检索结果-内蒙古大学图书馆

家畜生态学报 2024年第12期45卷 37-42页

作者：赵梓多武嵘峰耿晴晴程富富王哲吴一凡张亚妮扬州大学动物科学技术学院/江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009

本文旨在探究差异代谢物泛酸(PA)和脂肪酸氧化(FAO)在鸡胚胎干细胞(ESCs)向原始生殖细胞(PGCs)分化过程中的作用,为从代谢角度解析PGCs形成机制提供新的理论基础。采用BMP4诱导体系,基于课题组前期对泛酸及其抑制剂(PZ)和脂肪酸氧化激活... 详细信息

本文旨在探究差异代谢物泛酸(PA)和脂肪酸氧化(FAO)在鸡胚胎干细胞(ESCs)向原始生殖细胞(PGCs)分化过程中的作用,为从代谢角度解析PGCs形成机制提供新的理论基础。采用BMP4诱导体系,基于课题组前期对泛酸及其抑制剂(PZ)和脂肪酸氧化激活剂(BMS)/抑制剂(Per)的最适添加浓度,设置5个分组:Control组、PA+BMS组、PA+Per组、PZ+BMS组、PZ+Per组。通过观察细胞形态、qRT-PCR检测PGCs特异标记基因、间接免疫荧光和流式细胞分选等探究泛酸代谢及其下游的脂肪酸氧化在ESCs向PGCs分化过程中的作用。细胞形态观察结果显示,诱导至第6天,PZ+BMS组的类胚体数目显著升高(P<0.01),PA+Per组显著减少(P<0.05);qRT-PCR结果显示,CVH和C-KIT在PZ+BMS诱导组中的表达量极显著升高(P<0.01),而在PA+Per组中的表达量则显著降低(P<0.01);间接免疫荧光和流式细胞分选结果显示,PZ+BMS组DDX4阳性细胞率显著高于对照组(P<0.05),而PA+Per组DDX4阳性细胞率极显著低于对照组(P<0.01)。以上结果表明,抑制泛酸代谢并激活脂肪酸代谢能够促进PGCs的形成,该研究为利用代谢物完善PGCs的体外诱导培养体系提供新见解。

关键词：泛酸脂肪酸氧化 PGCs

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鸡circ_PLXNA1鉴定及其在脂肪细胞分化中的功能预测

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东北农业大学学报 2022年第3期53卷 61-69页

作者：杨婷王来娣胡晓丹袁春友白皓王志秀江勇陈国宏常国斌江苏省动物遗传育种与分子设计重点实验室扬州大学动物科学与技术学院江苏扬州225009 教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室扬州大学农业科技发展研究院江苏扬州225009

环状RNA(circ RNA)由于其广泛性、稳定性、保守性等特点具有较高研究价值,已成为生物研究领域热点之一。为研究circ RNA在鸡脂肪细胞分化中作用,选择与前期发现在鸭脂肪细胞分化中具有重要作用的鸭circ_PLXNA1具有高度同源性的鸡circ_PL... 详细信息

环状RNA(circ RNA)由于其广泛性、稳定性、保守性等特点具有较高研究价值,已成为生物研究领域热点之一。为研究circ RNA在鸡脂肪细胞分化中作用,选择与前期发现在鸭脂肪细胞分化中具有重要作用的鸭circ_PLXNA1具有高度同源性的鸡circ_PLXNA1作验证分析。鸡circ_PLXNA1是一个稳定的环状转录本,核质分离试验发现鸡circ_PLXNA1主要定位在细胞质中。此外,circ_PLXNA1主要在鸡心脏和肝脏中表达。生物信息学分析结果表明,鸡circ_PLXNA1和预测的靶基因富集于Erb B、MAPK和Hedgehog等信号通路,表明鸡circ_PLXNA1可能通过调控靶基因间接参与脂肪细胞分化。

关键词：鸡 circ_PLXNA1 脂肪细胞鉴定功能预测

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鸡MAPK8生物信息学分析及慢病毒干扰载体效率检测

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中国家禽 2022年第3期44卷 17-22页

作者：胡菜王颖洁靳锴吴宇慧赵宗仪李熠张亚妮扬州大学动物科学技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009 扬州大学教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室江苏扬州225009 温州肯恩大学理工学院浙江温州325000

研究旨在对鸡胚胎干细胞(Embryonic stem cell,ESC)向鸡精原干细胞(Spermatogonial stem cells,SSC)分化过程中显著差异基因——丝裂原活化蛋白激酶8(Mitogen-activated protein kinase 8,MAPK8)进行生物信息学分析,验证MAPK8慢病毒干扰载体活性及干扰效率,为后期验证MAPK8在ESC向SSC分化过程中的调控方式以及功能研究奠定基础。试验采用RNA-seq和qRT-PCR分析和检测鸡ESC、PGC和SSC的差异表达基因;利用生物信息学在线预测软件对其进行理化性质及结构特征分析;比较鸡MAPK8基因序列与其它物种的同源性并进行组织表达谱检测;验证MAPK8慢病毒干扰载体的活性与干扰效率。结果显示:MAPK8在SSC上特异高表达;生物信息学分析显示鸡MAPK8是一种亲水性的无信号脂溶性蛋白,存在2个N-糖基化位点、13个O-糖基化位点和45个磷酸化位点,与其它物种高度同源(序列一致性达到80%),保守性较高;表达谱分析发现其在性腺中高表达;MAPK8慢病毒干扰载体能够稳定表达EGFP荧光蛋白且shRNA-1干扰效率最佳。该结果为深入探究MAPK8在鸡ESC向SSC分化过程中的功能奠定了基础。

关键词：鸡 MAPK8 生物信息学分析慢病毒干扰载体

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原鸡DMRT1基因密码子偏好性与进化分析

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中国畜禽种业 2025年第3期21卷 31-44页

作者：李泽宇李国辉靳锴孙红艳李碧春扬州大学农业科技发展研究院/教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室江苏扬州225009 扬州大学动物科学与技术学院/江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009 江苏省家禽科学研究所江苏扬州225003

为了研究原鸡DMRT1基因密码子偏好性及其影响因素以及物种间遗传进化和密码子偏好关系,试验选取了原鸡以及另外15个代表性物种的DMRT1基因作为研究对象,通过Codon W软件和EMBOSS在线网站,系统分析这些基因密码子偏好性相关的7个关键指... 详细信息

为了研究原鸡DMRT1基因密码子偏好性及其影响因素以及物种间遗传进化和密码子偏好关系,试验选取了原鸡以及另外15个代表性物种的DMRT1基因作为研究对象,通过Codon W软件和EMBOSS在线网站,系统分析这些基因密码子偏好性相关的7个关键指标。使用ENC-plot和PR2-plot等方法对碱基突变等潜在影响因素进行了分析,基于各物种DMRT1基因的CDS序列信息构建了系统发育树;通过同义密码子相对使用度(RSCU)构建了不同物种的密码子使用偏好性热图,以直观展示各物种间密码子使用的差异和相似性。结果显示,DMRT1基因偏好使用以G/C结尾的密码子,而碱基突变是导致DMRT1基因偏好性产生的主要影响因素,系统发育树和热图表明,虽然密码子使用具有种属特异性,但由于受其他因素影响,亲缘关系相近的物种间密码子使用模式也会有差异。该文发现原鸡DMRT1基因的偏好性弱,其密码子在使用度上也与近缘物种有较大差异。

关键词：原鸡 DMRT1基因密码子偏好性遗传进化碱基突变

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柔嫩艾美耳球虫感染对不同球虫抗性鸡群体炎性相关因子的影响

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中国兽医杂志 2025年第6期 39-46页

作者：唐美慧 Areej Arif 董理月于海亮汤建强范作堃张涛张跟喜谢恺舟赵振华戴国俊扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室中国农业科学院家禽研究所

为了探究柔嫩艾美耳球虫（Eimeria tenella）感染后不同球虫抗性鸡群体对免疫、氧化应激反应和炎症相关基因表达量的影响，本试验将京海黄鸡随机分为对照组和攻毒组，根据柔嫩艾美耳球虫感染后的相对增重率、粪便卵囊数、卵囊值、盲肠... 详细信息

为了探究柔嫩艾美耳球虫（Eimeria tenella）感染后不同球虫抗性鸡群体对免疫、氧化应激反应和炎症相关基因表达量的影响，本试验将京海黄鸡随机分为对照组和攻毒组，根据柔嫩艾美耳球虫感染后的相对增重率、粪便卵囊数、卵囊值、盲肠病变值和抗球虫指数等抗性评价指标，筛选出抗性组和易感组鸡群体，测定柔嫩艾美耳球虫感染后不同球虫抗性鸡群体血液炎性因子和抗氧化指标以及不同组织中炎性相关基因的表达量。结果显示，抗性组和易感组血液中超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）活性及活性氧（ROS）浓度与对照组相比差异极显著（P <0.01），但不同球虫抗性组间血液中SOD和CAT活性及ROS和一氧化氮（NO）浓度无显著差异（P> 0.05）；抗性组和易感组血液中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度极显著高于对照组（P <0.01），且易感组IL-1β和TNF-α浓度极显著高于抗性组（P <0.01）；抗性组和易感组盲肠和胸腺中IL-6、IL-8、IL-1β和TNF-α基因表达量极显著高于对照组（P <0.01），且易感组盲肠和胸腺中IL-1β、TNF-α基因表达量极显著高于抗性组（P <0.01）。抗性组与易感组之间进行比较发现，2个组血液中IL-1β和TNF-α浓度与盲肠和胸腺组织中IL-1β和TNF-α基因表达量的变化规律高度一致。结果表明，柔嫩艾美耳球虫感染促进了不同球虫抗性鸡群体免疫、氧化应激反应和炎症相关基因表达量。

关键词：柔嫩艾美耳球虫京海黄鸡抗氧化指标炎性因子

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干扰MAP3K1基因对山羊毛囊干细胞增殖和凋亡的影响

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东北农业大学学报 2020年第10期51卷 56-62页

作者：马金亮王健冯云奎王强张柳明李拥军扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009

研究旨在探讨促分裂原活化蛋白激酶激酶激酶(Mitogen-activated protein kinase kinase kinase 1,MAP3K1)基因对体外培养长江三角洲白山羊毛囊干细胞(HFSCs)增殖和凋亡的影响。针对MAP3K1基因设计3个干扰靶点,构建pDNA316-ZsGreen-ShRN... 详细信息

研究旨在探讨促分裂原活化蛋白激酶激酶激酶(Mitogen-activated protein kinase kinase kinase 1,MAP3K1)基因对体外培养长江三角洲白山羊毛囊干细胞(HFSCs)增殖和凋亡的影响。针对MAP3K1基因设计3个干扰靶点,构建pDNA316-ZsGreen-ShRNA腺病毒干扰载体。转染HFSCs,以空载体细胞为对照,RT-qPCR技术检测干扰MAP3K1效果及增殖相关基因(PCNA、CDK1、CCND2)、凋亡相关基因(Bax、Bcl-2)表达水平,CCK-8和EdU法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡。结果表明,shRNA(MAP3K1-sh)转染HFSCs后,MAP3K1基因相当表达量极显著下降(P<0.01);增殖相关基因mRNA表达水平显著下降,促凋亡基因Bax的mRNA表达水平显著提高,相反,抗凋亡基因Bcl-2的mRNA表达显著降低;CCK-8和EdU结果发现细胞增殖受抑制,S期细胞数量显著上升;细胞总凋亡量显著上升。综上,干扰MAP3K1基因表达显著抑制HFSCs增殖并促进其凋亡,研究为阐明调控长江三角洲白山羊优质笔料毛分子形成机制提供科学参考。

关键词： MAP3K1基因 HFSCs 细胞增殖细胞凋亡长江三角洲白山羊

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谷胱甘肽对湖羊精液低温保存效果的影响

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中国草食动物科学 2021年第5期41卷 23-26,36页

作者：龚常亮张柳明王彦虎康言郭裕娇 Tariq Sohail 李拥军扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室扬州225009

为探究谷胱甘肽(GSH)对湖羊精液低温保存效果的影响,在基础稀释液中分别添加了0(对照组)、2、4、8、10 mM的GSH,在4℃保存过程中对精子的活率、活力及直线速率等运动性能指标进行了检测。结果表明,与对照组相比,在保存1~3 d时,4~8 mM的... 详细信息

为探究谷胱甘肽(GSH)对湖羊精液低温保存效果的影响,在基础稀释液中分别添加了0(对照组)、2、4、8、10 mM的GSH,在4℃保存过程中对精子的活率、活力及直线速率等运动性能指标进行了检测。结果表明,与对照组相比,在保存1~3 d时,4~8 mM的GSH显著提高了精子活率(P<0.05),10 mM的GSH对精子活率没有显著影响(P>0.05);保存4~6 d时,4 mM的GSH显著提高了精子活率和精子运动性能(P<0.05)。说明GSH可以提高湖羊精液在低温保存下的质量,且以4 mM的GSH对湖羊精液的低温保存效果最好。

关键词：湖羊精液低温保存谷胱甘肽活率运动性能

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卵黄在湖羊精液常温保存中的作用效果

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中国畜牧杂志 2020年第8期56卷 125-131页

作者：张柳明 Tariq Sohail 马金亮冯云奎褚长江李拥军扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009

为探究常温保存稀释液中添加卵黄对湖羊精液保存效果的影响,本实验在基础稀释液中添加0(对照组)、5%、10%、15%和20%卵黄,检测16℃保存过程中湖羊精子活率、活力和直线速率等运动性能指标。结果表明:与对照组相比,保存0~72 h,5%和10%卵... 详细信息

为探究常温保存稀释液中添加卵黄对湖羊精液保存效果的影响,本实验在基础稀释液中添加0(对照组)、5%、10%、15%和20%卵黄,检测16℃保存过程中湖羊精子活率、活力和直线速率等运动性能指标。结果表明:与对照组相比,保存0~72 h,5%和10%卵黄添加组精子活率增强(P>0.05),15%和20%卵黄添加组精子活率降低(P>0.05);与对照组相比,保存96 h,5%、10%和15%卵黄添加组精子活率增强(P>0.05),20%卵黄添加组精子活率降低(P>0.05);与对照组相比,保存120~240 h,各卵黄添加组的精子活率、活力、直线速率、曲线速率、路径速率和侧摆幅度较对照组均有显著提高。因此,在本实验条件下,不同浓度卵黄在常温保存条件下保存不同时间对湖羊精液的保存效果不同,保存144 h内,添加5%卵黄的保存效果最好;保存144~216 h,添加15%卵黄量的保存效果最好;保存216 h后,添加20%卵黄的保存效果最好。

关键词：湖羊精液卵黄常温保存活力运动性能

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甘油在湖羊精液常温保存中作用效果研究

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扬州大学学报（农业与生命科学版） 2020年第5期41卷 69-74页

作者：张柳明马金亮冯云奎褚长江胡慧茹 TARIQ Sohail 王彦虎李拥军扬州大学动物科学与技术学院/江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009

为探究甘油对湖羊精液常温保存效果的影响,在基础稀释液中添加0 (对照组)、2%、4%、6%和8%甘油,检测16℃保存过程中湖羊精子活率、活力、质膜完整率、顶体完整率和直线速率等运动性能指标。结果表明:与对照组相比,保存48~120 h时, 2%甘... 详细信息

为探究甘油对湖羊精液常温保存效果的影响,在基础稀释液中添加0 (对照组)、2%、4%、6%和8%甘油,检测16℃保存过程中湖羊精子活率、活力、质膜完整率、顶体完整率和直线速率等运动性能指标。结果表明:与对照组相比,保存48~120 h时, 2%甘油组精子活率(P>0.05)、质膜完整率(P<0.05)和顶体完整率(P>0.05)提高;保存144~168 h时, 2%和4%甘油组精子活率(P>0.05)、质膜完整率(P<0.05)和顶体完整率(P>0.05)提高;保存192 h时,各甘油组精子活率(P<0.05)提高。随着甘油浓度的增加,直线速率、曲线速率、平均路径速率和侧摆幅度也表现为先升高后降低的趋势。在试验条件下,保存24 h内各甘油组均降低精液品质,保存48~120 h时2%甘油组精液品质提高,保存144~168 h时2%和4%甘油组精液品质提高,保存192 h时各甘油组精液品质均提高。

关键词：湖羊甘油精液常温保存精子运动性能

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GST pull-down联合质谱分析技术筛选鸡NOS2的互作蛋白

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中国家禽 2020年第9期42卷 19-25页

作者：周鑫琦王颖洁张文慧张亚妮扬州大学动物科学技术学院江苏扬州225009 江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009

为了筛选NOS2在鸡雄性生殖细胞形成过程中的互作蛋白,通过克隆NOS2序列,构建pGEX-6p-NOS2原核表达载体且诱导表达NOS2蛋白,采用GST pull-down联合质谱分析技术筛选与鸡NOS2相互作用的蛋白质。结果显示:经GST pull-down质谱分析鉴定到31... 详细信息

为了筛选NOS2在鸡雄性生殖细胞形成过程中的互作蛋白,通过克隆NOS2序列,构建pGEX-6p-NOS2原核表达载体且诱导表达NOS2蛋白,采用GST pull-down联合质谱分析技术筛选与鸡NOS2相互作用的蛋白质。结果显示:经GST pull-down质谱分析鉴定到316个与鸡NOS2相互作用的候选蛋白质,其中12个高评分蛋白具有相同的功能注释,参与精子运动调控,且主要分布在细胞质、细胞核等细胞组分中,可能通过与其它蛋白质、核酸等分子结合而参与MAPK、Notch等信号通路;质谱分析还发现GOT1蛋白与NOS2互作最为明显,该蛋白参与Notch信号通路,后续将作为重点候选互作蛋白以探究其与NOS2蛋白的互作方式。该结果为进一步探究NOS2在鸡胚胎干细胞向雄性生殖细胞分化中的调控机制奠定了实验基础。

关键词： NOS2 GST pull-down 质谱分析技术蛋白质相互作用

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