关键信号调控机制研究

鸡胚胎干细胞向雄性生殖细胞分化中的关键信号调控机制研究

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中国畜牧兽医学会家禽学分会第十七次全国家禽学术研讨会

作者：左其生扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物繁育与分子设计重点实验室扬州225009

[目的]本研究探讨了鸡胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ESCs)向雄性生殖细胞分化过程中的关键信号通路的表达规律及调控机制。[方法]利用RNA-seq技术筛选出在ESCs向雄性生殖细胞分化过程中的关键信号通路,选取了TGF-β(transforming gr... 详细信息

[目的]本研究探讨了鸡胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ESCs)向雄性生殖细胞分化过程中的关键信号通路的表达规律及调控机制。[方法]利用RNA-seq技术筛选出在ESCs向雄性生殖细胞分化过程中的关键信号通路,选取了TGF-β(transforming growth factor β,转化生长因子)及Notch信号通路,分析其在鸡ESCs、原始生殖细胞(Primordial germ cells,PGCs)和精原干细胞(Spermatogonial Stem cells,SSCs)三种细胞中的表达情况;同时分别从体内和体外水平对TGFβ和Notch信号通路进行抑制,通过Western blot、QRT-PCR检测下游分子的表达情况,并采用流式细胞术、免疫荧光化学及免疫组织化学等方法检测生殖细胞在体内及体外分化过程中的表达情况。[结果]RNA-seq结果表明,ESCs vs PGCs共有5954个差异基因富集于258条信号通路,19条信号通路显著富集,ESCs vs SSCs共有6078个差异基因富集于255条信号通路, 19条信号通路显著富集,PGCs vs SSCs共有4817个差异基因富集于255条信号通路, 55条信号通路显著富集;RNA-seq结果表明TGF-β信号及Notch信号均参与雄性生殖细胞分化过程;鸡胚注射TGF-β信号通路抑制剂后,Smad2,Smad5较对照组表达明显降低,生殖细胞产生比例明显减少,生殖标记基因C-kit、Cvh、Dazl、Stra8、integrinα6的表达水平也显著下调,而体外BMP4诱导ESC向雄性生殖细胞分化过程中BMP4诱导组Smad2,Smad5表达较抑制组和对照组显著上调,且生殖细胞的产生比例也显著上调;鸡胚注射Notch信号通路抑制剂后,Notch1表达明显降低,但是生殖细胞的产生比例较对照组显著增加,生殖标记基因Cvh、Dazl、Stra8、integrinα6的表达水平也显著上调,而体外BMP4诱导ESC向雄性生殖细胞分化过程中BMP4诱导组Notch1表达较对照组显著下调,生殖细胞的产生比例显著高于对照组,低于抑制组。[结论]本研究结果表明：TGF-β和Notch信号通路在鸡ESCs向雄性生殖细胞分化过程中起到关键作用,其中TGFβ信号通路为正向调控,Notch信号为负向调控,两者作用机制相反。结果为构建鸡雄性生殖细胞分化的调控网络,揭示生殖细胞形成机制提供实验基础。

关键词：鸡胚胎干细胞原始生殖细胞精原干细胞 Microarray RNA-seq TGF-β信号 Notch信号

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TGFβ信号通路对鸡胚胎干细胞向雄性生殖细胞分化的作用研究

TGFβ信号通路对鸡胚胎干细胞向雄性生殖细胞分化的作用研究

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第九次全国动物生物技术学术研讨会

作者：张亚妮施青青王颖洁左其生李东连超毕瑜林王飞纪艳芹路镇宇李碧春扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物繁育与分子设计重点实验室扬州225009

前言生殖细胞在有性繁殖的生物中肩负着将遗传信息在世代中传递的任务，并能代替胚胎干细胞(ESCs)用于治疗和遗传修饰，而不涉及伦理和免疫排斥问题。但是，如何在体外培养条件下获得大量的精原干细胞(SSCs)并使其能够产生具有功能性的... 详细信息

前言生殖细胞在有性繁殖的生物中肩负着将遗传信息在世代中传递的任务，并能代替胚胎干细胞(ESCs)用于治疗和遗传修饰，而不涉及伦理和免疫排斥问题。但是，如何在体外培养条件下获得大量的精原干细胞(SSCs)并使其能够产生具有功能性的精子就显得尤为迫切和必要。尽管关于ESCs分化为雄性生殖细胞的研究取得了令人振奋的研究进展，但是由于各个研究组所用的诱导方案迥异，尚没有一个稳定有效的诱导体系且诱导效率较低;受取材和干细胞RNA量少的限制，几乎还没有研究组开展数字基因表达谱(RNA-Seq)研究，揭示参与生殖细胞分化的关键基因和信号通路，以及这些关键基因的被调控模式及其阐明其是如何影响生殖细胞分化的启动和减数分裂的起始，只有系统地解决这些问题，才能高效、稳定地将ESCs诱导为雄性生殖细胞，克服体外诱导的不确定性。

关键词：鸡胚胎干细胞雄性生殖细胞分化 TGFβ信号通路

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桑叶粉对新西兰白兔屠宰性能和肉品质的影响

桑叶粉对新西兰白兔屠宰性能和肉品质的影响

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第五届（2015）中国兔业发展大会

作者：闫晓荣赵博昊郝晔朱杰陈阳潘雨来朱慈根吴信生扬州大学动物科学与技术学院动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏省金陵种兔场

试验旨在研究桑叶粉对新西兰白兔屠宰性能及肉品质的影响。选用120只35天断奶的新西兰白兔,随机分为4个处理组,每个处理3个重复,每个重复10只;桑叶粉的添加水平为0%（对照组）、15%（试验I组）、20%（试验II组）、25%（试验III组）,试... 详细信息

试验旨在研究桑叶粉对新西兰白兔屠宰性能及肉品质的影响。选用120只35天断奶的新西兰白兔,随机分为4个处理组,每个处理3个重复,每个重复10只;桑叶粉的添加水平为0%（对照组）、15%（试验I组）、20%（试验II组）、25%（试验III组）,试验期为35 d。结果显示:（1）对照组70日龄活体重、全净膛重、半净膛重均低于试验组,且与试验I组差异显著（P<0.01）。（2）各试验组背最长肌和腿肌L*值和a*值均大于对照组（P<0.05）,且随着添加剂量的增加而逐渐增大,而失水率和剪切力均大于试验组;对照组与试验组间b*值和p H无显著差异（P>0.05）。（3）各试验组的水分含量均低于对照组,粗脂肪含量均有所降低,粗蛋白含量呈现不同程度的上升趋势,试验I组粗蛋白含量和粗脂肪含量显著高于对照组（P<0.01）。研究结果表明日粮中添加桑叶粉对于新西兰白兔的屠宰性能和肉品质有显著影响,且以15%0%添加剂量效果最佳。

关键词：桑叶粉新西兰白兔屠宰性能肉品质肉常规成分

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调控鸡雄性性原细胞分化的关键基因和信号通路的分析

调控鸡雄性性原细胞分化的关键基因和信号通路的分析

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江苏省畜牧兽医学会成立60周年庆典暨2015年学术年会

作者：张亚妮张振韬施青青左其生李东王颖洁王飞纪燕琴路镇宇张文慧靳锴陈少则汪怡临李碧春扬州大学动物科学与技术学院/江苏省动物繁育与分子设计重点实验室江苏扬州 225009

[目的]本研究旨在探寻参与调控鸡雄性性原细胞分化的关键基因和信号通路,以期提高雄性生殖细胞的体外诱导生成效率。[方法]采用流式细胞分选法获得纯化的鸡胚胎干细胞(Embryonicstem cells,ESCs)、原始生殖细胞(primordial germ cells,P... 详细信息

[目的]本研究旨在探寻参与调控鸡雄性性原细胞分化的关键基因和信号通路,以期提高雄性生殖细胞的体外诱导生成效率。[方法]采用流式细胞分选法获得纯化的鸡胚胎干细胞(Embryonicstem cells,ESCs)、原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)和精原干细胞(Spermatogonial Stem cells,SSCs),利用Microarray、RNA-seq 技术系统地分析了三种细胞的转录本差异,筛选出参与调控鸡雄性性原细胞分化的候选关键基因和信号通路;采用qRT-PCR 对上述结果进行验证。

关键词：鸡胚胎干细胞原始生殖细胞精原干细胞 RNA测序 Microarray 分化

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5-Azadc和TSA对鸡Nanog基因启动活性及ESC多能性维持的影响

5-Azadc和TSA对鸡Nanog基因启动活性及ESC多能性维持的影响

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江苏省畜牧兽医学会成立60周年庆典暨2015年学术年会

作者：王颖洁左其生李东张蕾汤贝贝连超毕瑜林张文慧张亚妮李碧春扬州大学动物科学技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州 225009

本文旨在克隆苏禽黄鸡Nanog 基因启动子,并构建含有双荧光素酶报告基因的表达载体进行启动子活性分析,找出该基因启动子的核心调控区;探索甲基化抑制剂5-Azadc(5-aza-2'-deoxycytidine)或曲古抑菌素(Trichostatin A,TSA)对Nanog 基... 详细信息

本文旨在克隆苏禽黄鸡Nanog 基因启动子,并构建含有双荧光素酶报告基因的表达载体进行启动子活性分析,找出该基因启动子的核心调控区;探索甲基化抑制剂5-Azadc(5-aza-2'-deoxycytidine)或曲古抑菌素(Trichostatin A,TSA)对Nanog 基因启动活性及其ESC 体外培养条件下多能性维持的影响,为初步阐明Nanog 基因的表达调控机制提供理论依据。

关键词： Nanog基因启动子 5-Azadc TSA 双荧光素酶活性检测系统

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脂代谢通路对鸡雄性生殖细胞分化的调控机制的研究

脂代谢通路对鸡雄性生殖细胞分化的调控机制的研究

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江苏省畜牧兽医学会成立60周年庆典暨2015年学术年会

作者：左其生张蕾连超肖天荣王颖洁汤贝贝王飞纪艳芹路镇宇赵瑞峰张文慧张亚妮李碧春扬州大学动物科学与技术学院/江苏省动物繁育与分子设计重点实验室江苏扬州 225009

[目的]探索家鸡雄性生殖细胞分化过程中脂代谢相关基因以及信号通路的调控机制,以期为完善体外诱导体系提供依据.[方法]采用流式细胞分选法获得纯度较高的胚胎干细胞(embryonicstem cell,ESC)、原始生殖细胞(primitive germ cells,PGC)... 详细信息

[目的]探索家鸡雄性生殖细胞分化过程中脂代谢相关基因以及信号通路的调控机制,以期为完善体外诱导体系提供依据.[方法]采用流式细胞分选法获得纯度较高的胚胎干细胞(embryonicstem cell,ESC)、原始生殖细胞(primitive germ cells,PGC)和精原干细胞(spermatogonial stem cell,SSC),提取细胞总RNA.

关键词： RNA-seq 雄性生殖细胞视黄酸脂代谢

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调控鸡雄性性原细胞分化的关键基因和信号通路的分析

调控鸡雄性性原细胞分化的关键基因和信号通路的分析

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第12届两岸三地优质鸡的改良生产暨发展研讨会

作者：张亚妮左其生李东张振韬张蕾王颖洁李碧春扬州大学动物科学技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009

本研究旨在探寻参与调控鸡雄性性原细胞分化的关键基因和信号通路.采用流式细胞分选法获得纯化的鸡胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ESCs)、原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)和精原干细胞(Spermatogonial Stem cells,SSCs),利... 详细信息

本研究旨在探寻参与调控鸡雄性性原细胞分化的关键基因和信号通路.采用流式细胞分选法获得纯化的鸡胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ESCs)、原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)和精原干细胞(Spermatogonial Stem cells,SSCs),利用Microarray、RNA-seq对三种细胞中各基因表达量进行检测,运用DAVID、WEGO等数据库深入发掘三种细胞间的转录组差异,筛选关键基因和信号通路,采用qRT-PCR对上述结果进行验证;根据筛选获得关键基因在体外验证各类化学诱导剂的作用.结果表明:①共筛选出GAL9、AMH、PLK1、PSMD7等173个与发育分化及代谢相关的关键基因,筛选出TGF-beta、Notch、Jak-STAT等18条参与细胞增殖、分化、信号传导的信号通路;②qRT-PCR分析验证了Microarray和RNA-Seq表达分析的可靠性和精确性;③通过检测关键基因的表达变化确认了RA与支持细胞、BMP4、性激素在体外能诱导ESCs向着雄性生殖细胞分化.通过对鸡ESCs、PGCs以及SSCs表达谱的生物信息学分析,共筛选获得173个候选关键基因,11条候选关键信号通路,并通过体外诱导实验中关键基因表达变化验证了多种化学物质对ESCs向着雄性生殖细胞方向分化起着促进作用.

关键词：鸡雄性性原细胞分化过程基因表达量信号通路

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徐淮山羊Oct4启动子功能的初步分析

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遗传 2014年第8期36卷 793-799页

作者：韦光辉李东左其生张亚妮朱睿张蕾刘志永邱峰龙李碧春扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室扬州225009

为确定徐淮山羊Oct4(Octamer-binding transcription factor 4)基因启动子活性区域,并初步探讨TSA(Trichostatin A)和VPA(Valproic acid)对Oct4基因启动子活性的调控作用,文章采用Primer5.0设计包含Oct4基因启动子不同长度片段的特异性PCR引物,扩增并定向克隆至PGL3-Bacic荧光素酶报告载体,分别转染gEF、P19和COS7细胞,通过TSA和VPA诱导,进行双荧光报告基因活性检测。同时用Oct4启动子–1516^+30 bp片段替换pEGFP-N1中的CMV启动子,通过GFP荧光表达检测Oct4启动子的活性。结果表明:在gEF、P19和COS7细胞中Oct4启动子各片段均表现出不同程度的活性,且最强活性区域为上游–1516^+30 bp,基本活性区域为–238^+30 bp;在–1516~–946 bp、–615~–96 bp区域存在正调控元件,在–1936~–1516 bp、–946~–615 bp区域存在负调控元件;终浓度为1μmol/L的TSA和4 mmol/L的VPA为诱导的最佳浓度,均能显著增强Oct4基因启动子的活性;–1516^+30 bp片段能够启动GFP的表达。研究结果为揭示Oct4基因的转录调控机制奠定了基础。

关键词： Oct4 启动子活性 TSA VPA 诱导

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京海黄鸡杂交配套系亲本柔嫩艾美耳球虫的敏感性

京海黄鸡杂交配套系亲本柔嫩艾美耳球虫的敏感性

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江苏省畜牧兽医学会成立60周年庆典暨2015年学术年会

作者：林雨鑫张菁菁戴国俊孙明明张跟喜王金玉俞亚波王永娟江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州 225009 扬州大学动物科学与技术学院江苏扬州 225009 江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州 225009 江苏京海禽业集团有限公司江苏海门 226103

为了有效评价京海黄鸡杂交配套系亲本BB、FF、WW 对柔嫩艾美耳球虫的敏感性,本试验采用存活率、体增重、卵囊脱落数、盲肠记分、抗球虫指数(ACI)及一氧化氮(NO)、过氧化氢酶(CAT)、γ 干扰素(IFN-γ)等10 项血浆指标对其进行综合评价.... 详细信息

为了有效评价京海黄鸡杂交配套系亲本BB、FF、WW 对柔嫩艾美耳球虫的敏感性,本试验采用存活率、体增重、卵囊脱落数、盲肠记分、抗球虫指数(ACI)及一氧化氮(NO)、过氧化氢酶(CAT)、γ 干扰素(IFN-γ)等10 项血浆指标对其进行综合评价.研究结果显示：WW 感染组ACI值最高为143.1,BB 感染组ACI 值为142.6,两者均为抗球虫低效,FF 感染组ACI 值最低为119.3,为抗球虫无效.

关键词：京海黄鸡杂交配套柔嫩艾美耳球虫敏感性

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