检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医科学 2016年第10期46卷 1264-1269页

作者：施洋洋田晓彦马靖雯韦芊含邵红霞秦爱建叶建强禽类预防医学教育部重点实验室江苏省动物预防医学重点实验室扬州大学兽医学院江苏扬州225009 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

新型环形病毒AGV2最早于2011年报道。为建立AGV2血清学诊断方法,并探究其VP 3基因功能,本研究对AGV2的VP3基因进行了克隆、表达及多抗制备。通过将AGV2 VP3基因克隆进pGEX-6p-1原核表达载体,获得了可溶性GST-VP3融合表达产物,并利用纯化... 详细信息

新型环形病毒AGV2最早于2011年报道。为建立AGV2血清学诊断方法,并探究其VP 3基因功能,本研究对AGV2的VP3基因进行了克隆、表达及多抗制备。通过将AGV2 VP3基因克隆进pGEX-6p-1原核表达载体,获得了可溶性GST-VP3融合表达产物,并利用纯化的GST-VP3蛋白制备了小鼠抗GST-VP3多克隆抗体。同时构建获得了pcDNA3.1-VP3以及EGFP-VP3两个AGV2 VP 3基因真核表达载体。间接免疫荧光试验以及EGFP观察发现,AGV2的VP3蛋白及其EGFP融合蛋白EGFP-VP3在HCT116肿瘤细胞中的表达集中于细胞核,且呈散在点状分布,类似凋亡小体。这些AGV2 VP3表达载体的构建,表达产物、小鼠多克隆抗体的获得及其在肿瘤细胞中的表达分布,为进一步研制AGV2血清学诊断方法提供了材料,为深入探究AGV2 VP3的生物学功能打下了基础。

关键词： AGV2 VP3基因表达多克隆抗体

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2013年苏皖地区鹅细小病毒的分离鉴定及其VP3基因序列分析

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中国兽医学报 2014年第12期34卷 1916-1921页

作者：邵红霞吕亚楠叶建强金文杰钱琨秦爱建扬州大学兽医学院/江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心/江苏省动物预防医学重点实验室/禽类预防医学教育部重点实验室江苏扬州225009

鹅细小病毒(GPV)主要引起雏鹅和雏番鸭的高死亡率。本研究对2013年采集的苏皖地区疑似GPV感染的病鹅组织,通过鹅胚病毒分离以及PCR扩增,共分离鉴定出11株GPV病毒。这11株GPV病毒的鹅胚致死时间为43~159h。与NCBI中检索到的21个VP3进行... 详细信息

鹅细小病毒(GPV)主要引起雏鹅和雏番鸭的高死亡率。本研究对2013年采集的苏皖地区疑似GPV感染的病鹅组织,通过鹅胚病毒分离以及PCR扩增,共分离鉴定出11株GPV病毒。这11株GPV病毒的鹅胚致死时间为43~159h。与NCBI中检索到的21个VP3进行的序列分析发现,这些GPV的VP3氨基酸同源性为97.2%~100%。进化树分析表明,新分离的GPV VP3与分离于1982年的台湾GPV毒株82-0308最接近。与其他分离株VP3比较,这11株中有3株VP3中存在N35D、V261L、Y293H共突变现象。这些苏皖地区GPV毒株的分离、鉴定以及序列特征,对进一步探究苏皖地区GPV病毒的分子演化特征以及流行病学提供了材料。

关键词：鹅细小病毒分离与鉴定 PCR VP3 序列分析

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K亚群禽白血病病毒分离株全基因组测序及序列分析

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中国兽医学报 2019年第6期39卷 1091-1098页

作者：俞燕周生徐步邵红霞钱琨叶建强秦爱建扬州大学兽医学院教育部禽类预防医学重点实验室/江苏省动物预防医学重点实验室江苏扬州225009 江苏省家禽科学研究所江苏扬州225125

K亚群禽白血病病毒(ALV-K)是近年来从地方品种鸡分离鉴定的新亚群ALV。本试验在对江苏某原种鸡场保存的琅琊鸡开展禽白血病净化过程中,分离并鉴定1株ALV-K,命名为JS13LY19。为探明其基因组来源及特征,对JS13LY19分离株前病毒DNA进行了... 详细信息

K亚群禽白血病病毒(ALV-K)是近年来从地方品种鸡分离鉴定的新亚群ALV。本试验在对江苏某原种鸡场保存的琅琊鸡开展禽白血病净化过程中,分离并鉴定1株ALV-K,命名为JS13LY19。为探明其基因组来源及特征,对JS13LY19分离株前病毒DNA进行了分段克隆和测序,获得全长基因组序列,并与各亚群ALV参考株进行比对分析。结果显示,JS13LY19分离株符合复制完整型C型反转录病毒特征,缺乏肿瘤基因。其gp85基因相较于其他亚群ALV,与ALV-K参考株遗传进化关系最为接近,与ALV-K原型株JS11C1一致性最高(99.2%);而gag、pol、gp37、LTR、UTR及JS13LY19与内源性ALV显示出更高的一致性(92.0%~99.4%);其LTR U3区比大部分外源性ALV LTR少了1个CAAT enhancer盒、PRE盒、CArG盒及Y盒。JS13LY19分离株极有可能是JS11C1与内源性ALV重组产生,且具有内源性ALV LTR及U3区转录调控元件的部分缺失,可能使JS13LY19转录能力下降而致病性降低。

关键词： K亚群禽白血病病毒序列分析 LTR 转录调控元件地方品种鸡

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我国不同地方品种鸡(Gallus gallus domesticus)对柔嫩艾美耳球虫的易感性

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畜牧兽医学报 2016年第10期47卷 2098-2107页

作者：李建梅刘梅沈欣悦程旭季正剑刘丹丹殷建玫尤素兰苏一军陶建平戴亚斌中国农业科学院家禽研究所扬州225125 扬州大学兽医学院禽类预防医学教育部重点实验室扬州225009

旨在比较不同品种鸡（Gallus gallus domesticus）对柔嫩艾美耳球虫的易感性差异。选取26日龄无球虫感染的24个我国地方品种鸡和国外引进品种隐性白羽鸡各45只,分别分为2个感染组和1个非感染对照组,每组15只。感染组每只鸡嗉囊内接种1&#... 详细信息

旨在比较不同品种鸡（Gallus gallus domesticus）对柔嫩艾美耳球虫的易感性差异。选取26日龄无球虫感染的24个我国地方品种鸡和国外引进品种隐性白羽鸡各45只,分别分为2个感染组和1个非感染对照组,每组15只。感染组每只鸡嗉囊内接种1×105个孢子化柔嫩艾美耳球虫卵囊,基于感染鸡的死亡率、相对增重率、肠道病变记分、卵囊产量和抗球虫指数（ACI）等指标,评价不同鸡种对柔嫩艾美耳球虫的易感性。25个鸡种中,狼山鸡、藏鸡、大骨鸡、萧山鸡、文昌鸡、安义瓦灰鸡、白耳黄鸡、仙居鸡、大围山微型鸡和金湖乌凤鸡易感性最低,ACI介于56.80～85.76,表现为未发生死亡或死亡率低,相对增重率高,肠道病变记分低,但卵囊产量相对较高（藏鸡除外）。隐性白羽鸡、清远麻鸡、惠阳胡须鸡、固始鸡、北京油鸡、瓢鸡和汶上芦花鸡易感性最高,ACI介于-11.64～18.67之间,表现为死亡率较高（北京油鸡除外）,相对增重率较低,肠道病变记分和卵囊产量较高（固始鸡除外）。其余8个品种易感性中等,ACI介于29.81～53.36。不同品种鸡对柔嫩艾美耳球虫的易感性存在较大的差异,且肉用型品种较蛋肉兼用型品种易感性高。

关键词：地方鸡种隐性白羽鸡柔嫩艾美耳球虫易感性

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不同家禽细胞Wnt/β-catenin信号通路基础活化状态的比较

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中国兽医科学 2019年第11期49卷 1434-1439页

作者：乔丹丹程晓薇何倩秦爱建钱琨扬州大学教育部禽类预防医学重点实验室江苏扬州225009 扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室江苏扬州225009 扬州大学江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 扬州大学教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室江苏扬州225009

了解家禽细胞静息状态下Wnt/β-catenin信号通路的基础活化状态,为研究家禽Wnt信号通路提供细胞模型。利用激光共聚焦显微镜、绝对荧光定量PCR和Western-blot方法检测鸡胚成纤维细胞(CEF)、鸡胚肾细胞(CEK)、鸡成纤维永生化细胞系(DF-1... 详细信息

了解家禽细胞静息状态下Wnt/β-catenin信号通路的基础活化状态,为研究家禽Wnt信号通路提供细胞模型。利用激光共聚焦显微镜、绝对荧光定量PCR和Western-blot方法检测鸡胚成纤维细胞(CEF)、鸡胚肾细胞(CEK)、鸡成纤维永生化细胞系(DF-1)和鸡肝癌细胞系(LMH)中β-catenin蛋白的定位情况以及表达情况。同时使用双荧光素酶报告基因检测不同细胞加入激活剂后Wnt信号通路的活化情况。结果显示,CEF细胞中β-catenin基因和蛋白表达水平较低,主要位于细胞膜上,且对信号通路激活剂反应最为明显。DF-1细胞与LMH细胞中β-catenin的mRNA水平与蛋白水平均高于正常家禽细胞。结果表明,CEF细胞Wnt/β-catenin信号通路基础活化状态较低,是研究家禽Wnt相关信号通路的良好细胞模型。

关键词：家禽细胞 Wnt β-连环蛋白信号通路基础活化状态

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IgA受体FcαRI与CLK1蛋白激酶相互作用的鉴定

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中国免疫学杂志 2011年第8期27卷 696-701,717页

作者：钱琨金文杰邵红霞秦爱建扬州大学教育部禽类预防医学重点实验室江苏省动物预防医学重点实验室扬州 225009

目的:研究FcɑRI在没有FcRγ链的情况下,能否与细胞中其他蛋白结合调节细胞功能。方法:利用酵母双杂交、蛋白与蛋白相互作用、激光共聚焦、受体交联等方法研究细胞内与FcɑRI结合的分子。结果:发现FcαRI在体内和体外能够直接与hCLK1蛋... 详细信息

目的:研究FcɑRI在没有FcRγ链的情况下,能否与细胞中其他蛋白结合调节细胞功能。方法:利用酵母双杂交、蛋白与蛋白相互作用、激光共聚焦、受体交联等方法研究细胞内与FcɑRI结合的分子。结果:发现FcαRI在体内和体外能够直接与hCLK1蛋白激酶相互作用,并且确定了hCLK1所编码的386~399位氨基酸EHLAMMERILGPLP为两者相互作用的关键区域,同时交联人外周血中性粒细胞FcɑRI受体后发现,hCLK1仍然和FcɑRI结合在一起。结论:除了FcɑRI与FcRγ链相互作用引起细胞功能以外,FcɑRI与CLK1蛋白酶的相互作用可能在IgA炎症疾病反应中发挥重要作用。

关键词： FcɑR hCLK1 蛋白相互作用

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以畜禽疱疹病毒为载体的重组基因工程疫苗研究进展

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动物医学进展 2022年第8期43卷 88-93页

作者：张璐何慧芬秦爱建钱琨扬州大学教育部禽类预防医学重点实验室/江苏省动物预防医学重点实验室江苏扬州225009 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 扬州大学比较医学研究院江苏扬州225009

畜禽疱疹病毒常作为表达外源基因的活病毒载体,用于构建重组基因工程疫苗。论文从重组基因工程疫苗的常见构建方法着手,分析比较了利用不同方法构建重组疫苗的优缺点,并阐述了不同类重组病毒活载体疫苗的特征、免疫保护效果等研究现状,... 详细信息

畜禽疱疹病毒常作为表达外源基因的活病毒载体,用于构建重组基因工程疫苗。论文从重组基因工程疫苗的常见构建方法着手,分析比较了利用不同方法构建重组疫苗的优缺点,并阐述了不同类重组病毒活载体疫苗的特征、免疫保护效果等研究现状,为今后新型疫苗的研发和相关疾病的防控提供参考。

关键词：疱疹病毒重组活载体疫苗研究进展

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夹心ELISA检测牛γ-干扰素方法的建立及应用

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中国动物传染病学报 2016年第5期24卷 57-62页

作者：钱琨赵巍黄大卢邵红霞秦爱建扬州大学兽医学院扬州225009 江苏省动物预防医学重点实验室扬州225009 教育部禽类预防医学重点实验室扬州225009 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州225009

为建立检测牛γ-干扰素(Bo IFN-γ)的双夹心ELISA方法,将前期获得的针对Bo IFN-γ的单克隆抗体作为捕捉抗体进行夹心ELISA检测天然Bo IFN-γ,结果表明单克隆抗体Bo IFN-γ-6E5、Bo IFN-γ-3E1、Bo IFN-γ-3C2三株能捕捉到天然的牛γ干... 详细信息

为建立检测牛γ-干扰素(Bo IFN-γ)的双夹心ELISA方法,将前期获得的针对Bo IFN-γ的单克隆抗体作为捕捉抗体进行夹心ELISA检测天然Bo IFN-γ,结果表明单克隆抗体Bo IFN-γ-6E5、Bo IFN-γ-3E1、Bo IFN-γ-3C2三株能捕捉到天然的牛γ干扰素。经过条件摸索和优化,最终建立了以3E1/HRP-6E5为最佳组合的检测Bo IFN-γ的夹心ELISA方法。用建立的双夹心ELISA检测方法和进口试剂盒同时对66份血样进行检测,结果表明双夹心ELISA方法和进口试剂盒检测结果的符合率达95.45%,说明该方法能有效地对牛结核病γ-干扰素进行检测。

关键词：牛γ-干扰素双夹心ELISA 应用

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禽白血病病毒衣壳蛋白p27基因绝对定量PCR方法的建立及应用

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中国家禽 2015年第20期37卷 16-20页

作者：胡海钱琨张丹阳石亚运张杰邵红霞金文杰秦爱建扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室江苏扬州225009 扬州大学教育部禽类预防医学重点实验室江苏扬州225009 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

研究旨在建立一种检测禽白血病病毒(ALV)衣壳蛋白p27(ALV-p27)基因实时荧光定量PCR的方法。通过设计ALV-p27特异性的荧光定量PCR引物扩增基因并制备质粒标准品,同时建立检测病毒衣壳蛋白p27基因的实时荧光定量PCR方法,并利用该方法检测... 详细信息

研究旨在建立一种检测禽白血病病毒(ALV)衣壳蛋白p27(ALV-p27)基因实时荧光定量PCR的方法。通过设计ALV-p27特异性的荧光定量PCR引物扩增基因并制备质粒标准品,同时建立检测病毒衣壳蛋白p27基因的实时荧光定量PCR方法,并利用该方法检测6日龄胚胎感染,1日龄出壳雏鸡不同组织中p27基因的分布和表达情况。结果表明,ALV-p27基因在1日龄雏鸡脑组织中表达水平最高,而在胸腺组织中表达水平最低。研究建立的检测ALV-p27基因绝对定量PCR方法为进一步研究其生物学功能提供了一种技术手段。

关键词：禽白血病病毒 p27基因荧光定量PCR

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马立克氏病病毒RB1B株UL14蛋白原核表达及多抗血清制备

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中国动物传染病学报 2013年第3期21卷 8-12页

作者：徐文财刘秋秦爱建胡序明吴庚华孙苹钱琨邵红霞金文杰扬州大学教育部禽类预防医学重点实验室扬州225009 扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室扬州225009

为研究UL14蛋白在马立克氏病病毒感染过程中的生物学作用,本文以RB1B毒株感染的鸡胚成纤维细胞基因组DNA为模板,经PCR扩增出UL14基因,然后克隆入pET32a载体,转化BL21(DE3)工程细菌且经IPTG诱导进行原核表达。结果显示,pET32a-UL14重组... 详细信息

为研究UL14蛋白在马立克氏病病毒感染过程中的生物学作用,本文以RB1B毒株感染的鸡胚成纤维细胞基因组DNA为模板,经PCR扩增出UL14基因,然后克隆入pET32a载体,转化BL21(DE3)工程细菌且经IPTG诱导进行原核表达。结果显示,pET32a-UL14重组质粒在大肠杆菌中表达,表达的重组蛋白具有可溶性。IFA分析证实,用此融合蛋白免疫BALB/c小鼠后获得的多抗血清能与MDV RB1B感染的CEF细胞发生特异性反应。本研究结果为UL14蛋白的生物学功能研究提供了条件。

关键词：马立克氏病病毒 UL14蛋白原核表达

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