检索结果-内蒙古大学图书馆

鸡大肠杆菌病并发新城疫的诊断与防治

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中国兽医杂志 2006年第7期42卷 53-54页

作者：唐一鸣张评浒陈祥高崧扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

2004年12月江苏淮北地区某农场养鸡专业户饲养的肉鸡群于15日龄时,突然暴发一种以呼吸困难、腹泻为主症,剖解变化主要以气囊炎、心包炎、肝周炎为特征的疾病。发病率约为80%,死亡率高达50%。现将结果汇报如下,以供同行参考。[第一段]

关键词：鸡大肠杆菌病新城疫防治诊断并发养鸡专业户淮北地区呼吸困难剖解变化肉鸡群

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利用反向遗传技术产生8基因全禽源流感病毒疫苗候选株

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病毒学报 2006年第2期22卷 126-130页

作者：石火英张小荣陈素娟吴艳涛刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

利用反向遗传技术将含有A／Chicken／Shanghai／F／98（H9N2）株禽流感病毒（avian influenza virus，AIV）的6个内部基因与H5N1亚型AIV的2个表面基因HA和NA共转染COS-1细胞，产生了6＋2全禽源的重配AIV。将H5N1亚型AIV的HA基因经基因... 详细信息

利用反向遗传技术将含有A／Chicken／Shanghai／F／98（H9N2）株禽流感病毒（avian influenza virus，AIV）的6个内部基因与H5N1亚型AIV的2个表面基因HA和NA共转染COS-1细胞，产生了6＋2全禽源的重配AIV。将H5N1亚型AIV的HA基因经基因突变致弱，然后将A／Chicken／Shanghai／F／98（H9N2）AIV的6个内部基因的cDNA和以上致弱的禽源HA基因及NA基因的cDNA分别克隆到转录／表达载体pHW2000中，构建成8个转录／表达质粒。将8个质粒共转染COS-1细胞，24h后收获细胞及上清接种SPF鸡胚，72～90h后鸡胚死亡，收取鸡胚尿囊液进行血凝、血凝抑制试验、序列分析、病毒致病性试验和动物免疫保护试验，最终证实产生了致弱的全禽源AIV瘩苗候诜株．

关键词：反向遗传技术 AIV 质粒转染

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重组减毒细菌运送CD8^+T细胞表位的效应分析

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细胞与分子免疫学杂志 2006年第6期22卷 730-733页

作者：潘志明张晓明焦新安 Richard Lo-Man Claude Leclerc 刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009 法国巴斯德研究所免疫调节生物学实验室法国巴黎75015

目的:分析重组减毒菌体外运送CD8+T细胞表位的效应。方法:以表达卵清蛋白(OVA)和淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)CD8+T细胞表位的重组菌13A(ptG2F)、25A(ptG2F)和SL7207(ptG2F)感染抗原提呈细胞(APC)LKb、LLd和骨髓源树突状细胞(BMDC),... 详细信息

目的:分析重组减毒菌体外运送CD8+T细胞表位的效应。方法:以表达卵清蛋白(OVA)和淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)CD8+T细胞表位的重组菌13A(ptG2F)、25A(ptG2F)和SL7207(ptG2F)感染抗原提呈细胞(APC)LKb、LLd和骨髓源树突状细胞(BMDC),应用体外抗原提呈试验检测APC对重组菌运送的CD8+T细胞表位的提呈效应。结果:感染试验证实,减毒菌13A、25A和SL7207对LKb细胞或LLd细胞均具有良好的侵袭能力,BMDC对重组菌具有很好的摄取功能。抗原提呈试验结果显示,在感染的早期(2h),LKb、LLd细胞和BMDC均可提呈重组菌13A(ptG2F)或SL7207(ptG2F)运送的T细胞表位;在感染的晚期(48h),LKb细胞对OVA257-264CD8+T细胞表位的提呈效应降低,LLd细胞对LCMV118-132CD8+T细胞表位的提呈效应增强。3种APC均不能提呈25A(ptG2F)运送的T细胞表位。另外,在同样的作用条件下,BMDC对减毒菌运送的抗原表位的提呈效应要强于LKb和LLd细胞。结论:重组菌能运送CD8+T细胞表位,为基于减毒细菌的新型基因工程疫苗的分子设计提供了有益借鉴。

关键词： CD8^+T细胞表位减毒大肠杆菌减毒鼠伤寒沙门氏菌体外抗原提呈试验

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盐城国家级珍禽自然保护区野鸭、天鹅、丹顶鹤禽流感监测分析

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中国人兽共患病学报 2006年第6期22卷 565-567页

作者：薛峰陈浩彭宜仇保丰刘文博刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009 盐城国家级珍禽自然保护区管理处

采用常规的血清学试验对江苏省盐城国家级珍禽自然保护区野鸭、燕鸥、天鹅、丹顶鹤中流感病毒的带毒状况和相应的禽流感抗体进行监测。共采集咽拭子和泄殖腔标本144份,在野鸭、丹顶鹤中分离鉴定出H4、H3、H6、H9、H5等亚型禽流感病毒13... 详细信息

采用常规的血清学试验对江苏省盐城国家级珍禽自然保护区野鸭、燕鸥、天鹅、丹顶鹤中流感病毒的带毒状况和相应的禽流感抗体进行监测。共采集咽拭子和泄殖腔标本144份,在野鸭、丹顶鹤中分离鉴定出H4、H3、H6、H9、H5等亚型禽流感病毒13株,分离率为9.0%,其中泄殖腔标本阳性率为12.5%。野鸭血清中H4、H9、H6、H11等抗体呈阳性,燕鸥血清相应抗体检测为阴性,而天鹅由于免疫过AIVH5、H9油乳剂灭活苗,AIVH5、H9抗体平均效价均较高,同样免疫过的丹顶鹤AIVH5抗体却一直呈阴性。

关键词：禽流感病毒分离血凝抑制抗体监测

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减毒鼠伤寒沙门氏菌介导的H5亚型禽流感病毒DNA疫苗的实验免疫效果研究

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病毒学报 2006年第1期22卷 6-10页

作者：焦凤超焦新安潘志明黄金林张小荣刘秀梵扬州大学生物科学与技术学院江苏扬州225009 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

将运送H5亚型禽流感病毒DNA疫苗重组减毒鼠伤寒沙门氏菌以1.0×1010CFU剂量口服接种1日龄SPF雏鸡,结果表明重组菌对雏鸡具有良好的安全性。将重组菌SL7207(pVAX1-HA)和X4550(asd-pVAX1-HA)以2×109CFU的剂量两次口服免疫1日龄... 详细信息

将运送H5亚型禽流感病毒DNA疫苗重组减毒鼠伤寒沙门氏菌以1.0×1010CFU剂量口服接种1日龄SPF雏鸡,结果表明重组菌对雏鸡具有良好的安全性。将重组菌SL7207(pVAX1-HA)和X4550(asd-pVAX1-HA)以2×109CFU的剂量两次口服免疫1日龄商品代伊莎褐蛋鸡,同时,将重组菌分别与pVAX1-IFN-γ或pVAX1-IL2(200μg/只)联合免疫,通过测定小肠粘膜抗体效价,结果显示,重组菌单独免疫组和联合免疫组能激发机体产生粘膜免疫应答,且与空载体组、空白对照组以及油苗组之间存在显著性差异(P<0.05)。攻毒后,免疫保护结果显示无论是重组菌单独免疫组还是联合免疫组均与空载体组和空白对照组之间存在显著性差异(P<0.05),而重组菌单独免疫组与联合免疫组之间不存在显著性差异,说明重组菌SL7207(pVAX1-HA)和X4550(asd-pVAX1-HA)能够提供机体抵抗HPAIV H5亚型强毒攻击的良好的免疫保护作用,这为进一步筛选出基于粘膜免疫途径的新型禽流感基因工程疫苗奠定了基础。

关键词：减毒沙门氏菌 DNA疫苗禽流感病毒免疫效力

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禽流感病毒H5和H9亚型多重RT-PCR快速检测方法的建立

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中国兽医学报 2006年第2期26卷 160-161页

作者：耿士忠曾显营潘志明黄金林焦新安刘秀梵扬州大学生物科学与技术学院江苏扬州225009 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

根据禽流感病毒(A IV)核蛋白(NP)和血凝素(HA)基因序列,设计1对用来鉴定A型A IV特异性引物(NP-F,NP-R)和2对用来鉴定A IV H 5和H 9不同亚型特异性引物(H 5-F,H 5-R;H 9-F,H 9-R),建立了多重RT-PCR快速检测方法。该方法能同时从一种病毒... 详细信息

根据禽流感病毒(A IV)核蛋白(NP)和血凝素(HA)基因序列,设计1对用来鉴定A型A IV特异性引物(NP-F,NP-R)和2对用来鉴定A IV H 5和H 9不同亚型特异性引物(H 5-F,H 5-R;H 9-F,H 9-R),建立了多重RT-PCR快速检测方法。该方法能同时从一种病毒扩增出2条核酸带,分别为型(NP:330 bp)和亚型(H 5A:550 bp,或H 9A:490 bp)。通过对105份样品进行检测,并与病毒分离及琼脂扩散(AGP)血清学方法作平行对比,两者之间符合率达100%;试验灵敏度为102ELD50。结果表明,建立的多重RT-PCR为检测H 5、H 9亚型A IV提供了一种快速、经济、易行的技术。

关键词：禽流感病毒核蛋白基因血凝素基因多重RT—PCR

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PRRSV血清抗体间接ELISA检测方法的建立

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扬州大学学报（农业与生命科学版） 2006年第4期27卷 1-4页

作者：陈义平邓珣彭长凌刘文博吴晓东李林王志亮刘秀梵中国动物卫生与流行病学中心山东青岛266032 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

用亲和层析纯化的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组核衣壳蛋白GST-N作为诊断抗原,建立检测PRRS血清抗体的间接ELISA方法。抗原最佳包被量为每孔400 ng,待检血清最佳稀释度为1∶100,待检血清样品的D_(490 nm)≥0．43D_(po■)+0．57D_(n... 详细信息

用亲和层析纯化的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组核衣壳蛋白GST-N作为诊断抗原,建立检测PRRS血清抗体的间接ELISA方法。抗原最佳包被量为每孔400 ng,待检血清最佳稀释度为1∶100,待检血清样品的D_(490 nm)≥0．43D_(po■)+0．57D_(neg)判为阳性,反之判为阴性。对采自14个猪场的364份猪血清样品进行检测,PRRS阳性率为51．4%,略高于HerdChek ELISA的阳性检出率49．7%。与HerdChek ELISA相比,间接ELISA的敏感性为94．5%,特异性为91．3%,总符合率为92．9%,Youden指数为0．86。同时还证明该方法具有良好的批间和批内重复性,并且不与猪瘟、猪伪狂犬病等阳性血清发生反应。该方法的成功建立将为我国PRRS的防制工作作出贡献。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒重组核衣壳蛋白间接ELISA

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不同接种途径对H9亚型禽流感病毒在SPF鸡的致病性

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中国人兽共患病学报 2006年第8期22卷 716-719页

作者：高璐唐伟胡仁莉马林艳高崧刘秀梵扬州大学食品科学与工程学院扬州225009 扬州威克生物有限公司扬州225009 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

目的探讨H9亚型AIV不同接种途径对SPF鸡致病性的影响。方法以气管接种和静脉接种途径对SPF鸡进行人工感染。结果气管接种组死亡率为16.7%,而静脉接种组未见死亡;称重发现气管接种组平均体重显著低于静脉接种组;跟踪泄殖腔排毒发现气管... 详细信息

目的探讨H9亚型AIV不同接种途径对SPF鸡致病性的影响。方法以气管接种和静脉接种途径对SPF鸡进行人工感染。结果气管接种组死亡率为16.7%,而静脉接种组未见死亡;称重发现气管接种组平均体重显著低于静脉接种组;跟踪泄殖腔排毒发现气管接种组试验鸡排毒率高于静脉接种组,排毒时间也长于后者;病理切片观察可见气管接种组病变严重,恢复期长;在免疫组化试验中,气管接种组可在肺中检测到病毒存在,而静脉接种组各组织中均未检测到病毒的存在。结论气管接种H9亚型AIV组比静脉接种组致病性更强,是评价H9亚型AIV致病性更为有效的接种途径。

关键词： SPF鸡 H9亚型AIV 接种途径致病性

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用反向遗传技术致弱基因Ⅶd型鹅源新城疫病毒ZJI株

用反向遗传技术致弱基因Ⅶd型鹅源新城疫病毒ZJI株

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中国畜牧兽医学会2006学术年会

作者：胡顺林张艳梅孙庆刘玉良吴艳涛刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

将新城疫病毒ZJI株基因组cDNA全长分成7个片段,依次连接并克隆至TVT7R转录载体中,构建了含ZJI株全基因组cDNA的转录载体(pNDV/ZJI),oNDV／ZJI与三个辅助表达质粒pCI-NP、pCI-P和pCI-L共转染BSR-T7／5细胞,成功拯救出了具有感染性的新城... 详细信息

将新城疫病毒ZJI株基因组cDNA全长分成7个片段,依次连接并克隆至TVT7R转录载体中,构建了含ZJI株全基因组cDNA的转录载体(pNDV/ZJI),oNDV／ZJI与三个辅助表达质粒pCI-NP、pCI-P和pCI-L共转染BSR-T7／5细胞,成功拯救出了具有感染性的新城疫病毒粒子。设计两对引物,经overlap PCR方法将该毒株F蛋白裂解位点的112、115 和117位碱性氨基酸突变成弱毒株特征的非碱性氨基酸后,替换pNDV/ZJI上的对应序列,构建了转录载体pNDV/ZJIFM,将 pNDV／ZJIFM与三个辅助表达质粒共转染BSR-T7／5细胞,成功拯救出了致弱的基因VIId型鹅源新城疫病毒NDV／ZJIFM,获救病毒的鸡胚最小致死剂量平均死亡时间(MDT)大于120h,初步表明获救病毒的毒力已致弱,是一个较为理想的疫苗候选株。

关键词：新城疫病毒拯救致弱基因Ⅶd型

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抗禽流感H9亚型血凝素单克隆抗体的抗原结合特性分析

抗禽流感H9亚型血凝素单克隆抗体的抗原结合特性分析

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中国畜牧兽医学会2006学术年会

作者：唐应华张评浒刘金彪王海燕李玉君刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

目的:了解和确定本室所研制特异性针对H9亚型禽流感病毒血凝素单克隆抗体所针对的抗原表位及今后的确切用途,方法:用ELISA叠加试验结合Western-blotting,对10株单抗的抗原结合特性进行分析。结果:抗体反应增值结果表明,10株单抗针对同... 详细信息

目的:了解和确定本室所研制特异性针对H9亚型禽流感病毒血凝素单克隆抗体所针对的抗原表位及今后的确切用途,方法:用ELISA叠加试验结合Western-blotting,对10株单抗的抗原结合特性进行分析。结果:抗体反应增值结果表明,10株单抗针对同一大的抗原决定簇,并根据增值结果可将10株单抗分成四个亚群。结论:除2Al外,其他9株单抗的ELISA反应增值结果与Western blot结果相一致,分析认为,可能由于2Al与其他9株单抗的免疫原不同所致。

关键词：单克隆抗体竞争性结合ELISA 抗原结合特性 Western-blotting

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