检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学报 2025年第2期65卷 629-643页

作者：尚爽婕陈卫国张晓奎朱健鹏白松陈晓婷武有聪大理大学基础医学院病原生物学综合实验室云南大理大理大学基础医学院医学微生物学及免疫学教研室云南大理

【目的】探究VraSR通过CidA-LrgAB系统调控表皮葡萄球菌的生物学功能。【方法】构建重组质粒pKOR1-ΔlrgAB,并将其转化至表皮葡萄球菌SE1457ΔvraSR突变株中。通过同源重组技术,在ΔvraSR突变株上进一步敲除lrgAB基因。利用PCR、RT-PCR... 详细信息

【目的】探究VraSR通过CidA-LrgAB系统调控表皮葡萄球菌的生物学功能。【方法】构建重组质粒pKOR1-ΔlrgAB,并将其转化至表皮葡萄球菌SE1457ΔvraSR突变株中。通过同源重组技术,在ΔvraSR突变株上进一步敲除lrgAB基因。利用PCR、RT-PCR和测序技术鉴定表皮葡萄球菌ΔvraSR-lrgAB疑似突变株,并检测其生长特性、药物敏感性、自溶能力以及生物被膜形成能力。【结果】成功构建了表皮葡萄球菌ΔvraSR-lrgAB突变株。与表皮葡萄球菌SE1457、ΔvraSR和ΔlrgAB菌株相比,ΔvraSR-lrgAB突变株生长迟缓,特别是在25℃和40℃下尤为明显(P<0.001)。该突变株的药物敏感性增强(P<0.01),自溶能力显著增强(P<0.001),生物被膜形成能力降低(P<0.01)。【结论】VraSR可能部分通过LrgAB调控表皮葡萄球菌的生长、药物敏感性、自溶能力和生物被膜的形成。

关键词： VraSR LrgAB 同源重组表皮葡萄球菌

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结核分枝杆菌RpfB及RpfE蛋白的生物信息学分析

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微生物学杂志 2025年第1期45卷 106-116页

作者：杨雨婷杨国平王艳龚丽坤楚雄州中医医院检验科云南楚雄675000 楚雄州彝族医药研究院云南楚雄675000 大理大学基础医学院医学微生物学及免疫学教研室云南大理671000

运用生物信息学方法预测RpfB和RpfE蛋白的生物学特性及抗原表位,并分析其作为新型结核疫苗候选抗原的潜力。从NCBI数据库中获取Rv1009、Rv2450c基因的碱基序列,从Uniprot数据库中获取Rv1009基因编码蛋白RpfB及Rv2450c基因编码蛋白RpfE... 详细信息

运用生物信息学方法预测RpfB和RpfE蛋白的生物学特性及抗原表位,并分析其作为新型结核疫苗候选抗原的潜力。从NCBI数据库中获取Rv1009、Rv2450c基因的碱基序列,从Uniprot数据库中获取Rv1009基因编码蛋白RpfB及Rv2450c基因编码蛋白RpfE的氨基酸序列,运用生物信息学分析软件ORFfinder、ProtParam、ProtScale、TMPRED、TMHMM、SignalP 5.0、NetNGlyc 1.0、YinOYang 1.2、NetPhos 3.1、STRING、SOPMA、SWISS-MODEL、DNAStar、SYFPEITHI、NetCTL 1.2及Net MHCII pan 4.0对RpfB及RpfE蛋白的理化性质、亲疏水性、结构、信号肽、糖基化/磷酸化位点、跨膜结构、互作蛋白及抗原表位进行分析。结果表明,Rv1009基因全长1089 bp,有5个开放阅读框,其编码蛋白RpfB由362个氨基酸组成,为含有信号肽的疏水性跨膜蛋白,其二级结构以无规则卷曲为主,该蛋白含有1个N-糖基化位点、29个磷酸化位点、8个优势CTL细胞抗原表位、14个优势Th细胞抗原表位及10个优势B细胞抗原表位;Rv2450c基因全长519 bp,有1个开放阅读框,其编码蛋白RpfE由172个氨基酸组成,为含有信号肽的亲水性蛋白,无跨膜结构,其二级结构以无规则卷曲为主,该蛋白含有2个N-糖基化位点、9个磷酸化位点、4个优势CTL细胞抗原表位、6个优势Th细胞抗原表位及7个优势B细胞抗原表位。RpfB及RpfE蛋白具有较好的免疫原性及多个优势T、B细胞抗原表位,可作为Mtb多肽疫苗研制的候选优势蛋白。

关键词：结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb) RpfB RpfE 生信分析抗原表位多肽疫苗

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激发学生学习医学微生物学兴趣的“六个结合”教学法

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微生物学通报 2005年第3期32卷 138-140页

作者：方艳辉肖丽君程露阳承德医学院微生物学与免疫学教研室承德067000

医学微生物学一门与临床、社会、历史和生命科学发展前沿紧密联系的学科。“六个结合”教学法,就是基于这种联系、结合这些因素去讲授医学微生物学的教学法,是一种“源自生活”的教学法;“六个结合”教学法,可激发学生的学习兴趣,加深... 详细信息

医学微生物学一门与临床、社会、历史和生命科学发展前沿紧密联系的学科。“六个结合”教学法,就是基于这种联系、结合这些因素去讲授医学微生物学的教学法,是一种“源自生活”的教学法;“六个结合”教学法,可激发学生的学习兴趣,加深他们对教材知识的理解和记忆,并能将所学知识活学活用。

关键词：医学微生物学,教学法,学习兴趣

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对医学生开展艾滋病教育课程的实践

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微生物学通报 2005年第6期32卷 140-142页

作者：肖丽君方艳辉郭亚春刘立新承德医学院微生物学与免疫学教研室承德967000

艾滋病教育课程在大学的开设面临重要性和紧迫性,由于专业的特殊性,在医学院校开展艾滋病教育课程更显意义重大。该文论述了对医学生开展艾滋病教育课程的几点实践体会。

关键词：艾滋病教育课程医学生

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应用抑制性消减杂交技术分析淋球菌染色体介导的耐药相关核苷酸序列

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中华微生物学和免疫学杂志 2003年第5期23卷 388-392页

作者：季明春陈红菊严华申厚凤扬州大学医学院微生物学及免疫学教研室 225001

目的　克隆耐药性淋病奈瑟球菌菌株与标准参考菌株之间的差异核苷酸序列。方法应用抑制性消减杂交技术构建耐药性淋球菌与标准参考菌株差异DNA消减文库。结果　成功地构建了高特异性的淋球菌耐药菌株DNA消减文库。经对消减文库初步筛选 ... 详细信息

目的　克隆耐药性淋病奈瑟球菌菌株与标准参考菌株之间的差异核苷酸序列。方法应用抑制性消减杂交技术构建耐药性淋球菌与标准参考菌株差异DNA消减文库。结果　成功地构建了高特异性的淋球菌耐药菌株DNA消减文库。经对消减文库初步筛选 ,对其中 5个克隆插入的DNA片段进行测序 ,经GenBank和淋球菌基因组序列库检索分析 ,证明 5个片段均为未知新序列。结论　淋球菌耐药性相关核苷酸序列的发现将为防治淋球菌感染和研究抗淋球菌抗生素提供新的实验工具。

关键词：淋球菌核苷酸序列耐药性抗生素抑制性消减杂交技术

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应用Protein G纯化细胞培养上清中的大鼠单抗

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免疫学杂志 1999年第3期15卷 207-209页

作者：白丽 Dent,L 大理医学院微生物学及免疫学教研室

用ｍｉｎｉＰｅｒｍ系统旋转连续培养大鼠杂交瘤细胞株，获得大量含抗鼠ＩＬ－４（ＩｇＧ１）和ＩＬ－５（ＩｇＧ１和ＩｇＧ２ａ）抗体的培养上清；经ＰＭ１０膜超滤、５０％饱和硫酸铵沉淀及链球菌Ｇ蛋白－琼脂糖亲和层析纯化ＩｇＧ单... 详细信息

用ｍｉｎｉＰｅｒｍ系统旋转连续培养大鼠杂交瘤细胞株，获得大量含抗鼠ＩＬ－４（ＩｇＧ１）和ＩＬ－５（ＩｇＧ１和ＩｇＧ２ａ）抗体的培养上清；经ＰＭ１０膜超滤、５０％饱和硫酸铵沉淀及链球菌Ｇ蛋白－琼脂糖亲和层析纯化ＩｇＧ单抗。结果每升杂交瘤细胞培养上清得到大鼠ＩｇＧ２２～３６ｍｇ；１次可纯化抗体达２０ｍｇ；经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及ＥＬＩＳＡ鉴定，所得到的抗体纯度高、活性保持良好。

关键词：杂交瘤大鼠单克隆抗体细胞培养

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抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌天然药物研究进展

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中草药 2016年第20期47卷 3742-3748页

作者：王鑫刘奇大理大学基础医学院医学微生物学及免疫学教研室云南大理671000

以抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)天然药物为对象,检索了近年来对其天然药物研究的相关文献,并进行归纳整理。来源于植物、动物、微生物的能有效抗MRSA的化合物,包括植物中的黄酮类、... 详细信息

以抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)天然药物为对象,检索了近年来对其天然药物研究的相关文献,并进行归纳整理。来源于植物、动物、微生物的能有效抗MRSA的化合物,包括植物中的黄酮类、萜类、蒽醌类等,动物中的抗菌肽及毒素,以及部分微生物的代谢产物等。部分化合物可作为未来抗MRSA的候选药物。目前抗MRSA的天然药物研究已经成为该领域的研究热点之一,但是多数研究仅停留在对活性药物的筛选上,缺少对候选药物的毒理、药理等深入研究。

关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌天然药物动物植物微生物

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反义寡核苷酸体外抗乙型肝炎病毒研究

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中华预防医学杂志 2001年第5期35卷 338-340页

作者：刘素侠孙汶生曹英林张利宁马春红丁培芳山东大学医学院微生物学及免疫学教研室济南市250012

目的　探讨反义寡核苷酸的体外抗病毒作用 ,为基因水平上防治乙型肝炎病毒 (HBV)感染及HBV相关肝细胞癌的基因治疗提供实验依据。方法　用PCR方法分别合成了互补于HBVX基因的翻译起始区、DR2区、ENⅡ区的反义寡核苷酸 (AsON)及无关序列 ... 详细信息

目的　探讨反义寡核苷酸的体外抗病毒作用 ,为基因水平上防治乙型肝炎病毒 (HBV)感染及HBV相关肝细胞癌的基因治疗提供实验依据。方法　用PCR方法分别合成了互补于HBVX基因的翻译起始区、DR2区、ENⅡ区的反义寡核苷酸 (AsON)及无关序列 ,其中针对ENⅡ设计的AsON ,目前尚未见互补于该区段反义寡核苷酸的报道。以HBVDNA转染的HepG2 2 15细胞为靶细胞 ,ELISA法检测AsON作用前后细胞上清中的HBsAg和HBeAg分泌情况。结果　当AsON的最佳作用浓度为 10 μmol L时 ,3种反义寡核苷酸对HBsAg和HBeAg抑制率分别为 :5 7%、6 0 %、5 2 %和 5 6 %、45 %、5 6 % ,AsON对HBV抗原的抑制作用具双峰现象。无关序列无明显抑制作用 (<12 % )。利用锥虫蓝染色、四甲基偶氮唑盐比色试验观察到当AsON作用浓度为 40 μmol L时 ,对细胞代谢无明显毒副作用。结论　反义寡核苷酸封闭HBVX基因区的关键区段 ,可有效抑制HBV抗原的分泌。

关键词：乙型肝炎病毒反义寡核苷酸类基因转染肿瘤细胞细胞培养肝细胞癌基因治疗

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测定小鼠细胞因子的双抗体夹心ELISA法的建立及应用研究

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中国人兽共患病杂志 2002年第4期18卷 75-77页

作者：白丽大理医学院微生物学及免疫学教研室大理671000

目的　建立敏感的测定小鼠IL - 5、IL - 4和IFN -γ水平的生物素 -链霉亲和素双抗体夹心ELISA法 ,并探讨该法在IL - 5转基因小鼠感染模型中的应用价值。方法　含大鼠抗小鼠IL - 4、IL - 5和IFN -γ单克隆抗体的杂交瘤细胞培养上清 ,经PM... 详细信息

目的　建立敏感的测定小鼠IL - 5、IL - 4和IFN -γ水平的生物素 -链霉亲和素双抗体夹心ELISA法 ,并探讨该法在IL - 5转基因小鼠感染模型中的应用价值。方法　含大鼠抗小鼠IL - 4、IL - 5和IFN -γ单克隆抗体的杂交瘤细胞培养上清 ,经PM 10膜超滤、5 0 %饱和硫酸铵沉淀及ProteinG -Sepharose亲和层析纯化。应用活化生物素制剂对纯化的TR FK4、BVD6和AN18单克隆体抗体进行生物素化。用纯化的 2 μg/mlTRFK5、8μg/ml 11B11和 4 μg/mlR4 - 6A2分别作为测定小鼠IL - 5、IL - 4和IFN -γ的包被抗体 ,然后逐步加入样品、生物素化TRFK4 (1μg/ml)、BVD6 (2 μg/ml)和AN18(1μg/ml)、SA -HRPO和OPD ,硫酸终止反应后读取A490 值。结果　所建立的生物素 -链霉亲和素双抗体夹心ELISA法特异性和敏感性高 ,用于检测感染巴西日圆线虫感染的IL - 5转基因小鼠和非转基因小鼠的血清标本取得了较好的效果。

关键词：细胞因子生物素-链霉素亲和素 ELISA 巴西日圆线虫免疫学方法

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丙型肝炎病毒多细胞毒性T淋巴细胞表位DNA疫苗诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞反应

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中华肝脏病杂志 2006年第5期14卷 385-386页

作者：史霖刘珊胜利孟照俊袁育康西安交通大学医学院免疫及病原微生物学系 710061 海南医学院微生物学及免疫学教研室

本研究通过构建含有两个丙型肝炎病毒（HCV）细胞毒性T淋巴细胞（CTL）表位（Core133-142和El315-322）的多HCVCTL表位DNA疫苗，用其免疫小鼠，研究其引起的特异性CTL应答，以明确由多个HCVCTL表位基因编码直接连接构成的多CTL表位DNA... 详细信息

本研究通过构建含有两个丙型肝炎病毒（HCV）细胞毒性T淋巴细胞（CTL）表位（Core133-142和El315-322）的多HCVCTL表位DNA疫苗，用其免疫小鼠，研究其引起的特异性CTL应答，以明确由多个HCVCTL表位基因编码直接连接构成的多CTL表位DNA疫苗，其各个HCVCTL表位是否能独立表达，引起各自相应的特异性CTL应答，且多个CTL的联合作用能否能增强总体的CTL杀伤效应，为构建有效安全的多CTL表位DNA疫苗提供理论基础。

关键词：肝炎病毒,丙型表位,T淋巴细胞 DNA疫苗

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