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ERK在TNF-α诱导内皮细胞β-1,4-半乳糖基转移酶-I表达中的作用

免疫学杂志 2010年第11期26卷 930-933页

作者：贲志云汪晓莺钱佶肖锋季玉红南通大学医学院免疫学与微生物学教研室 226001

目的研究细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated protein kinase,ERK)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导内皮细胞β-1,4-半乳糖基转移酶-I(β-1,4-GalT-I)表达的调节作用。方法用不同浓度的TNF-α刺激人脐静脉内皮细胞(human ... 详细信息

目的研究细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated protein kinase,ERK)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导内皮细胞β-1,4-半乳糖基转移酶-I(β-1,4-GalT-I)表达的调节作用。方法用不同浓度的TNF-α刺激人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs),并作用不同的时间,检测β-1,4-GalT-I表达变化;应用ERK通路抑制剂U0126预处理HUVECs,再用TNF-α刺激HUVECs,检测β-1,4-GalT-I的表达变化,并通过内皮-单核细胞黏附试验观察HU-VECs黏附能力的改变。结果 TNF-α诱导HUVECsβ-1,4-GalT-I表达增加,且具有剂量和时间依赖关系;U0126显著抑制TNF-α引起的HUVECsβ-1,4-GalT-I表达的上调及其黏附能力的上调。结论 ERK信号转导通路可能参与调节TNF-α诱导的内皮细胞β-1,4-GalT-I的表达,并影响内皮细胞的黏附能力。

关键词：细胞外信号调节激酶 TNF-α β-1,4-半乳糖基转移酶-I 内皮细胞

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小鼠MIP-1α真核表达质粒的构建及在HSV-II核酸疫苗中的应用

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细胞与分子免疫学杂志 2006年第3期22卷 286-289页

作者：邵文爱李晓眠汕头大学医学院微生物与免疫学教研室广东汕头515031 天津医科大学微生物学教研室天津300070

目的构建小鼠巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)的真核表达质粒,观察其作为分子佐剂对单纯疱疹病毒II型(HSV-II)DNA疫苗免疫效果的影响。方法以LPS刺激RAW264.7细胞提取总RNA。采用RT-PCR扩增出MIP-1α基因的全部编码序列,利用克隆载体pUCm... 详细信息

目的构建小鼠巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)的真核表达质粒,观察其作为分子佐剂对单纯疱疹病毒II型(HSV-II)DNA疫苗免疫效果的影响。方法以LPS刺激RAW264.7细胞提取总RNA。采用RT-PCR扩增出MIP-1α基因的全部编码序列,利用克隆载体pUCm-T,将其亚克隆入pcDNA3中,构建出小鼠MIP-1α的真核表达质粒Pm;将其转染COS-7细胞,并用Boyden趋化小室法检测MIP-1α的生物学活性。然后用其与HSV-IIgD的DNA疫苗一起免疫BALB/c小鼠,检测免疫小鼠的特异性抗体、脾T细胞增殖反应及病毒攻击小鼠后对小鼠的保护率,观察MIP-1α对HSV-IIDNA疫苗免疫效果的影响。结果成功构建了小鼠MIP-1α的重组真核表达质粒;免疫BALB/c小鼠发现,其作为分子佐剂可加强HSV-IIgDDNA疫苗的免疫效果。结论小鼠MIP-1α可作为HSV-IIgDDNA疫苗的分子佐剂,为研制新型有效的HSV-IIDNA疫苗提供一定的依据。

关键词：小鼠巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α) 单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)DNA疫苗分子佐剂

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医学微生物学兴趣小组——培养学生能力的有效途径

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微生物学通报 2010年第1期37卷 137-140页

作者：胡四海吴移谋朱翠明余敏君张艳唐双阳蔡恒玲南华大学医学院微生物学教研室湖南衡阳421001

在进行医学微生物学实验课教学的同时,开展微生物学兴趣小组活动,可形成以学生为主体的学习模式,开阔学生的视野,提高学生的学习兴趣,陶冶学生的科研情操,激发学生的创新热情,培养学生的动手能力以及分析问题和解决问题的能力,促进学生... 详细信息

在进行医学微生物学实验课教学的同时,开展微生物学兴趣小组活动,可形成以学生为主体的学习模式,开阔学生的视野,提高学生的学习兴趣,陶冶学生的科研情操,激发学生的创新热情,培养学生的动手能力以及分析问题和解决问题的能力,促进学生主动学习、合作学习和研究性学习。

关键词：微生物学兴趣小组主动学习合作学习研究性学习

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丙型肝炎病毒多细胞毒性T淋巴细胞表位DNA疫苗诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞反应

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中华肝脏病杂志 2006年第5期14卷 385-386页

作者：史霖刘珊胜利孟照俊袁育康西安交通大学医学院免疫及病原微生物学系 710061 海南医学院微生物学及免疫学教研室

本研究通过构建含有两个丙型肝炎病毒（HCV）细胞毒性T淋巴细胞（CTL）表位（Core133-142和El315-322）的多HCVCTL表位DNA疫苗，用其免疫小鼠，研究其引起的特异性CTL应答，以明确由多个HCVCTL表位基因编码直接连接构成的多CTL表位DNA... 详细信息

本研究通过构建含有两个丙型肝炎病毒（HCV）细胞毒性T淋巴细胞（CTL）表位（Core133-142和El315-322）的多HCVCTL表位DNA疫苗，用其免疫小鼠，研究其引起的特异性CTL应答，以明确由多个HCVCTL表位基因编码直接连接构成的多CTL表位DNA疫苗，其各个HCVCTL表位是否能独立表达，引起各自相应的特异性CTL应答，且多个CTL的联合作用能否能增强总体的CTL杀伤效应，为构建有效安全的多CTL表位DNA疫苗提供理论基础。

关键词：肝炎病毒,丙型表位,T淋巴细胞 DNA疫苗

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登革病毒感染患者血清IFN-γ和TNF-α的检测及意义

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中国人兽共患病杂志 2001年第2期17卷 19-21页

作者：江振友江丽芳方丹云郭辉玉暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州510632 中山医科大学微生物学教研室

目的　探讨登革病毒感染患者血清IFN γ和TNF α在登革病毒感染致病中的作用。方法　应用酶联免疫吸附法 (ELISA)测定广州地区 30例DV 1感染患者血清IFN γ和TNF α的水平。实验数据采用两样本均数t检验法处理。结果　 30例登革病毒感... 详细信息

目的　探讨登革病毒感染患者血清IFN γ和TNF α在登革病毒感染致病中的作用。方法　应用酶联免疫吸附法 (ELISA)测定广州地区 30例DV 1感染患者血清IFN γ和TNF α的水平。实验数据采用两样本均数t检验法处理。结果　 30例登革病毒感染者血清IFN γ和TNF α水平比正常健康对照组明显增高 (P <0 .0 5、P <0 .0 1)。感染病程第一天 ,患者血清IFN γ水平开始升高 ,第二天达高峰 ,然后逐渐下降。患者血清TNF -α水平第 2天明显升高 ,第 3天达高峰 ,然后逐渐下降。结论　TNF γ和TNF α在登革病毒的致病与免疫过程中可能起重要作用。

关键词：登革病毒免疫学细胞因子 IFN-γ TNF-α

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肺炎支原体膜脂蛋白诱导A549细胞mICAM-1表达上调

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武汉大学学报（医学版） 2004年第6期25卷 642-644,651页

作者：董碧麟刘先洲汤纪路白瑞珍宗润芝武汉大学医学院微生物学教研室武汉430071

目的 :观察肺炎支原体膜脂蛋白 (Mp -LAMP)对肺腺上皮癌细胞 (A5 4 9细胞 )mICAM - 1表达的影响并探讨膜脂蛋白中的活性成分 ,为阐明肺炎支原体感染所致炎性反应奠定基础。方法 :用流式细胞术检测Mp -LAMP不同浓度刺激组、不同时间刺激... 详细信息

目的 :观察肺炎支原体膜脂蛋白 (Mp -LAMP)对肺腺上皮癌细胞 (A5 4 9细胞 )mICAM - 1表达的影响并探讨膜脂蛋白中的活性成分 ,为阐明肺炎支原体感染所致炎性反应奠定基础。方法 :用流式细胞术检测Mp -LAMP不同浓度刺激组、不同时间刺激组及消化酶处理组的A5 4 9细胞mICAM - 1的表达水平。结果 :与正常细胞相比 ,A5 4 9细胞受到Mp -LAMP作用后 ,mICAM - 1的表达水平明显上调 (P <0 .0 1) ,且对Mp -LAMP具有浓度依耐性。随着Mp -LAMP作用时间的延长 ,A5 4 9细胞mICAM - 1表达水平逐渐上升 ,作用 16h时达到高峰 ,然后开始下降。酶消化试验证实Mp -LAMP的活性成分是其脂质部分。结论 :肺炎支原体膜脂蛋白中的脂质成分可以诱导A5 4 9细胞mICAM - 1表达水平的上调 ,在很大程度上影响着肺炎支原体所致炎性反应的强弱。

关键词：肺炎支原体膜脂蛋白膜结合型细胞间粘附分子-1

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新世纪流感大流行的思考

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生物化学与生物物理进展 2009年第8期36卷 945-949页

作者：王革非李康生汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室广东高校免疫病理重点实验室汕头515041

2009年从墨西哥开始暴发了一场席卷全世界的流感疫情.此次大流行的毒株,甲型H1N1病毒,包含了猪源、禽源和人源流感病毒的基因片段.研究该毒株的基因重配、进化历程及其生物学特性,将对防控此次流行具有重要意义.目前,该毒株的遗传进化... 详细信息

2009年从墨西哥开始暴发了一场席卷全世界的流感疫情.此次大流行的毒株,甲型H1N1病毒,包含了猪源、禽源和人源流感病毒的基因片段.研究该毒株的基因重配、进化历程及其生物学特性,将对防控此次流行具有重要意义.目前,该毒株的遗传进化关系已明确,通过遗传性状分析可获知该毒株可能的生物学性状,但流感大流行动向、毒株遗传变化、毒力及致病性变化仍在密切监控中.流感病毒生态系统具有复杂性,其基因组易突变、易重配、易在自然宿主保存,使得流感大流行存在一定的必然性.正视流感大流行的威胁,积极提高流感病毒在生态系统中的监控,加强流行病学调查,发展疫苗与药物,建立有效公共卫生保障体系,才能降低流感大流行的破坏性.

关键词：流感病毒甲型H1N1 流感大流行基因重配

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联合免疫缺陷小鼠的发展及其人免疫重建的研究

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第三军医大学学报 2005年第13期27卷 1415-1417页

作者：谭玉波林晨李扬秋暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州510632

多年来研究者致力于在联合免疫缺陷小鼠(severe combined immunodeficiency mice，SCID mice)体内重建有功能的人免疫系统，期以解决动物模型难以确切反映人体免疫系统的特点和研究人体免疫应答受限于体外实验的难题1988年Mosier等将人... 详细信息

多年来研究者致力于在联合免疫缺陷小鼠(severe combined immunodeficiency mice，SCID mice)体内重建有功能的人免疫系统，期以解决动物模型难以确切反映人体免疫系统的特点和研究人体免疫应答受限于体外实验的难题1988年Mosier等将人外周血淋巴细胞移植入C.B—17 SCID小鼠首次建立了人源化的SCID鼠模型。人类造血干／祖细胞移植给联合免疫缺陷鼠后可在其体内多系分化、增殖。

关键词：免疫缺陷鼠再植免疫重建

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《医学微生物学图鉴》多媒体CAI课件的设计与应用

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微生物学通报 2004年第4期31卷 122-124页

作者：江振友暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州510632

计算机辅助教学 (CAI)是现代化教育技术的重要组成部分。我们利用多媒体形象、多样化表达及交互性强的特点 ,将文本、声音、图片、动画、录像等有机结合在一起 ,设计制作了卫生部CAI课件《医学微生物学图鉴》。教学实践表明 :本课件在... 详细信息

计算机辅助教学 (CAI)是现代化教育技术的重要组成部分。我们利用多媒体形象、多样化表达及交互性强的特点 ,将文本、声音、图片、动画、录像等有机结合在一起 ,设计制作了卫生部CAI课件《医学微生物学图鉴》。教学实践表明 :本课件在教学中的应用提高了微生物学的教学质量 ,促进教学的整体改革 ,优化教学过程 ,取得较好的教学效果。

关键词： CAI 微生物学图鉴医学

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EB病毒LMP2A和EB病毒BZLF1融合基因反转录病毒表达载体的构建

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中国组织工程研究与临床康复 2007年第50期11卷 10109-10112页

作者：朱伟徐爱晶罗兵济宁医学院微生物学教研室山东省济宁市276826 青岛大学医学院微生物学教研室山东省青岛市266021

目的：将LMP2A和BZLF1基因进行融合同时可发挥LMP2A诱导特异性CTL和BZLF1基因诱导潜伏期EBV进入裂解期复制的作用，协同杀伤EBV阳性肿瘤细胞。实验拟构建含EB病毒潜伏膜蛋白2A编码基因和即刻早期基因融合基因的反转录病毒表达载体，并... 详细信息

目的：将LMP2A和BZLF1基因进行融合同时可发挥LMP2A诱导特异性CTL和BZLF1基因诱导潜伏期EBV进入裂解期复制的作用，协同杀伤EBV阳性肿瘤细胞。实验拟构建含EB病毒潜伏膜蛋白2A编码基因和即刻早期基因融合基因的反转录病毒表达载体，并筛选建立携带该基因的高滴度产毒细胞系。方法：实验于2006—08／2007—08在济宁医学院微生物教研室和青岛大学医学院微生物教研室进行。应用反转录-聚合酶链反应分别获得潜伏膜蛋白2A和即刻早期基因编码序列的cDNA，采用剪接式重叠延伸技术将两段基因通过多肽接头（Gly4Ser）3的DNA序列进行连接．构建融合基因Z2A。将融合基因Z2A定向插入逆转录病毒表达载体pMSCVpuro，形成重组质粒pMSCVpuro-Z2A，脂质体法将pMSCVpuro-Z2A转染反转录病毒包装细胞PT67。嘌呤霉素筛选产毒细胞克隆，扩大培养产毒细胞克隆，收获病毒进行滴度测定，RT-PCR检测产毒PT67细胞目的基因的转录表达。结果：限制性酶切、PCR及测序鉴定证实Z2A正确插入逆转录病毒表达载体，筛选获得了稳定产毒的嘌呤霉素抗性细胞克隆，收获病毒的滴度为7．8×10^6CFU／L，且重组逆转录病毒在PT67细胞能有效转录。结论：携带Z2A基因的重组反转录病毒表达载体pMSCVpuro-Z2A构建成功，转染PT67细胞后包装出重组反转录病毒，进而筛选获得了能转录表达Z2A的产毒细胞系PT67-Z2A。

关键词： LMP2A BZLF1 融合基因逆转录病毒表达载体

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