检索结果-内蒙古大学图书馆

江苏农业学报 2012年第1期28卷 125-130页

作者：段志强胡娇胡增垒王郁杨朱杰胡顺林刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

试验旨在制备原核表达鹅源新城疫病毒(NDV)JS/5/05/Go株M蛋白的多克隆抗体并进行鉴定。以鹅源NDV总RNA为模板,RT-PCR扩增M基因,亚克隆到原核表达载体pET-32a(+)获得重组质粒pET32a-M,转化*** BL21(DE3)菌株进行诱导表达,SDS-PAGE电泳检... 详细信息

试验旨在制备原核表达鹅源新城疫病毒(NDV)JS/5/05/Go株M蛋白的多克隆抗体并进行鉴定。以鹅源NDV总RNA为模板,RT-PCR扩增M基因,亚克隆到原核表达载体pET-32a(+)获得重组质粒pET32a-M,转化*** BL21(DE3)菌株进行诱导表达,SDS-PAGE电泳检测表达产物;用KCl染色切胶纯化法纯化重组蛋白;采用切胶免疫小鼠的方法制备M蛋白多克隆抗体,抗体效价用间接ELISA检测,特异性用Western blot和间接免疫荧光法鉴定。结果表明,在大肠杆菌中成功表达了分子量约为55 000的重组蛋白,用切胶纯化法获得了纯度较高的重组蛋白;ELISA法检测抗体效价可达1∶102 400,Western blot和间接免疫荧光试验结果表明制备的多克隆抗体能够特异性识别纯化的M蛋白及NDV自身表达的M蛋白。

关键词：鹅源新城疫病毒 M基因原核表达多克隆抗体

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不同血清型马立克氏病病毒在体外相互增殖的影响

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农业生物技术学报 1999年第1期7卷 41-46页

作者：吴晓丰刘秀梵张如宽吴长新彭大新 225009 扬州大学畜牧兽医学院畜禽传染病农业部重点开放实验室!扬州

通过细胞培养板间接免疫荧光空斑计数法对MDV1,2和3型在鸡成纤维细胞（Chickenembryofibroblast，CEF）上相互增殖的影响进行研究，发现：（1）MDV2，3型不影响MDV1型形成的空斑数目，但明显地减少了每一个空斑中的感染细胞数；（2）MDV... 详细信息

通过细胞培养板间接免疫荧光空斑计数法对MDV1,2和3型在鸡成纤维细胞（Chickenembryofibroblast，CEF）上相互增殖的影响进行研究，发现：（1）MDV2，3型不影响MDV1型形成的空斑数目，但明显地减少了每一个空斑中的感染细胞数；（2）MDV2型对MDV3型在体外CEF上形成的空斑数目也无明显影响，但能显著增强MDV3型的复制，而且这种增强作用依赖于2型剂量；（3）来自MDV2型感染的CEF培养上清液对HVT的复制无明显抑制作用，而r-干扰素能明显抑制MDV1和3型在细胞单层上空斑形成，说明MDV之间的相互作用与r-干扰素无关。而2型和3型之间的协同作用可能与2型病毒促进了3型病毒的复制有关。

关键词：马立克氏病病毒体外增殖

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重组减毒细菌运送CD8^+T细胞表位的效应分析

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细胞与分子免疫学杂志 2006年第6期22卷 730-733页

作者：潘志明张晓明焦新安 Richard Lo-Man Claude Leclerc 刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 法国巴斯德研究所免疫调节生物学实验室法国巴黎75015

目的:分析重组减毒菌体外运送CD8+T细胞表位的效应。方法:以表达卵清蛋白(OVA)和淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)CD8+T细胞表位的重组菌13A(ptG2F)、25A(ptG2F)和SL7207(ptG2F)感染抗原提呈细胞(APC)LKb、LLd和骨髓源树突状细胞(BMDC),... 详细信息

目的:分析重组减毒菌体外运送CD8+T细胞表位的效应。方法:以表达卵清蛋白(OVA)和淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)CD8+T细胞表位的重组菌13A(ptG2F)、25A(ptG2F)和SL7207(ptG2F)感染抗原提呈细胞(APC)LKb、LLd和骨髓源树突状细胞(BMDC),应用体外抗原提呈试验检测APC对重组菌运送的CD8+T细胞表位的提呈效应。结果:感染试验证实,减毒菌13A、25A和SL7207对LKb细胞或LLd细胞均具有良好的侵袭能力,BMDC对重组菌具有很好的摄取功能。抗原提呈试验结果显示,在感染的早期(2h),LKb、LLd细胞和BMDC均可提呈重组菌13A(ptG2F)或SL7207(ptG2F)运送的T细胞表位;在感染的晚期(48h),LKb细胞对OVA257-264CD8+T细胞表位的提呈效应降低,LLd细胞对LCMV118-132CD8+T细胞表位的提呈效应增强。3种APC均不能提呈25A(ptG2F)运送的T细胞表位。另外,在同样的作用条件下,BMDC对减毒菌运送的抗原表位的提呈效应要强于LKb和LLd细胞。结论:重组菌能运送CD8+T细胞表位,为基于减毒细菌的新型基因工程疫苗的分子设计提供了有益借鉴。

关键词： CD8^+T细胞表位减毒大肠杆菌减毒鼠伤寒沙门氏菌体外抗原提呈试验

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共表达鸡IL-6和H5亚型禽流感病毒HA基因重组鸡痘病毒免疫抗体消长规律及免疫效力研究

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畜牧兽医学报 2012年第4期43卷 596-601页

作者：陈素娟丁彦红钱程柴茂彭大新刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病重点开放实验室禽类预防医学教育部重点实验室扬州225009

为评价共表达鸡IL-6和H5亚型禽流感病毒HA基因重组鸡痘病毒(rFPV-AIH5AIL6)的免疫抗体消长规律及免疫效力,将重组病毒通过颈部皮下注射和翅部皮下注射2种不同的免疫途径来免疫鸡群,结果发现,2种免疫途径中,重组鸡痘病毒对鸡体质量增加... 详细信息

为评价共表达鸡IL-6和H5亚型禽流感病毒HA基因重组鸡痘病毒(rFPV-AIH5AIL6)的免疫抗体消长规律及免疫效力,将重组病毒通过颈部皮下注射和翅部皮下注射2种不同的免疫途径来免疫鸡群,结果发现,2种免疫途径中,重组鸡痘病毒对鸡体质量增加均无影响,而野生型鸡痘病毒均可抑制鸡体质量增加。翅部皮下注射疫苗组能够产生较高的血凝抑制(HI)抗体水平,免疫21d后抗体水平达到高峰,28d后开始下降,49d时仍保持在一定的水平。免疫SPF鸡21d后攻毒,表明该重组病毒能使经滴鼻攻毒的SPF鸡抵抗H5亚型AIV的致死性攻击,保护率为95%,与油苗组相同,与单表达H5亚型禽流感病毒HA基因重组鸡痘病毒组(40%)差异显著;攻毒后3、5、7d采集喉头、泄殖腔棉拭子检测排毒情况,结果发现第3天排毒率最高,其中rFPV-AIH5AIL6免疫组排毒率为最低,显示IL-6在rFPV-AIH5IL6免疫过程中起到了免疫佐剂的作用,这为研制新型的禽流感重组鸡痘病毒疫苗奠定了基础。

关键词：禽流感病毒 HA基因鸡IL-6 重组鸡痘病毒佐剂

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流感病毒气源性传播研究进展

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中国家禽 2015年第13期37卷 43-49页

作者：江恺骏钟蕾王晓泉刘晓文刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

流感病毒是现今世界流行最为广泛、传播最为迅速的人兽共患病毒之一,而气源性传播是流感病毒最有效的传播方式。流感病毒的相关基因,尤其是相关基因的关键氨基酸位点对其自身是否具有气源性传播能力具有决定性的作用。外界环境的改变会... 详细信息

流感病毒是现今世界流行最为广泛、传播最为迅速的人兽共患病毒之一,而气源性传播是流感病毒最有效的传播方式。流感病毒的相关基因,尤其是相关基因的关键氨基酸位点对其自身是否具有气源性传播能力具有决定性的作用。外界环境的改变会直接影响病毒气溶胶颗粒形成的数量和大小,进而影响传播效率。目前,经过长期的筛选和比较,将豚鼠和雪貂作为研究流感气源性传播的模式动物,根据不同目的或者单独使用或者协同实验。文章通过对病毒本身的生物学特性以及外界环境对气源性传播产生的影响进行了初步总结,对进行气源性传播的实验动物给出了综合评价,一方面为研究者提供较为全面的总结,另一方面为防治流感提供依据。

关键词：流感病毒气源性传播生物学特性动物模型环境因素

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反向遗传操作技术产生全禽源致弱的H5N1亚型禽流感病毒的免疫保护性试验

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中国家禽 2005年第17期27卷 11-13页

作者：石火英张小荣孙学辉刘慧谋刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

利用反向遗传操作技术产生致弱的8基因全禽源的H5N1亚型禽流感病毒rgF-H5△N1,经甲醛灭活制成油苗免疫SPF鸡和有母源抗体的商品鸡。比较拯救的重配病毒rgF-H5△N1和野毒H5N1亚型禽流感病毒油苗免疫后的抗体应答水平、攻毒后发病率和死... 详细信息

利用反向遗传操作技术产生致弱的8基因全禽源的H5N1亚型禽流感病毒rgF-H5△N1,经甲醛灭活制成油苗免疫SPF鸡和有母源抗体的商品鸡。比较拯救的重配病毒rgF-H5△N1和野毒H5N1亚型禽流感病毒油苗免疫后的抗体应答水平、攻毒后发病率和死亡率等指标,评价其免疫和交叉免疫保护作用。结果表明:反向遗传操作技术为构建新型的流感疫苗株提供了更好的方法。

关键词：反向遗传操作技术禽流感病毒疫苗免疫保护作用 H5N1亚型操作技术反向遗传保护性试验致弱禽源

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家养水禽在A型流感病毒和新城疫病毒进化和疾病流行中的作用

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中国家禽 2007年第15期29卷 1-7页

作者：刘秀梵农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学兽医学院江苏扬州225009

高致病性禽流感和新城疫是最重要的两种禽病,近年来对世界家禽业造成了重创。由于家养水禽在这两种病原体的进化和疾病流行中占据着独特的地位,作者对此进行了详细探讨,为两种疾病的防控提出了积极有效的建议。

关键词：流感病毒 AIV 新城疫病毒水禽强毒株 NDV 疾病流行

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马立克氏病疫苗二次免疫效果评价及机理探讨

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中国禽业导刊 1999年第2期16卷 48-50页

作者：吴长新扬州大学国家农业部畜禽传染病部级重点开放实验室

一ＭＤ疫苗二次免疫的背景由于ＭＤ流行越来越严重，不管应用经典的ＨＶＴ冻干苗，还是使用效力较强的ＭＤ二价苗和ＣＶＩ９８８，甚至进一步提高免疫剂量，均还不能较好的控制ＭＤ流行。人们不得不从免疫技术角度考虑，寻找更好的免... 详细信息

一ＭＤ疫苗二次免疫的背景由于ＭＤ流行越来越严重，不管应用经典的ＨＶＴ冻干苗，还是使用效力较强的ＭＤ二价苗和ＣＶＩ９８８，甚至进一步提高免疫剂量，均还不能较好的控制ＭＤ流行。人们不得不从免疫技术角度考虑，寻找更好的免疫方法以有效控制ＭＤ，使ＭＤ造成的...

关键词：二次免疫效果评价马立克氏病疫苗免疫效力生产性能疫苗毒免疫系统免疫剂量结构和功能易感性

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鸡马立克氏病疫苗免疫机理和不同疫苗病毒之间的保护协同作用

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中国家禽 1998年第12期20卷 35-37页

作者：刘秀梵扬州大学畜牧兽医学院畜禽传染病学农业部重点开放实验室

１引言鸡马立克氏病（ＭＤ）是由疱疹病毒引起的鸡的一种最常见的淋巴组织增生性疾病，以外周神经、虹膜、各种内脏、性腺、皮肤和肌肉的淋巴样细胞浸润、增生和肿瘤形成为特征。本病在世界各主要养鸡国家和地区均有流行，也是我国经济... 详细信息

１引言鸡马立克氏病（ＭＤ）是由疱疹病毒引起的鸡的一种最常见的淋巴组织增生性疾病，以外周神经、虹膜、各种内脏、性腺、皮肤和肌肉的淋巴样细胞浸润、增生和肿瘤形成为特征。本病在世界各主要养鸡国家和地区均有流行，也是我国经济意义上最重要的禽病之一。本病自６０...

关键词：鸡马立克氏病疫苗免疫机理保护协同作用

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采用反向遗传学技术构建clade7..2 H5N2亚型禽流感病毒高产疫苗株

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中国家禽 2015年第3期37卷 13-17页

作者：孙中涛王萱李群辉高照王晓泉刘秀梵刘晓文扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

为构建H5N2亚型禽流感病毒(AIV)高产疫苗株,研究采用反向遗传操作技术删除Clade 7.2 H5N2亚型AIV A/chicken/Shanxi/Q6/2013(wt-Q6株)血凝素(HA)基因多碱性氨基酸序列,以wt-Q6株HA和神经氨酸酶基因为供体,结合A/Puerto Rico/8/34(H1N1)(PR8)AIV的6个内部片段骨架,构建针对此种变异的H5亚型AIV疫苗株,成功拯救出一株重组病毒r Q6/PR8。该病毒在鸡胚和MDCK细胞上均具有较好的繁殖滴度,对SPF鸡胚和鸡无致病性,具有低毒高产的特性,符合疫苗候选株的标准。

关键词： H5 clade 7.2 禽流感病毒反向遗传学

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