检索结果-内蒙古大学图书馆

中国实验血液学杂志 2025年第2期33卷 491-497页

作者：杨兰凌玲杨帆杨蕾戴志晨郁多男扬州大学医学院/江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室江苏扬州225009

目的:探讨microrna-144(miR-144)在β地中海贫血(β-thal)中的表达及作用。方法:通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法分析miR-144在小鼠红白血病(MEL)细胞和小鼠胚胎肝来源的红系前体细胞分化过程中的表达情况;qRT-PCR法检测野生型(WT)小鼠... 详细信息

目的:探讨microrna-144(miR-144)在β地中海贫血(β-thal)中的表达及作用。方法:通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法分析miR-144在小鼠红白血病(MEL)细胞和小鼠胚胎肝来源的红系前体细胞分化过程中的表达情况;qRT-PCR法检测野生型(WT)小鼠和β-thal小鼠外周血和14.5 d胚胎肝细胞中miR-144的表达水平以及β地中海贫血患者外周血中miR-144的表达水平;流式细胞术分析轻度和重度β-thal小鼠外周血中Ter119和CD71双阳性细胞的比例变化,并对比轻度和重度β-thal小鼠和患者外周血中miR-144的表达水平;分选得到WT小鼠和β-thal小鼠的骨髓有核红细胞,通过基因芯片分析miR-144潜在靶基因的表达水平。结果:在小鼠MEL细胞和胚胎肝细胞向红系定向分化过程中,miR-144的表达水平逐步升高(r_(MEL)=0.97,r_(胚胎肝)=0.86);与WT小鼠相比,β-thal小鼠外周血以及14.5 d胚胎肝细胞中miR-144表达水平明显升高(P<0.05);与健康对照组相比,β地中海贫血患者外周血中miR-144表达水平明显升高(P<0.05);重度β-thal小鼠和人外周血中miR-144的表达水平较轻度β-thal小鼠和人均明显升高(P<0.05);β-thal小鼠有核红细胞中miR-144的潜在靶基因相较于WT组表达水平明显下降。结论:miR-144在红系发育过程中逐渐升高,且相较于轻度β-thal,重度β-thal外周血中miR-144的表达水平更高,miR-144有望成为临床β-thal的辅助诊断指标。

关键词： miR-144 红系分化 β地中海贫血

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Obg样ATP酶1促进人B细胞淋巴瘤Romas细胞生长的机制研究

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中国病理生理杂志 2024年第4期40卷 577-585页

作者：张毅王鑫许晗魏子辰庞磊赵明超郁多男扬州大学医学院/江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室江苏扬州225009 扬州大学附属医院消化内科江苏扬州225003

目的:探讨Obg样ATP酶1(Obg-like ATPase 1,OLA1)基因在人B细胞淋巴瘤Romas细胞发生发展过程中的作用机制。方法:利用基因表达谱数据交互分析(Gene Expression Profiling Interactive Analysis,GEPIA)数据库,对弥漫性大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)组织中OLA1基因的差异表达进行分析,并考察GSE181063数据库中OLA1的表达对患者生存期的影响。采用感染逆转录病毒的方法,在Romas细胞中构建OLA1基因稳定敲减(OLA1-sh)和阴性对照细胞系。为判定敲减OLA1对Romas细胞生长机制的影响,采用细胞计数法、CCK-8法、小鼠皮下成瘤实验以及Ki67免疫组化染色检测细胞活力和增殖,流式细胞术检测细胞周期及凋亡,TUNEL荧光染色检测细胞凋亡。通过TCGA数据库中48例DLBCL患者的差异基因,分析OLA1基因与细胞周期和凋亡相关基因的关联。RT-qPCR法检测细胞周期及凋亡相关基因,Western blot检测细胞周期及凋亡相关蛋白。结果:OLA1基因在DLBCL中呈高表达(P<0.05),敲减OLA1能显著抑制Romas细胞的增殖,阻滞细胞周期并诱导其凋亡(P<0.05或P<0.01)。此外,敲减OLA1还能促进Bax的mrna及蛋白表达,抑制细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶6(cyclin-dependent kinase 6,CDK6)、细胞周期蛋白E1(cyclin E1)和BCL2的mrna及蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。结论:敲减OLA1基因能够显著抑制人B细胞淋巴瘤Romas细胞的生长,其作用机制可能涉及细胞周期的阻滞及细胞凋亡的诱导。

关键词： Obg样ATP酶1 弥漫性大B细胞淋巴瘤 Romas细胞细胞凋亡细胞周期

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超保守rna uc.102-uc.106及其宿主基因OLA1在不同组织中的差异表达

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中国病理生理杂志 2024年第8期40卷 1361-1368页

作者：王鑫张毅许晗魏子辰庞磊赵明超郁多男扬州大学医学院/江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室江苏扬州225009 扬州大学附属医院消化内科江苏扬州225003

目的:本研究旨在探究超保守rna uc.102-uc.106基因簇及其宿主基因Obg样ATP酶1(OLA1)在C57BL/6J小鼠不同组织器官中的表达差异。方法:选取5只8~10周龄的健康雄性C57BL/6J小鼠,在正常生理条件下采集不同组织器官(包括肝脏、睾丸、骨髓、... 详细信息

目的:本研究旨在探究超保守rna uc.102-uc.106基因簇及其宿主基因Obg样ATP酶1(OLA1)在C57BL/6J小鼠不同组织器官中的表达差异。方法:选取5只8~10周龄的健康雄性C57BL/6J小鼠,在正常生理条件下采集不同组织器官(包括肝脏、睾丸、骨髓、大脑、肾脏、血液、肺、结肠、胸腺、脾脏、胃、心脏、淋巴结和膀胱)。同时使用磁珠分选技术提取骨髓血细胞,包括B细胞、巨噬细胞、有核红细胞和成熟红细胞。通过RT-qPCR技术,以GAPDH作为内参照,检测uc.102-uc.106和OLA1 mrna的表达量。结果:OLA1 mrna在C57BL/6J小鼠大脑、淋巴结、睾丸和胸腺中呈高水平表达,在肝脏、脾脏、肺、结肠和外周血中呈低水平表达(P<0.05)。uc.102-uc.106的表达趋势与OLA1的mrna表达基本相反,但在睾丸组织中两者均呈高水平表达(P<0.05)。在血细胞中,OLA1和uc.102-uc.106在B细胞中的表达水平最高,在成熟红细胞中的表达水平最低(P<0.05)。结论:OLA1基因和uc.102-uc.106基因簇在C57BL/6J小鼠的不同组织器官及血细胞中均有表达且存在差异。值得注意的是,OLA1基因和uc.102-uc.106基因簇在小鼠睾丸中均呈高水平表达,表明OLA1基因和uc.102-uc.106基因簇可能与雄性小鼠的生殖功能密切相关。

关键词：超保守rna uc.102-uc.106基因簇 OLA1基因 C57BL/6J小鼠

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Ywhab通过靶向Hsp90aa1抑制小鼠B细胞淋巴瘤38B9细胞生长

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中国病理生理杂志 2024年第3期40卷 395-403页

作者：魏子辰张毅许晗王鑫谷婷庞磊赵明超郁多男扬州大学医学院/江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室江苏扬州225009 扬州大学附属医院消化内科江苏扬州225003

目的:研究Ywhab在小鼠B细胞淋巴瘤发生发展中的作用,并探讨其可能的分子机制。方法:使用生物信息学分析Ywhab与弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的相关性。在小鼠B细胞淋巴瘤38B9细胞中感染逆转录病毒构建Ywhab基因过表达细胞系,并采用RT-qPC... 详细信息

目的:研究Ywhab在小鼠B细胞淋巴瘤发生发展中的作用,并探讨其可能的分子机制。方法:使用生物信息学分析Ywhab与弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的相关性。在小鼠B细胞淋巴瘤38B9细胞中感染逆转录病毒构建Ywhab基因过表达细胞系,并采用RT-qPCR和Western blot验证Ywhab的mrna及蛋白(14-3-3β)水平;通过细胞计数法、CCK-8法和小鼠皮下成瘤实验检测Ywhab过表达对38B9细胞在体内外生长的影响;RT-qPCR和Western blot检测细胞凋亡相关蛋白的表达;应用蛋白质免疫共沉淀联合蛋白质谱(CoIP-MS)筛选与14-3-3β特异性结合的蛋白并采用Western blot及分子对接分析进行验证。结果:Ywhab基因在DLBCL中低表达,其低表达预示DLBCL患者的临床预后较差。与正常小鼠骨髓B细胞相比,Ywhab在38B9细胞中低表达。Ywhab过表达能在体内外诱导38B9细胞凋亡,促进凋亡蛋白Puma、Noxa和Bax的mrna及蛋白表达,抑制抗凋亡蛋白Bcl2的mrna及蛋白表达(P<0.05)。14-3-3β蛋白能特异性结合Hsp90aa1蛋白并抑制其表达,从而促进38B9细胞凋亡。结论:Ywhab能够显著诱导小鼠B细胞淋巴瘤38B9细胞凋亡,其机制可能是通过靶向抑制Hsp90aa1蛋白表达来实现的。

关键词： Ywhab基因 14-3-3β蛋白弥漫性大B细胞淋巴瘤 38B9细胞细胞凋亡 Hsp90aa1蛋白

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ROS及Nrf2相关抗氧化酶在红系发育中动态变化的研究

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中国实验血液学杂志 2023年第1期31卷 247-253页

作者：杨蕾吴凡凌玲郁多男扬州大学医学院江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室江苏扬州225009

目的:研究活性氧自由基(ROS)及Nrf2相关因子在红系细胞发育过程中表达水平的变化和作用。方法:流式细胞术检测野生型小鼠外周血红细胞对强氧化剂过氧化氢的敏感性。通过流式分选得到不同发育阶段的骨髓红细胞并检测ROS水平。RT-q PCR方... 详细信息

目的:研究活性氧自由基(ROS)及Nrf2相关因子在红系细胞发育过程中表达水平的变化和作用。方法:流式细胞术检测野生型小鼠外周血红细胞对强氧化剂过氧化氢的敏感性。通过流式分选得到不同发育阶段的骨髓红细胞并检测ROS水平。RT-q PCR方法检测骨髓红细胞各个发育阶段中Nrf2及相关抗氧化酶表达水平的变化。在Nrf2敲除小鼠中检测外周血和骨髓有核红细胞的ROS水平。体外实验检测野生型小鼠14.5 d胚胎肝细胞分选后的红系前体细胞在体外分化培养过程中Nrf2的表达水平。结果:野生型小鼠外周血中,过氧化氢处理后的网织红细胞ROS水平升高4倍左右,成熟红细胞ROS水平升高7倍左右(P<0.01)。在骨髓红细胞中,随着细胞发育成熟,ROS水平逐渐降低(r=0.85),而Nrf2(r=0.99)及相关抗氧化因子表达水平逐渐增高。与野生型小鼠相比,Nrf2敲除小鼠外周血红细胞和骨髓有核红细胞中的ROS水平均显著升高(P<0.01)。Nrf2在胚胎肝细胞分选后的红系细胞早期发育中表达升高(P<0.01)。结论:Nrf2及相关因子在红系细胞各分化阶段表达量不同,生理水平的Nrf2在红系细胞发育过程中发挥了重要的抗氧化作用。

关键词：红细胞细胞发育活性氧自由基 Nrf2

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microrna-144/451在不同类型贫血性疾病中的表达

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中国实验血液学杂志 2024年第3期32卷 825-830页

作者：杨帆凌玲侯亚颖杨兰孙梅王方方郁多男扬州大学医学院江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室江苏扬州225009 扬州大学临床医学院江苏省苏北人民医院江苏扬州225001

目的:研究micro rna-144/451基因簇(miR-144/451)在不同类型贫血性疾病中的表达及临床相关性。方法:收集再生障碍性贫血(AA)、骨髓增生异常综合征(MDS)和弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)初诊贫血和化疗后贫血患者外周血,RT-q PCR法检测miR-144... 详细信息

目的:研究micro rna-144/451基因簇(miR-144/451)在不同类型贫血性疾病中的表达及临床相关性。方法:收集再生障碍性贫血(AA)、骨髓增生异常综合征(MDS)和弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)初诊贫血和化疗后贫血患者外周血,RT-q PCR法检测miR-144和miR-451的表达水平,采用Spearman相关性分析研究miR-144和miR-451表达与常规实验室指标的相关性。结果:与正常对照组相比,miR-144在AA和MDS患者外周血中表达均明显降低(均P<0.01),在DLBCL初诊不贫血、初诊贫血和化疗后贫血患者外周血中表达均无明显差异(P>0.05);miR-451在AA和MDS患者外周血中表达均明显降低(均P<0.01),在DLBCL各组患者外周血中表达明显升高(均P<0.05)。相关性分析结果显示,miR-144和miR-451的表达水平与AA患者红细胞分布宽度变异系数呈正相关性(r=0.629,r=0.574),与MDS和DLBCL组实验室检测指标均无明显相关性。结论:miR-144和miR-451在不同类型的贫血性疾病中表达水平不尽相同,有望成为临床贫血性疾病的辅助诊断以及鉴别诊断指标。

关键词： miR-144 miR-451 贫血相关性分析

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安徽医科大学学报 2025年第1期60卷 96-101页

作者：房晓赵薇喻文颖裴灵洁钱文轩赵雅扬州大学医学院(转化医学研究院) 扬州225009 扬州大学江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室扬州225009

目的探究染色体不稳定(CIN)相关基因多肽N-乙酰半乳糖氨基转移酶7(GALNT7)对结肠癌细胞HCT116增殖和凋亡的影响。方法采用慢病毒感染构建敲低GALNT7的HCT116细胞系,通过染色体滴定验证GALNT7与CIN的相关性,运用活细胞计数检测GALNT7对... 详细信息

目的探究染色体不稳定(CIN)相关基因多肽N-乙酰半乳糖氨基转移酶7(GALNT7)对结肠癌细胞HCT116增殖和凋亡的影响。方法采用慢病毒感染构建敲低GALNT7的HCT116细胞系,通过染色体滴定验证GALNT7与CIN的相关性,运用活细胞计数检测GALNT7对细胞增殖的影响,采用流式细胞术和Western blot检测GALNT7对细胞周期的影响,采用Caspase-3酶活性测定和Western blot检测GALNT7对细胞凋亡的影响。结果敲低GALNT7后HCT116细胞染色体核型分布更为分散,CIN程度增高,细胞增殖速度减慢;敲低GALNT7后HCT116细胞发生细胞周期阻滞,并且细胞内P21蛋白上调,CDK6蛋白下调;敲低GALNT7后HCT116细胞Caspase-3酶活性上升,切割型PARP1蛋白和PUMA蛋白表达量升高,BCL-2蛋白表达量下降。结论GALNT7基因可能通过抑制CIN产生促进结肠癌细胞增殖并抑制其凋亡。

关键词：染色体不稳定结肠癌 GALNT7 细胞增殖细胞周期细胞凋亡

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含有SAP结构域的肌肉增强因子2激活基因对肝细胞癌细胞增殖和凋亡的影响及其可能机制

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中华肿瘤防治杂志 2023年第18期30卷 1091-1099页

作者：房晓朱春苗喻文颖赵薇赵楠赵雅扬州大学医学院(转化医学研究院)·江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室江苏扬州225001

目的探讨含有SAP结构域的肌肉增强因子2激活基因(MAMSTR)对肝细胞癌(HCC)预后的影响,以及对HCC细胞增殖和凋亡的作用和可能机制。方法从TCGA数据库中获取369例HCC患者肿瘤组织和正常肝组织mrna数据和相应临床信息。通过Wilcoxon检验分析... 详细信息

目的探讨含有SAP结构域的肌肉增强因子2激活基因(MAMSTR)对肝细胞癌(HCC)预后的影响,以及对HCC细胞增殖和凋亡的作用和可能机制。方法从TCGA数据库中获取369例HCC患者肿瘤组织和正常肝组织mrna数据和相应临床信息。通过Wilcoxon检验分析MAMSTR基因在HCC组织和正常肝组织中的表达差异。通过Kaplan-Meier曲线和Cox回归模型分析MAMSTR与HCC患者预后的关系。应用基因功能富集分析(GSEA)检测MAMSTR在HCC中的潜在生物学功能。使用慢病毒包装质粒构建可诱导表达MAMSTR sirna的HepG2肝癌细胞系。通过细胞计数、克隆形成和Caspase 3活性实验检测体外条件下MAMSTR对HCC细胞生长和凋亡的作用。使用蛋白质印迹、定量PCR实验分析MAMSTR影响HCC细胞凋亡的分子机制。通过转录因子分析MAMSTR对HCC生物学功能调控的可能信号通路。结果与正常肝组织比较,MAMSTR基因在HCC组织中高表达,P<0.001;且其表达量与年龄和临床分期有关联,均P<0.05。生存分析显示,高表达MAMSTR组患者中位生存期较短,χ^(2)=14.257,P<0.001。单因素(HR=1.302,95%CI为1.160~1.461)和多因素Cox回归模型(HR=1.265,95%CI为1.124~1.424)表明,MAMSTR可以作为HCC患者预后的独立危险因子,均P<0.001。单样本基因集富集分析(ssGSEA)分析发现,MAMSTR高表达组中CD56dim自然杀伤细胞(W=536,P=0.018)、效应记忆CD8+T细胞(W=576,P=0.048)、嗜酸性粒细胞(W=305,P<0.001)、1型辅助性调节T细胞(W=497,P=0.006)和17型辅助性调节T细胞(W=439,P<0.001)抗肿瘤免疫细胞出现下调。同时,促肿瘤免疫细胞记忆B细胞(W=1010,P=0.022)和2型辅助性调节T细胞(W=1191,P<0.001)上调。GSEA结果显示,MAMSTR可能调控E2F转录因子[标准化富集分数(NES)=2.475,P<0.001]、PI3K/Akt/mTOR(NES=1.438,P=0.002)等信号通路。定量PCR检测发现,敲低组细胞MAMSTR的相对表达量(0.624±0.006)明显低于对照组(1.000±0.010),差异有统计学意义,t=45.998,P<0.001。生长计数和克隆形成实验发现,敲低MAMSTR表达可以抑制HepG2细胞生长,t=11.372,P=0.008。Caspase 3活性实验结果显示,Dox(+)组细胞中Caspase 3相对活性(2.209±0.027)明显高于Dox(-)组(1.000±0.017),差异有统计学意义,t=66.576,P<0.001。蛋白质印迹实验验证了在敲低MAMSTR表达的HepG2细胞中,PUMA蛋白在Dox(+)组(1.390±0.018)中相对于Dox(-)组(0.988±0.030)表达上调,差异有统计学意义,t=16.270,P=0.004;BCL2蛋白在Dox(+)组(0.565±0.005)相比Dox(-)组(1.046±0.038)表达下调,差异有统计学意义,t=17.635,P=0.003。定量PCR实验显示,BAX基因在Dox(+)组中相对表达量(1.415±0.055)明显高于Dox(-)组(1.000±0.020),差异有统计学意义,t=9.969,P=0.010。转录因子分析表明,MAMSTR可能通过E2F1参与调控细胞生长,相关E2F1蛋白转录结合域包括cisbp_M3134、transfac_pro_M00920和transfac_public_M00516等。进一步分析发现,E2F1与MAMSTR表达呈正相关,r=0.566,P<0.001。结论MAMSTR基因是促进HCC进展和导致HCC患者预后不良的可能因素之一,其可能通过调节E2F1转录因子网络进而调控HCC细胞增殖和凋亡。

关键词：含有SAP结构域的肌肉增强因子2激活基因肝细胞癌 E2识别位点协同结合DNA的转录激活因子1 细胞增殖细胞凋亡

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酸枣仁皂苷B对大鼠心室肌细胞电压门控钠通道的影响

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中华中医药学刊 2025年

作者：董晓娜向洁朱业彭晟展许正新顾翔扬州大学临床医学院扬州大学附属苏北人民医院扬州大学医学院药学系江苏省中西医结合老年病防治重点实验室扬州大学江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室

酸枣仁皂苷B（Jujuboside B， JuB）是安神药酸枣仁的主要成分之一，具有抑制血小板聚集和抗血管再狭窄作用等多种药理活性。然而，JuB的抗心律失常作用及其潜在机制尚不明确。本研究通过全细胞膜片钳技术和分子对接研究探讨了JuB对大... 详细信息

酸枣仁皂苷B（Jujuboside B， JuB）是安神药酸枣仁的主要成分之一，具有抑制血小板聚集和抗血管再狭窄作用等多种药理活性。然而，JuB的抗心律失常作用及其潜在机制尚不明确。本研究通过全细胞膜片钳技术和分子对接研究探讨了JuB对大鼠心室肌细胞钠电流(sodium current， INa)的影响。结果显示，JuB导致INa的电流-电压（current-voltage， I-V）曲线上移，激活曲线沿电压轴正向即膜电位的去极化趋势移动，稳态失活曲线向超极化方向移动，延长了从失活到恢复所需的时间，表示JuB抑制了Na+通道的开放过程，可能在失活期间对钠通道具有较强的结合亲和力。分子对接研究显示，JuB主要结合在rnav1.5和rnav1.5/QQQ的电压感应域（voltage-sensing domain， VSD）III和IV的跨膜螺旋结构中。该研究首次初步证实JuB能够呈浓度依赖性抑制大鼠心室肌细胞INa。

关键词：酸枣仁皂苷B 心肌细胞电压门控钠通道分子对接心律失常

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藏红花酸对大鼠实验性房颤的影响及机制研究

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中国药学杂志 2023年第9期58卷 792-798页

作者：王洁如顾有为许正新扬州大学医学院药学系江苏扬州225000 江苏省中西医结合老年病防治重点实验室江苏扬州225001 江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室江苏扬州225009

目的研究藏红花酸(crocetin acid, CA)对大鼠实验性房颤(atrial fibrillation, AF)的影响,并探究其离子通道层面的作用机制。方法用氯化钙-乙酰胆碱给药法诱导体内阵发性AF大鼠模型;使用Langendorff逆行灌流、单酶解消化急性分离大鼠... 详细信息

目的研究藏红花酸(crocetin acid, CA)对大鼠实验性房颤(atrial fibrillation, AF)的影响,并探究其离子通道层面的作用机制。方法用氯化钙-乙酰胆碱给药法诱导体内阵发性AF大鼠模型;使用Langendorff逆行灌流、单酶解消化急性分离大鼠心房肌细胞,应用全细胞膜片钳技术记录、观察和分析不同浓度CA对大鼠心房肌细胞瞬时外向钾通道电流(I_(to))的影响。结果与对照组相比,不同剂量的CA预处理组均延长了模型动物AF诱导时间,降低了AF持续时间。膜片钳实验结果表明,25μmol·L^(-1)的CA对I_(to)无显著影响,当其剂量增加到50μmol·L^(-1)以上时则能显著抑制I_(to)。其中50、100、200μmol·L^(-1)的CA可使I_(to)峰值由给药前(71.10±7.28)pA/pF分别降为(55.49±2.34)pA/pF、(35.56±7.57)pA/pF和(14.69±1.95)pA/pF(P<0.01),表现出明显的浓度依赖性抑制。动力学研究方面,各浓度的CA可使I_(to)的电流-电压关系曲线(I-V曲线)明显下移,但不改变其激活电位、峰值电位和反转电位。能使稳态激活曲线显著右移,半数激活电压(V_(1/2-active))降低(P<0.01)。稳态失活曲线显著左移,半数失活电压(V_(1/2-inactive))降低(P<0.01),而失活后恢复曲线则右移,恢复时间常数(τ)延长(P<0.05)。以上结果显示,CA能够抑制大鼠实验性AF的产生,并抑制I_(to)的激活、失活及失活后动力学过程。结论 CA具有抗药物诱导的AF作用,此效应可能与其抑制I_(to),并改变其动力学过程有关。

关键词：藏红花酸瞬时外向钾通道心律失常心房颤动全细胞膜片钳心房肌细胞

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