检索结果-内蒙古大学图书馆

生物化学与生物物理进展 2009年第3期36卷 358-363页

作者：杨鹏辉安文琪石辛甫段跃强罗德炎张鹏飞唐冲邢丽张玉静刘秀梵王希良军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 吉林大学畜牧兽医学院长春130000 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

以冷适应、温度敏感、减毒的B/Ann Arbor/1/66流感病毒株作为重配病毒骨架,对其6个内部基因片段进行了全基因合成,同时人工引入9个氨基酸突变.构建了8个基因的拯救载体,经测序获得序列准确的拯救质粒,命名为:pAB121-PB1,pAB122-PB2,pAB1... 详细信息

以冷适应、温度敏感、减毒的B/Ann Arbor/1/66流感病毒株作为重配病毒骨架,对其6个内部基因片段进行了全基因合成,同时人工引入9个氨基酸突变.构建了8个基因的拯救载体,经测序获得序列准确的拯救质粒,命名为:pAB121-PB1,pAB122-PB2,pAB123-PA,pAB124-HA,pAB125-NP,pAB126-NA,pAB127-M和pAB128-NS.在成功拯救冷适应A型流感病毒的基础上,利用反向遗传学技术成功获救了具有感染性的重配B型流感病毒株,命名为rMDV-B.该重配病毒株以B/Ann Arbor/1/66为病毒骨架,其中HA和NA来源于2006～2007年当年流行株B/Malaysia/2506/***-B在鸡胚尿囊液和MDCK细胞中的HA效价可达1∶64～1∶512.实验结果暗示:从单一供体病毒株可以产生有效的减毒活B型流感病毒疫苗候选株,能够为将来人用流感疫苗的设计提供可借鉴的模型.

关键词： B型流感病毒反向遗传学 8质粒拯救系统重组流感病毒

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猪繁殖与呼吸综合征病毒江苏株的分离与鉴定

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动物医学进展 2009年第4期30卷 36-40页

作者：刘金彪孟庆华吴艳涛高崧彭大新刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 盐城生物工程高等学校江苏盐城224051

从暴发猪高热病的江苏盐城地区某养殖户送检病料中分离到一株致Marc-145细胞病变的病毒,细胞培养物裂解上清经浓缩、负染后电镜观察可见直径约50 nm,有囊膜的球形病毒粒子;间接免疫荧光试验结果表明,该分离株与美洲型猪繁殖与呼吸综合... 详细信息

从暴发猪高热病的江苏盐城地区某养殖户送检病料中分离到一株致Marc-145细胞病变的病毒,细胞培养物裂解上清经浓缩、负染后电镜观察可见直径约50 nm,有囊膜的球形病毒粒子;间接免疫荧光试验结果表明,该分离株与美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒阳性血清反应发出强特异性荧光;以特异性引物对分离的病毒进行RT-PCR扩增于600 bp^700 bp出现单一条带,序列分析显示Nsp2缺失了87 bp。结果表明,该分离株为美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株,暂命名为JYC。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒分离鉴定 RT—PCR

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高邮某鸡场2005～2008年新城疫、禽流感抗体与带毒状况跟踪监测

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中国家禽 2009年第24期31卷 59-60页

作者：刘慧谋秦廷安胡顺林孙庆高崧扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 高邮市畜牧兽医站江苏高邮225600

新城疫（ND）和禽流感（AI）是严重危害养禽业的重要病毒性疫病，在给养禽业造成巨大经济损失的同时，在公共卫生上有其重要性。目前，在我国主要通过广泛疫苗的免疫接种来控制ND与AI的发生与流行。但是，在临床上由于疫苗使用不当或滥... 详细信息

新城疫（ND）和禽流感（AI）是严重危害养禽业的重要病毒性疫病，在给养禽业造成巨大经济损失的同时，在公共卫生上有其重要性。目前，在我国主要通过广泛疫苗的免疫接种来控制ND与AI的发生与流行。但是，在临床上由于疫苗使用不当或滥用疫苗，造成免疫失败的现象屡有发生。因此，制定合理的免疫程序对预防上述疫病的暴发具有重要作用。

关键词：禽流感抗体新城疫跟踪监测病毒性疫病鸡场经济损失公共卫生免疫接种

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鸭源新城疫病毒P基因遗传变异分析

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中国动物传染病学报 2009年第4期17卷 1-6页

作者：刘晓文王晓泉吴双胡顺林刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

为分析2002-2007年分离的鸭源弱毒新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）磷蛋白（P）基因的分子特征,以及在新城疫病毒演化过程中所起的作用,采用RT-PCR方法扩增NDV弱毒分离株的P基因,进行测序,并应用生物信息学软件（SNAP和CODEM... 详细信息

为分析2002-2007年分离的鸭源弱毒新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）磷蛋白（P）基因的分子特征,以及在新城疫病毒演化过程中所起的作用,采用RT-PCR方法扩增NDV弱毒分离株的P基因,进行测序,并应用生物信息学软件（SNAP和CODEML）研究了作用于NDV P基因的选择压力。根据P基因序列的遗传发生分析表明,NDV I类（Class I）2型毒株与德国鸭源毒株DE/R49-99和美国株亲缘关系较近,而3b型毒株与其他I类病毒遗传关系较远,具有地区特色,形成一个独特的分支;NDV II类（Class II）中基因Ib型与中国广泛使用的基因I型疫苗毒Qeensland V4（QV4）以及I型代表株亲缘关系较远。生物信息学软件分析表明,P基因不同片段受到正选择压力的作用不一样,P基因的两端受到负选择压力的作用不易发生变异,而中间（aa62~113和137~198）片段多个位点受到正选择压力的作用。可见,I类病毒中3b具有地域特色,不同基因型P蛋白之间变异较大,而且P蛋白不同位置变异不均匀。

关键词：新城疫病毒 ClassI和ClassII 磷(P)蛋白正选择压力

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抗朊蛋白单克隆抗体的免疫学特性研究

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扬州大学学报（农业与生命科学版） 2009年第4期30卷 6-10页

作者：吴晓东张永强刘雨田邹艳丽刘珊李林王志亮扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 中国动物卫生与流行病学中心-国家外来动物疫病诊断中心-国家牛海绵状脑病参考实验室山东青岛266032

以牛、羊重组朊蛋白(PrP)、正常牛、羊的脑组织匀浆、牛海绵状脑病(BSE)及羊痒病阳性的脑组织匀浆及切片为抗原,测定9株抗朊蛋白单克隆抗体的ELISA、免疫印迹及免疫组化等免疫学反应特性。结果表明:5株单抗可用于BSE及羊痒病的ELISA、... 详细信息

以牛、羊重组朊蛋白(PrP)、正常牛、羊的脑组织匀浆、牛海绵状脑病(BSE)及羊痒病阳性的脑组织匀浆及切片为抗原,测定9株抗朊蛋白单克隆抗体的ELISA、免疫印迹及免疫组化等免疫学反应特性。结果表明:5株单抗可用于BSE及羊痒病的ELISA、免疫印迹检测;3株单抗可用于BSE及羊痒病的免疫组化检测;1株单抗在免疫印迹试验中只与羊痒病PrPSc的核心片段反应,结合该株单抗所识别的抗原表位PrP第78~93氨基酸(aa),证实BSE与羊痒病PrPSc的蛋白酶K消化位点存在差异。

关键词：传染性海绵状脑病朊蛋白单克隆抗体免疫学特性

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一株野鸭源H4N6亚型禽流感病毒A/mallard/Yancheng/2005的全基因组克隆和序列分析

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畜牧兽医学报 2009年第4期40卷 548-553页

作者：彭宜薛峰李彦芳陈浩彭大新刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009 江苏出入境检验检疫局南京210001 盐城国家级珍禽自然保护区管理处盐城224000

应用流感病毒通用引物对盐城珍禽自然保护区野鸭泄殖腔棉拭子分离株禽流感病毒A/mallard/Yancheng/2005(简称Mallard/YC/2005)(H4N6)进行全基因组序列扩增,结合GenBank中的相关序列进行遗传进化分析。结果表明,Mallard/YC/2005(H4N6)HA... 详细信息

应用流感病毒通用引物对盐城珍禽自然保护区野鸭泄殖腔棉拭子分离株禽流感病毒A/mallard/Yancheng/2005(简称Mallard/YC/2005)(H4N6)进行全基因组序列扩增,结合GenBank中的相关序列进行遗传进化分析。结果表明,Mallard/YC/2005(H4N6)HA基因与A/duck/Siberia/1701/1996(H4N6)的核苷酸同源性最高(97.5%),推导的氨基酸剪切位点序列为PEKASR,为典型低致病性禽流感病毒的特征序列;神经氨酸酶(NA)、非结构蛋白(NS)均没有氨基酸缺失;基质蛋白2(M2)与宿主特异性有关的位点及碱性聚合酶2(PB2)的627位都是亲禽类细胞的氨基酸;M基因与家鸭分离株A/duck/Yangzhou/02/2005(H8N4)的核苷酸同源性为99.4%,PA基因与家鸭分离株A/duck/Jiangxi/1286/2005(H5N2)的核苷酸同源性达98.9%,说明这2个基因已经在家鸭体内存在并参与了基因重排。

关键词： Mallard/YC/2005(H4N6) 禽流感病毒全基因组序列序列分析

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H9N2亚型禽流感病毒华东分离株的生物学特性及遗传进化分析

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中国兽医科学 2009年第8期39卷 665-668页

作者：刘慧谋吴培培吴双扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

对从华东地区分离的6株鸡源H9N2亚型禽流感病毒进行了生物学特性及血凝素(HA)基因和神经氨酸酶(NA)基因的分子遗传进化分析。发现这6株病毒对SPF鸡无致病性,IVPI均为0,可被单克隆抗体4E7分为2个亚群。序列分析表明,这6株病毒的HA基因裂... 详细信息

对从华东地区分离的6株鸡源H9N2亚型禽流感病毒进行了生物学特性及血凝素(HA)基因和神经氨酸酶(NA)基因的分子遗传进化分析。发现这6株病毒对SPF鸡无致病性,IVPI均为0,可被单克隆抗体4E7分为2个亚群。序列分析表明,这6株病毒的HA基因裂解位点处的氨基酸序列均为RSSR↓GLF,Ck/HD/16/07和Ck/HD/112/05的潜在糖基化位点与其他4株不一致;NA基因为N2亚型,其中4个毒株的茎部缺失3个氨基酸,而另2个毒株无缺失。

关键词： H9N2亚型禽流感病毒抗原性血凝素神经氨酸酶

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新城疫病毒LaSota疫苗株的蚀斑纯化

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畜牧与兽医 2009年第5期41卷 45-47页

作者：楚电峰杜元钊刘相娥周洁刘思思朱吕昌扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病重点开放实验室江苏扬州225009 青岛易邦生物工程有限公司山东青岛266032

通过蚀斑克隆技术，对新城疫病毒LaSota疫苗株进行连续纯化，在原病毒株的基础上筛选到1株免疫原性较好的病毒纯化株，血凝效价从9log2提高到11log2，鸡胚半数感染量（EID50）从10^-9.1／0．1mL上升到10^-9.5／0．1mL。通过对纯化株的F... 详细信息

通过蚀斑克隆技术，对新城疫病毒LaSota疫苗株进行连续纯化，在原病毒株的基础上筛选到1株免疫原性较好的病毒纯化株，血凝效价从9log2提高到11log2，鸡胚半数感染量（EID50）从10^-9.1／0．1mL上升到10^-9.5／0．1mL。通过对纯化株的F基因和HN基因进行测序，并与GenBank中已发表的新城疫病毒LaSota株基因序列进行比较发现，F和HN基因核苷酸序列的同源性分别在99．5％和98．6％，氨基酸同源性分别为99．1％和96．9％；F基因裂解位点区（112—117）氨基酸组成与原疫苗株完全一致。纯化株的鸡胚平均死亡时间（MDT）在109h、1日龄雏鸡脑内接种致病指数（ICPI）为0．375，与原疫苗株进行生物学特性比较，表明该纯化株比原疫苗株更适合用于疫苗生产。

关键词：新城疫病毒 LaSota株蚀斑纯化

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11型鸭疫里默氏杆菌分离鉴定及致病性研究

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中国预防兽医学报 2009年第8期31卷 605-609页

作者：云水丽杨勇王小波卢焱炜高崧吴艳涛高以明彭大新刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 南通金太阳科技饲料有限公司江苏南通4314448 南京出入境检验检疫局江苏南京210001

从江苏某免疫鸭场的病死鸭中分离出1株细菌,经形态特性、生化试验、PCR扩增和血清型鉴定,证明该菌为血清11型的鸭疫里默氏杆菌(RA)。人工感染试验显示,106CFU/mL RA经肌肉注射后可导致鸭发病死亡,病死鸭的多个脏器组织均可分离到细菌,... 详细信息

从江苏某免疫鸭场的病死鸭中分离出1株细菌,经形态特性、生化试验、PCR扩增和血清型鉴定,证明该菌为血清11型的鸭疫里默氏杆菌(RA)。人工感染试验显示,106CFU/mL RA经肌肉注射后可导致鸭发病死亡,病死鸭的多个脏器组织均可分离到细菌,而滴鼻接种引起症状所需的细菌剂量为108CFU/mL;对106CFU/mL细菌肌肉注射致死鸭的脏器进行细菌计数,以法氏囊的含菌量最高;病理学变化涉及心、肝、脾、肺、胰、脑、肠粘膜和法氏囊。结果表明,江苏地区存在新的RA血清型,法氏囊是该细菌感染的一个重要靶器官。

关键词：鸭疫里默氏杆菌血清型法氏囊

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不同动物源新城疫病毒感染不同种属细胞的病变观察

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中国家禽 2009年第23期31卷 18-21页

作者：高以明张敬友王水明柯家法李超美朱雪良张扬严继宁黄立业任晓进吴艳涛刘文博南京农业大学动物医学院江苏南京210095 南京出入境检验检疫局江苏南京210001 江苏出入境检验检疫局江苏南京210001 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

用10株不同动物源的新城疫病毒F48E8,LaSota、LaSota-GFP、ZJ1、ZJ1-GFP、JS-4-05-Go、GX-1-05-Ch、JS-1-07-Os、JS-1-07-Du、JS-1-07-Pi等毒株分别感染鸡胚、鹅胚、鸭胚成纤维细胞、PK-15、Dulac、FK81、MDCK、Vero、Hela多种不同动物来源的传代细胞系,通过对病毒感染细胞后病变的观察、ZJ1-GFP及LaSota-GFP两个病毒感染细胞后细胞中绿色荧光蛋白指示的病变,了解不同的毒株对不同细胞感染性的差别。结果表明,不同毒力、不同动物源的新城疫病毒致不同种属细胞病变的作用不同,产生病变的时间有差异,强毒F48E8等毒株感染细胞后48～72h可以引起几种禽源成纤维细胞全部裂解,而哺乳动物来源的细胞在60～120h细胞发生病变,且病变也不如禽源成纤维细胞严重,出现了细胞的圆缩。弱毒株在胰酶处理后感染细胞,72h以后出现明显细胞病变,引起的哺乳动物细胞病变不明显。受试毒株的动物种属来源与细胞的致病性没有明显相关性。

关键词：新城疫病毒成纤维细胞传代细胞系绿色荧光蛋白致病性感染性

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