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解剖学杂志 2001年第6期24卷 532-536页

作者：高福禄岳凤鸣庞晓静杜心欣赵春芳承德医学院承德067000 河北医科大学组织学与胚胎学教研室

目的 :研究表皮生长因子受体 (Epithelium growthfactorreceptorEGFR)和原癌基因c Fos在db/db(diabetesobese)自发性糖尿病小鼠睾丸生殖细胞的表达变化。方法 :免疫组化ABC法。结果 :EGFR在精母细胞、精子细胞、支持细胞和间质细胞均呈... 详细信息

目的 :研究表皮生长因子受体 (Epithelium growthfactorreceptorEGFR)和原癌基因c Fos在db/db(diabetesobese)自发性糖尿病小鼠睾丸生殖细胞的表达变化。方法 :免疫组化ABC法。结果 :EGFR在精母细胞、精子细胞、支持细胞和间质细胞均呈阳性反应。c Fos免疫阳性细胞主要为精母细胞、圆形精子细胞和变形期精子 ,间质血管内皮细胞也有强阳性表达 ,另外 ,少数支持细胞、管周肌样细胞也有着色。以上两组指标 ,随糖尿病病程进展 (糖尿病组 )及年龄增加 (对照组 ) ,其阳性率呈现明显下降趋势 ,并且每年龄段糖尿病组阳性率明显低于相应正常对照组。结论 :糖尿病睾丸中EGFR的减少使EGF与受体结合减少 ,第二信使cAMP和“第三信使”c Fos均减少 ,以致核转录和核基因表达减弱 ,最终表现为糖尿病生殖细胞增殖减弱 ,生殖功能障碍。

关键词：睾丸生殖细胞糖尿病表皮生长因子 c-Fos

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血管内皮生长因子及其受体在糖尿病小鼠视网膜的表达

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解剖学杂志 2001年第5期24卷 421-424页

作者：董白霞高福禄张爱子庞晓静河北医科大学第二医院眼科石家庄050000 承德医学院3河北医科大学组织学与胚胎学教研室河北医科大学组织学与胚胎学教研室承德医学院

目的 :观察血管内皮生长因子 (VascularEndothelialGrowthFactor,VEGF)及其受体flk 1在糖尿病视网膜细胞的表达 ,以期阐明VEGF与糖尿病性盲的关系。方法 :应用免疫组织化学方法显示正常及发病组视网膜VEGF和flk 1阳性细胞 ,并计算单位... 详细信息

目的 :观察血管内皮生长因子 (VascularEndothelialGrowthFactor,VEGF)及其受体flk 1在糖尿病视网膜细胞的表达 ,以期阐明VEGF与糖尿病性盲的关系。方法 :应用免疫组织化学方法显示正常及发病组视网膜VEGF和flk 1阳性细胞 ,并计算单位面积视网膜中神经节细胞VEGF阳性率和flk 1阳性细胞数。结果 :发病组视网膜神经节细胞VEGF阳性率和flk 1阳性神经节细胞数从 3月龄时开始增多 (P <0 .0 5 ) ,并随着病程延长有上升趋势 ,VEGF在 6月龄后增多更显著 ;flk 1在 8月龄后增加也更为明显。结论 :VEGF和flk 1在糖尿病视网膜神经节细胞表达量增加。VEGF通过与flk 1相互作用 ,不仅使血管内皮细胞增殖 ,导致视网膜新生血管形成。

关键词：血管内皮生长因子受体小鼠病理糖尿病视网膜病变 VEGF

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db/db自发性糖尿病小鼠睾丸生殖细胞增殖及凋亡研究

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解剖学报 2002年第2期33卷 185-189页

作者：岳凤鸣高福禄殷秀玲赵春芳庞晓静杜心欣河北医科大学组织学胚胎学教研室石家庄050017 承德医学院组织学胚胎学教研室承德067000

目的　研究糖尿病对生殖细胞增殖和凋亡的影响。　方法　以免疫组织化学ABC法检测增殖细胞核抗原 (proliferationcellnucleusantigen ,PCNA)检测生殖细胞的增殖情况 ,电镜和脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记法 (TUNEL)检... 详细信息

目的　研究糖尿病对生殖细胞增殖和凋亡的影响。　方法　以免疫组织化学ABC法检测增殖细胞核抗原 (proliferationcellnucleusantigen ,PCNA)检测生殖细胞的增殖情况 ,电镜和脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记法 (TUNEL)检测凋亡的生殖细胞。　结果　PCNA阳性率随糖尿病病程进展 (糖尿病组 )和年龄增加 (对照组 )均呈明显下降趋势 ,但每年龄段糖尿病组PCNA阳性率均明显低于相应正常对照组。凋亡管横断面数及凋亡阳性率糖尿病组均较正常高 ,而且随糖尿病病程进展呈明显增加趋势 ,对照组中随加龄二者有增加。电镜下 ,糖尿病组小鼠睾丸精原细胞、精母细胞和精子细胞均可见到核染色质凝集、边集 ,凋亡小体形成和降解等凋亡过程。　结论　db/db自发性糖尿病小鼠睾丸生殖细胞PCNA表达减弱 ,TUNEL标记凋亡细胞增加 ,说明糖尿病使生殖细胞增殖与凋亡的平衡破坏。

关键词：糖尿病睾丸生殖细胞增殖细胞核抗原细胞增殖细胞凋亡

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大鼠Sertoli细胞与精原细胞的分离及共培养

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解剖学报 2007年第1期38卷 118-120页

作者：李宝园徐群渊高福禄河北医科大学组织学与胚胎学教研室石家庄050017 首都医科大学北京神经科学研究所北京100069 承德医学院组织学与胚胎学教研室承德067000

目的分离纯化14d大鼠Sertoli细胞与精原细胞,用Sertoli细胞作为饲养层对大鼠精原细胞进行体外培养研究。方法酶消化法制备大鼠睾丸组织单细胞悬液,采用牛血清白蛋白(BSA)不连续密度梯度沉降法分离Sertoli细胞和精原细胞。结果经分离的Se... 详细信息

目的分离纯化14d大鼠Sertoli细胞与精原细胞,用Sertoli细胞作为饲养层对大鼠精原细胞进行体外培养研究。方法酶消化法制备大鼠睾丸组织单细胞悬液,采用牛血清白蛋白(BSA)不连续密度梯度沉降法分离Sertoli细胞和精原细胞。结果经分离的Sertoli细胞与精原细胞的纯度分别达到92.73%和78.36%。Sertoli细胞与精原细胞共培养,可见精原细胞发生分裂增殖等行为。结论在添加EGF、bFGF和GDNF等细胞因子的10%胎牛血清DMEM/F12培养基中,精原细胞能够存活一定时间;而Sertoli细胞表现为旺盛的生长状态,并可促进精原细胞的分裂与增殖。

关键词：精原细胞 Sertoli细胞体外培养大鼠

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何首乌饮对运动疲劳大鼠睾丸组织P450胆固醇侧链裂解酶和类固醇激素急性调节蛋白的影响

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解剖学报 2012年第4期43卷 524-529页

作者：赵秀军孙一翀曲银娥陈雪郭银王凤威高福禄河北医科大学组织学与胚胎学教研室石家庄050017 承德医学院基础医学部河北承德067000

目的探讨何首乌饮对运动疲劳大鼠睾丸组织细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(P450scc)和类固醇激素急性调节蛋白(StAR)的影响。方法 60只雄性SD大鼠,随机分为安静对照组(A组)、安静何首乌饮组(B组)、模型组(C组)、自然恢复组(D组)、何首乌... 详细信息

目的探讨何首乌饮对运动疲劳大鼠睾丸组织细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(P450scc)和类固醇激素急性调节蛋白(StAR)的影响。方法 60只雄性SD大鼠,随机分为安静对照组(A组)、安静何首乌饮组(B组)、模型组(C组)、自然恢复组(D组)、何首乌饮治疗组(E组);何首乌饮预防组(F组),每组10只。C、D、E和F组大鼠复制运动疲劳动物模型,其中F组每天训练前给何首乌饮20g/(kg.d)(含生药4.8kg/L)灌胃60 d。模型成功后E组给何首乌饮20 g/(kg.d)(含生药4.8kg/L)灌胃治疗60 d。采用美国Beckmancoulter Unicel Dxl 800仪器测定睾酮水平;采用RT-PCR、Western blotting和免疫组织化学法检测各组睾酮合成限速酶P450scc和StAR的表达变化。结果 P450scc免疫组织化学阳性颗粒主要表达于间质细胞及精母细胞,B组和F组表达最强,C组最弱,与其余各组相比差异有统计学意义。P450scc蛋白和mRNA表达变化为B、F组明显高于E、D和A组(P<0.05),C组明显低于A组(P<0.05),A组和D组以及B组和F组两两之间差异无显著性;StAR免疫组织化学阳性颗粒主要表达于睾丸间质细胞胞质,阳性强度表现为E组和F组最强,C组最弱。StAR蛋白和mRNA表达变化为E和F组明显高于A、D组(P<0.05),C组明显低于A组(P<0.05),A、D组之间无差异。结论何首乌饮可以提高睾酮合成限速酶P450scc和StAR的表达。

关键词：何首乌饮运动疲劳睾酮 P450scc StAR 免疫印迹法免疫组织化学大鼠

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何首乌饮对运动性疲劳大鼠睾丸组织17β-羟基类固醇脱氢酶表达的影响

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解剖学报 2011年第4期42卷 532-536页

作者：郭银牛嗣云高福禄曲银娥赵秀军陈雪郭凯华孙一翀承德医学院基础医学部河北承德067000 河北大学医学部组织学胚胎学教研室河北保定071000 河北师范大学石家庄050016 河北医科大学组织学胚胎学教研室石家庄050017

目的探讨何首乌饮对运动性疲劳大鼠睾丸组织17β-羟基类固醇脱氢酶(17β-HSD)的影响。方法 50只雄性SD大鼠随机分为5组,A组为安静对照组;B组为安静何首乌饮组;C组为模型组;D组为何首乌饮治疗组;E组为何首乌饮预防组,每组10只。C、D和E... 详细信息

目的探讨何首乌饮对运动性疲劳大鼠睾丸组织17β-羟基类固醇脱氢酶(17β-HSD)的影响。方法 50只雄性SD大鼠随机分为5组,A组为安静对照组;B组为安静何首乌饮组;C组为模型组;D组为何首乌饮治疗组;E组为何首乌饮预防组,每组10只。C、D和E组大鼠复制运动性疲劳动物模型,其中E组每天训练前给予何首乌饮20g/(kg.d)(含生药9.6kg/L)灌胃作为预防。模型成功后D组大鼠给予何首乌饮20g/(kg.d)(含生药9.6kg/L)灌胃治疗60d。放射免疫法检测各组大鼠血清睾酮浓度,分别采用免疫组织化学法、Western blotting和RT-PCR检测各组大鼠睾酮合成催化酶的表达变化。结果 17β-HSD蛋白的阳性产物主要表达在睾丸间质细胞。17β-HSD mRNA及蛋白表达变化:与C组相比,D组和E组17β-HSD有显著性提高(P<0.05),而D组和E组无差异(P>0.05)。结论何首乌饮可以提高睾酮合成限速酶17β-HSD的表达。

关键词：何首乌饮运动性疲劳睾酮 17β-羟基类固醇脱氢酶免疫组织化学免疫印迹法反转录-聚合酶链反应大鼠

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中药赞育延生饮对生精障碍大鼠的治疗作用

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解剖学报 2004年第2期35卷 179-183页

作者：李欣贾湘曼高福禄贾春华庞宗然庞小静承德医学院组织学胚胎学教研室承德067000 河北医科大学药学院石家庄050011

目的　观察中药赞育延生饮对生精障碍大鼠的治疗作用。　方法　选用SD大鼠 ,灌胃腺嘌呤造成肾阳虚生精障碍模型。造模后 ,中药组大鼠每日给予中药赞育延生饮 (zanyuyanshengyin ,ZYYSY) 5 4g kg体重 ,西药组给克罗米芬 13 5mg kg体重 ... 详细信息

目的　观察中药赞育延生饮对生精障碍大鼠的治疗作用。　方法　选用SD大鼠 ,灌胃腺嘌呤造成肾阳虚生精障碍模型。造模后 ,中药组大鼠每日给予中药赞育延生饮 (zanyuyanshengyin ,ZYYSY) 5 4g kg体重 ,西药组给克罗米芬 13 5mg kg体重 ,模型组不予任何治疗 ,连续 1个月。用酶联免疫法测血清睾酮值 ,用TUNEL法测生精细胞凋亡率 ,用免疫组织化学法研究生精细胞的增殖率和Bcl 2、Bax表达率。　结果　中药治疗组大鼠血睾酮水平明显升高 ,精子数量增多 ,生精细胞增殖率上升 ,凋亡率下降 ,与模型组相比有显著性差异 (P <0 .0 1)。　结论　中药赞育延生饮治疗大鼠生精功能障碍有效。

关键词：中药赞育延生饮生精障碍大鼠治疗细胞凋亡睾酮

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糖尿病小鼠视网膜碱性成纤维细胞生长因子的表达及细胞损害的电镜观察

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解剖学杂志 2003年第3期26卷 234-238页

作者：董白霞高福禄马景学张爱子宠晓静河北医科大学第二医院眼科石家庄050000 承德医学院河北医科大学组织学与胚胎学教研室

目的:为临床研究提供形态学资料。方法:用免疫组化方法,观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在糖尿病小鼠视网膜的分布及表达密度;用透射电镜观察不同病程视网膜细胞的损害情况。结果:糖尿病及正常小鼠视网膜各层细胞均表达bFGF,反应强度... 详细信息

目的:为临床研究提供形态学资料。方法:用免疫组化方法,观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在糖尿病小鼠视网膜的分布及表达密度;用透射电镜观察不同病程视网膜细胞的损害情况。结果:糖尿病及正常小鼠视网膜各层细胞均表达bFGF,反应强度和密度不同。发病组自6月龄起,居于大血管周围的阳性节细胞密度增加;不同病程bFGF的表达有不同程度的增加。随糖尿病病程延长,细胞超微结构受到不同程度的损害。结论:糖尿病时增多的bFGF直接或间接作用于血管内皮细胞和平滑肌细胞,刺激二者增殖,促进微血管病变的发生;另一方面,减弱视细胞与双极细胞间的信息传递,对糖尿病性盲的发生起重要作用。同时,各种细胞的超微结构及相应的功能也受到不同程度的损害。

关键词：糖尿病小鼠视网膜碱性成纤维细胞生长因子细胞损害透射电镜免疫组织化学超微结构微血管病变

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何首乌饮对运动疲劳大鼠睾丸组织黄体生成素受体的影响

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解剖学杂志 2012年第4期35卷 416-419页

作者：赵秀军孙一翀沈永青李莉曲银娥陈雪高福禄河北医科大学组织学与胚胎学教研室石家庄050017 河北医科大学西山校区石家庄050200 承德医学院基础医学部承德067000

目的：探讨何首乌饮对运动疲劳大鼠睾丸组织黄体生成素受体（LHR）的影响。方法：复制运动疲劳动物模型，测定睾酮水平，采用RT-PCR、免疫印迹和免疫组织化学法检测各组睾丸组织LHR的表达变化。结果：LHR免疫组化阳性颗粒主要表达于问... 详细信息

目的：探讨何首乌饮对运动疲劳大鼠睾丸组织黄体生成素受体（LHR）的影响。方法：复制运动疲劳动物模型，测定睾酮水平，采用RT-PCR、免疫印迹和免疫组织化学法检测各组睾丸组织LHR的表达变化。结果：LHR免疫组化阳性颗粒主要表达于问质细胞以及精母细胞胞膜和胞质，何首乌饮预防组和何首乌饮治疗组阳性信号较强，模型组最弱。LHR蛋白和mRNA表达变化为：何首乌饮预防组、何首乌饮治疗组明显高于对照组和何首乌饮组，模型组明显低于对照组。结论：何首乌饮可以提高大鼠睾丸组织LHR的表达。

关键词：何首乌饮运动疲劳睾酮黄体生成素受体 RT-PCR免疫印迹免疫组织化学

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大鼠Desert Hedgehog基因的克隆和表达

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解剖学报 2006年第5期37卷 545-548页

作者：刘靖赵焕英赵春礼段德义高福禄徐群渊河北医科大学组织学与胚胎学教研室石家庄050017 首都医科大学北京神经科学研究所北京100069 承德医学院承德067000

目的克隆大鼠DesertHedgehog(DHH)基因,构建其真核表达载体并转染PT67细胞;同时制备DHHcRNA正义及反义探针用于检测其在细胞中的表达。方法提取SD大鼠睾丸总RNA,RT-PCR法扩增DHH-cDNA片段,连接于pGEM-TEasy载体,经测序后构建真核表达载... 详细信息

目的克隆大鼠DesertHedgehog(DHH)基因,构建其真核表达载体并转染PT67细胞;同时制备DHHcRNA正义及反义探针用于检测其在细胞中的表达。方法提取SD大鼠睾丸总RNA,RT-PCR法扩增DHH-cDNA片段,连接于pGEM-TEasy载体,经测序后构建真核表达载体pLXSN/DHH并转染PT67细胞;重组质粒经限制性内切酶NotI和NcoI酶切、回收后,进行转录标记反应,原位杂交检测DHH在PT67细胞中的表达。结果RT-PCR扩增得到1220bp的片段;成功构建了真核表达载体pLXSN/DHH;制备DHH正义及反义探针浓度分别为150mg/L和80mg/L;DHH在PT67细胞中有表达。结论克隆的DHH基因与大鼠Sertoli细胞的DHH基因相同,成功标记了特异、敏感的DHHcRNA探针,转染的DHH基因能够在PT67细胞中表达。

关键词： Desert Hedgehog基因克隆表达逆转录聚合酶链反应大鼠

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