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2009—2010年华东地区家禽低致病性禽流感病毒的流行病学调查与分析

中国兽医学报 2012年第3期32卷 345-349页

作者：赵坤坤仲书官赵国阮丽莎朱艳梅张妍段志强刘晓文刘文博彭大新刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 安徽农业大学动物科技学院安徽合肥230036

为了解华东地区家禽中低致病性禽流感病毒(low pathogenic avian influenza viruses,LPAIVs)的分布规律,从2009年10月到2010年9月在华东地区某活禽市场采集鸡、鸭、鹅等家禽的泄殖腔拭子共1 650份,经鸡胚接种和HA、HI试验鉴定,结果从58... 详细信息

为了解华东地区家禽中低致病性禽流感病毒(low pathogenic avian influenza viruses,LPAIVs)的分布规律,从2009年10月到2010年9月在华东地区某活禽市场采集鸡、鸭、鹅等家禽的泄殖腔拭子共1 650份,经鸡胚接种和HA、HI试验鉴定,结果从58份样品中分离到了LPAIVs,总分离率为3.51%。所分离到的6种HA亚型及各HA亚型分离率从高到底依次为:H6、H3、H1、H4、H9、H11。从这些样品中鉴定出7种NA亚型,包括N1、N2、N3、N4、N5、N6、N8,二者之间有11种组合。家鸭样品中LPAIVs的分离率为7.28%,显著高于鸡源样品的分离率1.00%和鹅源样品的分离率1.02%。LPAIVs的季节性分布较为明显,3～6月份和10～12月份的分离率较高,而冬季最冷的1月份和夏季最热的7月份则没有分离到。2种或2种以上不同HA亚型混合感染的样品有6份,全部为水禽源样品,占总阳性样品数的10.34%。这些数据表明活禽市场可以作为AIV的一个重要储存库,而家养水禽可作为AIV的一个重要储存宿主,应该继续加强对活禽市场,尤其是家养水禽中AIV的监测。

关键词：低致病性禽流感流行病学家禽分离率家养水禽

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新城疫病毒基质蛋白第23位苯丙氨酸对病毒复制与细胞致病性的作用

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中国家禽 2012年第9期34卷 17-20页

作者：高海岗陆建荣胡增垒胡娇刘晓文王晓泉朱杰苏州市动物卫生监督所江苏苏州215100 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

副黏病毒科的副流感病毒5型(Parainfluenza virus5,SV5)和腮腺炎病毒(Mumps virus,MuV)的基质蛋白(Matrix protein,M)都编码FPIV-like晚期结构域(Late-domain,L-domain),L-domain中的苯丙氨酸(Phenylalanine,F)对病毒出芽与复制有很重要的作用。新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)M蛋白也包含潜在的L-domain23FPIV26,但23F对NDV的出芽及复制的作用尚不明确。本试验应用反向遗传学技术,以NDV ZJ1株为母本病毒,拯救一株M蛋白F23A突变的重组病毒ZJ1F23A,并在DF1细胞上对ZJ1F23A的复制性能和细胞致病性进行评价。结果显示,ZJ1F23A在DF1上的复制水平显著低于母本病毒ZJ1,ZJ1F23A对DF1的致病性比ZJ1弱。试验结果说明NDV M蛋白23F对病毒复制及病毒的细胞致病性具有重要作用。

关键词：新城疫病毒基质蛋白晚期结构域病毒复制细胞致病性

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基于比较蛋白质组学研究新城疫病毒的入胞机制

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中国家禽 2012年第21期34卷 31-34页

作者：吴双刘秀梵王晓泉朱善元王安平王永娟洪伟鸣左伟勇江苏畜牧兽医职业技术学院江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室江苏泰州225300 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

为验证新城疫病毒(NDV)入胞过程存在胞吞途径,本研究以感染了NDV的鸡胚成纤维细胞(CEF)为研究对象,采用比较蛋白质组学研究方法,双向凝胶电泳(2-DE)结合基质辅助激光解析电离飞行时间质谱鉴定技术(MALDI-TOF-MS)分析3株NDV感染CEF后24h... 详细信息

为验证新城疫病毒(NDV)入胞过程存在胞吞途径,本研究以感染了NDV的鸡胚成纤维细胞(CEF)为研究对象,采用比较蛋白质组学研究方法,双向凝胶电泳(2-DE)结合基质辅助激光解析电离飞行时间质谱鉴定技术(MALDI-TOF-MS)分析3株NDV感染CEF后24h和48h两个时间点细胞蛋白表达动态。试验结果显示早期内体标志蛋白早期内体抗原1(EEA1)表达水平变化显著,这表明NDV可通过胞吞途径进入细胞;与其它两株病毒相比,胞吞作用在JS-5-05-Go进入细胞的过程中,可以发挥更长时间的效应。

关键词：新城疫病毒比较蛋白质组学早期内体抗原1 胞吞途径

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动物源性沙门菌的血清型、生物被膜形成能力和耐药性分析

动物源性沙门菌的血清型、生物被膜形成能力和耐药性分析

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第十六次学术研讨会

作者：孙化露姜逸李树纯陈素娟张华张晓平田艳娜吴艳涛焦库华彭大新扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室

前言沙门菌是一种重要的人兽共患致病菌,不同血清型的沙门菌对不同动物的致病性存在差异。沙门菌可形成生物被膜,细菌处于生物被膜状态可增强细菌对抗生素、热应激、消毒剂、pH和机体免疫力等的抵抗力。由于人们长期反复使用抗菌药物,... 详细信息

前言沙门菌是一种重要的人兽共患致病菌,不同血清型的沙门菌对不同动物的致病性存在差异。沙门菌可形成生物被膜,细菌处于生物被膜状态可增强细菌对抗生素、热应激、消毒剂、pH和机体免疫力等的抵抗力。由于人们长期反复使用抗菌药物,加之用药的不合理,加剧了细菌耐药的严重程度。本研究的目的旨在从不同发病动物分离沙门菌,测定其的差异,为人和动物沙门菌的防控提供理论依据。材料与方法从不同动物病料中分离细菌,以PCR方法鉴定沙门菌,结合玻片凝集法和16S rRNA序列测定确定沙门菌的血清型和分布,结晶紫染色定量法检测分离株的生物被膜形成能力,药敏试验

关键词：沙门菌生物被膜形成动物源性耐药性分析

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基因Ⅶd亚型新城疫病毒高度侵害鸡免疫系统的重要机制

基因Ⅶd亚型新城疫病毒高度侵害鸡免疫系统的重要机制

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第十六次学术研讨会

作者：胡增垒胡顺林胡娇宋庆庆丁平云朱杰刘晓文王晓泉刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室

前言:基因Ⅶd亚型新城疫病毒(Newcastledisease virus,NDV)在亚非许多国家呈优势流行。与其他强毒株相比,基因ⅦⅡd亚型NDV对鸡免疫系统侵害性更强,病变以淋巴组织广泛性坏死为特点。但是,基因Ⅶd亚型NDV这一特殊的致病表现的机制尚不... 详细信息

前言:基因Ⅶd亚型新城疫病毒(Newcastledisease virus,NDV)在亚非许多国家呈优势流行。与其他强毒株相比,基因ⅦⅡd亚型NDV对鸡免疫系统侵害性更强,病变以淋巴组织广泛性坏死为特点。但是,基因Ⅶd亚型NDV这一特殊的致病表现的机制尚不清楚。材料与方法:本研究比较两株基因Ⅶd亚型毒株(JS3/05和JS5/05)、基因Ⅳ型Herts/33和基因X型F48E8在鸡免疫系统中造成的病理变化。为确定基因Ⅶd亚型NDV对淋巴组织高度侵害的宿主机制,我们选择病变表现差异较大的两个毒株JS5/05和Herts/33感染第2天的鸡脾脏进行差异转录学组实验。我们还比较了所选四个毒株在鸡主

关键词：新城疫病毒淋巴组织免疫系统

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血管瘤型禽白血病研究进展

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中国兽药杂志 2012年第2期46卷 53-56页

作者：侯新华刘东王义左青山孙健李彬杜元钊扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病重点开放实验室江苏扬州225009 青岛易邦生物工程有限公司山东青岛266032

就血管瘤型禽白血病抗原特征、流行病学、临床及解剖症状、诊断方法和预防控制措施等几方面进行了综述。

关键词：禽白血病血管瘤研究进展

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江苏某地健康绵羊群产志贺毒素大肠杆菌体内分离株的分子流行病学及致病力

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微生物学报 2011年第5期51卷 676-683页

作者：顾丛丛薛涛徐婷婷高崧焦新安刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

【目的】探讨江苏某羊场健康绵羊体内产志贺毒素大肠杆菌的带菌和流行情况,同时就分离株的致病力和对Vero细胞的毒性作用作了研究。【方法】基于本实验室已经建立的EHEC O157:H7 EDL933W株的stx1、stx2、eaeA、hlyA四个基因的多重PCR检... 详细信息

【目的】探讨江苏某羊场健康绵羊体内产志贺毒素大肠杆菌的带菌和流行情况,同时就分离株的致病力和对Vero细胞的毒性作用作了研究。【方法】基于本实验室已经建立的EHEC O157:H7 EDL933W株的stx1、stx2、eaeA、hlyA四个基因的多重PCR检测并配合选择性增菌、平板筛选等方法对STEC进行分离鉴定。【结果】在为期6个月的连续跟踪调查中,共分离到STEC菌株107株,分离率为19.4%(107/550)。分离株属于41种O血清型、62种O:H血清型,未定型(ONT)有22株,粗糙型(OR)1株。其中属于绵羊STEC的优势血清型有O5(2株)、O91(1株)、O103(1株)。本文检测到的优势血清型为O93,stx2阳性菌株的分离率较stx1阳性菌株的分离率高,LD50测定结果表明分离株对小鼠致病力不高,受试的3个分离株均不能致小鼠死亡。对107株stx阳性分离株噬菌斑试验表明,71株阳性菌株携带噬菌体(66.3%,71/109)。受试分离株进行Vero细胞毒性试验,其中有一个菌株stx基因阳性但不能使Vero细胞产生病变。【结论】绵羊是STEC的天然宿主,可健康带菌。虽然STEC分离株对小鼠的致病力较弱,但不能排除其对人类安全的威胁。STEC携带志贺毒素基因并不意味着一定表达志贺毒素,需对志贺毒素的表达及调控机理做进一步的研究。

关键词：产志贺毒素大肠杆菌 PCR O抗原 H抗原半数致死量 Vero细胞

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神经氨酸酶、碱性聚合酶2及非结构蛋白1影响A型流感病毒致病力的分子机制研究进展

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微生物学报 2011年第1期51卷 7-13页

作者：顾敏彭大新刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

随着研究的不断深入,血凝素(HA)之外的其他蛋白在影响A型流感病毒的致病力甚至宿主特异性方面的重要作用逐渐受到关注。本文对神经氨酸酶(NA)、碱性聚合酶2(PB2)及非结构蛋白1(NS1)的相关进展作了综述,以期进一步阐明流感病毒的致病分... 详细信息

随着研究的不断深入,血凝素(HA)之外的其他蛋白在影响A型流感病毒的致病力甚至宿主特异性方面的重要作用逐渐受到关注。本文对神经氨酸酶(NA)、碱性聚合酶2(PB2)及非结构蛋白1(NS1)的相关进展作了综述,以期进一步阐明流感病毒的致病分子基础,并藉此探讨可能的宿主范围限定因素。

关键词：流感病毒 NA PB2 NS1 致病力宿主范围综述

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生物信息学在A型流感病毒研究中的应用

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病毒学报 2011年第3期27卷 298-303页

作者：顾敏曹永忠刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

生物信息学是随着人类基因组计划（Human genome project,HGP）的启动而发展起来的一门新兴学科。1995年,在HGP第一个五年总结报告中,给出了较为完整的定义：生物信息学是一门交叉科学，包含了生物信息的获取、加工、存储、分发、分析... 详细信息

生物信息学是随着人类基因组计划（Human genome project,HGP）的启动而发展起来的一门新兴学科。1995年,在HGP第一个五年总结报告中,给出了较为完整的定义：生物信息学是一门交叉科学，包含了生物信息的获取、加工、存储、分发、分析、解释等在内的所有方面，它综合运用数学、计算机科学和生物学的各种工具，来阐明和理解大量数据所包含的生物学意义。

关键词：生物信息学 A型流感病毒人类基因组计划生物学意义应用计算机科学新兴学科总结报告

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肠炎沙门氏菌鸡源株ompR基因缺失株的构建及生物学特性与亲本株的比较

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微生物学报 2011年第9期51卷 1256-1262页

作者：董洪燕彭大新焦新安张小荣陈素娟卢艳耿士忠刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

【目的】为了探讨ompR基因在肠炎沙门氏菌生物被膜形成及毒力中的作用。【方法】以肠炎沙门氏菌作为母本,运用自杀性载体pGMB151构建了ompR基因缺失株,结晶紫染色法和扫描电镜观察测定缺失株的生物被膜形成能力,细胞的吸附和侵入及小鼠... 详细信息

【目的】为了探讨ompR基因在肠炎沙门氏菌生物被膜形成及毒力中的作用。【方法】以肠炎沙门氏菌作为母本,运用自杀性载体pGMB151构建了ompR基因缺失株,结晶紫染色法和扫描电镜观察测定缺失株的生物被膜形成能力,细胞的吸附和侵入及小鼠攻毒试验测定缺失株的毒力。【结果】RT-PCR和蛋白表达证明了ompR基因缺失株构建成功;该缺失株不表达纤维素和菌毛,不形成生物被膜;上皮细胞吸附和侵入试验表明缺失株与野生株具有相同的吸附和侵入率;BALB/c鼠腹腔感染性试验表明,缺失株的半数致死量为106.67CFU,而野生株的半数致死量小于2 CFU。【结论】ompR基因既是肠炎沙门氏菌生物膜形成的调控基因,又是重要的毒力基因。

关键词：肠炎沙门氏菌生物被膜 ompR基因缺失毒力

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