检索结果-内蒙古大学图书馆

中国畜牧兽医学会2017年学术年会

作者：邓永欢薛玲胡顺林刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点实验室江苏扬州225009

引言新城疫(ND)在我国是优先防控的重大动物疫病之一.鸡胚接种是一种常用的新城疫病毒(NDV)分离诊断方法,但该方法耗时长,操作烦琐.带有绿色荧光蛋白(GFP)标记的NDV强毒株感染试验鸡后,将采集的喉头拭子、泄殖腔拭子和组织样品以不同稀...

引言新城疫(ND)在我国是优先防控的重大动物疫病之一.鸡胚接种是一种常用的新城疫病毒(NDV)分离诊断方法,但该方法耗时长,操作烦琐.带有绿色荧光蛋白(GFP)标记的NDV强毒株感染试验鸡后,将采集的喉头拭子、泄殖腔拭子和组织样品以不同稀释度接种细胞,在荧光显微镜下即可直接观察到病毒的增殖情况,且方便病毒的定量.

关键词：

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表达红色荧光蛋白重组基因VIId亚型鸭源NDV强毒株的拯救与鉴定

表达红色荧光蛋白重组基因VIId亚型鸭源NDV强毒株的拯救与鉴定

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第九次全国会员代表大会暨第十七次全国学术研讨会

作者：段志强许海旭赵佳福阮涌嵇辛勤胡顺林刘秀梵贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

引言新城疫病毒（NDV）是一种有囊膜,含有单股、负链、不分节段基因组的RNA病毒,是目前严重危害世界养禽业的重要病原之一。自1997年以来我国多个省份均有水禽感染NDV发病死亡的报道,分子流行病学研究结果显示,感染并导致水禽发病死亡... 详细信息

引言新城疫病毒（NDV）是一种有囊膜,含有单股、负链、不分节段基因组的RNA病毒,是目前严重危害世界养禽业的重要病原之一。自1997年以来我国多个省份均有水禽感染NDV发病死亡的报道,分子流行病学研究结果显示,感染并导致水禽发病死亡的主要是基因Ⅶd亚型NDV。研究表明,虽然基因Ⅶ型NDV毒株对家鸭的致病力不强,但是人工感染鹅或鸡后却能造成严重的发病

关键词： NDV 强毒株重组基因红色荧光蛋白

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新城疫病毒与其它副黏病毒基质蛋白功能的比较

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微生物学报 2016年第7期56卷 1070-1078页

作者：段志强胡顺林刘秀梵贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室贵州贵阳550025 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

近年来研究发现,副黏病毒基质蛋白(Matrix protein,M)是一种多功能病毒蛋白,在细胞内不仅能抑制宿主细胞基因的转录和翻译、调节病毒基因组的复制和转录以及招募细胞蛋白协助病毒粒子组装和出芽,还可以通过自身的泛素化和磷酸化修饰促... 详细信息

近年来研究发现,副黏病毒基质蛋白(Matrix protein,M)是一种多功能病毒蛋白,在细胞内不仅能抑制宿主细胞基因的转录和翻译、调节病毒基因组的复制和转录以及招募细胞蛋白协助病毒粒子组装和出芽,还可以通过自身的泛素化和磷酸化修饰促进病毒的复制。然而,作为副黏病毒成员之一的新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV),其M蛋白目前仅证实参与了NDV的组装和出芽释放过程,其它副黏病毒M蛋白的功能在NDV中尚不清楚。本文结合近年来国内外副黏病毒M蛋白功能的相关研究进展,将NDV与其它副黏病毒M蛋白功能进行比较,着重阐述了M蛋白在NDV毒力、复制和致病性等方面的功能和作用机制,并对NDV M蛋白功能研究中存在的问题和今后的研究方向进行了展望。

关键词：新城疫病毒副黏病毒基质蛋白组装和出芽

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2011—2013年7株鸽源新城疫病毒的生物学特性鉴定及遗传进化分析

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中国兽医学报 2016年第11期36卷 1853-1857页

作者：赵振振朱杰许海旭胡顺林刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病重点开放实验室江苏扬州225009

为了解目前鸽群中新城疫病毒（NDV）的流行情况，本研究对2011-2013年分离到的7株鸽源NDV进行了部分生物学特性的测定和遗传进化分析。结果显示，7株NDV的F蛋白裂解位点均为^122RRQKRF^117，呈典型强毒特征，但7株病毒的MDT值范围较大，... 详细信息

为了解目前鸽群中新城疫病毒（NDV）的流行情况，本研究对2011-2013年分离到的7株鸽源NDV进行了部分生物学特性的测定和遗传进化分析。结果显示，7株NDV的F蛋白裂解位点均为^122RRQKRF^117，呈典型强毒特征，但7株病毒的MDT值范围较大，从50～114h不等；ICPI从0．98～1．51不等。遗传进化分析结果表明，分离到的7株鸽源NDV分离株之间的同源性较高，且均属于VIb亚型，但与目前广泛使用的疫苗株Lasota的遗传距离较远，因此有必要研制针对鸽源VIb亚型NDV的新型疫苗。

关键词：鸽 ND F蛋白 VIb亚型

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新城疫病毒M蛋白NLS突变影响病毒的复制和致病性

新城疫病毒M蛋白NLS突变影响病毒的复制和致病性

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中国畜牧兽医学会2017年学术年会

作者：段志强许海旭嵇辛勤赵佳福倪萌萌阮涌胡顺林刘秀梵贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室贵州贵阳550025 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

引言新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)属于副黏病毒科腮腺炎病毒属成员,是一种含有单股负链不分节段基因组的RNA病毒.M蛋白是NDV基因组编码的结构蛋白中分子量最小的病毒蛋白,构成了病毒RNP与囊膜连接的支架.研究表明,M蛋白是...

引言新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)属于副黏病毒科腮腺炎病毒属成员,是一种含有单股负链不分节段基因组的RNA病毒.M蛋白是NDV基因组编码的结构蛋白中分子量最小的病毒蛋白,构成了病毒RNP与囊膜连接的支架.研究表明,M蛋白是一种细胞核-细胞质穿梭蛋白,在病毒早期感染阶段通过其携带的核定位信号(nuclear localization signal,NLS)进入细胞核,主要作用是抑制细胞基因的转录和翻译,有利于病毒基因组的复制和转录;而在感染后期则通过其核输出信号(nuclear export signal,NES)以CRM-1非依赖的方式进入细胞质,在细胞膜内侧与病毒蛋白相互作用促进子代病毒粒子的组装和出芽.国内外研究发现,NLS介导的病毒蛋白细胞核定位对病毒复制和致病性至关重要,但是到目前为止,有关M蛋白NLS突变对NDV复制和致病性的影响研究尚未见报道.本课题组通过反向遗传操作技术拯救出M蛋白NLS突变的NDV,并对突变体病毒的复制能力和致病性进行了研究.

关键词：

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两种新城疫疫苗对贵州三穗麻鸭的免疫效果比较

两种新城疫疫苗对贵州三穗麻鸭的免疫效果比较

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中国畜牧兽医学会家禽学分会第十八次全国家禽学术讨论会

作者：段志强胡焱嵇辛勤赵佳福阮涌胡顺林刘秀梵贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室贵州贵阳550025 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

1引言三穗麻鸭是我国地方四大蛋系名鸭品种之一。我们前期对贵州省三穗麻鸭群进行了新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)流行病学调查和致病性研究,发现三穗麻鸭中主要流行基因Ⅶd亚型NDV,虽然这些分离株对鸡致病力强而对鸭不致病... 详细信息

1引言三穗麻鸭是我国地方四大蛋系名鸭品种之一。我们前期对贵州省三穗麻鸭群进行了新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)流行病学调查和致病性研究,发现三穗麻鸭中主要流行基因Ⅶd亚型NDV,虽然这些分离株对鸡致病力强而对鸭不致病,但鸭在感染后的较长时间可通过喉头或泄殖腔向体外排毒,有造成其它禽群接触感染的危险。因此,本研究选取新型重组NDV灭活疫苗(A-Ⅶ株)、ND Ⅳ系灭活疫苗(LaSota株)分别对三穗麻鸭进行免疫实验,比较两种ND疫苗的最小免疫剂量、免疫鸭的抗体滴度和持续时间,以及NDV强毒株感染免疫鸭后的排毒情况,旨在为生产上有效的防控ND提供科学的参考依据。

关键词：新城疫疫苗三穗麻鸭免疫效果

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贵州省鸭源新城疫病毒强毒株的遗传变异分析及致病性研究

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畜牧兽医学报 2016年第8期47卷 1623-1634页

作者：段志强许厚强嵇辛勤陈强胡炎胡顺林刘秀梵贵州大学动物科学学院贵阳550025 贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室贵阳550025 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

为了科学理解家鸭在新城疫病毒（NDV）流行和传播中的作用,对贵州不同地区分离的5株鸭源NDV强毒株进行遗传变异分析以及对鸭和SPF鸡的致病性研究。结果显示：5株NDV分离株均属于基因Ⅶd亚型,其F蛋白裂解位点基序均为112 RRQKRF117,符合... 详细信息

为了科学理解家鸭在新城疫病毒（NDV）流行和传播中的作用,对贵州不同地区分离的5株鸭源NDV强毒株进行遗传变异分析以及对鸭和SPF鸡的致病性研究。结果显示：5株NDV分离株均属于基因Ⅶd亚型,其F蛋白裂解位点基序均为112 RRQKRF117,符合强毒株序列特征,与病毒致病性指数测定结果相符;F和HN蛋白中功能性氨基酸位点均高度保守,但在HN蛋白线性表位区有3株发生E347K突变。交叉血凝抑制试验发现分离株与传统疫苗株LaSota的抗原同源性较低（为83.3%~87.0%）,而与新型基因Ⅶ型疫苗株A-Ⅶ的抗原同源性较高（为93.5%~100%）。将5株NDV分离株以0.5mL病毒尿囊液原液通过肌肉注射感染鸭后未见明显发病死亡和病理变化,并且除脾外在其他多个组织脏器未能检测到病毒复制;而以106.0 ELD50·0.1mL-1剂量通过滴鼻点眼感染SPF鸡后6d内100%发病死亡,病死鸡表现出新城疫典型的临床症状和病理变化,病毒在多个组织脏器中均能复制且对脾、胸腺和法氏囊等免疫器官损伤严重。另外,SPF鸡攻毒后喉头和泄殖腔棉拭病毒分离率明显高于试验鸭。本研究结果表明,贵州省鸭群中流行的基因Ⅶd亚型NDV强毒株HN蛋白发生E347K突变的变异株呈上升趋势,并与传统疫苗株产生抗原差异;5株鸭源NDV强毒株对鸭和鸡致病性差异显著,虽然对鸭无明显致病性,但鸭感染后可在较长时间内通过喉头或泄殖腔向体外排毒,因此必须采取有效措施防止NDV强毒由鸭群向鸡群的传播。

关键词：新城疫病毒基因Ⅶd亚型遗传变异致病性

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线粒体蛋白质翻译延伸因子(TUFM)在不同毒力新城疫病毒感染的鸡胚成纤维细胞中的表达水平

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江苏农业学报 2016年第3期32卷 615-618页

作者：吴双朱善元王晓泉左伟勇王安平王永娟秦枫洪伟鸣刘秀梵江苏农牧科技职业学院/江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室江苏泰州225300 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

为研究线粒体蛋白质翻译延伸因子Tu(TUFM)在不同毒力新城疫病毒(NDV)感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)中表达水平的变化,运用比较蛋白质组技术分析感染了NDV的CEF差异表达的蛋白点。与24 h的阴性对照组相比,感染NDV后24 h时TUFM表达量在毒力... 详细信息

为研究线粒体蛋白质翻译延伸因子Tu(TUFM)在不同毒力新城疫病毒(NDV)感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)中表达水平的变化,运用比较蛋白质组技术分析感染了NDV的CEF差异表达的蛋白点。与24 h的阴性对照组相比,感染NDV后24 h时TUFM表达量在毒力最弱的WX-10-07-Pi感染组中显著升高;毒力最强的JS-5-05-Go引起宿主表达TUFM量随感染时间增加逐渐增强。推测TUFM的表达水平与NDV毒力强弱具有一定相关性。

关键词：线粒体蛋白质翻译延伸因子Tu 新城疫病毒表达水平毒力

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鸭源新城疫病毒SS1株全基因序列测定及遗传进化分析

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中国家禽 2016年第12期38卷 51-55页

作者：罗宇宏陈强阮涌主性段志强胡顺林刘秀梵贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025 贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室贵州贵阳550025 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

对从贵州省某三穗鸭养殖场病死鸭体内分离的1株新城疫病毒(NDV)Sheldrakeduck/China/Guizhou/SS1/2014(简称SS1株)进行部分生物学特性测定及全基因测序与分析。结果表明:SS1株的MDT、ICPI和IVPI分别为52 h、1.89和2.80,F基因编码蛋白的... 详细信息

对从贵州省某三穗鸭养殖场病死鸭体内分离的1株新城疫病毒(NDV)Sheldrakeduck/China/Guizhou/SS1/2014(简称SS1株)进行部分生物学特性测定及全基因测序与分析。结果表明:SS1株的MDT、ICPI和IVPI分别为52 h、1.89和2.80,F基因编码蛋白的裂解位点序列为^(112)R-R-Q-K-R-F^(117),HN基因编码571个氨基酸,均符合NDV强毒株特征;SS1株基因组全长为15 192 bp,各基因片段核苷酸序列与代表性基因Ⅶ型毒株ZJ1、NA-1、SF02和FP1/02相似性最高,达96.3%~98.7%,而与疫苗株V4、La Sota和Mukteswar同源性最低,为82.8%~85.4%;根据F基因序列绘制的系统进化树显示SS1株属于ClassⅡ基因Ⅶd亚型。F和HN蛋白氨基酸序列分析发现,SS1株F蛋白中和抗原位点第170位氨基酸、HN蛋白抗原区及其邻近氨基酸位点与国内当前流行的基因Ⅶd亚型NDV毒株一致,而与疫苗株有较大的差异。此外,交叉血凝抑制试验结果表明,SS1株与传统疫苗株La Sota的抗原同源性为84.5%,而与新型基因Ⅶ型疫苗株A-Ⅶ的抗原同源性为100%,表明分离株与疫苗株存在一定的抗原差异。

关键词：三穗鸭新城疫病毒全基因测序遗传进化

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KPNB1和Ran蛋白共同介导新城疫病毒基质蛋白的入核转运

KPNB1和Ran蛋白共同介导新城疫病毒基质蛋白的入核转运

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中国畜牧兽医学会2016年学术年会、中国畜牧兽医学会禽病学分会第十八次学术研讨会

作者：段志强周迪嵇辛勤许厚强赵佳福许海旭胡顺林刘秀梵贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)基质蛋白(matrix protein,M)具有明显的细胞核定位特征,但是与NDVM蛋白入核相关的细胞蛋白尚未见报道。本研究旨在鉴定参与NDVM蛋白入核的细胞蛋白,以阐明M蛋白细胞核定位的分子机制。从鸡胚成... 详细信息

新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)基质蛋白(matrix protein,M)具有明显的细胞核定位特征,但是与NDVM蛋白入核相关的细胞蛋白尚未见报道。本研究旨在鉴定参与NDVM蛋白入核的细胞蛋白,以阐明M蛋白细胞核定位的分子机制。从鸡胚成纤维细胞中分别克隆核转运受体蛋白KPNA1～KPNA6和KPNB1基因,将其构建到真核表达载体,并与表达NDV M蛋白的重组真核表达载体分别共转染HEK-293T细胞,通过免疫共沉淀方法鉴定与NDV M蛋白相互作用的核转运受体蛋白。

关键词：入核转运细胞核定位 KPNB1 Ran 新城疫病毒基质蛋白

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