检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧兽医学报 2022年第3期53卷 688-699页

作者：许写石东风吴嘉韵吴圣龙王海飞吴正常包文斌扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室扬州225009 扬州大学教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室扬州225009

旨在初步探究猪m^(6)A甲基化酶METTL3基因表达水平与脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)诱导猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)损伤的关系。本研究构建了稳定干扰METTL3基因表达水平的IPEC-J2细胞系,用1μg·mL^(-1) DON诱导METTL3干扰... 详细信息

旨在初步探究猪m^(6)A甲基化酶METTL3基因表达水平与脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)诱导猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)损伤的关系。本研究构建了稳定干扰METTL3基因表达水平的IPEC-J2细胞系,用1μg·mL^(-1) DON诱导METTL3干扰组和对照组猪肠上皮细胞48 h,通过实时荧光定量PCR检测凋亡相关基因、免疫相关基因、抗氧化酶相关基因表达水平,同时测定细胞增殖活性、细胞周期、细胞凋亡以及活性氧(ROS)水平。结果显示,与对照组相比,干扰组免疫相关基因TNF-α、IL-6、IL^(-1)2的表达水平产生了显著变化(P<0.05),凋亡相关基因Bax、Caspase3、Caspase9表达量均显著下降(P<0.05),抗氧化酶相关基因GPXs、CuZn-SOD、CAT表达量显著上升(P<0.05);细胞增殖活性显著提高,细胞总凋亡率显著降低(P<0.05),ROS水平极显著降低(P<0.01)。本研究结果表明,METTL3基因表达水平降低能一定程度地帮助IPEC-J2细胞抵抗因DON诱发的细胞凋亡和炎症。METTL3表达下调有利于缓解DON对于细胞损伤产生的一系列炎症反应,为今后细致研究RNA甲基化修饰在仔猪抵抗脱氧雪腐镰刀菌烯醇损害调控中的作用机制提供了理论基础。

关键词：猪 METTL3 脱氧雪腐镰刀菌烯醇

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褪黑素对高龄小鼠卵母细胞体外成熟的影响

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中国兽医科学 2021年第2期51卷 251-256页

作者：胡慧茹王健张柳明王彦虎牛浩原李拥军扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009

为探究褪黑素对高龄小鼠卵母细胞体外成熟的影响,本研究以10~12月龄ICR雌鼠的卵母细胞为研究对象,在体外成熟培养液中添加不同浓度的褪黑素(0、10-4、10-6、10-8 mol/L),以第一极体排出率作为卵母细胞成熟的评判依据筛选出褪黑素最佳添... 详细信息

为探究褪黑素对高龄小鼠卵母细胞体外成熟的影响,本研究以10~12月龄ICR雌鼠的卵母细胞为研究对象,在体外成熟培养液中添加不同浓度的褪黑素(0、10-4、10-6、10-8 mol/L),以第一极体排出率作为卵母细胞成熟的评判依据筛选出褪黑素最佳添加浓度,并通过活性氧(ROS)水平检测、谷胱甘肽(GSH)水平检测、三磷酸腺苷(ATP)含量检测以及纺锤体组装来分析褪黑素对高龄小鼠卵母细胞体外成熟的作用。结果,1×10^(-6) mol/L的褪黑素能够降低细胞内ROS水平,提高GSH水平,减弱高龄小鼠卵母细胞的氧化应激,同时还可以通过维持细胞内正常的能量(ATP)供应来保证纺锤体的正常形态,促进卵母细胞体外成熟。结论认为,在体外成熟培养体系中添加1×10^(-6) mol/L的褪黑素可以通过改善卵母细胞的质量,促进高龄小鼠卵母细胞的体外成熟。

关键词：褪黑素高龄小鼠卵母细胞体外成熟

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褪黑素在高龄小鼠卵母细胞体外成熟中的促进作用

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扬州大学学报（农业与生命科学版） 2021年第1期42卷 12-18页

作者：胡慧茹王健马金亮张柳明冯云奎褚长江瞿静雯冀德君李拥军扬州大学动物科学与技术学院/江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009

为探究褪黑素对高龄小鼠卵母细胞体外成熟的影响,以10~12月龄的ICR雌鼠为试验材料,分别将不同浓度的褪黑素(0、10-4、10-6、10-8 mol·L^(-1))添加至体外成熟培养液中,通过判断卵母细胞的成熟率、受精率及囊胚率筛选出褪黑素最适宜... 详细信息

为探究褪黑素对高龄小鼠卵母细胞体外成熟的影响,以10~12月龄的ICR雌鼠为试验材料,分别将不同浓度的褪黑素(0、10-4、10-6、10-8 mol·L^(-1))添加至体外成熟培养液中,通过判断卵母细胞的成熟率、受精率及囊胚率筛选出褪黑素最适宜的添加浓度,并通过线粒体分布检测、活性氧水平检测和细胞早期凋亡水平检测,分析褪黑素在卵母细胞成熟中的作用。结果表明:10-6 mol·L^(-1)的褪黑素添加至体外成熟培养液中能有效改善高龄小鼠卵母细胞的成熟、受精和胚胎发育,可通过改善线粒体的分布和活性,降低氧化应激水平和早期细胞凋亡,从而减弱衰老所引起的卵母细胞退化。综合而言,在体外成熟培养液中添加10-6mol·L^(-1)的褪黑素可提高卵母细胞的核质成熟,改善高龄小鼠卵母细胞的质量。

关键词：高龄小鼠褪黑素卵母细胞体外成熟

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辅酶Q_(10)对湖羊精液常温保存效果的影响

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中国畜牧杂志 2021年第5期57卷 131-136页

作者：褚长江张柳明王彦虎马金亮胡慧茹冯云奎李拥军扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009

本实验旨在探究辅酶Q_(10)对湖羊精液常温保存效果的影响。选取3只1~2岁的健康湖羊采集精液,在基础稀释液中添加0、5、50、250、500μmol/L的辅酶Q_(10),检测在20℃保存过程中的湖羊精子活力、活率、曲线速度、质膜完整率、顶体完整率... 详细信息

本实验旨在探究辅酶Q_(10)对湖羊精液常温保存效果的影响。选取3只1~2岁的健康湖羊采集精液,在基础稀释液中添加0、5、50、250、500μmol/L的辅酶Q_(10),检测在20℃保存过程中的湖羊精子活力、活率、曲线速度、质膜完整率、顶体完整率和活性氧(ROS)含量等指标。结果表明:随着在常温保存稀释液中添加辅酶Q_(10)浓度的提升,其对精子的保护作用呈先上升后下降的趋势,当辅酶Q_(10)浓度为50μmol/L时,精子活力、质膜和顶体完整率显著提高,ROS含量显著降低。本实验条件下,在湖羊精液常温保存稀释液中添加50μmol/L辅酶Q_(10)能够提高湖羊精液常温保存效果。

关键词：辅酶Q_(10) 湖羊精液常温保存

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鸡Stra8原核表达载体的构建及多克隆抗体血清的制备

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中国家禽 2021年第10期43卷 10-16页

作者：赵宗仪王颖洁靳锴左其生张亚妮扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009

试验旨在探究视黄酸介导的Stra8信号在生殖细胞发生过程中的作用和调控机制。以如皋黄鸡睾丸cDNA为模板扩增Stra8基因CDS区,并与pET-28a载体相连获得原核重组表达载体pET-28a-Stra8,然后转染大肠杆菌BL21感受态,经异丙基-β-D-硫代半乳... 详细信息

试验旨在探究视黄酸介导的Stra8信号在生殖细胞发生过程中的作用和调控机制。以如皋黄鸡睾丸cDNA为模板扩增Stra8基因CDS区,并与pET-28a载体相连获得原核重组表达载体pET-28a-Stra8,然后转染大肠杆菌BL21感受态,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导外源基因表达,离心收集菌液,并用超声波破碎等方法收集表达的蛋白,用纯化的蛋白作为抗原制备兔源抗体,产生带有免疫抗体的兔血;取全血,经血凝离心等步骤后获取血清,通过SDS-PAGE检测抗体的纯度,将获得的含有多克隆抗体的血清进行ELISA检测效价。结果显示:成功构建pET-28a-Stra8重组载体,IPTG诱导后在大肠杆菌BL21中表达,表达产物经SDS-PAGE分析后显示,STRA8蛋白大小约为55 ku;ELISA检测显示在血清稀释比为1∶256000时P/N=3.3>2.1,达到阳性血清合格标准;Western blotting结果显示制备的多克隆抗体血清可结合STRA8蛋白,该结果为进一步研究Stra8在生殖细胞发生过程中的作用和调控机制提供了基础。

关键词： Stra8 原核表达载体 IPTG诱导多克隆抗体

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牛血清白蛋白对湖羊精液低温保存效果的影响

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中国畜牧杂志 2021年第8期57卷 165-169页

作者：王彦虎张柳明褚长江马金亮冯云奎郭裕娇龚常亮李拥军扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009

为探究牛血清白蛋白(BSA)对湖羊精液低温保存效果的影响,在湖羊精液低温保存的稀释液中添加不同浓度BSA(0、1、2、3、4、5、6 g/L),检测分析BSA对精子在4℃保存条件下的活力、活率、顶体完整率和质膜完整率。结果表明:保存24~96 h时,2~3... 详细信息

为探究牛血清白蛋白(BSA)对湖羊精液低温保存效果的影响,在湖羊精液低温保存的稀释液中添加不同浓度BSA(0、1、2、3、4、5、6 g/L),检测分析BSA对精子在4℃保存条件下的活力、活率、顶体完整率和质膜完整率。结果表明:保存24~96 h时,2~3 g/L BSA组的精子活率显著高于对照组;保存120 h时,3g/LBSA组的精子活率显著高于其他组;保存24、48、120h时,3g/LBSA组的精子活力显著提高;保存24~120 h时,6 g/L BSA组的精子活力低于对照组;保存48~72 h时,1~4 g/L BSA组的精子质膜完整率显著提高;保存48~72 h时,4 g/L BSA组的顶体完整率显著高于对照组;保存96~120 h时,3 g/L BSA组的顶体完整率显著高于对照组。本研究结果表明,在4℃条件下,1~5 g/L BSA可以提高湖羊精子活率、活力和质膜完整率,其中3 g/L BSA的作用效果最佳。

关键词：牛血清白蛋白湖羊精液低温保存质膜完整率

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解冻温度和时间对湖羊细管冻精解冻效果的影响

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畜牧与兽医 2024年第12期56卷 10-15页

作者：张柳明江才雨王旭洋孙宇轩王健孙晓梅李拥军扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009

为提高解冻后的湖羊精液质量,本研究探讨不同解冻温度和时间对湖羊精液冷冻保存效果的影响。细管冻精分别在45、55、65、70和75℃条件下进行不同时间的解冻,通过检测精子活率、活力和运动性能探讨各温度下不同解冻时间对细管冻精解冻效... 详细信息

为提高解冻后的湖羊精液质量,本研究探讨不同解冻温度和时间对湖羊精液冷冻保存效果的影响。细管冻精分别在45、55、65、70和75℃条件下进行不同时间的解冻,通过检测精子活率、活力和运动性能探讨各温度下不同解冻时间对细管冻精解冻效果的影响;在上述试验的基础上通过检测上述指标和质膜完整性、顶体完整性以及活性氧(ROS)水平来探究各解冻温度在最适宜解冻时间下对精液冷冻保存效果的影响。结果:在45℃条件下,解冻20 s和30 s后的精子活率、活力以及各项运动速率均显著高于10 s解冻组(P<0.05);在55℃条件下,解冻8 s后的精子活力显著高于5 s解冻组(P<0.05);在65℃和70℃条件下,解冻5 s后的精子活率和活力均显著高于其他各组(P<0.05);在75℃条件下,解冻3 s后的精子各项运动速率显著高于其他各组(P<0.05);在55℃条件下解冻8 s后的精子质膜完整率和顶体完整率均显著高于37℃解冻30 s、70℃解冻5 s和75℃解冻3 s这3组(P<0.05),且ROS水平显著低于37℃解冻30 s、45℃解冻20 s、65℃解冻30 s和75℃解冻3 s这4组(P<0.05)。综上,55℃条件下解冻8 s是最适合湖羊细管精液的解冻方式,可以获得较好的精液冷冻保存效果。

关键词：湖羊精液冷冻保存解冻温度解冻时间精液质量

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代谢产物泛酸的筛选及其在原始生殖细胞形成过程中的功能验证

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中国家禽 2025年第1期47卷 15-23页

作者：程富富武嵘峰耿晴晴赵梓多王哲牛英杰左其生张亚妮扬州大学动物科学技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009

研究旨在探究差异代谢物泛酸(PA)对鸡胚胎干细胞(ESCs)向原始生殖细胞(PGCs)分化过程中的作用,为从代谢角度解析PGCs形成机制提供新的理论基础。试验基于转录组学筛选出PA,通过CCK8与EdU试验探究PA及其代谢抑制剂PZ的适宜添加浓度;最后... 详细信息

研究旨在探究差异代谢物泛酸(PA)对鸡胚胎干细胞(ESCs)向原始生殖细胞(PGCs)分化过程中的作用,为从代谢角度解析PGCs形成机制提供新的理论基础。试验基于转录组学筛选出PA,通过CCK8与EdU试验探究PA及其代谢抑制剂PZ的适宜添加浓度;最后,分别通过观察细胞形态、qRT-PCR检测PGCs特异标记基因、间接免疫荧光和流式细胞分析等分析PA代谢在ESCs向PGCs分化过程中的作用。结果显示:参与PA代谢相关的基因在ESCs与PGCs中呈现差异性表达,且富集于生殖细胞分化相关的通路(Pantothenate and CoA biosynthesis、TGF-beta signaling pathway和AMPK signaling pathway);PA和PZ的适宜添加浓度分别为20μmol/L和80 nmol/L;PA组在第6天的类胚体数目显著低于PZ组,PA组中CVH和C-KIT3的表达量显著低于PZ组(P<0.01);PA组的DDX4阳性细胞数显著低于PZ组(P<0.01)。结果表明添加PA抑制PGCs的形成,添加PZ促进PGCs的形成。

关键词：胚胎干细胞原始生殖细胞代谢物泛酸鸡

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泛酸及其下游脂肪酸氧化代谢在鸡ESCs向PGCs分化过程中的作用

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家畜生态学报 2024年第12期45卷 37-42页

作者：赵梓多武嵘峰耿晴晴程富富王哲吴一凡张亚妮扬州大学动物科学技术学院/江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009

本文旨在探究差异代谢物泛酸(PA)和脂肪酸氧化(FAO)在鸡胚胎干细胞(ESCs)向原始生殖细胞(PGCs)分化过程中的作用,为从代谢角度解析PGCs形成机制提供新的理论基础。采用BMP4诱导体系,基于课题组前期对泛酸及其抑制剂(PZ)和脂肪酸氧化激活... 详细信息

本文旨在探究差异代谢物泛酸(PA)和脂肪酸氧化(FAO)在鸡胚胎干细胞(ESCs)向原始生殖细胞(PGCs)分化过程中的作用,为从代谢角度解析PGCs形成机制提供新的理论基础。采用BMP4诱导体系,基于课题组前期对泛酸及其抑制剂(PZ)和脂肪酸氧化激活剂(BMS)/抑制剂(Per)的最适添加浓度,设置5个分组:Control组、PA+BMS组、PA+Per组、PZ+BMS组、PZ+Per组。通过观察细胞形态、qRT-PCR检测PGCs特异标记基因、间接免疫荧光和流式细胞分选等探究泛酸代谢及其下游的脂肪酸氧化在ESCs向PGCs分化过程中的作用。细胞形态观察结果显示,诱导至第6天,PZ+BMS组的类胚体数目显著升高(P<0.01),PA+Per组显著减少(P<0.05);qRT-PCR结果显示,CVH和C-KIT在PZ+BMS诱导组中的表达量极显著升高(P<0.01),而在PA+Per组中的表达量则显著降低(P<0.01);间接免疫荧光和流式细胞分选结果显示,PZ+BMS组DDX4阳性细胞率显著高于对照组(P<0.05),而PA+Per组DDX4阳性细胞率极显著低于对照组(P<0.01)。以上结果表明,抑制泛酸代谢并激活脂肪酸代谢能够促进PGCs的形成,该研究为利用代谢物完善PGCs的体外诱导培养体系提供新见解。

关键词：泛酸脂肪酸氧化 PGCs

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鸡circ_PLXNA1鉴定及其在脂肪细胞分化中的功能预测

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东北农业大学学报 2022年第3期53卷 61-69页

作者：杨婷王来娣胡晓丹袁春友白皓王志秀江勇陈国宏常国斌江苏省动物遗传育种与分子设计重点实验室扬州大学动物科学与技术学院江苏扬州225009 教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室扬州大学农业科技发展研究院江苏扬州225009

环状RNA(circ RNA)由于其广泛性、稳定性、保守性等特点具有较高研究价值,已成为生物研究领域热点之一。为研究circ RNA在鸡脂肪细胞分化中作用,选择与前期发现在鸭脂肪细胞分化中具有重要作用的鸭circ_PLXNA1具有高度同源性的鸡circ_PL... 详细信息

环状RNA(circ RNA)由于其广泛性、稳定性、保守性等特点具有较高研究价值,已成为生物研究领域热点之一。为研究circ RNA在鸡脂肪细胞分化中作用,选择与前期发现在鸭脂肪细胞分化中具有重要作用的鸭circ_PLXNA1具有高度同源性的鸡circ_PLXNA1作验证分析。鸡circ_PLXNA1是一个稳定的环状转录本,核质分离试验发现鸡circ_PLXNA1主要定位在细胞质中。此外,circ_PLXNA1主要在鸡心脏和肝脏中表达。生物信息学分析结果表明,鸡circ_PLXNA1和预测的靶基因富集于Erb B、MAPK和Hedgehog等信号通路,表明鸡circ_PLXNA1可能通过调控靶基因间接参与脂肪细胞分化。

关键词：鸡 circ_PLXNA1 脂肪细胞鉴定功能预测

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