检索结果-内蒙古大学图书馆

中国家禽 2016年第8期38卷 10-16页

作者：张文慧蒋一秀王颖洁左其生李东连超汤贝贝张亚妮李碧春扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009

试验分别探讨了睾酮和FSH诱导鸡胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ESCs)向雄性生殖细胞分化的作用效果。首先筛选睾酮和卵泡刺激素(FSH)的适宜诱导浓度,在RA和支持细胞的诱导基础上分别添加适宜浓度的睾酮和FSH对传至2代的ESCs进行诱导... 详细信息

试验分别探讨了睾酮和FSH诱导鸡胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ESCs)向雄性生殖细胞分化的作用效果。首先筛选睾酮和卵泡刺激素(FSH)的适宜诱导浓度,在RA和支持细胞的诱导基础上分别添加适宜浓度的睾酮和FSH对传至2代的ESCs进行诱导,通过形态学观察、实时荧光定量PCR及免疫细胞化学对诱导结果进行检测。结果显示:睾酮和FSH的适宜诱导浓度分别为15 ng/m L和25 ng/m L,单独使用睾酮和FSH诱导均未出现类SSCs样细胞;二者联合支持细胞和RA诱导,诱导2 d出现类胚体,随后类胚体体积逐渐变大,诱导12 d类胚体解体出现类SSC样细胞;实时荧光定量PCR结果显示,睾酮和FSH分别与支持细胞和RA共同诱导组中,Stra8表达量持续上调,integrinβ1、Dazl表达量显著上调,ESCs标记基因Nanog、Sox2表达量均呈持续下降趋势;睾酮的多因素诱导组中,Dazl的表达量明显高于RA和支持细胞诱导组;而FSH的多因素诱导组中Stra8的表达量相对于RA和支持细胞诱导组也显著升高。结果表明睾酮和FSH单独诱导不能引起ESCs向雄性生殖细胞分化,但可以促进支持细胞和RA诱导ESCs向雄性生殖细胞分化的作用效果,该结果为进一步研究雄性生殖细胞的形成和调控机制提供理论基础。

关键词：鸡胚胎干细胞雄性生殖细胞分化睾酮卵泡刺激素

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京海黄鸡卵巢转录组研究:基因结构分析与新基因发掘注释

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中国畜牧兽医 2016年第4期43卷 854-861页

作者：韩昆鹏段炼李婷婷王金玉张涛李国辉张跟喜薛倩扬州大学动物科学与技术学院扬州225009 江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室扬州225009

本试验通过对京海黄鸡卵巢组织进行转录组分析,旨在为完善京海黄鸡部分基因结构和发掘新基因提供参考。选取高、低产京海黄鸡各4只,利用转录组测序(RNA-Seq)技术对其卵巢转录组进行测序,然后对得到的测序数据进行生物信息学分析。测序... 详细信息

本试验通过对京海黄鸡卵巢组织进行转录组分析,旨在为完善京海黄鸡部分基因结构和发掘新基因提供参考。选取高、低产京海黄鸡各4只,利用转录组测序(RNA-Seq)技术对其卵巢转录组进行测序,然后对得到的测序数据进行生物信息学分析。测序数据经过质量控制后,8个样品共得到484 992 074条有效数据(Clean Reads),总计61.09Gb。筛选出1 445 264个京海黄鸡品种内SNP位点,其中位于基因区的SNP位点916 108个,位于基因间区的SNP位点552 168个。8个样品中平均新预测的可变剪接12 883个,并对7 481个基因结构进行了优化。与所选的参考基因组序列对比分析,共发掘4 431个新基因,通过与各数据库进行序列对比,1 809个新基因得到功能注释。本研究通过转录组测序技术检测了京海黄鸡卵巢组织的基因结构,为进一步完善京海黄鸡的基因结构信息及发掘潜在的新基因提供分子水平的依据。

关键词：转录组测序京海黄鸡基因结构 SNP 新基因

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小鼠DAZL基因启动子核心区域分析及甲基化对其启动活性的影响

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安徽农业大学学报 2016年第3期43卷 420-426页

作者：王颖洁张文慧朱睿左其生李东王飞路镇宇纪艳芹王曼张亚妮李碧春扬州大学动物科学与技术学院扬州225009 江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室扬州225009

旨在确定小鼠DAZL启动子基本活性区,并分析启动子区域甲基化对其启动子活性的影响,探究小鼠DAZL的表达调控机制。采用PCR法扩增不同长度的小鼠DAZL启动子,插入到p EGFP-N1和p GL3-Basic载体,构建重组载体。将重组载体转染GC-1细胞系,并... 详细信息

旨在确定小鼠DAZL启动子基本活性区,并分析启动子区域甲基化对其启动子活性的影响,探究小鼠DAZL的表达调控机制。采用PCR法扩增不同长度的小鼠DAZL启动子,插入到p EGFP-N1和p GL3-Basic载体,构建重组载体。将重组载体转染GC-1细胞系,并通过添加适量DNA甲基化转移酶抑制剂(5-azacytidine,5-aza-C)逆转各试验组启动子片段的甲基化水平,然后利用双荧光素酶报告基因检测系统检测DAZL活性变化。双荧光素酶活性检测结果表明,小鼠Dazl启动子基本活性区域为5’侧翼区-370^-36 bp,在-370^-166 bp区域存在不可或缺的重要调控元件;经5-aza-C处理后,各缺失片段载体转染的GC-1细胞DAZL的启动子活性与对照组相比均有不同程度的提升,但差异不显著。本试验确定了小鼠DAZL启动子基本活性区域,证明降低小鼠睾丸DAZL启动子区域甲基化水平,有助于DAZL在生殖细胞中特异性表达,为进一步探究DAZL生物学功能和调控机制提供参考。

关键词： DAZL 启动子甲基化 5-aza-C 基因活性

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维生素E和谷氨酰胺对兔精液获能的影响及获能相关基因的表达

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江苏农业科学 2016年第8期44卷 306-308页

作者：陈梦然高浩泽周培培刘俊李拥军扬州大学动物科学与技术学院/江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009

为了探讨不同质量浓度维生素E和谷氨酰胺(glutamine,Gln)对精子获能的影响,以及与获能有关的关键基因在获能后相对表达量的差异,在获能液中加入不同质量浓度的维生素E(0、0.5、1.0、1.5、2.0 mg/m L)或Gln(0、5、10、15、20 mg/m L),并... 详细信息

为了探讨不同质量浓度维生素E和谷氨酰胺(glutamine,Gln)对精子获能的影响,以及与获能有关的关键基因在获能后相对表达量的差异,在获能液中加入不同质量浓度的维生素E(0、0.5、1.0、1.5、2.0 mg/m L)或Gln(0、5、10、15、20 mg/m L),并分别将其与精子悬液一同培养,以孕酮诱导顶体反应,通过涂片染色镜检得到顶体发生率;采用实时荧光定量PCR得到获能相关基因蛋白激酶A催化亚单位β(PRKACB)和ACP6(acid phosphatase 6,lysophosphatidic)在获能后的表达。结果表明,添加质量浓度为1.0 mg/m L的维生素E对精子顶体发生率的影响显著高于其他组别(P<0.05);添加质量浓度为15 mg/m L的Gln,精子顶体发生率显著高于其他组别(P<0.05);与空白对照组相比,维生素E最佳质量浓度处理组(1.0 mg/m L)的PRKACB和ACP6基因的相对表达量显著性降低(P<0.05);Gln最佳质量浓度处理组(15 mg/m L)处理后,基因PRKACB、ACP6在获能后的相对表达量高于空白对照组,但差异不显著(P>0.05)。可见,获能液中添加维生素E和Gln对兔精子获能具有一定影响。

关键词：维生素E 谷氨酰胺精子获能基因表达

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氨苄西林在鸡排泄物中的残留消除规律

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中国兽药杂志 2016年第6期50卷 33-38页

作者：王波张杨杨谢恺舟刘建宇刘亚楠高强郭辉生张跟喜戴国俊王金玉扬州大学动物科学与技术学院江苏扬州225009 江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009

为了研究氨苄西林（AMP）在鸡排泄物中残留消除规律,将鸡排泄物用乙腈去蛋白处理,再用饱和的二氯甲烷萃取后,在酸性条件下上清液用水杨醛沸水浴衍生化后,在激发波长354 nm、发射波长445 nm处用高效液相色谱荧光检测器检测。结果显示：... 详细信息

为了研究氨苄西林（AMP）在鸡排泄物中残留消除规律,将鸡排泄物用乙腈去蛋白处理,再用饱和的二氯甲烷萃取后,在酸性条件下上清液用水杨醛沸水浴衍生化后,在激发波长354 nm、发射波长445 nm处用高效液相色谱荧光检测器检测。结果显示：该方法测定鸡排泄物中AMP的检测限为1.2μg/kg（S/N≥3）、定量限为3.5μg/kg（S/N≥10）。AMP在鸡排泄物样品中平均回收率为74.96%~80.41%,变异系数均低于9.77%。试验鸡按体重以60.0、120.0 mg/（kg·d）剂量内服AMP,每天给药1次,连续5 d。AMP在投药第1 d时,鸡排泄物中AMP残留量被检测到,投药第5 d时达到峰值。休药后AMP在鸡排泄物中残留量迅速降低。正常剂量组,休药第7 d时,AMP在鸡排泄物中残留量低于检测限。双倍剂量组,在休药第9 d时,鸡排泄物中AMP残留量低于检测限。AMP在鸡排泄物中的残留量与给药剂量呈正相关,鸡排泄物中高含量AMP残留存在较大的环境风险。

关键词：氨苄西林高效液相色谱荧光检测法残留消除鸡排泄物

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氨苄西林在鸡排泄物中的残留消除规律

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中国兽医杂志 2016年第6期50卷 33-38页

作者：王波张杨杨谢恺舟刘建宇刘亚楠高强郭辉生张跟喜戴国俊王金玉扬州大学动物科学与技术学院，江苏扬州 225009 江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室，江苏扬州 225009

为了研究氨苄西林（AMP）在鸡排泄物中残留消除规律，将鸡排泄物用乙腈去蛋白处理，再用饱和的二氯甲烷萃取后，在酸性条件下上清液用水杨醛沸水浴衍生化后，在激发波长354 nm、发射波长445 nm 处用高效液相色谱荧光检测器检测。结果显... 详细信息

为了研究氨苄西林（AMP）在鸡排泄物中残留消除规律，将鸡排泄物用乙腈去蛋白处理，再用饱和的二氯甲烷萃取后，在酸性条件下上清液用水杨醛沸水浴衍生化后，在激发波长354 nm、发射波长445 nm 处用高效液相色谱荧光检测器检测。结果显示：该方法测定鸡排泄物中 AMP 的检测限为1．2μg／kg（S ／N≥3）、定量限为3．5μg／kg（S ／N≥10）。AMP 在鸡排泄物样品中平均回收率为74．96％～80．41％，变异系数均低于9．77％。试验鸡按体重以60．0、120．0 mg／（kg·d）剂量内服 AMP，每天给药1次，连续5 d。AMP 在投药第1 d 时，鸡排泄物中 AMP 残留量被检测到，投药第5 d 时达到峰值。休药后 AMP 在鸡排泄物中残留量迅速降低。正常剂量组，休药第7 d 时，AMP在鸡排泄物中残留量低于检测限。双倍剂量组，在休药第9 d 时，鸡排泄物中 AMP 残留量低于检测限。AMP 在鸡排泄物中的残留量与给药剂量呈正相关，鸡排泄物中高含量 AMP 残留存在较大的环境风险。

关键词：氨苄西林高效液相色谱荧光检测法残留消除鸡排泄物

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迷迭香提取物对京海黄鸡生长性能、免疫器官指数和血清抗氧化性的影响

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中国兽医学报 2016年第7期36卷 1218-1223,1272页

作者：刘亚楠李爱华谢恺舟张跟喜戴国俊王金玉扬州大学动物科学与技术学院江苏扬州225009 江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009

选取同一批次孵化的1日龄京海黄鸡800只,随机分成10个组,1~9组为试验组,10组为对照组,每组4个重复,每个重复20只（公、母各半）。1~3试验组分别在基础日粮中添加水溶性迷迭香提取物100、150、200 mg/kg,4~6试验组分别在基础日粮中添加... 详细信息

选取同一批次孵化的1日龄京海黄鸡800只,随机分成10个组,1~9组为试验组,10组为对照组,每组4个重复,每个重复20只（公、母各半）。1~3试验组分别在基础日粮中添加水溶性迷迭香提取物100、150、200 mg/kg,4~6试验组分别在基础日粮中添加脂溶性迷迭香提取物100、150、200mg/kg,7~9试验组分别在基础日粮中添加混合（水溶性＋脂溶性）迷迭香提取物（50＋50）、（75＋75）、（100＋100）mg/kg构成各试验组日粮,10组饲喂基础日粮。试验期112d。结果显示：迷迭香提取物能显著改善京海黄鸡生长性能（P〈0.05）;提高京海黄鸡胸腺指数（P〈0.05）,但对脾脏和法氏囊指数无显著影响（P〉0.05）;200mg/kg脂溶性迷迭香提取物添加水平显著提高了血清的总抗氧化能力（P〈0.05）,200 mg/kg混合迷迭香提取物添加水平显著降低了血清丙二醛含量（P〈0.05）。由此可知,200mg/kg脂溶性和混合迷迭香提取物添加水平能够提高京海黄鸡血清的抗氧化能力。

关键词：迷迭香提取物京海黄鸡生长性能免疫器官指数血清抗氧化性

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miRNA-10基因家族序列分析及其在鹅卵巢组织表达分析

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中国家禽 2016年第6期38卷 6-9页

作者：张惠子刘然陈阳张扬徐琪陈国宏扬州大学动物科学与技术学院江苏扬州225009 江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009

为探明鹅卵巢miRNA-10基因家族（miRNA-10s）在生殖周期内的表达变化规律,从Solexa深度测序鹅卵巢miRNA表达谱中获取miR-10s家族成员（miR-10、miR-10a、miR-10b、miR-10c、miR-10d、miR-100、miR-100a、miR-100b）成熟序列,并进行序列分析,选择表达丰度较高的miR-10s家族成员（miR-10a、miR-10d、miR-100a）进行RT-qPCR检测。结果发现,鹅卵巢miRNA-10s的成熟序列同源性很高,序列长度（20-24 nt）相近,保守碱基14个,其前体序列具有典型的二级茎环结构。RT-qPCR检测结果显示,miR-100a在排卵前期和就巢期卵巢表达量极显著高于开产前期和排卵后期（P〈0.01）,而miR-10a和miR-10d在各个生殖周期内表达变化不大（P〉0.05）,提示鹅卵巢miR-100a在生殖周期内发挥了一定作用。

关键词：鹅卵巢组织 miRNA-10s 序列分析定量表达

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京海黄鸡中HOXC10基因表达规律及其生物信息学分析

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中国畜牧兽医 2016年第7期43卷 1702-1708页

作者：张向前董新龙凌姣姣韩昆鹏张涛王金玉王永娟扬州大学动物科学与技术学院扬州225009 江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室扬州225009 江苏京海集团南通226103

同源异型盒基因（homeobox genes,HOX）是在酵母乃至人类等几乎所有的真核细胞中均表达的一类基因。为了探究HOXC10基因表达规律及其生物信息学,采用qRT-PCR方法研究HOXC10基因在8周龄京海黄鸡心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胸肌、腿... 详细信息

同源异型盒基因（homeobox genes,HOX）是在酵母乃至人类等几乎所有的真核细胞中均表达的一类基因。为了探究HOXC10基因表达规律及其生物信息学,采用qRT-PCR方法研究HOXC10基因在8周龄京海黄鸡心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胸肌、腿肌、下丘脑和卵巢组织中的表达规律,检测其在300日龄高、低产组卵巢组织的表达差异,并通过多种在线软件对原鸡HOXC10基因进行生物信息学分析。结果显示,HOXC10基因在京海黄鸡腿肌中表达丰度极显著高于其他组织（P〈0.01）,且300日龄高产组中HOXC10基因表达丰度显著低于低产组（P〈0.05）。原鸡HOXC10基因序列与火鸡、野鸽、绿头鸭、人、小鼠、牛、猪、山羊及非洲爪蟾的同源性分别为77.4%、94.8%、98.6%、68.3%、67.9%、66.0%、59.0%、68.1%和79.4%;HOXC10基因共编码354个氨基酸,其中丝氨酸的含量最高,潜在的磷酸化位点有24个,在280~342的氨基酸序列内存在一个同源结构域,蛋白质亚细胞主要定位在细胞核中,且不包含跨膜结构。HOXC10基因在京海黄鸡生长和繁殖的基因调控网络中发挥了重要作用。

关键词： HOXC10基因京海黄鸡组织表达分析生物信息学

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京海黄鸡Myf5基因表达谱及表达规律

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中国兽医学报 2016年第2期36卷 320-325页

作者：张涛张向前董新龙张跟喜王金玉樊庆灿王文浩王永娟扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009 江苏京海集团江苏南通226103

为了探究Myf5基因的表达谱和表达规律,研究其可能的作用机理,本研究根据GenBank上的原鸡(Gallus gallus)Myf5基因cDNA序列,跨内含子设计1对荧光定量引物,采用实时荧光定量PCR技术检测Myf5基因在不同组织的表达情况,绘制其组织表达谱;并... 详细信息

为了探究Myf5基因的表达谱和表达规律,研究其可能的作用机理,本研究根据GenBank上的原鸡(Gallus gallus)Myf5基因cDNA序列,跨内含子设计1对荧光定量引物,采用实时荧光定量PCR技术检测Myf5基因在不同组织的表达情况,绘制其组织表达谱;并选取4个时间点,检测在高表达组织中的表达情况,以研究其表达规律。结果显示,无论是在公鸡还是母鸡中,Myf5基因均在胸肌和腿肌中的表达量最高。在公鸡的其他组织中表达量很低或几乎不表达,母鸡中,除在卵巢中有少量表达外,其他组织中表达量很低或几乎不表达。无论是在公鸡腿肌和胸肌中,还是在母鸡腿肌和胸肌中,Myf5基因的表达量总体呈下降趋势,在16周龄接近体成熟时表达量最低。本研究揭示了京海黄鸡(Gallus gallus)Myf5基因的表达谱以及随肌肉生长发育的表达规律,为进一步研究Myf5基因的作用机理、表达调控以及与MyoG基因相互作用机理奠定基础。

关键词： Myf5 京海黄鸡表达谱表达规律

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