检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医杂志 2012年第5期48卷 17-19页

作者：李拥军李太坤李文婷张光景谷亚轻尚利青邹恒扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009

本试验以小鼠为动物模型,采用HTF和TCM-199两个基础培养体系,通过添加不同浓度的表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG),研究其对小鼠卵母细胞体外成熟、体外受精及其后期胚胎发育的影响。结果表明,在HTF和TCM-199体系中,培养卵丘-卵母细胞复... 详细信息

本试验以小鼠为动物模型,采用HTF和TCM-199两个基础培养体系,通过添加不同浓度的表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG),研究其对小鼠卵母细胞体外成熟、体外受精及其后期胚胎发育的影响。结果表明,在HTF和TCM-199体系中,培养卵丘-卵母细胞复合物(COCs)时EGCG的最佳添加量均为20μmol/L,可以显著提高卵母细胞的成熟率、受精率和胚胎发育率。过量添加EGCG则有负面的效应。综合比较,HTF体系的培养效果优于TCM-199体系。

关键词： EGCG 卵母细胞体外成熟体外受精胚胎发育

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徐淮山羊H—FABP基因克隆、表达产物亚细胞定位的研究及转基因小鼠的制备

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中国畜牧兽医文摘 2013年第4期29卷 132-132页

作者：阴彦辉韦光辉李伟扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室

旨在克隆徐淮山羊心脏型脂肪酸结合蛋白（H—FABP）基因的。DNA，探讨其生物信息学功能。通过EGFP融合蛋白对该基因亚细胞水平的表达定位，探究该基因在异种生物体内表达情况，探索制备异种转基因动物的可能性。采用反转录PCR（RT-PCR... 详细信息

旨在克隆徐淮山羊心脏型脂肪酸结合蛋白（H—FABP）基因的。DNA，探讨其生物信息学功能。通过EGFP融合蛋白对该基因亚细胞水平的表达定位，探究该基因在异种生物体内表达情况，探索制备异种转基因动物的可能性。采用反转录PCR（RT-PCR）方法克隆徐淮山羊H—FABP基因cDNA，进行生物信息学分析，构建其融合表达载体pEGFP—H—FABP。脂质体（LTX）介导基因转染山羊成纤维细胞（GEF），

关键词：基因克隆徐淮山羊 FABP 转基因小鼠亚细胞定位表达产物制备基因cDNA

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日龄对幼龄兔超数排卵及卵母细胞体外培养的影响

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中国畜牧杂志 2012年第13期48卷 23-26页

作者：李拥军李太坤邹恒李文婷扬州大学动物科学与技术学院动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009

对不同日龄的幼龄兔实施超数排卵处理,并进行卵母细胞体外成熟及体外受精培养。结果表明:最早可进行超数排卵的幼龄兔为50日龄,但60日龄兔的超数排卵效果显著优于50日龄兔(P0.05);70日龄兔的卵母细胞总成熟率显著高于50日龄兔(P0.05);7... 详细信息

对不同日龄的幼龄兔实施超数排卵处理,并进行卵母细胞体外成熟及体外受精培养。结果表明:最早可进行超数排卵的幼龄兔为50日龄,但60日龄兔的超数排卵效果显著优于50日龄兔(P<0.05)、70日龄兔(P>0.05);70日龄兔的卵母细胞总成熟率显著高于50日龄兔(P<0.05),60日龄兔的卵母细胞总成熟率略高于50日龄兔,并低于70日龄兔,但差异均不显著(P>0.05);70日龄兔的卵母细胞总受精率高于60日龄兔,60日龄和70日龄的卵母细胞总受精率均高于50日龄,差异均不显著(P>0.05)。

关键词：超数排卵体外成熟体外受精幼龄兔

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甲砜霉素在鸡肌肉中的残留消除规律

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畜牧兽医学报 2012年第7期43卷 1150-1155页

作者：谢恺舟张小杰陈学森谢星孙瑛瑛张跟喜王金玉陈国宏扬州大学动物科学与技术学院扬州225009 江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室扬州225009 南京农业大学动物医学院南京210095

为研究甲砜霉素在鸡肌肉中的残留消除规律,鸡肌肉样品经丙酮、二氯甲烷提取,饱和正己烷脱脂,氮吹仪吹干浓缩后用流动相溶解,上高效液相色谱荧光检测器检测。测定鸡肌肉样品中甲砜霉素的检测限为1.5μ***-1(S/N=3)、定量限为5μ***-1(S/N... 详细信息

为研究甲砜霉素在鸡肌肉中的残留消除规律,鸡肌肉样品经丙酮、二氯甲烷提取,饱和正己烷脱脂,氮吹仪吹干浓缩后用流动相溶解,上高效液相色谱荧光检测器检测。测定鸡肌肉样品中甲砜霉素的检测限为1.5μ***-1(S/N=3)、定量限为5μ***-1(S/N=10)。各试验组鸡分别按体质量以10.0、20.0和50.0mg.(kg.d)-1剂量给药,每天1次,连续5d内服给药后,鸡肉中甲砜霉素残留量随给药剂量增大呈上升趋势,随休药期的延长而降低。休药第1天时,鸡肉中甲砜霉素残留量均达到峰值。休药前期甲砜霉素残留消除较快,后期消除缓慢。休药第5天时,鸡肉中甲砜霉素残留量均低于50μ***-1,休药第9天时,鸡肌肉中甲砜霉素残留量均低于检测限(1.5μ***-1);甲砜霉素在鸡肌肉中的残留量与给药剂量呈正相关。

关键词：鸡肌肉甲砜霉素残留消除高效液相色谱荧光检测法

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氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺在鸡肌肉中的残留消除规律

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畜牧兽医学报 2012年第8期43卷 1298-1305页

本试验旨在研究氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺在鸡肌肉中的残留消除规律。鸡肌肉样品经丙酮、二氯甲烷提取,饱和正己烷脱脂,氮吹仪吹干浓缩后,以乙腈-磷酸二氢钠溶液(0.01mol.L-1,含0.005mol.L-1十二烷基硫酸钠和0.1%三乙胺)(体积比35∶... 详细信息

本试验旨在研究氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺在鸡肌肉中的残留消除规律。鸡肌肉样品经丙酮、二氯甲烷提取,饱和正己烷脱脂,氮吹仪吹干浓缩后,以乙腈-磷酸二氢钠溶液(0.01mol.L-1,含0.005mol.L-1十二烷基硫酸钠和0.1%三乙胺)(体积比35∶65)为流动相,流速为***-1,在激发波长225nm、发射波长285nm处用高效液相色谱荧光检测器检测。结果:测得鸡肌肉中氟苯尼考、氟苯尼考胺的检测限分别为1.5和0.5μ***-1(S/N=3)、定量限分别为5和2μ***-1(S/N=10)。各试验组京海黄鸡分别按体质量以25.0、50.0和***-1.d-1剂量给药,每天1次,连续5d内服给药后,休药第1天时,鸡肌肉中氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺的残留量均达到峰值,且残留量随给药剂量的增大而增大,随休药期的延长而降低。休药第7天时,鸡肌肉中氟苯尼考及其代谢产物氟苯尼考胺的总残留量均低于MRLs(100μ***-1);休药第11天时,鸡肌肉中氟苯尼考及其代谢产物氟苯尼考胺的总残留量均低于检测限;氟苯尼考、氟苯尼考胺在鸡肌肉中的残留量及其总残留量均与给药剂量呈正相关。

关键词：氟苯尼考氟苯尼考胺鸡肌肉残留消除高效液相色谱荧光检测法

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IGF-I与IGFBP-1基因对京海黄鸡生长性状的遗传效应分析

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畜牧兽医学报 2012年第1期43卷 152-158页

作者：赵秀华王金玉张跟喜魏岳顾玉萍俞亚波施会强扬州大学动物科学与技术学院扬州225009 江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室扬州225009 江苏京海禽业集团有限公司海门226103

旨在对IGF-I和IGFBP-1基因部分SNPs与鸡生长性状进行关联分析。试验以京海黄鸡为材料,采用PCR-SSCP方法检测2个候选基因的单核苷酸多态性(SNPs),采用一般线性模型(GLM)分析基因型与生长性状的遗传效应。结果表明,IGF-I基因外显子3序列的... 详细信息

旨在对IGF-I和IGFBP-1基因部分SNPs与鸡生长性状进行关联分析。试验以京海黄鸡为材料,采用PCR-SSCP方法检测2个候选基因的单核苷酸多态性(SNPs),采用一般线性模型(GLM)分析基因型与生长性状的遗传效应。结果表明,IGF-I基因外显子3序列的60bp处有A→G的点突变,在京海黄鸡中检测到AA、AB、BB 3种基因型,A等位基因频率为0.613,B等位基因的频率为0.387;IGFBP-1基因外显子2序列的21bp处有A→T的点突变,104bp处有T→C的突变,在京海黄鸡中检测到CC、CD和DD 3种基因型,C等位基因频率为0.558,D等位基因频率为0.442。IGF-I基因BB基因型个体4周龄体质量显著高于AA和AB型个体(P<0.05);IGFBP-1基因DD基因型个体8周龄体质量显著高于CC基因型个体(P<0.05),4、12和16周龄体质量差异极显著(P<0.01)。因此,推测这些SNPs对京海黄鸡生长性状具有一定的影响,应用于鸡育种过程中的标记辅助选择可以加快育种进程。

关键词：京海黄鸡胰岛素样生长因子-I基因胰岛素样生长因子结合蛋白-1基因遗传多态性遗传效应

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鸡突变型和未突变型Mx蛋白体外抗病毒活性研究

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中国农业科学 2012年第5期45卷 990-998页

作者：傅德智孙敏郑蒙蒙高波张亚妮窦套存王克华李碧春孙怀昌扬州大学动物科学与技术学院/江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室中国农业科学院家禽研究所扬州大学兽医学院

【目的】研究鸡Mx蛋白第631位氨基酸变异与抗病性的相关性。【方法】用已经构建成功的中国狼山鸡Mx蛋白基因突变型pcDNA3.0-MMx和未突变型pcDNA3.0-Mx真核表达载体分别转染鸡成纤维(CEF)细胞和鼠成纤维(NIH-3T3)细胞;利用RT-PCR检测突变... 详细信息

【目的】研究鸡Mx蛋白第631位氨基酸变异与抗病性的相关性。【方法】用已经构建成功的中国狼山鸡Mx蛋白基因突变型pcDNA3.0-MMx和未突变型pcDNA3.0-Mx真核表达载体分别转染鸡成纤维(CEF)细胞和鼠成纤维(NIH-3T3)细胞;利用RT-PCR检测突变型MMx基因和未突变型Mx基因的表达,微量细胞病变抑制法测定重组蛋白抗新城疫病毒(NDV)和水泡性口炎病毒(VSV)的效果。【结果】诱变鸡Mx基因的表达重组蛋白可保护CEF细胞在孵育48 h内免受NDV的感染;转染突变型pcDNA3.0-MMx真核表达载体的NIH-3T3细胞在孵育60 h内亦未受到VSV的浸染;而转染未突变型pcDNA3.0-Mx真核表达载体的CEF和NIH-3T3细胞在24 h内均发生了病变。【结论】体外重组突变的Mx蛋白在单细胞水平上具有延缓NDV和VSV感染的能力。

关键词： Mx蛋白抗病毒活性抗NDV 抗VSV 狼山鸡

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徐淮山羊H-FABP基因克隆、表达产物亚细胞定位的研究及转基因小鼠的制备

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畜牧兽医学报 2012年第5期43卷 684-692页

作者：阴彦辉韦光辉李伟朱才业张亚妮杜立新曹文广李碧春扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室扬州225009 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193

旨在克隆徐淮山羊心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)基因的cDNA,探讨其生物信息学功能。通过EGFP融合蛋白对该基因亚细胞水平的表达定位,探究该基因在异种生物体内表达情况,探索制备异种转基因动物的可能性。采用反转录PCR(RT-PCR)方法克隆... 详细信息

旨在克隆徐淮山羊心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)基因的cDNA,探讨其生物信息学功能。通过EGFP融合蛋白对该基因亚细胞水平的表达定位,探究该基因在异种生物体内表达情况,探索制备异种转基因动物的可能性。采用反转录PCR(RT-PCR)方法克隆徐淮山羊H-FABP基因cDNA,进行生物信息学分析,构建其融合表达载体pEGFP-H-FABP。脂质体(LTX)介导基因转染山羊成纤维细胞(GEF),48h后进行荧光检测,RT-PCR检测mRNA在细胞内的表达。利用睾丸注射将目的基因转入小鼠体内,在DNA和蛋白水平上检测目的基因的表达情况。结果,徐淮山羊H-FABP基因完整编码区(CDS)大小为402bp,编码133个氨基酸,GenBank登录号为AY466498.1。徐淮山羊H-FABP序列与人、鸡、褐家鼠、奶牛、野猪、驴及斑马鱼相应编码区同源性为89%、76%、85%、84%、93%、91%、70%,氨基酸序列同源性为90%、79%、88%、97%、95%、94%、72%。成功构建融合表达载体pEGFP-H-FABP,目的基因在mRNA水平上成功表达。目的蛋白定位于细胞质中,与在线预测结果相同(无信号肽,定位于细胞质中)。通过尾静脉注射和睾丸注射,该基因可以在小鼠体内实现暂态表达和持续性表达。本研究成功克隆了徐淮山羊H-FABP基因cDNA,而且H-FABP基因在进化过程中是保守的。该蛋白无信号肽,在单细胞水平上可表达于细胞质中,在小鼠体内也可以成功表达。

关键词：徐淮山羊心脏型脂肪酸结合蛋白真核表达荧光蛋白转基因鼠

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高效液相色谱荧光检测法检测鸡蛋中阿莫西林残留

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食品科学 2012年第22期33卷 264-268页

作者：谢恺舟陈学森徐东郭辉生贾龙飞谢星黄玉萍张小杰孙瑛瑛戴国俊张跟喜王金玉扬州大学动物科学与技术学院江苏扬州225009 江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

建立鸡蛋中阿莫西林残留的高效液相色谱荧光检测的方法。鸡蛋经乙腈提取,饱和二氯甲烷萃取,水杨醛酸性条件下沸水浴衍生化后,以0.01mol/L的磷酸二氢钾溶液(A)和乙腈溶液(B)为流动相,流速为1.0mL/min,荧光检测激发波长为354nm,发射波长为... 详细信息

建立鸡蛋中阿莫西林残留的高效液相色谱荧光检测的方法。鸡蛋经乙腈提取,饱和二氯甲烷萃取,水杨醛酸性条件下沸水浴衍生化后,以0.01mol/L的磷酸二氢钾溶液(A)和乙腈溶液(B)为流动相,流速为1.0mL/min,荧光检测激发波长为354nm,发射波长为445nm。阿莫西林在5.0～800ng/mL质量浓度范围内,本方法线性关系良好,相关系数为0.9997。当添加水平阿莫西林为5～125ng/g时,该方法平均回收率为80.47%～89.53%,相对标准偏差为5.77%～6.87%;日内相对标准偏差为8.61%～9.61%;日间相对标准偏差为11.01%～14.80%。阿莫西林检测限为1.2ng/g(RSN=3)、定量限为3.9ng/g(RSN=10)。所建立的方法简便、快速、灵敏度高,适用于鸡蛋中阿莫西林残留的高灵敏度检测。

关键词：高效液相色谱荧光检测法阿莫西林鸡蛋残留

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高效液相色谱荧光检测法检测鸡蛋中氨苄西林残留

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中国兽医学报 2012年第8期32卷 1181-1185页

作者：谢恺舟郭辉生徐东贾龙飞谢星陈学森黄玉萍张小杰孙瑛瑛王金玉扬州大学动物科学与技术学院江苏扬州225009 江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

鸡蛋经乙腈提取,饱和二氯甲烷萃取,水杨醛酸性条件下沸水浴衍生后,以0.01mol.L-1的磷酸二氢钾溶液(A)和乙腈溶液(B)为流动相,流速为***-1,荧光检测激发波长为354nm,发射波长为445nm,建立了用高效液相色谱荧光法检测鸡蛋中氨苄西林残留... 详细信息

鸡蛋经乙腈提取,饱和二氯甲烷萃取,水杨醛酸性条件下沸水浴衍生后,以0.01mol.L-1的磷酸二氢钾溶液(A)和乙腈溶液(B)为流动相,流速为***-1,荧光检测激发波长为354nm,发射波长为445nm,建立了用高效液相色谱荧光法检测鸡蛋中氨苄西林残留的方法。氨苄西林在5.0～800.0μg.L-1,本方法线性关系良好,相关系数为0.999 4。当氨苄西林添加水平为5～125ng.g-1时,该方法平均回收率为78.30%～85.11%,相对标准偏差为4.99%～7.25%;日内相对标准偏差为7.99%～9.64%;日间相对标准偏差为8.69%～12.48%。氨苄西林检测限为0.4ng.g-1(S/N=3),定量限1.5ng.g-1(S/N=10)。所建立的方法简便、快速、灵敏度高,适用于鸡蛋中氨苄西林残留的高灵敏度检测。

关键词：高效液相色谱氨苄西林鸡蛋药物残留

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