检索结果-内蒙古大学图书馆

中国家禽 2024年第10期46卷 81-88页

作者：翁贝崔洲昊邵红霞秦爱建钱琨扬州大学教育部禽类预防医学重点实验室江苏扬州225009 扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室江苏扬州225009 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

为制备针对家禽糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)的单克隆抗体以及了解不同细胞中GSK-3β蛋白的基础表达量,试验利用原核表达纯化的GSK-3β蛋白免疫BALB/c小鼠,真核表达GSK-3β蛋白间接免疫荧光筛选杂交瘤阳性细胞,并利用单克隆抗体检测不同... 详细信息

为制备针对家禽糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)的单克隆抗体以及了解不同细胞中GSK-3β蛋白的基础表达量,试验利用原核表达纯化的GSK-3β蛋白免疫BALB/c小鼠,真核表达GSK-3β蛋白间接免疫荧光筛选杂交瘤阳性细胞,并利用单克隆抗体检测不同禽源细胞(LMH细胞、DF-1细胞、CEF细胞)中GSK-3β蛋白表达情况。结果显示:共获得3株单克隆抗体细胞株,分别命名为4C1、5B11和8G9,其中4C1和5B11仅能结合禽源细胞中的GSK-3β,而8G9和禽源以及人源的GSK-3β都能反应;单克隆抗体4C1介导的Western bolt显示在LMH细胞中GSK-3β蛋白丰度相对最高,而RT-qPCR显示其中LMH细胞中GSK-3β基因转录水平较低。研究成功制备了禽源GSK-3β的单克隆抗体,为深入研究家禽GSK-3β的生物学功能提供良好的生物材料。

关键词：禽 GSK-3β 原核表达单克隆抗体应用

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禽呼肠孤病毒检测方法研究进展

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动物医学进展 2022年第11期43卷 69-74页

作者：钱金涵朱亭帆金文杰扬州大学教育部禽类预防医学重点实验室江苏扬州225009 扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室江苏扬州225009 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

禽呼肠孤病毒(Avian reovirus,ARV)是一种分节段的双股RNA病毒,属于呼肠孤病毒科(Reoviridae)正呼肠孤病毒属(Orthoreovirus),可感染多种禽类。近年来,该病毒引起的疾病发病率不断上升且出现了多样化的临床疾病形式,表明ARV的影响越来越... 详细信息

禽呼肠孤病毒(Avian reovirus,ARV)是一种分节段的双股RNA病毒,属于呼肠孤病毒科(Reoviridae)正呼肠孤病毒属(Orthoreovirus),可感染多种禽类。近年来,该病毒引起的疾病发病率不断上升且出现了多样化的临床疾病形式,表明ARV的影响越来越大,给养禽业造成了严重的损失。因此,需要对ARV给予更多的关注,并在感染早期通过对该病毒的快速检测从而进行紧急监测以防止该病毒的传播。论文主要通过对大量国内外文献的检索对快速检测技术和方法的原理、应用情况以及各自的优缺点进行了分类和总结,希望能为禽呼肠孤病毒的检测方法研究提供参考。

关键词：禽呼肠孤病毒(ARV) 分离与鉴定分子生物学检测方法免疫学检测方法

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鸡体内疫苗抗体选择压对H9N2亚型禽流感病毒内部基因演化的影响

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病毒学报 2019年第6期35卷 919-925页

作者：苏海龙赵宇郑丽荣李耀门张辛耘石火英扬州大学兽医学院扬州225009 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同中心扬州225009 教育部禽类预防医学重点实验室扬州225009

在我国,接种疫苗是防控H9N2亚型禽流感(Avain influenza,AI)流行的主要措施。为了解H9N2亚型禽流感病毒(Avain influenza virus,AIV)在疫苗抗体选择压下的遗传变异情况,本研究选择A/Chicken/Shanghai/F/98(H9N2,F/98)禽流感病毒分别在有和没有疫苗抗体选择压的SPF鸡体内连续传代。为了减少混合病毒对研究结果的干扰,我们建立了三个独立传代系列。结果表明,母本病毒在经过有和没有疫苗抗体选择压下连续传代后,两种模式下的传代病毒的内部基因都发生了基因突变。与没有疫苗抗体选择压下的传代病毒相比,有疫苗抗体选择压下的传代病毒氨基酸突变数量明显减少(P<0.05),肺组织分离到的传代病毒的突变氨基酸数量显著多于相同传代条件下气管中分离到的传代病毒的氨基酸突变数量(P<0.05)。此外,疫苗抗体选择压下的传代病毒V9L和V9T有4个特有突变:PB2(H366Q、A322E)和M(P154A、A246Q),没有疫苗抗体选择压下的传代病毒N9L和N9T有9个相同突变:PB2(I298Q、E526R)、PB1(T348A)、PA(L336M)、NP(G52A、L187G)、M(H23I)和NS(S81L、H85S),所有第9代次的传代病毒相同的突变有2个:PB2(R327K、Y369S)。值得注意的是,相比母本病毒没有疫苗抗体选择压下的传代病毒对鸡胚的感染力显著提高(P<0.01),而有免疫选择压下的传代病毒对鸡胚的感染力相比母本病毒变化不大(P>0.05),但丧失了致死鸡胚的能力。本研究对了解禽流感病毒在疫苗的选择压力下的演化规律,以及理解疫苗对病毒进化的影响具有重要参考意义。

关键词： H9N2亚型禽流感病毒(AIV) 抗体选择压连续传代基因变异

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Wnt信号通路在疾病中的调控作用研究进展

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中国动物传染病学报 2021年第4期29卷 31-43页

作者：施佳蕾乔丹丹何倩何慧芬秦爱建钱琨扬州大学禽类预防医学教育部重点实验室扬州225009 扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室扬州225009 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州225009

Wnt信号通路是调节胚胎发育、干细胞生长分化的重要信号通路之一,与许多疾病的发生发展紧密联系。在许多疾病中,Wnt信号通路都发生了异常的调控。本文主要介绍近年来Wnt信号通路在人类和动物疾病中的调控作用及针对信号通路的治疗方法。

关键词： Wnt信号通路疾病癌症病毒感染治疗

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鹅星状病毒江苏分离株JSSQ遗传特征分析

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微生物学通报 2022年第6期49卷 2174-2182页

作者：徐梦璐吴少鹏马水锋邵红霞钱琨万志敏叶建强秦爱建扬州大学兽医学院教育部禽类预防医学重点实验室江苏扬州225009 扬州大学兽医学院江苏省动物预防医学重点实验室江苏扬州225009 扬州大学兽医学院江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 扬州大学教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室江苏扬州225009

【背景】自2016年以来,我国山东、安徽、江苏、广东等养鹅地区暴发了一种以痛风为主要特征的急性传染病。【目的】研究引起江苏某鹅场雏鹅痛风的鹅星状病毒(goose astrovirus,GAstV)的基因组特征。【方法】从疑似患有痛风的雏鹅肝脏样... 详细信息

【背景】自2016年以来,我国山东、安徽、江苏、广东等养鹅地区暴发了一种以痛风为主要特征的急性传染病。【目的】研究引起江苏某鹅场雏鹅痛风的鹅星状病毒(goose astrovirus,GAstV)的基因组特征。【方法】从疑似患有痛风的雏鹅肝脏样品中分离到一株GAstV,命名为JSSQ,并对JSSQ全基因组序列及遗传特征进行分析。【结果】GAstV JSSQ株可在LMH细胞上稳定传代,无明显细胞病变;该毒株基因组全长7 175 nt,与其他已报道的鹅星状病毒参考株相似性为57.3%-99.1%。系统进化分析显示,JSSQ与参考毒株AHAU3亲缘关系最近,处于同一分支。重组分析显示,在GAstVJSSQ基因组中的第807和2818位点发生了2次重组,起源于GD AHAU2(major parent)和AHAU4(minor parent)。抗原表位分析显示,在ORF2区出现多处氨基酸突变,存在P64S、A224T、A228S、Q229P等独特突变,可引起抗原表位的变化。【结论】不同地区GAstV可能存在不同生物学特性,在防控中应予以注意。

关键词：鹅痛风鹅星状病毒分离鉴定遗传特征分析

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鸡星状病毒研究进展

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中国家禽 2018年第8期40卷 43-46页

作者：武宗仪孔正茹秦爱建钱琨扬州大学教育部禽类预防医学重点实验室江苏扬州225009 扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室江苏扬州225009 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

鸡星状病毒属于星状病毒科禽星状病毒属,目前尚未定种。鸡临床感染星状病毒后引发腹泻性肠炎、肾炎等症状,导致发育缓慢和生产力低下,对家禽养殖业造成了一定的损失。文章就近年来国内外对鸡星状病毒的研究进展进行综述,为鸡星状病毒的... 详细信息

鸡星状病毒属于星状病毒科禽星状病毒属,目前尚未定种。鸡临床感染星状病毒后引发腹泻性肠炎、肾炎等症状,导致发育缓慢和生产力低下,对家禽养殖业造成了一定的损失。文章就近年来国内外对鸡星状病毒的研究进展进行综述,为鸡星状病毒的后期研究以及防控提供依据。

关键词：鸡星状病毒病原学分离鉴定

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家禽beta-连环蛋白基因绝对定量PCR方法的建立及应用

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中国兽医学报 2017年第10期37卷 1904-1909页

作者：程晓薇张丹阳张杰邵红霞秦爱建钱琨扬州大学教育部禽类预防医学重点实验室江苏省动物预防医学重点实验室江苏扬州225009 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

根据GenBank中公布的原鸡beta-连环蛋白(β-catenin)参考序列设计特异性引物扩增得到β-catenin基因,并克隆到真核表达载体pcDNA3.1中作为荧光定量PCR标准品;同时利用软件设计家禽β-catenin的荧光定量PCR引物,建立检测β-catenin的绝... 详细信息

根据GenBank中公布的原鸡beta-连环蛋白(β-catenin)参考序列设计特异性引物扩增得到β-catenin基因,并克隆到真核表达载体pcDNA3.1中作为荧光定量PCR标准品;同时利用软件设计家禽β-catenin的荧光定量PCR引物,建立检测β-catenin的绝对荧光定量PCR方法。并利用该方法检测病毒感染组与非感染组1日龄雏鸡不同组织中β-catenin基因的分布和表达情况。结果显示,在感染和非感染病毒的1日龄雏鸡中,β-catenin基因在脑组织中表达水平最高,而在脾脏和法氏囊中表达水平较低。结果表明,成功建立了检测家禽β-catenin基因的绝对定量PCR方法,并检测了β-catenin基因在1日龄雏鸡不同脏器中的表达情况,为进一步研究其生物学功能提供了技术手段。

关键词： β-catenin基因荧光定量PCR 标准曲线 1日龄雏鸡

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高致病性毒力岛Irp1介导的细菌对Vero细胞黏附作用

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扬州大学学报（农业与生命科学版） 2012年第3期33卷 1-4页

作者：金文杰郑志明吉荣钱文正秦爱建扬州大学兽医学院教育部禽类预防医学重点实验室江苏扬州225009 商务部流通检测中心北京100070

高致病性毒力岛(HPI)已经在多种类型大肠杆菌中被发现。为了解HPI-Irp1在细菌致病中的作用,通过生物软件DNAStar的分析,筛选出HPI中irp1和fyuA基因上10个表位作用优势较强的区域。设计特异性引物10对,进行PCR扩增,将获得的PCR产物,插入... 详细信息

高致病性毒力岛(HPI)已经在多种类型大肠杆菌中被发现。为了解HPI-Irp1在细菌致病中的作用,通过生物软件DNAStar的分析,筛选出HPI中irp1和fyuA基因上10个表位作用优势较强的区域。设计特异性引物10对,进行PCR扩增,将获得的PCR产物,插入原核表达载体pET32a,构建重组质粒;将获得的重组质粒转化进入菌毛阴性宿主菌BL21,获得的重组菌用IPTG诱导表达后与Vero细胞混合进行体外作用。结果表明:带有irp1-1基因片段的重组菌BL21-rpET32a-irp1-1表现出对Vero细胞较强的聚集黏附作用,空载体对照和宿主菌对照均未出现相关现象。因而推测irp1-1基因片段编码的产物在细菌对宿主致病过程中,介导了细菌与宿主细胞的相互作用。

关键词：大肠杆菌高致病性毒力岛(HPI) Irp1 黏附作用

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禽白血病病毒衣壳蛋白表达载体的构建及应用

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中国家禽 2017年第18期39卷 18-22页

作者：孙舒胡海程晓薇秦爱建钱琨扬州大学教育部禽类预防医学重点实验室江苏扬州225009 扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室江苏扬州225009 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

为利用分段表达载体鉴定禽白血病病毒(ALV)衣壳蛋白单克隆抗体识别区域,构建ALV衣壳蛋白p27全长及分段真核表达载体。将实验室保存的pGEX-6p-1-p27质粒双酶切亚克隆到pcDNA3.1真核表达载体中,构建pcDNA3.1-p27全长表达质粒。同时设计引... 详细信息

为利用分段表达载体鉴定禽白血病病毒(ALV)衣壳蛋白单克隆抗体识别区域,构建ALV衣壳蛋白p27全长及分段真核表达载体。将实验室保存的pGEX-6p-1-p27质粒双酶切亚克隆到pcDNA3.1真核表达载体中,构建pcDNA3.1-p27全长表达质粒。同时设计引物,扩增p27基因1~480 bp的A片段以及241~720 bp的B片段,构建pcDNA3.1-p27A和pcDNA3.1-p27B分段表达载体,并在DF-1细胞中暂态表达,利用IFA和Western blot方法鉴定病毒衣壳蛋白单克隆抗体的识别区域。结果表明:重组质粒均能正确表达,并鉴定出两株单克隆抗体5D3和4F12的抗原识别区域均位于衣壳蛋白p27蛋白碳端161~240位氨基酸区域。研究成功构建并表达了ALV衣壳蛋白p27的全长和分段真核表达载体,并利用分段表达质粒鉴定了两株单克隆抗体的抗原识别区域,为深入研究衣壳蛋白p27的生物学功能提供了生物材料。

关键词：衣壳蛋白p27 真核表达载体单克隆抗体抗原识别区域

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江苏省某鸡场CAstV、CIAV和REV感染情况的调查及分析

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中国家禽 2017年第20期39卷 78-80页

作者：姜泊宇褚珊珊武宗仪程晓薇秦爱建钱琨扬州大学教育部禽类预防医学重点实验室江苏扬州225009 扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室江苏扬州225009 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

为研究鸡星状病毒(Chicken-origin astrovirus,CAst V)、鸡传染性贫血病毒(Chickeninfectious anemia virus,CIAV)和禽网状内皮组织增生症病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)在江苏某鸡场的流行和混合感染情况,采集该鸡场1日龄雏鸡的脏器,应用PCR和RT-PCR检测CAst V、CIAV和REV的单独感染以及混合感染情况。结果显示:1日龄雏鸡CAst V、CIAV、REV单独检出率分别为45%、37.5%和0%,其中CAst V和CIAV双重感染率为25%。表明该鸡场CAst V阳性率较高,提示养禽企业需增强对该病毒的关注。

关键词： CAstV CIAV REV 混合感染鸡江苏

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