检索结果-内蒙古大学图书馆

上海畜牧兽医通讯 2013年第4期 2-5页

作者：万小颖沈杰施丽娟王文洲秦立志吴信生扬州大学动物科学与技术学院扬州225009 江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室扬州225009

本研究对兔IL-10基因序列进行克隆并进行生物信息学分析,旨在为该基因的深入研究提供依据。结果表明,兔与其他哺乳动物的IL-10基因在CDS和氨基酸序列上相似性都较高;与鸡和斑马鱼的CDS序列没有同源性,且氨基酸序列同源性很低。对兔IL-1... 详细信息

本研究对兔IL-10基因序列进行克隆并进行生物信息学分析,旨在为该基因的深入研究提供依据。结果表明,兔与其他哺乳动物的IL-10基因在CDS和氨基酸序列上相似性都较高;与鸡和斑马鱼的CDS序列没有同源性,且氨基酸序列同源性很低。对兔IL-10蛋白的软件预测分析表明,该蛋白是一种不稳定的疏水性分泌蛋白,富含磷酸化位点,有8个优势B细胞抗原表位。本研究为该基因的深入研究以及探明IL-10的合成分泌机制和网络调控机理提供了理论依据。

关键词： IL-10基因相似性软件预测

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miR-192和miR-215在梅山猪不同组织中的表达及其靶基因分析

miR-192和miR-215在梅山猪不同组织中的表达及其靶基因分析

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中国畜牧兽医学会2013年学术年会

作者：王瑾刘颖董文华訾臣吴圣龙包文斌扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室

引言课题组运用高通量测序技术在抵抗型和敏感型断奶仔猪全同胞配对组的十二指肠中筛选出差异极显著的miRNA——miR-192和miR-215,本研究进一步分析这两种miRNA在梅山猪11个组织中的相对表达情况,并对它们的靶基因进行初步预测及分析,... 详细信息

引言课题组运用高通量测序技术在抵抗型和敏感型断奶仔猪全同胞配对组的十二指肠中筛选出差异极显著的miRNA——miR-192和miR-215,本研究进一步分析这两种miRNA在梅山猪11个组织中的相对表达情况,并对它们的靶基因进行初步预测及分析,为进一步阐明miR-192和miR-215的生物学功能及其与F18大肠杆菌抗性间的关系提供参考。材料方法试验所用6头35日龄梅山猪选自昆山市梅山猪保种有限公司,屠宰后立即采集心、肝、脾、肺、肾、胃、肌肉、胸腺、淋巴、十二指肠和空肠的组织样,提取各组织总RNA并稀释至2 ng/μL。以U6为内参,在mirbase上查找U6、miR-192和miR-215的成熟体序列,定制相应的反转录试剂盒及定量试剂盒。结果与讨论miR-192在肝、肾、十二指肠和空肠中表达量较高,在胃和肌肉中表达量次之,在心、脾、肺、胸腺和淋巴中表达量较低;miR-215在肾、十二指肠和空肠中表达量较高,在肝中表达量次之,在心、脾、肺、胃、肌肉、胸腺和淋巴中表达量较低。搜索TargetScan数据库得到miRNA与靶基因间的关系,将所得靶基因与本课题组前期表达谱芯片上的差异基因取交集进行进一步筛选后得到miR-192及miR-215调控的靶基因,均为ALCAM、DLG5、FRMD4B、MIPOL1和ZFHX3。miR-192和miR-215二者同源,均为肿瘤抑制因子,它们共同的靶基因DLG5等在维持人类肠道上皮细胞结构完整性和炎症性肠炎的发生中发挥了重要的遗传效应,结合本研究结果及生物信息学分析表明,miR-192和miR-215在断奶仔猪F18大肠杆菌抗性过程中发挥了重要的调控作用。因此,构建miR-192和miR-215及其靶基因的调控网络,进一步分析关键靶基因的功能,对于阐明这两种miRNA及其关键靶基因在梅山断奶仔猪F18大肠杆菌抗性的调控和分子机制具有重要的作用。

关键词： miR-192 miR-215 梅山猪组织靶基因

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大白猪MUC4基因A243G位点作为抗性遗传标记的可行性分析

大白猪MUC4基因A243G位点作为抗性遗传标记的可行性分析

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中国畜牧兽医学会2013年学术年会

作者：苏先敏赵乔辉朱世平訾臣包文斌吴圣龙扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室

引言MUC4基因最有可能作为F4ab/F4ac受体基因的候选基因。鉴于前期研究显示MUC4基因第17内含子A243G位点与ETEC F4ac抗性/易感性显著相关,本研究以大白猪为研究对象,分析该位点与一般抗病力指标和部分重要经济性状的关系,探讨将该酶切... 详细信息

引言MUC4基因最有可能作为F4ab/F4ac受体基因的候选基因。鉴于前期研究显示MUC4基因第17内含子A243G位点与ETEC F4ac抗性/易感性显著相关,本研究以大白猪为研究对象,分析该位点与一般抗病力指标和部分重要经济性状的关系,探讨将该酶切位点标记运用于大白猪抗病育种实践的可行性,为今后有效遗传标记的确定和标记辅助选择提供依据和参考。材料方法大白猪138头采自常州康乐农牧有限公司,利用PCR-RFLP的方法分析A243G位点多态性。利用Procarta immunoassay kit测定35日龄断奶仔猪血清中8个重要细胞因子(IFN-γ、IL-1β、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、TGF-β和TNF-α)的水平。测定试验猪的生长速度(换算成100kg体重日龄)、背膘厚、眼肌厚以及第1至4胎次的总产仔数、产活仔数和断奶仔猪数。利用SPSS16.0软件分析基因型与重要经济性状的关系。结果与讨论本试验在大白猪群体中检测到2种等位基因,共3种基因型,且A为优势等位基因。大白猪MUC4基因A243G位点多态性与细胞因子水平的关联分析结果表明,GG基因型的IL-8、IL-10水平显著高于AA和AG(P<0.05),说明GG基因型个体可能具有更强的抗病能力;GG基因型的100kg体重日龄显著高于AA和AG(P<0.05),说明GG基因型个体育肥期生长速度较慢;3种基因型对应的其他细胞因子水平、背膘厚、眼肌厚以及第1至4胎次繁殖性能间差异不显著(P>0.05),提示针对大白猪群体MUC4基因HhaI酶切位点的分子选育会在一定程度上提高机体的抗病能力,不会对机体其它细胞因子调控的一般抗病力、瘦肉率和繁殖性能产生显著的影响,但是可能会在一定程度上影响群体的生长速度。

关键词：大白猪 MUC4基因免疫指标经济性状

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肌肉生长抑制素基因5′调控区的多态性对边鸡生长和繁殖性状的遗传效应

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中国家禽 2013年第2期35卷 11-14页

作者：刘艳纽广林张跟喜张丽丁馥香王金玉江苏省江都畜牧兽医站江苏扬州225200 扬州大学动物科学与技术学院江苏扬州225009 江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009 山西省农业科学院畜牧兽医研究所山西太原030032

本研究采用PCR-SSCP技术检测边鸡肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)基因5′调控区的单核苷酸多态性,并与边鸡的生长和繁殖性状进行关联分析。结果表明:在MSTN基因5′调控区检测到2个突变(A326G、C334G);6～8周龄,KK型的体重显著高于JJ和JL... 详细信息

本研究采用PCR-SSCP技术检测边鸡肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)基因5′调控区的单核苷酸多态性,并与边鸡的生长和繁殖性状进行关联分析。结果表明:在MSTN基因5′调控区检测到2个突变(A326G、C334G);6～8周龄,KK型的体重显著高于JJ和JL型(P<0.05);14周龄,KK和LL型的体重显著高于JL型(P<0.05);16周龄,KK型的体重显著高于JJ、JK和JL型(P<0.05);18周龄,KK型的体重极显著高于JL型(P<0.01),显著高于JJ和JK型(P<0.05),LL型的体重显著高于JL型(P<0.05),KK型的开产体重显著高于JJ和JL型(P<0.05);不同基因型对其余4个繁殖性状(开产日龄、开产蛋重、300日龄产蛋数以及300日龄蛋重)均无显著影响。结果提示,MSTN基因可能是影响边鸡生长性状的一个主要候选基因。

关键词：边鸡肌肉生长抑制素基因 PCR—SSCP 生长性状繁殖性状

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卡尼鄂拉蜂zinc transporter 7-like基因表达水平变化研究

卡尼鄂拉蜂zinc transporter 7-like基因表达水平变化研究

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第十届海峡两岸蜜蜂与蜂产品学术研讨会暨首届全国蜂产业高峰论坛

作者：沈杰刘振国沈芳吉挺扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州 225009

本研究旨在克隆卡尼鄂拉蜂锌转运蛋白-7相似基因(Zinc Transporter 7-like,ZnT-7-1ike),制备ZnT-7-1ike多克隆抗体,了解该基因在卡尼鄂拉蜂王浆腺中不同时期的差异表达情况。运用RT-PCR法从卡尼鄂拉蜂王浆腺总RNA中扩增ZnT-7-1ike基因,... 详细信息

本研究旨在克隆卡尼鄂拉蜂锌转运蛋白-7相似基因(Zinc Transporter 7-like,ZnT-7-1ike),制备ZnT-7-1ike多克隆抗体,了解该基因在卡尼鄂拉蜂王浆腺中不同时期的差异表达情况。运用RT-PCR法从卡尼鄂拉蜂王浆腺总RNA中扩增ZnT-7-1ike基因,经过生物信息学分析,为避开跨膜结构的干扰,选择克隆其部分序列(273bp)作为多肽免疫序列。将其亚克隆入原核表达载体pGEX-4T-1,转入大肠杆菌BL21 (DE3)中诱导表达获得融合蛋白,然后将融合蛋白纯化后免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,分别用间接ELISA和Western Blot检测抗体的效价和特异性,最后采用实时荧光定量RT-PCR以及Western Blot技术检测该基因在不同日龄王浆腺中的相对表达量。结果,克隆得到卡尼鄂拉蜂ZnT-7-1ike基因,大小为1065 bp；SDS-PAGE电泳结果显示融合蛋白成功表达；制备的多克隆抗体效价高达1：64 000,且具有很高的特异性：该基因在卡尼鄂拉蜂5个日龄中的转录情况存在较大差异,表现为3日龄最高,12日龄最低；ZnT-7-1ike蛋白表达与转录水平基本一致。成功克隆了卡尼鄂拉蜂ZnT-7-1ike基因,制备了兔抗蜂ZnT-7-1ike多克隆抗体,并在转录和翻译两个水平上测定了ZnT-7-1ike在卡尼鄂拉蜂王浆腺中不同时期的相对表达量,为深入研究卡尼鄂拉蜂ZnT-7-1ike基因的功能奠定了基础。

关键词：锌转运蛋白-7相似基因克隆抗体制备差异表达

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京海黄鸡MyoG和Myf5基因在不同组织中的表达分析

京海黄鸡MyoG和Myf5基因在不同组织中的表达分析

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第十七次全国动物遗传育种学术讨论会

作者：唐莹王金玉张跟喜樊庆灿张涛陈学森江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州 225009 扬州大学动物科学与技术学院江苏扬州 225009

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FUT1基因启动子区甲基化及其与mRNA表达关系分析

FUT1基因启动子区甲基化及其与mRNA表达关系分析

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中国畜牧兽医学会2013年学术年会

作者：郑先瑞朱世平赵乔辉吴圣龙包文斌江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室扬州大学动物科技学院江苏省现代种猪分子选育工程技术研究中心

引言α-(1,2)岩藻糖转移酶基因1是控制F18大肠杆菌粘附的候选基因,然而在国外猪种中已经运用的FUT1基因编码区功能位点在中国地方猪群体中呈极端偏态分布。DNA甲基化在基因表达调控方面发挥重要作用。目前各权威数据库中缺少猪FUT1基因... 详细信息

引言α-(1,2)岩藻糖转移酶基因1是控制F18大肠杆菌粘附的候选基因,然而在国外猪种中已经运用的FUT1基因编码区功能位点在中国地方猪群体中呈极端偏态分布。DNA甲基化在基因表达调控方面发挥重要作用。目前各权威数据库中缺少猪FUT1基因启动子区域序列的相关信息,通过对FUT1基因启动子区克隆和甲基化修饰的研究,可为FUT1基因对F18大肠杆菌抗性的调控机理研究提供新的途径。材料和方法分别选取从初生到断奶前后的8、18和35日龄(断奶日龄)苏太仔猪各5头,采集十二指肠组织,提取DNA和RNA。设计特异性引物,经过两次染色体步移扩增FUT1基因启动子区序列;对获得的序列进行CpG岛、转录因子结合位点进行预测分析;运用BSP方法进行甲基化状态检测;利用Real-time方法进行定量检测。结果与讨论本研究首次获得了FUT1基因上游1150 bp的序列,该序列具备启动子的多种特征元件和多个转录因子结合位点,如Sp1、CAAT box和EARLY-SEQ1等。其中Sp1是哺乳动物基因转录活化的必须因子,可与GC-box结合而发挥转录激活作用。如果其结合位点中含有CG位点,该位点的甲基化将直接影响Sp1与DNA的结合,进而影响基因表达;同样EARLY-SEQ1也是如此。35日龄十二指肠甲基化程度显著低于18和8日龄(P<0.05),35日龄FUT1基因表达显著高于18和8日龄(P<0.05),FUT1基因CpG岛甲基化程度与mRNA表达量显著呈负相关(P<0.05)。FUT1基因在35日龄时可能通过CpG岛区关键位点去甲基化使得基因表达量上升,并在细胞表面形成受体,F18大肠杆菌识别并粘附在FUT1受体上,导致机体发病。FUT1基因可能通过CpG岛区甲基化修饰来调控机体对F18大肠杆菌的抗性。

关键词：猪 FUT1基因克隆启动子区甲基化 mRNA表达

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两品种兔皮肤Shh基因的表达规律研究

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中国草食动物科学 2013年第4期33卷 5-8页

作者：孙露露黄冬维陈胜吴信生赵辉玲安徽省农业科学院畜牧兽医研究所合肥230031 江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室扬州225009 扬州大学动物科学与技术学院江苏225009

采用实时荧光定量PCR技术研究Shh基因在皖系长毛兔和比利时兔不同周龄皮肤中的表达规律,结果表明：Shh基因在两个兔品种中的表达规律并不完全一致,但均在毛生长旺盛期表达量相对较高。Shh基因在皖系长毛兔0~22周龄中的表达量均相对较高... 详细信息

采用实时荧光定量PCR技术研究Shh基因在皖系长毛兔和比利时兔不同周龄皮肤中的表达规律,结果表明：Shh基因在两个兔品种中的表达规律并不完全一致,但均在毛生长旺盛期表达量相对较高。Shh基因在皖系长毛兔0~22周龄中的表达量均相对较高,在比利时兔中0~6周龄时表达量相对较高,8～22周龄时表达量较低。由此推测Shh基因与家兔毛生长相关。

关键词：皖系长毛兔比利时兔 Shh基因实时荧光定量PCR 表达

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睾丸注射法制备携带山羊H-FABP基因的转基因小鼠

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遗传 2012年第6期34卷 727-735页

作者：阴彦辉孙敏陈庭锋张亚妮朱才业李伟李碧春扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室扬州225009

为探究睾丸注射法制备转基因动物的可能性,文章将携带有山羊心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)和绿色荧光蛋白标签的重组载体经脂质体包裹后随机打点注射小鼠睾丸。对实验小鼠进行睾丸切片、精子荧光检测以及精子DNA检测,证实外源基因在亲... 详细信息

为探究睾丸注射法制备转基因动物的可能性,文章将携带有山羊心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)和绿色荧光蛋白标签的重组载体经脂质体包裹后随机打点注射小鼠睾丸。对实验小鼠进行睾丸切片、精子荧光检测以及精子DNA检测,证实外源基因在亲代小鼠体内成功表达。睾丸注射后小鼠与正常母鼠交配产生的F1代,以及F1代自交产生的F2代在不同水平均可检测到外源基因的成功表达,阳性率分别为4%和30.23%。研究结果说明睾丸注射是一种制备转基因动物行之有效的方法,且外源基因可以稳定遗传。该方法的完善和成熟对于动物转基因以及动物性状改良和育种具有理论和实践意义。

关键词：睾丸注射转基因小鼠心脏型脂肪酸结合蛋白

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不同转座子在哺乳动物细胞和胚胎中转座活性研究

不同转座子在哺乳动物细胞和胚胎中转座活性研究

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第十七次全国动物遗传育种学术讨论会

作者：薛松磊李奎沈丹谢雨绣周家庆高波崔文涛牟玉莲宋成义崔恒宓中国农业科学院北京畜牧兽医研究所/农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室北京100094 扬州大学表观遗传学与表观基因组学研究所/江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所/农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室北京100094 扬州大学表观遗传学与表观基因组学研究所/江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009

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