检索结果-内蒙古大学图书馆

细胞与分子免疫学杂志 2022年第5期38卷 452-459页

作者：徐文华翁子睿葛婷婷陆雯婷孟诗奇牛长敏郑英扬州大学医学院妇产与生殖医学研究所组织学与胚胎学教研室江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室江苏扬州225001

目的制备兔抗小鼠Tubby(Tub)样蛋白2(TULP2)多克隆抗体并检测TULP2蛋白在小鼠睾丸中的表达情况。方法分别将TULP2蛋白编码序列全长和TULP2蛋白含Tub结构域的羧基端(TULP2-C)插入pET-30a(+)质粒中,构建pET-30a(+)-TULP2和pET-30a(+)-TULP2-C原核表达重组质粒。将两种质粒分别转化入大肠杆菌*** BL21中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导原核蛋白表达。利用组氨酸(His)融合蛋白纯化柱纯化TULP2和TULP2-C原核蛋白,用梯度浓度的尿素复性。分别以复性后的TULP2和TULP2-C原核蛋白为抗原免疫成年雄性新西兰大白兔,获得两种类型的TULP2多克隆抗体。应用ELISA测定多克隆抗体的效价,Western blot法及免疫荧光技术确定自制多克隆抗体的有效性及特异性。结果成功构建了pET-30a(+)-TULP2以及pET-30a(+)-TULP2-C重组质粒,并且通过IPTG诱导,表达出TULP2和TULP2-C原核重组蛋白。ELISA检测两种抗体滴度均达到1∶1000000。Western blot法、免疫荧光染色结果显示,利用TULP2-C原核蛋白为免疫原制备的抗体特异性较差。而利用TULP2全长蛋白为免疫原制备的多克隆抗体可以特异识别成年野生型小鼠睾丸中内源性的TULP2蛋白,而且可用于免疫荧光组织化学染色,结果显示TULP2在成年野生型小鼠的圆形精子细胞及其后变形期的精子细胞中表达。结论应用TULP2全长蛋白为抗原可成功制备兔抗小鼠TULP2多克隆抗体,可同时用于Western blot法及免疫荧光组织化学染色。

关键词： Tubby样蛋白2(TULP2) 多克隆抗体精子发生

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兔抗小鼠含IQ基序及泛素结构域蛋白(IQUB)多克隆抗体的制备和应用

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细胞与分子免疫学杂志 2023年第9期39卷 846-851页

作者：袁露徐文华葛婷婷周慧萍杨玲杨凡牛长敏郑英扬州大学医学院组织学与胚胎学教研室江苏扬州225001 江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室江苏扬州225001

目的制备兔抗小鼠含IQ基序及泛素结构域蛋白(IQUB)多克隆抗体并检测IQUB在小鼠睾丸中的表达情况。方法将IQUB蛋白编码序列全长插入pET-30a(+)载体,构建pET-30a-IQUB原核表达质粒。将原核表达质粒转化入大肠杆菌BL21中,异丙基-β-D-硫... 详细信息

目的制备兔抗小鼠含IQ基序及泛素结构域蛋白(IQUB)多克隆抗体并检测IQUB在小鼠睾丸中的表达情况。方法将IQUB蛋白编码序列全长插入pET-30a(+)载体,构建pET-30a-IQUB原核表达质粒。将原核表达质粒转化入大肠杆菌BL21中,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白表达。利用组氨酸融合蛋白纯化柱纯化蛋白,使用梯度浓度的尿素复性原核蛋白。蛋白复性后免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。免疫完成后ELISA测定多克隆抗体效价,应用Western blot及免疫荧光染色分析多克隆抗体的有效性与特异性。结果成功构建了pET-30a-IQUB重组质粒,并通过IPTG诱导成功表达了原核蛋白。ELISA检测多克隆抗体效价达到1∶1 000 000,制备的多克隆抗体能识别成年野生型小鼠睾丸组织中的内源性IQUB蛋白,IQUB在成年小鼠睾丸的各级生精细胞表达,在成熟精子中定位于顶体及鞭毛。结论成功制备出高特异性的兔抗小鼠IQUB多克隆抗体,可用于Western blot及免疫荧光组织化学染色。

关键词：含IQ基序及泛素结构域蛋白(IQUB) 多克隆抗体精子发生

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miR-144/451在神经系统疾病中的研究概述

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神经解剖学杂志 2021年第3期37卷 357-361页

作者：吴成豪丁冬怡孙志颖卢瑶瑶郁多男王小洪扬州大学医学院江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室扬州225001 扬州大学医学院人体解剖学教研室扬州225001

microrna-144/451(miR-144/451)是一种是位于人类17号染色体和小鼠11号染色体上高度保守的双顺反子microrna,其转录受GATA结合蛋白1(GATA1)等多种核蛋白控制。miR-144/451在阿尔茨海默病(AD)、帕金森病(PD)和抑郁症(MDD)等神经系统疾病... 详细信息

microrna-144/451(miR-144/451)是一种是位于人类17号染色体和小鼠11号染色体上高度保守的双顺反子microrna,其转录受GATA结合蛋白1(GATA1)等多种核蛋白控制。miR-144/451在阿尔茨海默病(AD)、帕金森病(PD)和抑郁症(MDD)等神经系统疾病的治疗方面发挥重要的调控作用。本文就miR-144/451在神经系统疾病中发挥的作用及其转录调控机制做一综述。

关键词： miR-144 miR-451 转录调控神经系统

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接头蛋白LNK抑制胃癌细胞增殖和侵袭能力的研究

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扬州大学学报（农业与生命科学版） 2021年第3期42卷 29-34页

作者：孙佳许康节赵雅蒋静郁多男戴华扬州大学医学院(转化医学研究院) 江苏扬州225009 江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室江苏扬州225009 江苏省中西医结合老年病防治重点实验室江苏扬州225009

为分析人接头蛋白LNK(hLNK)对胃癌发生发展的影响,克隆并包装含hLNK基因的重组慢病毒并感染人胃癌细胞株SGC-7901以建立稳定过表达hLNK的细胞系SGC-7901-hLNK(7901-hLNK);Western blot验证该稳转细胞系中hLNK的表达水平,平板克隆试验分... 详细信息

为分析人接头蛋白LNK(hLNK)对胃癌发生发展的影响,克隆并包装含hLNK基因的重组慢病毒并感染人胃癌细胞株SGC-7901以建立稳定过表达hLNK的细胞系SGC-7901-hLNK(7901-hLNK);Western blot验证该稳转细胞系中hLNK的表达水平,平板克隆试验分析hLNK过表达对其增殖的影响;Transwell小室试验分析hLNK过表达对胃癌细胞侵袭能力的影响;并对细胞内信号分子p-Jak2、p-Stat3、p-p38、Jak2、Stat3、p38的活化水平进行分析。结果表明:过表达hLNK的人胃癌细胞株7901-hLNK得到成功构建,该细胞的增殖、侵袭能力较对照组明显被抑制,且细胞中p-Jak2、p-Stat3水平显著下调。这一研究提示,hLNK可能作为一种抑癌因子在胃癌中发挥作用,其主要通过下调Jak2-Stat3信号通路抑制癌细胞的增殖、侵袭。

关键词：接头蛋白LNK 胃癌 SGC-7901 增殖 Jak2-Stat3

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长链非编码rna PCAT-1对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响及作用机制研究

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安徽医科大学学报 2021年第3期56卷 428-433页

作者：王继军吴凡李瑶瑶孔桂美郁多男扬州大学医学院江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室扬州225009 江苏省中西医结合老年病防治重点实验室扬州225009 扬州大学附属医院消化内科扬州225001

目的研究长链非编码rna前列腺癌相关转录本1(lncrna PCAT-1)对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法qRT-PCR检测lncrna PCAT-1在胰腺癌细胞系Capan-1、Capan-2、PANC-1、SW1990和正常胰腺细胞hTERT-HPNE中的表达水平... 详细信息

目的研究长链非编码rna前列腺癌相关转录本1(lncrna PCAT-1)对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法qRT-PCR检测lncrna PCAT-1在胰腺癌细胞系Capan-1、Capan-2、PANC-1、SW1990和正常胰腺细胞hTERT-HPNE中的表达水平。lncrna PCAT-1表达最高的胰腺癌细胞系分为sh-NC组和sh-PCAT-1组,进行NC干扰慢病毒(shrna)和PCAT-1 shrna感染,qRT-PCR检测各组细胞中lncrna PCAT-1的表达水平。3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑鎓(MTS)实验检测沉默lncrna PCAT-1的表达对细胞增殖能力的影响;流式细胞仪检测沉默lncrna PCAT-1的表达对细胞周期和凋亡的影响;皮下移植瘤实验检测沉默lncrna PCAT-1的表达对胰腺癌细胞体内生长能力的影响;Western blot检测lncrna PCAT-1对细胞周期相关蛋白、凋亡相关蛋白和PI3K/AKT信号通路关键蛋白的表达影响。结果qRT-PCR检测结果显示lncrna PCAT-1在胰腺癌细胞系的表达水平高于在正常胰腺细胞hTERT-HPNE中的表达(P<0.05),与Capan-1、Capan-2和SW1990细胞相比,PANC-1细胞中lncrna PCAT-1的表达最高。PANC-1细胞感染PCAT-1 shrna,qRT-PCR结果显示,与sh-NC组相比,sh-PCAT-1组细胞中lncrna PCAT-1的表达降低(P<0.05);沉默lncrna PCAT-1的表达后,PANC-1细胞的增殖能力降低,细胞周期阻滞在G0/G1期,细胞凋亡增加,细胞体内裸鼠成瘤能力降低,细胞周期蛋白cyclinD1和CDK6蛋白的表达减少,抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白减少,促凋亡蛋白Bax蛋白表达增加,PI3K/AKT信号通路关键蛋白pPI3K和pPAKT蛋白表达减少。结论沉默lncrna PCAT-1的表达可能通过调控PI3K/AKT信号通路抑制胰腺癌细胞增殖和促进细胞凋亡。lncrna PCAT-1可能是治疗胰腺癌的新型靶标。

关键词：胰腺癌长链非编码rna前列腺癌相关转录本1 增殖凋亡 PI3K/AKT

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WWOX促进弥漫性大B淋巴瘤增殖作用初探

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扬州大学学报（农业与生命科学版） 2022年第6期43卷 80-86页

作者：许康节詹万达万晓洁王杰戴华扬州大学医学院(转化医学研究院) 江苏扬州225009 江苏省人兽共患病学重点实验室江苏扬州225009 扬州大学附属医院病理科江苏扬州225009 江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室江苏扬州225009

为研究WWOX在人弥漫性大B淋巴瘤(DLBCL)中的作用,首先对TCGA数据库中人WWOX(hWWOX)在DLBCL样本中的表达进行分析;随后在B细胞淋巴瘤细胞株Romas、OCI-Ly7(Ly7)、38B9及临床组织样本中对上述生物信息学分析结果进行验证;通过构建稳定过表... 详细信息

为研究WWOX在人弥漫性大B淋巴瘤(DLBCL)中的作用,首先对TCGA数据库中人WWOX(hWWOX)在DLBCL样本中的表达进行分析;随后在B细胞淋巴瘤细胞株Romas、OCI-Ly7(Ly7)、38B9及临床组织样本中对上述生物信息学分析结果进行验证;通过构建稳定过表达hWWOX的淋巴瘤细胞系进一步分析hWWOX过表达对DLBCL细胞增殖的影响;最后对该细胞内Jak2-Stat3通路的活化水平进行探究。结果表明:TCGA数据库DLBCL中hWWOX高表达并在B细胞淋巴瘤细胞株中得到验证;IHC结果显示,53%的DLBCL患者组织中hWWOX高表达。Western blot结果显示,过表达hWWOX的细胞系Ly7-hWWOX得到成功构建,MTT试验表明该稳转细胞株的增殖能力较对照组显著增强,且细胞中p-Jak2、p-Stat3水平显著上调。综上,hWWOX在DLBCL中主要通过上调Jak2-Stat3信号通路而促进癌细胞增殖,这为DLBCL的临床研究和治疗提供靶标。

关键词： WWOX 弥漫性大B细胞淋巴瘤 Jak2-Stat3信号通路

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扬州地区妊娠妇女不同孕期甲状腺功能指标参考区间的建立与临床意义

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中华地方病学杂志 2020年第2期39卷 117-122页

作者：凌玲桑学涵程文国赵桂平吴德群郁多男扬州大学医学院附属医院扬州市妇幼保健院 225000 扬州大学医学院江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室 225001 扬州大学临床医学院江苏省苏北人民医院 225000

目的建立扬州地区妊娠妇女各孕期游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺激素(TSH)以及甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)参考区间,并分析各指标的动态变化趋势,为临床及时、准确诊断孕期甲状腺疾病提供依据,促进优生优育.方法收集2017年10月至2018年1... 详细信息

目的建立扬州地区妊娠妇女各孕期游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺激素(TSH)以及甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)参考区间,并分析各指标的动态变化趋势,为临床及时、准确诊断孕期甲状腺疾病提供依据,促进优生优育.方法收集2017年10月至2018年10月扬州大学医学院附属医院扬州市妇幼保健院围产保健科门诊定期产检的3726例健康孕早(1747例)、中(1481例)、晚(498例)期妇女的临床资料,选择同期407例非妊娠妇女作为正常对照.采用美国贝克曼全自动化学发光分析仪检测观察对象血清FT4、TSH、TPOAb水平,采用双侧限值的95%参考值建立参考区间,并比较孕早、中、晚期各指标的差异.结果孕早、中、晚期,FT4水平比较差异有统计学意义(H=82.56,P<0.01),其中孕早期高于孕中期(P<0.01),孕中期高于孕晚期(P<0.01);TSH水平比较差异有统计学意义(H=91.27,P<0.01),其中孕早期低于孕中期(P<0.01),孕中期低于孕晚期(P<0.01);TPOAb水平比较差异有统计学意义(H=30.36,P<0.01),其中孕早期与孕中期比较差异无统计学意义(P>0.05),孕早、中期高于孕晚期(P均<0.01).不同孕期甲状腺功能指标参考区间,孕早期:FT4为8.28~15.66 pmol/L,TSH为0.11~4.23 mU/L,TPOAb为0.10~16.46 U/ml;孕中期:FT4为7.38~14.36 pmol/L,TSH为0.13~4.67 mU/L,TPOAb为0.10~18.97 U/ml;孕晚期:FT4为6.33~11.39 pmol/L,TSH为0.40~3.96 mU/L,TPOAb为0.10~6.17 U/ml.结论妊娠妇女不同孕期血清甲状腺功能指标有明显差异.成功建立不同孕期甲状腺功能指标参考区间,这对甲状腺疾病的诊断以及促进优生优育有重要的临床意义.

关键词：妊娠游离甲状腺素促甲状腺激素甲状腺过氧化物酶抗体参考区间

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黄酮类化合物对心肌细胞离子通道作用的研究进展

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中国现代应用药学 2019年第7期36卷 885-887页

作者：王秀秀邹丽钱薇许正新扬州大学医学院药理教研室江苏扬州225000 江苏省重点动物传染病和人畜共患病预防控制共创中心江苏扬州225001 江苏省中西医结合老年病防治重点实验室江苏扬州225001 江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室江苏扬州225009

目的深入了解黄酮类化合物抗心律失常方面的作用特点及机制。方法通过文献调研,从离子通道角度对黄酮类化合物抗心律失常方面的研究进展进行深入归纳和总结。结果不同类别的黄酮类化合物对钠、钾、钙通道的某些类型具有不同的影响,这些... 详细信息

目的深入了解黄酮类化合物抗心律失常方面的作用特点及机制。方法通过文献调研,从离子通道角度对黄酮类化合物抗心律失常方面的研究进展进行深入归纳和总结。结果不同类别的黄酮类化合物对钠、钾、钙通道的某些类型具有不同的影响,这些特点构成了其抗心律失常作用的物质基础。结论黄酮类化合物对心律失常具有良好的防治作用,对此类化合物的深入开发与利用具有重要的临床意义和应用前景。

关键词：黄酮类化合物膜片钳技术心肌细胞离子通道心律失常

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高龄产妇妊娠研究进展

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护理研究 2023年第2期37卷 277-279页

作者：戴佳旸孔祥扬州大学护理学院·公共卫生学院江苏225001 扬州大学医学院(转化医学研究所) 江苏省实验与转化非编码RNA研究重点实验室扬州大学临床医学院

对高龄产妇比例、特点、合并症与并发症发生现状、不良妊娠结局等进行综述,以期为高龄产妇围生期的个性化治疗提供指导。

关键词：高龄产妇妊娠结局护理综述

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Mirna-21在日本血吸虫诱导小鼠产生调节性B细胞中的作用

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扬州大学学报（农业与生命科学版） 2019年第4期40卷 55-59页

作者：田芳仰彬徐梦琪刘阳阳沈丹华王子文王甜甜钱莉杨维平扬州大学医学院/江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室/江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心

为探讨miR-21在调节性B细胞诱导中的作用,用实时荧光定量PCR(qPCR)检测正常小鼠和日本血吸虫感染小鼠脾脏B细胞中miR-21和IL-10的表达;体外免疫磁珠分选正常小鼠脾脏CD19^+B细胞,分别用脂多糖(LPS)和日本血吸虫虫卵抗原(SEA)刺激72 h后,... 详细信息

为探讨miR-21在调节性B细胞诱导中的作用,用实时荧光定量PCR(qPCR)检测正常小鼠和日本血吸虫感染小鼠脾脏B细胞中miR-21和IL-10的表达;体外免疫磁珠分选正常小鼠脾脏CD19^+B细胞,分别用脂多糖(LPS)和日本血吸虫虫卵抗原(SEA)刺激72 h后, qPCR检测miR-21和IL-10 mrna水平。MiR-21抑制剂及对照瞬时转染B细胞,再用LPS和SEA体外刺激培养,流式细胞术(FCM)检测IL-10^+B细胞比例, ELISA检测培养上清中IL-10表达水平。结果表明:日本血吸虫感染和SEA体外刺激均能使小鼠脾脏B细胞中miR-21和IL-10表达水平显著增高。MiR-21-Inhibitor转染B细胞, SEA和LPS体外刺激后IL-10^+B细胞比例和IL-10表达水平明显降低。这一研究提示日本血吸虫可溶性虫卵抗原可通过诱导miR-21的表达产生分泌IL-10的调节性B细胞。

关键词：日本血吸虫调节性B细胞 miR-21 IL-10

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