检索结果-内蒙古大学图书馆

实用临床医药杂志 2020年第2期24卷 33-37页

作者：郭俊荣张欣花逸婷孙敏敏朱明明华婧张艳青扬州大学医学院江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室

目的根据超保守rna uc.477+在小鼠正常B细胞与小鼠B淋巴瘤细胞中的表达差异,探讨uc.477+对小鼠B淋巴瘤细胞增殖的影响。方法从C57BL/6野生型小鼠脾脏中分选出正常B细胞,RT-PCR检测uc.477+在小鼠正常B细胞与B淋巴瘤细胞中的表达。将uc.4... 详细信息

目的根据超保守rna uc.477+在小鼠正常B细胞与小鼠B淋巴瘤细胞中的表达差异,探讨uc.477+对小鼠B淋巴瘤细胞增殖的影响。方法从C57BL/6野生型小鼠脾脏中分选出正常B细胞,RT-PCR检测uc.477+在小鼠正常B细胞与B淋巴瘤细胞中的表达。将uc.477+基因片段构建到pMSCV-PIG逆转录病毒表达载体上,过表达质粒477-pMSCV-PIG和空载体质粒pMSCV-PIG经293T包装成逆转录病毒感染小鼠淋巴瘤细胞38B9,倒置荧光显微镜和流式细胞术检测感染率。细胞计数和细胞周期检测uc.477+过表达后38B9细胞株和空载体38B9细胞株的增殖变化。结果uc.477+在小鼠B淋巴瘤细胞中的表达显著高于小鼠正常B细胞。稳定过表达uc.477+38B9细胞株和空载体38B9细胞株构建成功。uc.477+过表达38B9细胞株比空载体38B9细胞株增殖能力强。结论超保守rna uc.477+在小鼠B淋巴瘤细胞中的表达显著高于小鼠正常B细胞中的表达。uc.477+能促进小鼠B淋巴瘤细胞增殖。

关键词：超保守rna B淋巴瘤细胞 38B9细胞细胞增殖非编码rna

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miR-144/451对红细胞转铁蛋白受体1调控作用的研究

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实用临床医药杂志 2020年第1期24卷 46-49页

作者：杭筱王方方凌玲周姝婷吴凡杨蕾许蕾郁多男扬州大学医学院江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室

目的探讨miR-144/451对红细胞转铁蛋白受体1(Tfr1)的调控作用。方法流式细胞术检测野生型小鼠(WT)和miR-144/451基因敲除小鼠(mKO)的胚胎肝、骨髓、脾脏及外周血红细胞中Tfr1的平均荧光强度(MFI)。实时定量PCR(qRT-PCR)检测骨髓和脾脏... 详细信息

目的探讨miR-144/451对红细胞转铁蛋白受体1(Tfr1)的调控作用。方法流式细胞术检测野生型小鼠(WT)和miR-144/451基因敲除小鼠(mKO)的胚胎肝、骨髓、脾脏及外周血红细胞中Tfr1的平均荧光强度(MFI)。实时定量PCR(qRT-PCR)检测骨髓和脾脏有核红细胞中Tfr1 mrna的表达水平。结果与WT小鼠比较,mKO小鼠胚胎肝、骨髓、脾脏及外周血红细胞中Tfr1的MFI显著降低(P<0.05或P<0.01)。mKO小鼠骨髓及脾脏的有核红细胞中Tfr1 mrna的表达水平显著高于WT小鼠(P<0.05)。结论miR-144/451参与调控红细胞中的Tfr1,从而影响红细胞的生成。本研究为探讨mKO小鼠贫血的原因指明了方向。

关键词： miR-144/451 转铁蛋白受体1 红细胞荧光强度骨髓调控

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小鼠miR-144/451降低红细胞活性氧簇水平抑制AKT蛋白磷酸化的实验研究

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实用临床医药杂志 2020年第2期24卷 29-32,37页

作者：许蕾杨蕾吴凡严莹杭筱郁多男扬州大学医学院江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室

目的探讨miR-144/451、活性氧簇(ROS)与AKT磷酸化的关系。方法流式细胞仪检测野生型小鼠(WT)与miR-144/451基因敲除(KO)小鼠的外周血红细胞中ROS水平。Western blot检测WT小鼠与miR-144/451 KO小鼠的骨髓有核红细胞、红系细胞系G1E细胞... 详细信息

目的探讨miR-144/451、活性氧簇(ROS)与AKT磷酸化的关系。方法流式细胞仪检测野生型小鼠(WT)与miR-144/451基因敲除(KO)小鼠的外周血红细胞中ROS水平。Western blot检测WT小鼠与miR-144/451 KO小鼠的骨髓有核红细胞、红系细胞系G1E细胞中磷酸化AKT(p-AKT)水平。结果与WT小鼠比较,miR-144/451 KO小鼠外周血红细胞中ROS水平显著增高(P<0.05)。miR-144/451 KO小鼠骨髓有核红细胞中p-AKT的表达水平高于WT小鼠(P<0.05)。ROS的升高是引起AKT磷酸化的主要原因,14-3-3ζ表达增加是引起AKT磷酸化的次要原因。结论miR-144/451通过降低红细胞中ROS水平来抑制AKT蛋白磷酸化,从而使得红细胞免受氧化攻击。

关键词：红细胞活性氧簇蛋白激酶B 磷酸化 miR-144/451

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红细胞抗氧化机制的研究进展

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医学研究杂志 2020年第8期49卷 13-16页

作者：杨蕾凌玲郁多男扬州大学医学院、江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室 225100

氧化应激(oxidative stress)是指机体在遭受各种有害刺激时,体内高活性分子如活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)和活性氮自由基(reactive nitrogen species,RNS)产生过多,从而导致的细胞和组织损伤。红细胞的携氧功能使其不断... 详细信息

氧化应激(oxidative stress)是指机体在遭受各种有害刺激时,体内高活性分子如活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)和活性氮自由基(reactive nitrogen species,RNS)产生过多,从而导致的细胞和组织损伤。红细胞的携氧功能使其不断暴露于内源性和外源性ROS所引起的氧化损伤中,因此红细胞建立了强大的抗氧化及损伤修复系统来及时清除ROS并保护细胞免受过氧化损伤。本文将重点介绍红细胞抗氧化机制方面的研究进展,以期为减轻红细胞的氧化损伤提供更多思路。

关键词：红细胞活性氧自由基氧化应激氧化损伤

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锦菊素对银屑病模型小鼠的药效学作用及其机制探究

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中国药理学通报 2022年第12期38卷 1801-1808页

作者：张悦陆奕杨婧雯王钰凯张梦莹周芳王广基许正新扬州大学医学院药理学教研室江苏扬州225000 中国药科大学江苏省药物代谢动力学重点实验室中国医学科学院“中药复杂组分PK-PD结合研究”创新单元江苏南京210009 江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室江苏扬州225000

目的探讨锦菊素对咪喹莫特诱导的银屑病模型小鼠的药效作用及其机制。方法建立咪喹莫特乳膏涂抹小鼠背部皮肤诱导的银屑病模型,以皮损面积及严重程度指数、病理学和炎症因子水平及相关分子生物学数据的变化作为效应学指标,观察不同浓度... 详细信息

目的探讨锦菊素对咪喹莫特诱导的银屑病模型小鼠的药效作用及其机制。方法建立咪喹莫特乳膏涂抹小鼠背部皮肤诱导的银屑病模型,以皮损面积及严重程度指数、病理学和炎症因子水平及相关分子生物学数据的变化作为效应学指标,观察不同浓度的锦菊素给药后以上参数的变化并分析其可能的作用机制。结果与模型组相比,锦菊素可明显改善咪喹莫特诱导的小鼠皮肤红斑、鳞屑、增厚等症状,PASI评分明显降低;组织病理学相关指标显示,锦菊素干预组能够剂量依赖性地减轻小鼠表皮增厚情况,降低表皮细胞中Ki67的表达水平。炎症因子及分子生物学结果表明,锦菊素干预组小鼠皮肤组织中S100a8、S100a9、IL-17A、IL-6、IL-1β表达降低,血清中IL-2、IL-4、TNF-α、IFN-γ及IL-17A表达降低。淋巴结中Th17细胞比例降低,Treg细胞比例增加。此外,锦菊素还能够下调咪喹莫特诱导的P65蛋白磷酸化水平升高,显著抑制P65入核,提示锦菊素能够抑制咪喹莫特诱导的P65蛋白活化。结论锦菊素能够改善咪喹莫特诱导的银屑病模型小鼠的症状和体征,该项作用可能与抑制角质细胞中P65蛋白磷酸化相关。

关键词：锦菊素银屑病咪喹莫特 Th17细胞 Treg细胞炎症

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五味子乙素对大鼠心室肌细胞钠电流的影响

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中成药 2019年第11期41卷 2608-2613页

作者：邹丽王秀秀钱薇杨蕴智葛焱许正新扬州大学医学院江苏扬州225000 江苏省重点动物传染病和人畜共患病预防控制共创中心江苏扬州225001 江苏省中西医结合老年病防治重点实验室江苏扬州225001 江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室江苏扬州225009

目的探讨五味子乙素对大鼠心室肌细胞钠电流(INa)的影响。方法应用Langendorff主动脉逆向灌流、单酶解法获得单个大鼠心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术记录不同浓度的五味子乙素对大鼠心室肌细胞膜上INa的影响。结果五味子乙素(>3μm... 详细信息

目的探讨五味子乙素对大鼠心室肌细胞钠电流(INa)的影响。方法应用Langendorff主动脉逆向灌流、单酶解法获得单个大鼠心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术记录不同浓度的五味子乙素对大鼠心室肌细胞膜上INa的影响。结果五味子乙素(>3μmol/L)对INa可产生显著抑制作用(P<0.05,P<0.01),并呈浓度依赖性。五味子乙素(10、30μmol/L)可使钠通道的I-V曲线显著上移,但I-V曲线的激活电位、峰电位及形态未发生改变,使INa的激活曲线向去极化方向迁移(P<0.01),半数激活电位由给药前(-53.90±5.21) mV变为(-43.69±5.34) mV和(-40.80±3.23) mV。五味子乙素能使INa失活曲线向超级化方向移动(P<0.01),半数失活电压(对照、10μmol/L、30μmol/L)分别为(-57.80±6.21) mV、(-71.16±6.45) mV和(-81.03±7.53) mV。此外,五味子乙素还能显著延长INa失活后恢复时间(P<0.01),τ(对照、10μmol/L、30μmol/L)分别为(16.68±1.72) ms、(25.73±2.93) ms和(43.79±3.87) ms。结论五味子乙素能浓度依赖性阻滞大鼠心室肌细胞INa,对其激活、失活和失活后恢复动力学特征均有影响。

关键词：五味子乙素心室肌细胞膜片钳钠通道

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迷迭香酸甲酯诱导自噬抑制人胃癌细胞增殖的研究

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扬州大学学报（农业与生命科学版） 2018年第3期39卷 26-30,36页

作者：庞磊曹桂云吴凡王小洪周芳超王方方李斐邓彬丁岩冰郁多男扬州大学医学院/江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室江苏扬州225001 扬州大学附属医院江苏扬州225001 山东宏济堂制药集团股份有限公司济南250102

迷迭香酸甲酯(MR)梯度处理人胃癌细胞系SGC-7901和AGS细胞24h后,采用CCK-8法测定细胞的增殖活性;应用划痕试验观察细胞迁移能力的变化;流式细胞术检测胃癌细胞的凋亡率;Western blot检测LC3蛋白水平,探讨MR对人胃癌细胞系SGC-7901和AGS... 详细信息

迷迭香酸甲酯(MR)梯度处理人胃癌细胞系SGC-7901和AGS细胞24h后,采用CCK-8法测定细胞的增殖活性;应用划痕试验观察细胞迁移能力的变化;流式细胞术检测胃癌细胞的凋亡率;Western blot检测LC3蛋白水平,探讨MR对人胃癌细胞系SGC-7901和AGS细胞的增殖、迁移和凋亡的影响以及其与LC3蛋白的关系。结果表明:MR对人胃癌细胞系SGC-7901和AGS细胞增殖和迁移能力有明显抑制作用,且能够诱导细胞凋亡;同时MR能提高LC3蛋白水平。这一研究提示MR可显著抑制人胃癌细胞的增殖和迁移能力,同时可诱导细胞凋亡,其机制可能与LC3蛋白水平上调有关。

关键词：迷迭香酸甲酯胃癌增殖迁移凋亡 LC3蛋白

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鼠神经菌毛素1蛋白的真核表达及其鉴定

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齐齐哈尔医学院学报 2017年第19期38卷 2233-2235页

作者：戴华沈颖葛凡张海霞扬州大学江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室/医学院 225001

目的制备重组鼠神经菌毛素1(mNRP1)蛋白。方法将表达载体pCMV3-mNRP1-flag(pCMV-mNRP1)转化大肠杆菌DH5α感受态,扩增重组质粒;随后将pCMV-mNRP1转染哺乳动物细胞株HEK293,间接免疫荧光法(IFA)及western blot法鉴定重组蛋白mNRP1(flag-mNRP1)的表达。结果 IFA及western blot结果显示重组质粒转染HEK293后,flag-mNRP1获得有效表达,融合蛋白相对分子质量约为120 000。结论重组蛋白mNRP1在真核表达系统中获得成功表达,该蛋白的获得为进一步研究NRP1的生物学功能提供有效的生物材料。

关键词：神经菌毛素1 真核表达系统重组蛋白

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荭草苷对大鼠心室肌细胞钠通道的影响

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中国现代应用药学 2019年第18期36卷 2256-2261页

作者：王秀秀邹丽钱薇顾有为李立明许正新扬州大学医学院药理教研室江苏扬州225000 江苏省重点动物传染病和人畜共患病预防控制共创中心江苏扬州225001 江苏省中西医结合老年病防治重点实验室江苏扬州225001 江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室江苏扬州225009

目的研究荭草苷(orientin,Ori)对大鼠心室肌细胞钠通道电流(INa)的影响,探讨Ori在离子通道层面的抗心律失常机制。方法使用Langendorff恒温恒压灌流装置、单酶解消化法分离大鼠心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术记录、观察不同浓度Ori作... 详细信息

目的研究荭草苷(orientin,Ori)对大鼠心室肌细胞钠通道电流(INa)的影响,探讨Ori在离子通道层面的抗心律失常机制。方法使用Langendorff恒温恒压灌流装置、单酶解消化法分离大鼠心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术记录、观察不同浓度Ori作用前后大鼠心室肌细胞钠通道电流(INa)的变化。结果低于2μmol·L^-1的Ori对INa无明显影响,3,10,30μmol·L^-1的Ori使INa的I-V曲线显著上移,峰值钠电流(INa-Peak)由给药前的(-81.49±3.9)pA/pF依次变为(-74.38±4.1)pA/pF,(-63.05±2.8)pA/pF和(-55.35±3.2)pA/pF;Ori使激活曲线右移、失活曲线左移,失活后恢复曲线显著右移,最大半数激活电位(V1/2-ac)由给药前的(-53.66±4.12)mV分别变为(-44.64±1.9)mV,(-38.95±1.7)mV和(-30.21±1.5)mV;最大半数失活电位(V1/2-in)由给药前的(-51.68±0.76)mV分别变为(-60.17±1.5)mV,(-68.51±1.4)mV和(-75.22±1.37)mV,恢复时间(τ)由给药前的(18.38±0.84)ms分别变为(24.53±1.4)ms,(35.25±1.3)ms和(68.75±1.58)ms。结论Ori能浓度依赖性抑制大鼠心室肌细胞的INa,并能显著影响其激活、失活及失活后恢复的动力学特征。

关键词：荭草苷全细胞膜片钳心室肌细胞钠通道电流心律失常

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骨髓间充质干细胞机械刺激成骨的记忆效应

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中国组织工程研究 2023年第10期27卷 1501-1506页

作者：陈春晓姜乐涛沈悦闫家凯李克石宇林文正李翰文陈昊扬州大学医学院-转化医学研究院江苏省扬州市225002 江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室江苏省扬州市225000 大连医科大学骨科辽宁省大连市116000 苏州大学附属第一医院骨科江苏省苏州市215006 扬州大学附属医院江苏省扬州市225000

背景:骨髓间充质干细胞作为组织工程的理想种子细胞,已证实力学刺激有引导其分化的作用。研究表明,干细胞存在着机械记忆,即力学刺激所引起的改变可能会长期影响干细胞的命运。目的:观察骨髓间充质干细胞对力学刺激的记忆效应,解析其发... 详细信息

背景:骨髓间充质干细胞作为组织工程的理想种子细胞,已证实力学刺激有引导其分化的作用。研究表明,干细胞存在着机械记忆,即力学刺激所引起的改变可能会长期影响干细胞的命运。目的:观察骨髓间充质干细胞对力学刺激的记忆效应,解析其发生的表观遗传学机制。方法:(1)分离原代小鼠骨髓间充质干细胞,检测其三系分化能力,传至第3代待用;(2)利用拉伸仪,体外给予小鼠骨髓间充质干细胞机械刺激,检测细胞拉伸前后的成骨分化情况;(3)流式细胞仪检测拉伸后细胞干性;(4)将拉伸处理与未处理的细胞消化后铺种在常规12孔板,继续培养14 d后检测细胞的成骨分化情况;(5)免疫荧光染色检测并筛选造成干细胞机械记忆的关键组蛋白修饰变化,初步明确表观遗传调控的可能机制。结果与结论:(1)5%形变,0.5 Hz,6 h/d,为期7 d的机械刺激可以引导小鼠骨髓间充质干细胞向成骨方向分化;(2)重新铺种培养皿后,拉伸处理后的细胞仍能保持干性且继续向成骨方向分化;(3)结果显示,骨髓间充质干细胞对机械刺激存在记忆效应,这种效应可能与力学刺激导致的组蛋白H3K4me3修饰有关。

关键词：细胞机械记忆表观遗传修饰骨髓间充质干细胞成骨分化 H3K4me3

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