检索结果-内蒙古大学图书馆

中国血吸虫病防治杂志 2019年第3期31卷 346-352页

作者：邹其成陆凤扬州大学医学院寄生虫学教研室

疟疾是一种严重威胁人类生命健康的寄生虫病。磺胺多辛-乙胺嘧啶可用于儿童和孕妇疟疾间歇性预防性治疗,同时其也作为以青蒿素及其衍生物为基础的联合疗法的一种复方成分而被用于疟疾治疗。恶性疟原虫对磺胺多辛-乙胺嘧啶产生抗药性与... 详细信息

疟疾是一种严重威胁人类生命健康的寄生虫病。磺胺多辛-乙胺嘧啶可用于儿童和孕妇疟疾间歇性预防性治疗,同时其也作为以青蒿素及其衍生物为基础的联合疗法的一种复方成分而被用于疟疾治疗。恶性疟原虫对磺胺多辛-乙胺嘧啶产生抗药性与编码二氢叶酸还原酶(DHPS)和二氢蝶酸合酶(DHFR)的基因发生点突变相关,而药物选择压力亦可导致间日疟原虫上述两个基因发生突变。本文就抗疟药磺胺多辛-乙胺嘧啶的发现、应用、作用和间日疟原虫对其抗性机制及抗性相关基因研究进展作一综述,旨在为抗疟策略的制定提供参考依据。

关键词：间日疟原虫磺胺多辛-乙胺嘧啶二氢叶酸还原酶二氢蝶酸合酶抗药性

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百日咳杆菌效应CpG-ODNs调控变应性哮喘Toll信号分子的实验研究

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药学学报 2011年第3期46卷 285-292页

作者：张宝袁迟深孙云扬州大学医学院药理学教研室江苏扬州225001

从百日咳杆菌中分离出非甲基化寡核苷酸单链(CpG-ODNs),建立卵白蛋白(OVA)致敏的小鼠急性哮喘与慢性哮喘模型,经急性哮喘模型从百日咳杆菌CpG-ODNs与9条相似度高且含有CG片段的seq A～seq I序列中筛选出有效序列(seq A),以seq A腹腔注射... 详细信息

从百日咳杆菌中分离出非甲基化寡核苷酸单链(CpG-ODNs),建立卵白蛋白(OVA)致敏的小鼠急性哮喘与慢性哮喘模型,经急性哮喘模型从百日咳杆菌CpG-ODNs与9条相似度高且含有CG片段的seq A～seq I序列中筛选出有效序列(seq A),以seq A腹腔注射(ip)及灌胃(ig)对急、慢性哮喘小鼠分别进行干预。检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞(WBC)总数和嗜酸性粒细胞(EOS)数,酶联免疫吸附法(ELISA)检测BALF中细胞因子及血管内皮生长因子(VEGF)水平。逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测小鼠脾细胞TLR-9 mRNA表达量;蛋白印迹(Western blotting)法检测小鼠肺组织TLR-9蛋白表达。结果表明,小鼠急性哮喘模型经腹腔注射及灌胃seq A预处理,可明显抑制BALF中WBC总数增加,显著抑制EOS增加;百日咳杆菌、CpG+及seq A～seq D灌胃组亦显著抑制EOS增加,而seq E～seq I作用不明显;上述各序列干预组以腹腔注射途径抑制EOS作用较为显著。对小鼠慢性哮喘模型,CpG+和seq A腹腔注射预处理均能明显上调BALF中γ干扰素(IFN-γ)①空白对照组:(176.45±23.46)***-1;②模型组:(174.11±22.71)***-1;③CpG+(ip):(220.56±15.42)***-1;④seq A(ip):(225.23±21.60)***-1;并下调白介素-4(IL-4)①空白对照组:(66.91±5.81)***-1;②模型组:(81.02±11.24)***-1;③CpG+(ip):(63.99±6.09)***-1;④seq A(ip):(62.75±10.03)***-1;各序列组对VEGF无显著影响(P>0.05);seq A腹腔注射亦能上调小鼠脾细胞TLR-9 mRNA(TLR-9/GAPDH)①空白对照组:0.62±0.13;②模型组:0.66±0.17;③CpG+(ip):1.46±0.26;④seq A(ip):1.42±0.34及肺组织TLR-9蛋白表达(TLR-9/β-actin)①空白对照组:0.63±0.16;②模型组:0.61±0.07;③CpG+(ip):1.15±0.25;④seq A(ip):1.03±0.29;但经灌胃途径无明显影响。结果显示,CpG-ODNs和获得的CpG序列seq A可显著抑制哮喘模型的气道炎症反应以及相应炎症细胞因子水平的改变,其作用机制可能与调节Th1/Th2平衡、调控Toll样受体9(TLR-9)表达有关。

关键词：哮喘百日咳杆菌寡核苷酸单链 Th1/Th2 TLR-9

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大豆苷元对大鼠心室肌细胞I_(Na)的影响

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中国药理学通报 2019年第1期35卷 71-77页

作者：匡怡沙毛毛马宏昕任静娜饶本龙薛文君王嘉仪许正新扬州大学医学院药理学教研室江苏扬州225000

目的观察大豆苷元对大鼠心室肌细胞钠通道电流(I_(Na))的影响,探讨其抗心律失常的机制。方法 MTT比色法检测大豆苷元对心室肌细胞活力的影响;单酶解法分离大鼠单个心室肌细胞;全细胞膜片钳技术观察、记录、分析大豆苷元给药前后大鼠心... 详细信息

目的观察大豆苷元对大鼠心室肌细胞钠通道电流(I_(Na))的影响,探讨其抗心律失常的机制。方法 MTT比色法检测大豆苷元对心室肌细胞活力的影响;单酶解法分离大鼠单个心室肌细胞;全细胞膜片钳技术观察、记录、分析大豆苷元给药前后大鼠心室肌细胞I_(Na)及其动力学特征的变化。结果 MTT实验表明,大豆苷元的IC_(50) 30～100μmol·L^(-1),由此选定用于后续实验的药物浓度为0.3～10μmol·L^(-1)。膜片钳实验结果表明,当给予终浓度为0.3、1、3、10μmol·L^(-1)大豆苷元后,药物对I_(Na)呈浓度依赖性抑制现象;大豆苷元0.3μmol·L^(-1)时对I_(Na)作用的时间过程也具有一定影响,随时间推移缓慢减小;1、3、10μmol·L^(-1)大豆苷元使I-U曲线上移;在此同等条件下,激活曲线向去极化方向移动、稳态失活曲线向超极化方向移动和失活后恢复曲线的τ值延长。结论大豆苷元对大鼠心室肌Na^+通道有明显的抑制作用,这可能是其抗心律失常的机制之一。

关键词：乳鼠大豆苷元全细胞膜片钳技术钠离子通道心室肌细胞心律失常

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bcr-abl融合基因真核表达载体诱导小鼠特异性免疫应答

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中华血液学杂志 2006年第2期27卷 111-115页

作者：姜扬文钱莉龚卫娟刘伟蒋桂花季明春扬州大学临床医学院血液内科 225001 扬州大学医学院免疫学教研室

目的在小鼠体内外研究bcr-abl融合基因真核表达载体诱导的特异性免疫应答,探索肿瘤免疫治疗的新途径。方法构建表达bcr-abl融合基因cDNA片段的真核细胞质粒pVbcr-abl,将 pVbcr-abl质粒用纳米颗粒聚乙烯亚胺包裹后给BALB／c小鼠肌内注射... 详细信息

目的在小鼠体内外研究bcr-abl融合基因真核表达载体诱导的特异性免疫应答,探索肿瘤免疫治疗的新途径。方法构建表达bcr-abl融合基因cDNA片段的真核细胞质粒pVbcr-abl,将 pVbcr-abl质粒用纳米颗粒聚乙烯亚胺包裹后给BALB／c小鼠肌内注射,检测小鼠血清中bcr-abl特异性抗体水平。小鼠免疫后20 d皮下接种具有相同遗传背景的SP2／0／ber-abl细胞(H-2~d),观察小鼠生存情况、移植肿瘤的生长情况和肿瘤细胞浸润情况。利用免疫组织化学方法观察肿瘤组织中T淋巴细胞浸润情况;流式细胞术分析免疫小鼠脾脏T细胞亚群的变化;LDH释放法检测脾脏细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性。结果成功构建真核表达载体pVbcr-abl,bcr-abl融合基因cDNA片段在真核细胞中可得到高效表达。pVbcr-abl免疫BALB／c小鼠能激活机体免疫系统,诱导产生特异性抗体和特异性CTL活性,并形成特异性免疫保护力。免疫小鼠的移植肿瘤形成时间、表面出现破溃时间、生长速度明显降低,荷瘤生存时间明显延长。免疫小鼠移植肿瘤组织中有大量CD3^+T细胞浸润。免疫小鼠的脾细胞杀伤SP2／0／bcr-abl细胞的细胞毒活性明显升高。小鼠脾脏T细胞亚群发生改变,CIM^+／ CD8^+细胞比值升高到1．54±0．29。结论pVbcr-abl真核表达载体除能在小鼠体内诱导产生特异性抗体以外,还能诱导高水平特异性CTL活性,直接杀伤肿瘤细胞,抑制肿瘤细胞的生长速度。

关键词：白血病,髓样,慢性融合蛋白质类,bcr/abl 遗传载体免疫疗法,主动

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二丙诺啡对吗啡依赖动物的催促试验

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中国药理学通报 1999年第3期15卷 260-263页

作者：葛晓群卞春甫周华珠扬州大学医学院药理学教研室徐州医学院药理学教研室

目的观察二丙诺啡催促作用。方法连续递增剂量ｓｃ盐酸吗啡，建立吗啡依赖小鼠和大鼠模型，然后ｉｐ盐酸二丙诺啡（Ｍ５０５０），观察各种戒断症状并评分。结果小鼠ｉｐＭ５０５０５ｍｇ·ｋｇ－１，大鼠ｉｐ２ｍｇ·ｋｇ－１... 详细信息

目的观察二丙诺啡催促作用。方法连续递增剂量ｓｃ盐酸吗啡，建立吗啡依赖小鼠和大鼠模型，然后ｉｐ盐酸二丙诺啡（Ｍ５０５０），观察各种戒断症状并评分。结果小鼠ｉｐＭ５０５０５ｍｇ·ｋｇ－１，大鼠ｉｐ２ｍｇ·ｋｇ－１可分别催促两种动物迅速出现戒断症状，体重显著减轻，大鼠戒断症状评分较高。结论Ｍ５０５０具有较好的催促作用，可作为催促剂用于动物实验研究。

关键词：二丙诺啡吗啡催眠吸毒

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V5抗原表位融合性人雄激素受体基因酵母载体的构建及表达

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生物医学工程学杂志 2013年第4期30卷 866-872页

作者：杨晨罗方妮戴卫星李姗姗黄仁华谢阳梅薛飞玥李湘鸣扬州大学医学院预防医学教研室扬州225001 扬州大学动物科学与技术学院扬州225009

建立重组基因酵母筛选雄性内分泌干扰物的关键是雄激素受体(AR)在酵母细胞中的表达。为此,本文用PCR方法从W303-1A酵母基因组扩增3-磷酸甘油醛脱氢酶(GPD)启动子,将其插入到pYestrp2载体的SwaⅠ和BamHⅠ酶切位点,将所构建成的载体命名为... 详细信息

建立重组基因酵母筛选雄性内分泌干扰物的关键是雄激素受体(AR)在酵母细胞中的表达。为此,本文用PCR方法从W303-1A酵母基因组扩增3-磷酸甘油醛脱氢酶(GPD)启动子,将其插入到pYestrp2载体的SwaⅠ和BamHⅠ酶切位点,将所构建成的载体命名为pGPD。将5′和3′端含有BamHⅠ和EcoRⅠ黏性末端V5抗原表位DNA,插入到pGPD相应的酶切位点,构建成pGPDV5载体。用PCR方法从pcDNA3.1/AR扩增2 723bp全长的AR开放性阅读框(ORF),将其插入到pGPDV5载体,构建成与V5抗原表位相融合的酵母表达载体pGPDV5/AR,将其转入W303-1A酵母细胞。用Western blot检测该酵母细胞提取液中的AR与V5相融合的表达蛋白,一抗选用小鼠源性V5单克隆抗体(IgG2a),二抗选用偶联有辣根过氧化物酶(HRP)的羊抗小鼠的多克隆抗体(IgG)。结果表明,与V5相融合的AR蛋白在酵母细胞中成功表达。

关键词： V5相融合蛋白酵母细胞雄激素受体

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酵母CYC1启动子TATA框对ERE调控的报告基因的影响

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生物医学工程学杂志 2011年第3期28卷 553-558页

作者：谭明典罗方妮葛宜枝李晶晶徐海荣李湘鸣扬州大学医学院预防医学教研室扬州225001 扬州大学动物科学与技术学院扬州225009

人工合成两条雌激素效应元件(ERE)重复的核苷酸序列,并在5′和3′端设计HindⅢand SphⅠ黏性末端。将两条互补的ERE溶液加热至95℃,然后冷却至室温使其形成双股DNA,将双股ERE插入到pERE-CYC-yEGFP载体的细胞色素C(CYC1)启动子相应的酶... 详细信息

人工合成两条雌激素效应元件(ERE)重复的核苷酸序列,并在5′和3′端设计HindⅢand SphⅠ黏性末端。将两条互补的ERE溶液加热至95℃,然后冷却至室温使其形成双股DNA,将双股ERE插入到pERE-CYC-yEGFP载体的细胞色素C(CYC1)启动子相应的酶切位点,生成pERE-CYC-αyEGFP载体。pERE-CYC-yEGFP和pERE-CYC-αyEGFP载体的不同之处是ERE位于CYC1启动子的位置,前者ERE下游的CYC1启动子含有α和β-TATA框,而后只含有-αTATA框。将两者分别转化于可表达人雌激素受体的酵母细胞,构建成两种受雌激素调控的重组酵母细胞。将该重组酵母细胞经6种不同的雌激素化合物作用4 h,发现重组pERE-CYC-αyEGFP的酵母细胞的绿色荧光蛋白(GFP)表达量与受试物间剂量效应关系较差,而含有pERE-CYC-yEGFP载体重组酵母细胞,与受试物具有明显的剂量效应关系。因此,在用于快速、高通量筛选雌激素类化合物生物评价中,其CYC1基本启动子中的α和-βTATA框是必须的。

关键词：酵母细胞绿色荧光蛋白基本启动子生物评价

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比较两种RAD54启动子调控的全酵母发光细胞对化学诱变原的评价效果

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生态毒理学报 2016年第3期11卷 251-257页

作者：田永杰徐秀举陆益新王超周天祺李湘鸣扬州大学医学院预防医学教研室扬州225001

通过分子生物学技术构建2种不同RAD54启动子调控的yEGFP重组报告载体p RAD54-yEGFP和p RAD54S-yEGFP,前者启动子DNA为1.8 kb,后者为0.5 kb,分别转入W303-1A酵母细胞,构建2种启动子调控的发光酵母细胞,用不同化学诱变原作用后,用流式细... 详细信息

通过分子生物学技术构建2种不同RAD54启动子调控的yEGFP重组报告载体p RAD54-yEGFP和p RAD54S-yEGFP,前者启动子DNA为1.8 kb,后者为0.5 kb,分别转入W303-1A酵母细胞,构建2种启动子调控的发光酵母细胞,用不同化学诱变原作用后,用流式细胞仪和多功能发光仪测定酵母的发光强度。结果发现2种启动子调控的酵母细胞的发光强度均与化学诱变原(甲磺酸甲脂、4-硝基-N-氧化喹啉和5-氟尿嘧啶)有明显的剂量效应关系,但是W303-1A/RAD54-yEGFP剂量效应关系较为明显,产生的最大诱导倍数(5.96、2.19和2.71)明显高于W303-1A/RAD54S-yEGFP所产生的最大诱导倍数(2.53、1.50和1.91),可能与启动子序列中转录因子的数量以及转录因子间协同增效作用有关。同时发现,流式细胞仪测定效果明显优于发光仪测定效果。所以在构建RAD54启动子调控重组酵母细胞筛选诱变时,选用全启动子序列效果较好。

关键词：化学诱变原 RAD54启动子酵母细胞绿色荧光蛋白剂量效应关系

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精子尾部发育相关蛋白研究进展

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遗传 2020年第6期42卷 524-535页

作者：钟亚楠牛长敏夏蒙蒙郑英扬州大学医学院组织学与胚胎学教研室扬州225001

精子尾部结构与其运动功能密切相关。精子的运动能力直接决定了精子能否正常运输到输卵管与卵子受精。精子尾部的形成和发育是一个极其复杂的过程,由多种蛋白质精细调控。研究发现,多种精子尾部发育相关蛋白的缺陷可导致少、弱、畸形精... 详细信息

精子尾部结构与其运动功能密切相关。精子的运动能力直接决定了精子能否正常运输到输卵管与卵子受精。精子尾部的形成和发育是一个极其复杂的过程,由多种蛋白质精细调控。研究发现,多种精子尾部发育相关蛋白的缺陷可导致少、弱、畸形精子症。本文根据精子尾部的超微结构顺序,对近年来精子尾部发育相关蛋白的研究进展进行综述,以期为男性不育症的遗传学诊断和治疗提供理论基础和实践的可能。

关键词：精子尾部发育蛋白研究进展

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虫草素的中枢神经系统作用及毒性研究进展

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国际药学研究杂志 2017年第9期44卷 840-844页

作者：顾欣霞葛晓群扬州大学医学院药理教研室扬州225001

虫草素是从蛹虫草中分离得到的一种核苷类化合物,具有多种药理活性,如抗菌、抗病毒、抗炎、抗肿瘤、免疫调节、降血脂、降血糖等。近年来,人们开始关注其对中枢神经系统(CNS)的影响,发现虫草素可影响CNS的功能,对不同因素刺激诱导的神... 详细信息

虫草素是从蛹虫草中分离得到的一种核苷类化合物,具有多种药理活性,如抗菌、抗病毒、抗炎、抗肿瘤、免疫调节、降血脂、降血糖等。近年来,人们开始关注其对中枢神经系统(CNS)的影响,发现虫草素可影响CNS的功能,对不同因素刺激诱导的神经损伤具有保护作用。本文总结了虫草素镇静催眠、改善学习记忆的作用,以及对脑缺血/出血损伤,神经毒素(谷氨酸盐、β-淀粉样蛋白、鱼藤酮和6-羟基多巴胺等)、脂多糖和创伤引起神经损伤的保护作用,并对其体内外急性、亚急性毒性研究进行综述,以期为虫草素的研究和开发提供新的思路。

关键词：虫草素镇静催眠学习记忆神经保护毒性

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