检索结果-内蒙古大学图书馆

中国药理学与毒理学杂志 2014年第6期28卷 870-877页

作者：李春杰赵建张世勇潘微彤蒲韵竹贾启燕查晓丹尚艳楠黄春倩刘艳琴钟玉绪李前丁日高付爱玲赵宝全西南大学药学院重庆400715 军事医学科学院毒物药物研究所毒理学与抗毒药物研究国家重点实验室北京100850 内蒙古通辽市科尔沁区第一人民医院骨一科内蒙古通辽028000

目的：建立细胞色素P450CYP3A65荧光标记转基因斑马鱼用于快速、直观检测重金属（铜、镉、锌）及类二噁英化合物五氯联苯（ PCB126）等环境污染物。方法 PCR方法钓取斑马鱼CYP3A65基因调控序列，构建于pT2AL200R150G转座载体克隆位点，... 详细信息

目的：建立细胞色素P450CYP3A65荧光标记转基因斑马鱼用于快速、直观检测重金属（铜、镉、锌）及类二噁英化合物五氯联苯（ PCB126）等环境污染物。方法 PCR方法钓取斑马鱼CYP3A65基因调控序列，构建于pT2AL200R150G转座载体克隆位点，将pTol2-CYP3A65-EGFP 质粒与pCS-TP 转座酶mRNA共同注射入斑马鱼胚胎单细胞，通过荧光筛选，遗传选育和建立荧光标记转基因斑马鱼品系 Tg （ CYP3A65-EGFP）；利用该转基因斑马鱼胚胎及幼鱼检测上述3种重金属及 PCB126的生物学响应。结果成功建立了CYP3A65荧光标记转基因斑马鱼品系，绿色荧光在肝和消化道表达；该转基因斑马鱼对3种重金属及PCB126产生生物学响应。染毒96 h后，铜0.1和0.2μmol·L^－1、镉0.35和0.7μmol·L^－1组、锌1.5和3μmol·L^－1组、PCB126所有浓度组荧光相对表达量显著增强（ P＜0.01）；铜0.9μmol·L^－1组、镉2.7和5.4μmol·L^－1组及锌24μmol·L^－1组荧光相对表达量显著减弱（ P＜0.01）；染毒168 h 后，铜0.1和0.2μmol·L^－1组、镉0.35和0.7μmol·L^－1组、锌1.5和3μmol·L^－1组及PCB1262～32μmol·L^－1浓度组荧光相对表达量显著增强（ P＜0.01），铜0.9μmol·L^－1组、镉2.7和5.4μmol·L^－1组、锌12和24μmol·L^－1组荧光相对表达量减弱（ P＜0.05），随着浓度增加荧光减弱，呈现出量效关系。结论 CYP3A65荧光标记转基因斑马鱼模型可以用来检测铜、镉、锌及PCB126等环境污染物。

关键词：细胞色素P450 CYP3A65 斑马鱼,转基因铜镉锌多氯联苯化合物

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HPLC-MS法检测大鼠肝S9蛋白中T-2毒素及一种羟基代谢产物

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解放军药学学报 2014年第4期30卷 296-298页

作者：林妮妮郭磊军事医学科学院毒物药物研究所分析实验室抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

目的应用HPLC-MS技术,建立高灵敏度的大鼠肝S9蛋白中T-2毒素及其一种羟基化代谢产物的分析方法。方法以XDB-C18色谱柱（4.6 mm×50 mm,1.8μm）分离,以5 mmol·L-1的乙酸铵水溶液和甲醇溶液为流动相进行梯度洗脱,以玉米赤霉酮... 详细信息

目的应用HPLC-MS技术,建立高灵敏度的大鼠肝S9蛋白中T-2毒素及其一种羟基化代谢产物的分析方法。方法以XDB-C18色谱柱（4.6 mm×50 mm,1.8μm）分离,以5 mmol·L-1的乙酸铵水溶液和甲醇溶液为流动相进行梯度洗脱,以玉米赤霉酮为内标,在正离子多反应监测模式下对各分析物进行定性和定量分析。结果 T-2毒素、3＇-OH-T-2分别在5~5000 nmol·L-1、25~5000 nmol·L-1的浓度范围内具有良好的线性。检测限分别为2、5 nmol·L-1,定量限分别为5、25 nmol·L-1,回收率介于72.6%~125.8%。结论方法学验证表明本方法快速、重复性好、灵敏度高,已成功应用于T-2毒素羟基化产物制备的监测。

关键词： T-2毒素 HPLC-MS 肝S9

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何首乌醇提物对脂多糖诱导大鼠肝TLR4/TRIF/IRF-3信号通路的影响

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国际药学研究杂志 2016年第3期43卷 496-503页

作者：毛宏梅谢丽华樊星吴纯启王茜莎王全军中国疾病预防控制中心营养与健康所北京100050 广东药学院广州510006 总后卫生部药品仪器检验所北京100071 军事医学科学院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室、国家北京药物安全评价研究中心北京100850

目的研究大鼠经革兰阴性菌外膜成分脂多糖(LPS)诱导后,何首乌醇提物(PMT)对大鼠的肝毒性,并探讨其肝损伤机制与固有免疫炎症信号通路Toll样受体4(TLR4)-干扰素调节因子3(IRF-3)的关系。方法雄性SD大鼠随机分为正常对照组、对乙酰氨基酚(... 详细信息

目的研究大鼠经革兰阴性菌外膜成分脂多糖(LPS)诱导后,何首乌醇提物(PMT)对大鼠的肝毒性,并探讨其肝损伤机制与固有免疫炎症信号通路Toll样受体4(TLR4)-干扰素调节因子3(IRF-3)的关系。方法雄性SD大鼠随机分为正常对照组、对乙酰氨基酚(APAP,625 mg/kg)组、PMT 6 g/kg(PMT-L)和12 g/kg(PMT-H)组、脂多糖(LPS,4 g/L)组、(LPS+APAP)和(LPS+PMT-L/-H)组。后4组经尾静脉注射LPS 4 mg/kg,2 h后各实验组分别灌胃给予相应药物每日1次,连续7 d。观察每日大鼠体质量变化,分别在给药结束后2 h、14 h、5 d和8 d经HE染色检测大鼠组织形态变化,采用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)法及Western印迹法检测肝细胞中TLR4信号通路干扰素TIR结构域衔接蛋白(TRIF)、IRF-3的表达情况。结果大鼠尾静脉注射LPS诱导后2 h,肝实质出现微小肉芽肿,其后,LPS组大鼠肝损伤逐渐恢复。诱导第8天时,LPS组大鼠肝组织结构清晰完整,LPS+APAP组和LPS+PMT各剂量组肝细胞灶状坏死,伴炎细胞浸润。RT-q PCR检测法和Western印迹法检测结果显示,单独灌胃何首乌醇提物的大鼠肝细胞中TLR4、TRIF和IRF-3的m RNA和蛋白表达水平与正常组相比无显著差异,而经LPS诱导的大鼠肝细胞TLR4、TRIF和IRF-3 m RNA和蛋白表达水平显著高于正常对照组,与LPS组相比有显著性差异(P<0.05),但PMT各剂量组间相比无显著差异。结论何首乌醇提物经LPS诱导能引起肝损伤,其引起的肝毒性与正性调控TLR4/IRF-3信号通路的表达有关,其肝损伤程度与给药剂量无关,提示TLR4/IRF-3信号通路的激活是LPS诱导何首乌醇提物肝损伤的作用机制之一。

关键词：脂多糖何首乌醇提物肝毒性 Toll样受体4 非依赖性信号通路

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植物内生真菌Talaromyces sp.的次级代谢产物研究

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中国抗生素杂志 2022年第9期47卷 913-919页

作者：李思瑶张杨车永胜天津中医药大学天津300193 军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850 中国医学科学院北京协和医学院药物生物技术研究所北京100050

目的对1株植物内生真菌Talaromyces sp.的次级代谢产物进行研究。方法采用稻米培养基培养,通过正反相硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析、半制备反相高效液相色谱等技术对发酵提取物进行分离纯化,运用质谱、核磁共振、圆二色谱等波... 详细信息

目的对1株植物内生真菌Talaromyces sp.的次级代谢产物进行研究。方法采用稻米培养基培养,通过正反相硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析、半制备反相高效液相色谱等技术对发酵提取物进行分离纯化,运用质谱、核磁共振、圆二色谱等波谱技术进行结构鉴定,采用MTT测定化合物的细胞毒活性。结果从该菌株中共分离鉴定11个已知化合物,其中包括9个聚酮类化合物(1~9)和2个环肽类化合物(10和11),分别为1-deoxyrubralactone(1)、alternariol(2)、alternariol5-methyl ether(3)、altenuisol(4)、3-hydroxyalternariol 5-O-methyl ether(5)、(2’R,4’R,5’R)-altenuene(6)、(2’S,4’R,5’R)-isoaltenuene(7)、(2’R,4’R,5’R)-altenuene-5’-acetoxyester(8)、7-hydroxy-3,5-dimethyl-isochromen-1-one(9)、腾毒素(10)和二氢腾毒素(11)。结论化合物1、化合物3~11为首次从该属菌株中分离,化合物2和3在100μmol/L的浓度下对人膀胱癌J82细胞株具有抑制活性,抑制率分别为56.9%和59.7%。

关键词：植物内生真菌篮状菌属次级代谢产物生物活性

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肟类重活化剂的血脑屏障通透性研究

肟类重活化剂的血脑屏障通透性研究

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中国毒理学会灾害与应急毒理学专业委员会第一次全国学术交流会

作者：阳海鹰萧伟斌庄笑梅李桦军事医学科学院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室

目的利用大鼠稳态脑分布模型开展常用肟类重活化剂的稳态脑分布和血脑屏障通透性研究。方法实验大鼠分为正常组和梭曼染毒组,各组大鼠分别静脉推注负荷剂量的药物后恒量输注使血药浓度达到稳态,取稳态时的血和脑组织样品,LC-MS/MS定量... 详细信息

目的利用大鼠稳态脑分布模型开展常用肟类重活化剂的稳态脑分布和血脑屏障通透性研究。方法实验大鼠分为正常组和梭曼染毒组,各组大鼠分别静脉推注负荷剂量的药物后恒量输注使血药浓度达到稳态,取稳态时的血和脑组织样品,LC-MS/MS定量测定血浆和脑组织药物浓度,计算稳态脑血比值（K值）。在Caco-2单层细胞体外模型上评价受试药物的跨膜通透性,计算表观通透系数（Papp）。结果氯磷定的平均稳态脑分布浓度和K值分别为（1224.0±245.7）ng/g和24.4±3.4;HI-6为（100.3±33.4）ng/g和1.8±0.6;双复磷则分别为（394.9±95.2）ng/g和3.9±0.8。梭曼染毒后氯磷定、HI-6和双复磷的平均稳态脑分布浓度均显著降低,Kp值依次为13.3±0.8、0.7±0.2和1.8±0.4。其中,氯磷定和HI-6单向跨膜的Papp分别为5.42×10和4.25×10cm/s,为难通透化合物。由正常组大鼠结果可见,双肟类重活化剂脑分布低于单肟类,梭曼染毒后肟类重活化剂脑血分配比均下降,HI-6在梭曼染毒大鼠体内血浆的暴露量明显增加（2.25倍）,文献报道这可能是由于梭曼染毒影响肾血流和清除引起的。其他重活化剂未见明显的血浆动力学变化。结论 3种常见肟类重活化剂的稳态脑分布由高到低的排序为氯磷定>双复磷>HI-6,单肟类重活化剂的血脑屏障通透性优于双肟类;梭曼染毒后重活化剂的脑分布均有所下降。

关键词：重活化剂血脑屏障通透性稳态脑分布

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化学毒剂皮肤洗消剂RSDL对神经性毒剂梭曼的洗消效果

化学毒剂皮肤洗消剂RSDL对神经性毒剂梭曼的洗消效果

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中国毒理学会灾害与应急毒理学专业委员会第一次全国学术交流会

作者：杨航刘红岩应莺刘艳芹黄春倩张城王好山孙建绪郑爱萍冯建林谢剑炜张天宏张振清李桦王晓菲韩刚王全军丁日高王永安钟玉绪军事医学科学院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室

目的观察化学毒剂活性皮肤洗消剂RSDL对于神经性毒剂梭曼的体外和整体动物染毒洗消效果,并比较RSDL与原研产品消毒效果的一致性。方法 1.体外消毒效果:利用国家军用标准GJB3638-99《消毒效果的评价方法》进行消毒效果评价。取4μl梭曼,... 详细信息

目的观察化学毒剂活性皮肤洗消剂RSDL对于神经性毒剂梭曼的体外和整体动物染毒洗消效果,并比较RSDL与原研产品消毒效果的一致性。方法 1.体外消毒效果:利用国家军用标准GJB3638-99《消毒效果的评价方法》进行消毒效果评价。取4μl梭曼,加入200μl RSDL昆匀,于30 s、1 min、3 min和5 min利用联苯胺-硼酸钠比色法检测反应体系中的梭曼含量,通过下式计算消毒率:消毒率（%）=（初始梭曼含量-剩余梭曼含量）/初始梭曼含量×100%;2.整体动物染毒消毒效果:将2μl梭曼滴加于小鼠皮肤,染毒后1 min,将0.3 ml RSDL吸附于棉签上,在染毒部位消毒,观察染毒后24 h的小鼠存活情况。结果 ***与原研RSDL作用于梭曼30 s、1 min、3 min和5 min,在本方法的检测范围（1～100μg）之内,各组均检测不出游离梭曼,故RSDL与原研产品对梭曼的消毒率>99.9%。2.小鼠整体染毒洗消实验:梭曼2μl小鼠皮肤染毒,未洗消组20只小鼠于20 min内全部死亡;22只RSDL洗消组小鼠中,有12只存活,10只死亡;21只原研RSDL洗消组小鼠中,8只存活,13只死亡,采用两组样本率比较的2×2表卡方检验,χ=1.1686<3.84,P>0.05,两种洗消剂对于梭曼染毒均具有明显的洗消效果,RSDL与原研产品的消毒效果无显著性差别。结论 RSDL对于神经性毒剂梭曼具有高效消毒作用,30 s之内就将梭曼的毒性完全破坏;整体动物皮肤梭曼染毒后及时采用RSDL洗消,能明显降低梭曼导致的死亡,RSDL与原研产品的消毒效果一致。

关键词：化学毒剂皮肤洗消剂神经性毒剂 RSDL 梭曼

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基于毒物代谢的化学毒物中毒诊断和对抗策略研究

基于毒物代谢的化学毒物中毒诊断和对抗策略研究

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中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛

作者：李桦军事医学科学院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室

化学毒物包括化学战剂、恐怖剂和高毒化学品,是一类严重威胁国家安全和人民健康的有害物质。毒物的体内暴露是其发挥毒性效应的物质基础,毒物在体内的转运、转化性质和各种影响因素都能改变其在血循环和靶器官的暴露水平、蓄积或消除行... 详细信息

化学毒物包括化学战剂、恐怖剂和高毒化学品,是一类严重威胁国家安全和人民健康的有害物质。毒物的体内暴露是其发挥毒性效应的物质基础,毒物在体内的转运、转化性质和各种影响因素都能改变其在血循环和靶器官的暴露水平、蓄积或消除行为等,从而影响毒物的解毒或发挥毒效作用。毒物代谢和毒物代谢动力学研究毒物经不同途径染毒进入体内后的吸收、分布、代谢转化和排泄过程及其机制,是化学防护和毒物中毒医学对抗措施研究的关键环节之一。化学毒物染毒后起效快、毒性大、救治困难,有效的中毒救治需要快速、准确的诊断技术和特异性的抗毒药物,在缺乏抗毒药的情况下,也可以依据其中毒症状和机制,进行对症性治疗。对毒物在体内转运和代谢处置性质的了解,是中毒诊断和有效救治的重要基础,这些性质包括毒物的跨膜转运、系统暴露、靶器官分布、代谢解毒或活化反应、排泄消除途径等。本报告通过糜烂性毒剂硫芥和蛋白类毒素蓖麻毒素毒物代谢动力学研究实例的分析,介绍了毒物代谢和代谢动力学研究的思路、技术和数据分析,并报告了基于毒物代谢和毒物代谢动力学研究的中毒诊断标志物发现、评价和应用,以及基于毒物体内暴露和动力学过程分析的检测和对抗策略研究。抗毒药评价等。

关键词：毒物代谢化学毒物标志物毒医学对抗

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效应标志物质谱定量技术揭示硫芥毒理作用新特点

效应标志物质谱定量技术揭示硫芥毒理作用新特点

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第十次全国分析毒理学大会暨第六届分析毒理专业委员会会议

作者：徐华徐斌张雅姣吴剑锋宗成齐美玲岳丽君吕珊珊陈佳林缨谢剑炜抗毒药物与毒理学国家重点实验室军事医学科学院毒物药物研究所

硫芥是难防难治化学战剂的典型代表,也是日本在华遗弃化学武器的主要组成。一般认为,硫芥作为广泛的烷基化毒剂可引起多靶点多脏器中毒损伤,但其明确的毒理机制并未完全阐明,医学干预措施仍只能将其视为烧伤进行对症治疗。硫芥具有的高... 详细信息

硫芥是难防难治化学战剂的典型代表,也是日本在华遗弃化学武器的主要组成。一般认为,硫芥作为广泛的烷基化毒剂可引起多靶点多脏器中毒损伤,但其明确的毒理机制并未完全阐明,医学干预措施仍只能将其视为烧伤进行对症治疗。硫芥具有的高反应化学活性使其呈现极其复杂的体内代谢,但现有体内毒代数据仍不支持其毒性作用特征;常规毒理学研究仍未能阐明其体内转归转化及物料平衡;以及尚缺乏生物标志物来评价硫芥的内暴露效应等。近年来,我们发展效应标志物质谱定量技术,如化学转换、同位素稀释、诊断离子筛查鉴定技术等,开展了一系列有关硫芥的分析毒理学研究工作,主要包括:(1)确立了DNA加合物作为硫芥内暴露的效应标志物,通过四种DNA加合物的LC-MS/MS同位素稀释同时定量方法,发现硫芥暴露后各脏器均受到不同程度损伤,其中尤以骨髓、脑和肺组织中损伤更为严重,存在高丰度DNA双鸟嘌呤位点加合物(Bis-G),揭示了硫芥更严重的DNA损伤效应;(2)基于化学转化策略并结合LC-MS/MS同位素稀释方法,解决了生物样本中具高反应活性硫芥及其代谢产物无法准确定量的难题,并首次发现原型硫芥在血液中存留时限可达数小时,以及硫芥呈现显著的"脂肪蓄积"效应(组织分布差异至少在15倍以上)等新的毒性作用特点;(3)发现并鉴定了硫芥一条新的重要代谢途径和新的氧化代谢产物,即首先氧化为芥子亚砜继而进一步氧化为芥子砜,后者易与GSH发生加合反应,并最终经N-乙酰转移酶和β-裂解酶代谢。该途径发现的意义在于不仅揭示了硫芥体内发挥毒性作用的一种重要新毒性分子,而且明确了其GSH耗竭机制主要是由其砜类氧化产物引起的,推翻了现有假说,并揭示硫芥暴露存在显著的"复合毒性效应";(4)针对上述新发现,设计合成一系列具有良好脂溶性的强亲电分子作为硫芥体内清除剂,初步评价显示了良好的体内同时清除硫芥和砜类毒性产物的效应。这些研究结果从全新角度阐述了硫芥的毒理作用机制,并为建立其损伤医学干预新措施提供了新思路。

关键词：效应标志物质谱硫芥毒理毒代分析毒理学

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DNA-加合物定量测定揭示的硫芥损伤毒性作用新特点

DNA-加合物定量测定揭示的硫芥损伤毒性作用新特点

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中国化学会第29届学术年会

作者：张雅娇岳丽君宗成郭磊徐斌徐华陈佳刘勤谢剑炜抗毒药物与毒理学国家重点实验室军事医学科学院毒物药物研究所

硫芥,英文全称sulfur mustard(以下简称SM),化学式为C4H8Cl2S,是国际防化医学领域公认的难防难治化学毒剂之一,其临床救治具有早期易误诊、临床无有效诊断和救治措施、无特效解毒药等难题,其毒理机制虽经广泛研究但至今仍未完全清晰阐明... 详细信息

硫芥,英文全称sulfur mustard(以下简称SM),化学式为C4H8Cl2S,是国际防化医学领域公认的难防难治化学毒剂之一,其临床救治具有早期易误诊、临床无有效诊断和救治措施、无特效解毒药等难题,其毒理机制虽经广泛研究但至今仍未完全清晰阐明,但硫芥对DNA的烷基化损伤被认为是其毒理作用的始发机制以及细胞毒性与生物毒性的物质基础。本文围绕建立高灵敏和高特异的DNA加合物定量分析方法,试图通过体内DNA-加合物的高灵敏定量测定以回答硫芥经皮染毒的内暴露和DNA损伤问题。针对SM-DNA加合物的四种主要形式,N7-(2-羟乙基硫代乙基)鸟嘌呤(N7-HETEG),双[2-(N7-鸟嘌呤)]乙硫醚(Bis-G),O6-(2-羟乙基硫代乙基)鸟嘌呤(O6-HETEG),N3-(2-羟乙基硫代乙基)腺嘌呤(N3-HETEA),建立了高灵敏的ID-UPLC-MS/MS同时测定体内四种DNA-加合物的分析方法,检测限达亚pg/mL水平。系统检测了四种SM-DNA加合物在生物体内不同靶器官组织和体液中的分布和含量水平,以及时效、量效变化规律,以期定量阐述硫芥细胞毒性的物质基础与其毒性之间的相关性。结果表明:硫芥经皮染毒后10分钟即可从体内各脏器中检出DNA-加合物,表明硫芥可以迅速跨越机体皮肤屏障和血脑屏障。各脏器中加合物水平均呈现较好的剂量依赖增加,其中骨髓、脑、肺和胰脏中单位DNA加合物的含量显著升高,是硫芥重点损伤靶器官;首次发现体内Bis-G加合物是丰度比例占第二位的DNA加合物,甚至在骨髓中成为主要的DNA损伤加合物,揭示了硫芥对骨髓中DNA更严重的损伤和毒性作用新特点;脑、胰脏等中DNA-加合物修复或清除较慢,发现脂类含量高或被脂肪包裹的组织中SM-DNA加合物含量相对较高,提示芥子气可能存在体内"脂肪蓄积"的现象;30天后仍然可以在尿液中检测出修复的SM-DNA,呈现了良好的溯源性分析生物标志物。上述研究第一次系统揭示了硫芥经皮染毒后体内内暴露水平和各脏器损伤程度,并揭示了硫芥对DNA作用的新特点,为硫芥毒理作用机制的深入研究提供了物质基础。

关键词： DNA加合物、硫芥、同位素稀释质谱毒性作用

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基于现代生物技术的化学中毒救治新策略

基于现代生物技术的化学中毒救治新策略

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中国毒理学会灾害与应急毒理学专业委员会第一次全国学术交流会

作者：王永安军事医学科学院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室

多样性、未知性、不确定性及危险性是化学中毒新特点,亦对化学中毒救治提出新的要求。本文基于纳米技术、人工智能技术、组学技术等现代生物技术进展,从化学中毒致伤模拟染毒平台建立、基于共性毒性通路的未知毒物检测溯源,以及基于纳... 详细信息

多样性、未知性、不确定性及危险性是化学中毒新特点,亦对化学中毒救治提出新的要求。本文基于纳米技术、人工智能技术、组学技术等现代生物技术进展,从化学中毒致伤模拟染毒平台建立、基于共性毒性通路的未知毒物检测溯源,以及基于纳米递送技术的中枢靶向药物研究等不同层面,系统介绍了基于现代生物技术的化学中毒救治新策略。

关键词：化学中毒纳米技术靶向药物

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