检索结果-内蒙古大学图书馆

表达分泌型与膜结合型HH7N9 AIV血凝素蛋白重组NDV载体疫苗的免疫原性比较

中国家禽 2018年第14期40卷 14-18页

作者：胡增垒刘晓文胡娇顾晗石磊李如梦甘军纪焦新安刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 扬州大学农业部农产品质量安全生物性危害因子(动物源)控制重点实验室江苏扬州225009 扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室江苏扬州225009

研究以新城疫病毒(NDV)弱毒株LX为载体,构建了一株表达H7N9亚型禽流感病毒(H7N9 AIV)血凝素(HA)胞外区的重组病毒(LXs HA),并与一株前期构建的表达膜结合型HA的重组病毒(LXHAF)进行比较。生物学特性评价显示,两株病毒均为弱毒且在鸡胚... 详细信息

研究以新城疫病毒(NDV)弱毒株LX为载体,构建了一株表达H7N9亚型禽流感病毒(H7N9 AIV)血凝素(HA)胞外区的重组病毒(LXs HA),并与一株前期构建的表达膜结合型HA的重组病毒(LXHAF)进行比较。生物学特性评价显示,两株病毒均为弱毒且在鸡胚中的繁殖性能较强。此外,LXs HA主要以分泌形式表达HA蛋白,而LXHAF则以膜结合形式表达HA。鸡的免疫试验显示,两株重组病毒在一次免疫后均能诱导针对NDV载体的血凝抑制抗体,但LXHAF能够诱导较高水平的H7N9 AIV特异性Ig Y抗体,而LXs HA不能诱导H7N9 AIV抗体应答。结果表明,表达膜结合型HA的重组病毒具有针对H7N9 AIV较好的免疫原性,而表达分泌型HA的重组病毒免疫原性较差。这为研发H7N9亚型禽流感载体疫苗提供新的信息与参考。

关键词： H7N9亚型禽流感病毒新城疫病毒载体疫苗分泌型HA 膜结合型HA 免疫原性

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Importinα5负向调控importinβ1介导的新城疫病毒M蛋白细胞核定位以及病毒的复制和致病性

Importinα5负向调控importinβ1介导的新城疫病毒M蛋白细胞核定...

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中国畜牧兽医学会2018年学术年会禽病学分会第十九次学术研讨会

作者：段志强嵇辛勤赵佳福倪萌萌许海旭胡顺林刘秀梵贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

引言新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)属于副黏病毒科腮腺炎病毒属成员,是一种含有单股负链不分节段基因组的RNA病毒。M蛋白是NDV基因组编码分子量最小的一种病毒结构蛋白,构成了病毒RNP与囊膜连接的支架。与大多数副黏病毒M蛋... 详细信息

引言新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)属于副黏病毒科腮腺炎病毒属成员,是一种含有单股负链不分节段基因组的RNA病毒。M蛋白是NDV基因组编码分子量最小的一种病毒结构蛋白,构成了病毒RNP与囊膜连接的支架。与大多数副黏病毒M蛋白一样,NDVM蛋白也是一种细胞核质穿梭蛋白,在抑制宿主细胞基因转录以及促进子代病毒粒子的组装和出芽方面有重要作用。早期的研究表明,

关键词：新城疫病毒副黏病毒细胞核定位 importin Importin

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新城疫病毒基质蛋白与鸡importinβ1蛋白的相互作用验证

新城疫病毒基质蛋白与鸡importinβ1蛋白的相互作用验证

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中国畜牧兽医学会2018年学术年会禽病学分会第十九次学术研讨会

作者：胡焱段志强嵇辛勤赵佳福胡顺林刘秀梵贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

引言研究表明,新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)基质蛋白(matrix,M)是一种细胞核-细胞质穿梭蛋白:在病毒早期感染阶段通过其携带的核定位信号进入细胞核,主要作用是抑制细胞基因的转录和翻译;而在感染后期则通过其核输出信号以C... 详细信息

引言研究表明,新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)基质蛋白(matrix,M)是一种细胞核-细胞质穿梭蛋白:在病毒早期感染阶段通过其携带的核定位信号进入细胞核,主要作用是抑制细胞基因的转录和翻译;而在感染后期则通过其核输出信号以CRM-1非依赖的方式进入细胞质,在细胞膜内侧与病毒蛋白相互作用促进子代病毒粒子的组装和出芽。本课题组前期通过荧光共定位试验发现importinβ1

关键词：新城疫病毒 importin 重组蛋白基质蛋白

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一株小鹅瘟病毒的生物学特性分析

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中国家禽 2017年第7期39卷 67-70页

作者：范娟钱钟刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 扬州优邦生物药品有限公司江苏扬州225008

从江苏省某发病鹅场中分离到1株疑似小鹅瘟病毒,纯化后病毒通过电镜观察可见直径约20~25 nm的病毒粒子;琼脂扩散试验结果显示该毒株与小鹅瘟阳性血清发生沉淀反应,与其他阳性血清未发生反应;人工感染雏鹅,可致发病和死亡,通过基因序列... 详细信息

从江苏省某发病鹅场中分离到1株疑似小鹅瘟病毒,纯化后病毒通过电镜观察可见直径约20~25 nm的病毒粒子;琼脂扩散试验结果显示该毒株与小鹅瘟阳性血清发生沉淀反应,与其他阳性血清未发生反应;人工感染雏鹅,可致发病和死亡,通过基因序列测定及遗传进化分析进一步确认该分离株为小鹅瘟病毒。该流行株与当前市售的小鹅瘟弱毒活疫苗具有较大的遗传差异,可为新疫苗的开发提供基础。

关键词：小鹅瘟病毒分离鉴定遗传进化

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同源疫苗抗体选择压下H9N2亚型禽流感病毒的致病性和抗原性的变化

同源疫苗抗体选择压下H9N2亚型禽流感病毒的致病性和抗原性的变化

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中国畜牧兽医学会2018年学术年会禽病学分会第十九次学术研讨会

作者：孙王杨吉晋海云王婉石火英刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心

引言为控制鸡群中H9亚型禽流感病毒的传播,在上世纪90年代初中国大陆广泛实施H9N2亚型禽流感病毒疫苗接种计划,并能够有效地降低H9N2亚型禽流感病毒感染对鸡的影响,但病毒最终扩散到中国大部分地区。鉴于中国广泛使用各种禽流感疫苗的... 详细信息

引言为控制鸡群中H9亚型禽流感病毒的传播,在上世纪90年代初中国大陆广泛实施H9N2亚型禽流感病毒疫苗接种计划,并能够有效地降低H9N2亚型禽流感病毒感染对鸡的影响,但病毒最终扩散到中国大部分地区。鉴于中国广泛使用各种禽流感疫苗的策略以及目前H9N2亚型禽流感在中国广泛流行和复杂的作用,有必要评价疫苗抗体选择压在H9N2亚型禽流感病毒演化中的作用。本研究选择

关键词：禽流感病毒同源疫苗抗原性

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流感病毒PA-X基因多态性分析与功能研究

流感病毒PA-X基因多态性分析与功能研究

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中国畜牧兽医学会2018年学术年会禽病学分会第十九次学术研讨会

作者：胡娇马春喜王晓泉顾敏胡增磊刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心教育部新型兽用疫苗工程研究中心

引言目前发现流感病毒的PA基因编码4种蛋白:PA、PA-N155、PA-N182、PA-X。其中,PA-X于2012年被Jagger等人发现,并陆续被发现发挥多种功能:host-shutoff、调节流感病毒毒力、抑制流感病毒诱导的宿主先天性免疫应答和获得性免疫应答能力... 详细信息

引言目前发现流感病毒的PA基因编码4种蛋白:PA、PA-N155、PA-N182、PA-X。其中,PA-X于2012年被Jagger等人发现,并陆续被发现发挥多种功能:host-shutoff、调节流感病毒毒力、抑制流感病毒诱导的宿主先天性免疫应答和获得性免疫应答能力、影响流感病毒的复制和聚合酶活性、调节流感病毒诱导的宿主细胞死亡等等。然而,PA-X的以上功能在不同亚型、不同毒株、以及不同宿主之间存在

关键词：流感病毒不同亚型氨基酸位点基因多态性功能研究

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PA-X蛋白对HH9N2亚型禽流感病毒致病性的影响

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中国家禽 2017年第24期39卷 14-17页

作者：王晓泉刘东刘晓文刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病重点开放实验室江苏扬州225009 江苏高校动物重要疫病与人畜共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

H9N2亚型禽流感病毒(AIV)在我国家禽中循环存在,可跨种间传播感染人,对公共卫生产生重大影响。PA-X蛋白是流感病毒PA基因核糖体移码后编码的一种新蛋白,对病毒的致病性起调控作用。试验通过反向遗传技术构建并拯救了H9N2 AIV SH7株的PA-... 详细信息

H9N2亚型禽流感病毒(AIV)在我国家禽中循环存在,可跨种间传播感染人,对公共卫生产生重大影响。PA-X蛋白是流感病毒PA基因核糖体移码后编码的一种新蛋白,对病毒的致病性起调控作用。试验通过反向遗传技术构建并拯救了H9N2 AIV SH7株的PA-X变异病毒SH7-FS株,使PA-X的表达量下降至原来的0.2%^([1]),测定野生型SH7株和变异病毒SH7-FS株在不同来源细胞中的生长曲线,并通过小鼠感染试验测定病毒在肺中病毒载量及其对肺的病理损伤来分析其对小鼠的致病性。结果表明:SH7-FS株对小鼠的致病力比野生型SH7株低,造成的小鼠肺部炎症比SH7株轻。SH7株和SH7-FS株在小鼠体内复制能力无显著差异,但是SH7-FS株在Vero细胞和MDCK细胞上复制水平比SH7株低,推测PA-X蛋白是协助病毒更好适应环境的辅助蛋白。研究结果为H9N2 AIV PA-X蛋白的生物学功能的探索提供了理论基础,推进了人们对于流感病毒PA-X蛋白功能的认识。

关键词： H9N2亚型禽流感病毒 PA—X 小鼠致病性

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KPNB1和Ran蛋白共同介导新城疫病毒基质蛋白的入核转运

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微生物学报 2017年第1期57卷 109-120页

作者：段志强嵇辛勤许厚强赵佳福许海旭胡顺林刘秀梵贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室贵州贵阳550025 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

【目的】鉴定与新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)基质蛋白(matrix protein,M)入核相关的细胞蛋白,以阐明NDV M蛋白细胞核定位的分子机制。【方法】从鸡胚成纤维细胞中分别克隆核转运受体蛋白KPNA1–KPNA6和KPNB1基因,将其构建... 详细信息

【目的】鉴定与新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)基质蛋白(matrix protein,M)入核相关的细胞蛋白,以阐明NDV M蛋白细胞核定位的分子机制。【方法】从鸡胚成纤维细胞中分别克隆核转运受体蛋白KPNA1–KPNA6和KPNB1基因,将其构建到真核表达载体,并与表达NDV M蛋白的重组真核表达载体分别共转染HEK-293T细胞,通过免疫共沉淀方法鉴定与NDV M蛋白相互作用的核转运受体蛋白。另外,将M蛋白与Ran蛋白突变体或与M蛋白互作的核转运受体蛋白缺失体分别共表达,通过荧光共定位确定M蛋白入核转运相关的细胞蛋白。【结果】构建的重组真核表达载体在HEK-293T细胞中能够正确表达;通过间接免疫荧光观察发现,重组蛋白中除Myc-KPNA2蛋白定位在细胞质外,其它核转运受体蛋白均与M蛋白表现出相同的细胞核定位。免疫共沉淀试验结果表明,M蛋白与KPNA1蛋白和KPNB1蛋白均存在相互作用。进一步通过荧光共定位观察发现,M蛋白与KPNA1蛋白缺失体(DN-KPNA1)共表达不改变M蛋白的细胞核定位,而与KPNB1蛋白缺失体(DN-KPNB1)共表达后导致M蛋白变为细胞质定位,说明M蛋白入核转运需要KPNB1蛋白的参与。另外,将M蛋白与Ran蛋白突变体Ran-Q69L共表达,荧光观察发现M蛋白同样由细胞核定位变为细胞质定位,说明M蛋白入核转运还需要Ran蛋白的辅助。【结论】KPNB1和Ran蛋白共同介导NDV M蛋白的入核转运,其过程是KPNB1蛋白首先和M蛋白发生相互作用并形成复合物,然后通过Ran蛋白的辅助作用完成入核转运。

关键词：新城疫病毒基质蛋白转运受体蛋白细胞核定位

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基因VII型与IV型新城疫病毒调控脾脏细胞外基质的蛋白质组分析

基因VII型与IV型新城疫病毒调控脾脏细胞外基质的蛋白质组分析

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中国畜牧兽医学会2018年学术年会禽病学分会第十九次学术研讨会

作者：胡增垒顾晗胡娇焦新安刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏省人兽共患病学重点实验室农业部农产品质量安全生物性危害因子(动物源)控制重点实验室

引言为了解析基因VII型新城疫病毒(NDV)高度侵害鸡免疫系统的机制,我们前期应用转录组学技术鉴定了基因VII型与IV型NDV感染脾脏引起天然免疫应答相关基因的差异表达,如IFN-β、IFN-α、IFN-γ、IL-6、CCL-4等。基因VII型NDV可显著上调... 详细信息

引言为了解析基因VII型新城疫病毒(NDV)高度侵害鸡免疫系统的机制,我们前期应用转录组学技术鉴定了基因VII型与IV型NDV感染脾脏引起天然免疫应答相关基因的差异表达,如IFN-β、IFN-α、IFN-γ、IL-6、CCL-4等。基因VII型NDV可显著上调这些基因的表达水平,说明基因VII型NDV诱导的强烈的天然免疫应答对其造成免疫系统的严重损伤有重要作用。此外,基因表达谱分析还显示,与

关键词：新城疫病毒 VII ECM 细胞外基质

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稳定表达TIGAR基因的MDCK细胞建立及禽流感病毒在其中的增殖特性研究

稳定表达TIGAR基因的MDCK细胞建立及禽流感病毒在其中的增殖特性...

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第五届全国禽病分子生物技术青年工作者会议

作者：许靖孙中涛刘晓文王晓泉刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

1997年香港发生首例H5N1亚型高致病性禽流感病毒感染人的事件,引发了全世界的关注.此后,该亚型病毒在包括中国大陆在内的多个国家和地区相继爆发流行,给全球养禽业造成重大经济损失,同时也使人类的公共卫生安全面临严峻挑战.传统的禽流... 详细信息

1997年香港发生首例H5N1亚型高致病性禽流感病毒感染人的事件,引发了全世界的关注.此后,该亚型病毒在包括中国大陆在内的多个国家和地区相继爆发流行,给全球养禽业造成重大经济损失,同时也使人类的公共卫生安全面临严峻挑战.传统的禽流感重组灭活疫苗通常是通过反向遗传操作技术构建的高产致弱毒株,在SPF鸡胚上扩大增殖培养,灭活乳化后投入使用.但是该种方法生产的疫苗其抗原性与母本毒株存在差异,并且使用鸡胚的固有缺点也严重限制了该方法的发展.MDCK细胞是分离、培养禽流感病毒常用细胞系,因此科研工作者将目光投向以MDCK细胞为基质的禽流感疫苗研发.然而该方法也面临两方面的问题:一是MDCK细胞贴壁性太强,无法适应工业化生产;二是与鸡胚培养相比,禽流感病毒在MDCK细胞上的复制能力较低.TIGAR(TP53-induced glycolysis andapoptosis regulator)基因能够调节糖代谢和细胞凋亡,减少各种应激引起的凋亡,提高细胞存活时间.因此,本文通过建立稳定表达TIGAR基因的MDCK细胞期望解决上述MDCK细胞生产禽流感疫苗的问题.

关键词：禽流感病毒免疫疫苗 MDCK细胞 TIGAR基因

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