检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：刘秀梵胡顺林扬州大学农业部畜禽传染病学重点实验室扬大兽医学院

当前我国及周边地区流行的新城疫病毒主要为基因Ⅶ型,而目前所使用的的疫苗主要为基因Ⅱ型La Sota株,其与流行株的遗传距离较远。疫苗株与流行株之间的基因型差异被认为是免疫禽群中新城疫强毒发生感染的主要原因之一,为了提高疫苗的免... 详细信息

当前我国及周边地区流行的新城疫病毒主要为基因Ⅶ型,而目前所使用的的疫苗主要为基因Ⅱ型La Sota株,其与流行株的遗传距离较远。疫苗株与流行株之间的基因型差异被认为是免疫禽群中新城疫强毒发生感染的主要原因之一,为了提高疫苗的免疫效力,我们成功研制出了基因Ⅶd亚型新城疫病毒致弱株,该致弱株在控制当前新城疫的发生和流行方面具有较大的优势和潜力。

关键词：新城疫病毒流行株基因型疫苗

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1株对小鼠呈高致病性H5N1亚型禽流感病毒的遴选

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免疫学杂志 2010年第2期26卷 132-135,143页

作者：董梅顾敏曹军平彭大新王希良刘秀梵军事医学科学院微生物流行病研究所免疫研究室病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 扬州大学畜牧兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室 225009

目的观察从死禽体内分离的禽流感H5N1病毒株对小鼠的致病情况,筛选一株可用于小鼠攻毒实验的H5N1毒株。方法将17株禽源H5N1病毒分别滴鼻感染6～8周龄Balb/c小鼠,观察其对小鼠的致病和致死情况。通过测定其中毒力较强一株的EID_(50)、TCI... 详细信息

目的观察从死禽体内分离的禽流感H5N1病毒株对小鼠的致病情况,筛选一株可用于小鼠攻毒实验的H5N1毒株。方法将17株禽源H5N1病毒分别滴鼻感染6～8周龄Balb/c小鼠,观察其对小鼠的致病和致死情况。通过测定其中毒力较强一株的EID_(50)、TCID_(50)、小鼠LD_(50)及濒死小鼠不同组织中病毒载量,判定其致病力;采用遗传进化分析绘制HA基因进化树,了解其进化特征。结果动物实验表明,17株高致病性禽源H5N1毒株中,仅有一株对小鼠为高致病性。该毒株TCID_(50)/100μl=7.2,EID_(50)/100μl=8.325,小鼠1 LD_(50)/100μl=6.318≈10~2EID_(50)。鼻粘膜感染4～6 d小鼠发病,表现为精神萎靡、食欲减退、竖毛、弓背等临床症状,体重明显减轻。小鼠死亡集中在发病后的2～5 d,耐过死亡者12 d完全恢复正常。从濒死感染小鼠脾、肺、鼻及脑组织中皆可检出流感病毒NS片段,病毒数载量以脑组织中最多,达3.56×10^(10)拷贝/5μl。结论筛选到一株对小鼠呈强致病性H5N1亚型禽流感毒株,可以用于禽流感疫苗交叉保护效果评价的小鼠攻击实验,也可以作为感染模型用于H5N1禽流感病毒致病机制的研究。

关键词：禽 H5N1病毒株致病性小鼠

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基于Web的新城疫病毒基因分型系统

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计算机工程 2009年第4期35卷 255-257页

作者：陆王红曹永忠张剑峰扬州大学信息工程学院扬州225009 扬州大学农业部畜禽传染病学重点实验室扬州225009

根据新城疫病毒分子进化规律,采用JSP和SQL Server技术,设计并开发出基于Web的新城疫病毒基因分型系统。该系统通过计算机自动对核酸序列分析处理,提取特征位点信息,并与分型标准进行比较,从而实现快速准确分型。有效地减少分型过程中... 详细信息

根据新城疫病毒分子进化规律,采用JSP和SQL Server技术,设计并开发出基于Web的新城疫病毒基因分型系统。该系统通过计算机自动对核酸序列分析处理,提取特征位点信息,并与分型标准进行比较,从而实现快速准确分型。有效地减少分型过程中人的参与,缩短基因分型的周期,具有较强的实用性和可扩展性。

关键词：新城疫病毒 JSP技术基因分型

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冷适应减毒B型流感病毒疫苗候选株的制备及鉴定(英文)

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生物化学与生物物理进展 2009年第3期36卷 358-363页

作者：杨鹏辉安文琪石辛甫段跃强罗德炎张鹏飞唐冲邢丽张玉静刘秀梵王希良军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 吉林大学畜牧兽医学院长春130000 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

以冷适应、温度敏感、减毒的B/Ann Arbor/1/66流感病毒株作为重配病毒骨架,对其6个内部基因片段进行了全基因合成,同时人工引入9个氨基酸突变.构建了8个基因的拯救载体,经测序获得序列准确的拯救质粒,命名为:pAB121-PB1,pAB122-PB2,pAB1... 详细信息

以冷适应、温度敏感、减毒的B/Ann Arbor/1/66流感病毒株作为重配病毒骨架,对其6个内部基因片段进行了全基因合成,同时人工引入9个氨基酸突变.构建了8个基因的拯救载体,经测序获得序列准确的拯救质粒,命名为:pAB121-PB1,pAB122-PB2,pAB123-PA,pAB124-HA,pAB125-NP,pAB126-NA,pAB127-M和pAB128-NS.在成功拯救冷适应A型流感病毒的基础上,利用反向遗传学技术成功获救了具有感染性的重配B型流感病毒株,命名为rMDV-B.该重配病毒株以B/Ann Arbor/1/66为病毒骨架,其中HA和NA来源于2006～2007年当年流行株B/Malaysia/2506/***-B在鸡胚尿囊液和MDCK细胞中的HA效价可达1∶64～1∶512.实验结果暗示:从单一供体病毒株可以产生有效的减毒活B型流感病毒疫苗候选株,能够为将来人用流感疫苗的设计提供可借鉴的模型.

关键词： B型流感病毒反向遗传学 8质粒拯救系统重组流感病毒

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新城疫病毒LaSota疫苗株的蚀斑纯化

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畜牧与兽医 2009年第5期41卷 45-47页

作者：楚电峰杜元钊刘相娥周洁刘思思朱吕昌扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病重点开放实验室江苏扬州225009 青岛易邦生物工程有限公司山东青岛266032

通过蚀斑克隆技术，对新城疫病毒LaSota疫苗株进行连续纯化，在原病毒株的基础上筛选到1株免疫原性较好的病毒纯化株，血凝效价从9log2提高到11log2，鸡胚半数感染量（EID50）从10^-9.1／0．1mL上升到10^-9.5／0．1mL。通过对纯化株的F... 详细信息

通过蚀斑克隆技术，对新城疫病毒LaSota疫苗株进行连续纯化，在原病毒株的基础上筛选到1株免疫原性较好的病毒纯化株，血凝效价从9log2提高到11log2，鸡胚半数感染量（EID50）从10^-9.1／0．1mL上升到10^-9.5／0．1mL。通过对纯化株的F基因和HN基因进行测序，并与GenBank中已发表的新城疫病毒LaSota株基因序列进行比较发现，F和HN基因核苷酸序列的同源性分别在99．5％和98．6％，氨基酸同源性分别为99．1％和96．9％；F基因裂解位点区（112—117）氨基酸组成与原疫苗株完全一致。纯化株的鸡胚平均死亡时间（MDT）在109h、1日龄雏鸡脑内接种致病指数（ICPI）为0．375，与原疫苗株进行生物学特性比较，表明该纯化株比原疫苗株更适合用于疫苗生产。

关键词：新城疫病毒 LaSota株蚀斑纯化

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抗朊蛋白单克隆抗体的免疫学特性研究

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扬州大学学报（农业与生命科学版） 2009年第4期30卷 6-10页

作者：吴晓东张永强刘雨田邹艳丽刘珊李林王志亮扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 中国动物卫生与流行病学中心-国家外来动物疫病诊断中心-国家牛海绵状脑病参考实验室山东青岛266032

以牛、羊重组朊蛋白(PrP)、正常牛、羊的脑组织匀浆、牛海绵状脑病(BSE)及羊痒病阳性的脑组织匀浆及切片为抗原,测定9株抗朊蛋白单克隆抗体的ELISA、免疫印迹及免疫组化等免疫学反应特性。结果表明:5株单抗可用于BSE及羊痒病的ELISA、... 详细信息

以牛、羊重组朊蛋白(PrP)、正常牛、羊的脑组织匀浆、牛海绵状脑病(BSE)及羊痒病阳性的脑组织匀浆及切片为抗原,测定9株抗朊蛋白单克隆抗体的ELISA、免疫印迹及免疫组化等免疫学反应特性。结果表明:5株单抗可用于BSE及羊痒病的ELISA、免疫印迹检测;3株单抗可用于BSE及羊痒病的免疫组化检测;1株单抗在免疫印迹试验中只与羊痒病PrPSc的核心片段反应,结合该株单抗所识别的抗原表位PrP第78~93氨基酸(aa),证实BSE与羊痒病PrPSc的蛋白酶K消化位点存在差异。

关键词：传染性海绵状脑病朊蛋白单克隆抗体免疫学特性

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一株野鸭源H4N6亚型禽流感病毒A/mallard/Yancheng/2005的全基因组克隆和序列分析

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畜牧兽医学报 2009年第4期40卷 548-553页

作者：彭宜薛峰李彦芳陈浩彭大新刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009 江苏出入境检验检疫局南京210001 盐城国家级珍禽自然保护区管理处盐城224000

应用流感病毒通用引物对盐城珍禽自然保护区野鸭泄殖腔棉拭子分离株禽流感病毒A/mallard/Yancheng/2005(简称Mallard/YC/2005)(H4N6)进行全基因组序列扩增,结合GenBank中的相关序列进行遗传进化分析。结果表明,Mallard/YC/2005(H4N6)HA... 详细信息

应用流感病毒通用引物对盐城珍禽自然保护区野鸭泄殖腔棉拭子分离株禽流感病毒A/mallard/Yancheng/2005(简称Mallard/YC/2005)(H4N6)进行全基因组序列扩增,结合GenBank中的相关序列进行遗传进化分析。结果表明,Mallard/YC/2005(H4N6)HA基因与A/duck/Siberia/1701/1996(H4N6)的核苷酸同源性最高(97.5%),推导的氨基酸剪切位点序列为PEKASR,为典型低致病性禽流感病毒的特征序列;神经氨酸酶(NA)、非结构蛋白(NS)均没有氨基酸缺失;基质蛋白2(M2)与宿主特异性有关的位点及碱性聚合酶2(PB2)的627位都是亲禽类细胞的氨基酸;M基因与家鸭分离株A/duck/Yangzhou/02/2005(H8N4)的核苷酸同源性为99.4%,PA基因与家鸭分离株A/duck/Jiangxi/1286/2005(H5N2)的核苷酸同源性达98.9%,说明这2个基因已经在家鸭体内存在并参与了基因重排。

关键词： Mallard/YC/2005(H4N6) 禽流感病毒全基因组序列序列分析

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H9N2亚型禽流感病毒华东分离株的生物学特性及遗传进化分析

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中国兽医科学 2009年第8期39卷 665-668页

作者：刘慧谋吴培培吴双扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

对从华东地区分离的6株鸡源H9N2亚型禽流感病毒进行了生物学特性及血凝素(HA)基因和神经氨酸酶(NA)基因的分子遗传进化分析。发现这6株病毒对SPF鸡无致病性,IVPI均为0,可被单克隆抗体4E7分为2个亚群。序列分析表明,这6株病毒的HA基因裂... 详细信息

对从华东地区分离的6株鸡源H9N2亚型禽流感病毒进行了生物学特性及血凝素(HA)基因和神经氨酸酶(NA)基因的分子遗传进化分析。发现这6株病毒对SPF鸡无致病性,IVPI均为0,可被单克隆抗体4E7分为2个亚群。序列分析表明,这6株病毒的HA基因裂解位点处的氨基酸序列均为RSSR↓GLF,Ck/HD/16/07和Ck/HD/112/05的潜在糖基化位点与其他4株不一致;NA基因为N2亚型,其中4个毒株的茎部缺失3个氨基酸,而另2个毒株无缺失。

关键词： H9N2亚型禽流感病毒抗原性血凝素神经氨酸酶

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猪源大肠杆菌(ETEC、STEC、AEEC)毒力基因及其与O抗原型的关系

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微生物学报 2008年第7期48卷 857-862页

作者：陈祥赵李祥高崧苗晓青焦新安刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室/江苏省人兽共患病学重点实验室扬州225009

【目的】揭示从我国部分地区仔猪腹泻或水肿病病猪体内分离到的300个大肠杆菌分离株所属病原型(pathotype)、毒力基因及其与O血清型的关系。【方法】O血清型采用常规的凝集试验进行测定,毒力基因采用PCR方法检测。【结果】通过对这300... 详细信息

【目的】揭示从我国部分地区仔猪腹泻或水肿病病猪体内分离到的300个大肠杆菌分离株所属病原型(pathotype)、毒力基因及其与O血清型的关系。【方法】O血清型采用常规的凝集试验进行测定,毒力基因采用PCR方法检测。【结果】通过对这300个分离株的O血清型及其毒素、紧密素和黏附素基因进行鉴定,结果显示除50株未定型、17株自凝外,测定出233个分离株的血清型,这些分离株覆盖了45个血清型,其中以O149、O107、O139、O93和O91为主,共133株,占定型菌株的57.1%;拥有estⅠ、estⅡ、elt、stx2e和eaeA基因的菌株分别为102(34.0%)、190(63.3%)、81(27.0%)、57(19.0%)和54(18.0%)株;分离株中有51株K88基因阳性(其中菌毛表达率为100%),75株F18基因阳性(其中菌毛表达率为50.7%),在K88菌株中,O149血清型与estⅠ或estⅡ+elt密切相关,在F18菌株中,O107血清型与estⅠ或estⅡ、O139血清型与stx2e紧密相关。依其毒力特征可将这些分离株分为以下6种类型:ETEC、STEC、AEEC、ETEC/STEC、AEEC/ETEC和AEEC/ETEC/STEC,分别拥有190、24、36、32、17和1个菌株,占分离株的63.3%、8.0%、12.0%、10.7%、5.7%和0.3%。通过分析这些分离株的O血清型、毒素类型和黏附素型之间的相关性:猪源ETEC以O149、O107、O93和O98等血清型为主,O149:K88菌株主要与estⅡ或estⅡ+elt肠毒素相关,O107:F18菌株主要与estⅡ相关,O93和O98血清型菌株主要与estⅡ肠毒素相关;STEC菌株以O139:F18血清型为主,拥有stx2e;AEEC菌株拥有紧密素,无明显优势血清型;ETEC/STEC菌株以O107:F18和O116:F18血清型为主,主要与estⅠ+stx2e或estⅡ+stx2e密切相关,ETEC/AEEC菌株以O91和O107血清型为主,全部拥有肠毒素estⅠ和紧密素基因。【结论】我国至少存在6种病原型的猪肠道致病性大肠杆菌,其中ETEC为我国部分地区猪大肠杆菌病的主要病原,同时其病原型日益复杂。

关键词：仔猪大肠杆菌血清型毒力基因产肠毒素大肠杆菌产志贺毒素大肠杆菌黏附与脱落性大肠杆菌

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禽病原性大肠杆菌iro和tsh基因缺失株的构建

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生物工程学报 2008年第3期24卷 401-408页

作者：陈祥刘静高崧潘志明焦新安刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏省人兽共患病学重点实验室扬州225009

通过SSH和SCOTS研究,铁系统(Iro)和温度敏感性血凝素(Tsh)在禽病原性大肠杆菌(APEC)的感染中可能发挥重要作用。基因检测发现,在243个禽源大肠杆菌分离株中,有205株为iro+菌株,其中高、中度和低致病株分别为89.8%(184/205)、8.8%(18/205... 详细信息

通过SSH和SCOTS研究,铁系统(Iro)和温度敏感性血凝素(Tsh)在禽病原性大肠杆菌(APEC)的感染中可能发挥重要作用。基因检测发现,在243个禽源大肠杆菌分离株中,有205株为iro+菌株,其中高、中度和低致病株分别为89.8%(184/205)、8.8%(18/205)和1.5%(3/205);有167株为tsh+菌株,高、中度、低致病株分别为87.4%(146/167)、12.6%(21/167)和0%(0/167),结果显示iro+或tsh+株大多数为高致病株。为了确定iro和tsh基因在APEC致病力中的作用,以APECE037株为基础,通过自杀性载体分别构建了iro和tsh基因缺失突变株E037(Δiro)、E037(Δtsh)和E037(ΔiroΔtsh)。动物感染性试验表明,突变株在鸡体内的繁殖能力和致病性均明显下降,但两个基因的协同致病作用不显著。进一步证实Iro和Tsh为APEC重要的致病因子。

关键词：禽病原性大肠杆菌铁系统温度敏感性血凝素缺失突变株

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