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国际药学研究杂志 2017年第5期44卷 390-395,401页

作者：郭林肖智勇刘峰周文霞张永祥广西医科大学南宁530021 军事医学科学院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

卵巢癌是导致女性死亡的主要癌症之一,死亡率在妇科癌症中居高不下。聚ADP核糖聚合酶(PARP)抑制剂可靶向杀灭同源重组修复缺陷的肿瘤细胞,包括乳腺癌易感基因(BRCA)突变的癌细胞,这种机制被称为协同致死效应。目前已有3个PARP抑制剂被FD... 详细信息

卵巢癌是导致女性死亡的主要癌症之一,死亡率在妇科癌症中居高不下。聚ADP核糖聚合酶(PARP)抑制剂可靶向杀灭同源重组修复缺陷的肿瘤细胞,包括乳腺癌易感基因(BRCA)突变的癌细胞,这种机制被称为协同致死效应。目前已有3个PARP抑制剂被FDA批准用于治疗晚期BRCA突变的卵巢癌。本文旨在阐述PARP抑制剂治疗卵巢癌的作用机制,并对已进入临床试验阶段的PARP抑制剂进行综述,以期为开发新的卵巢癌治疗药物提供参考。

关键词：聚ADP核糖聚合酶抗肿瘤药卵巢肿瘤治疗乳腺癌易感基因协同致死

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全氟异丁烯染毒对大鼠肺微血管内皮细胞的影响

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中国药理学与毒理学杂志 2016年第9期30卷 955-960页

作者：王延琳赵建黄春倩王和枚丁日高军事医学科学院野战输血研究所北京100850 军事医学科学院毒物药物研究所北京100850 军事医学科学院抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

目的观察体外培养的肺微血管内皮细胞(PMVEC)经全氟异丁烯(PFIB)染毒后其肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9的含量变化。方法采用改进的组织块种植法分离培养大... 详细信息

目的观察体外培养的肺微血管内皮细胞(PMVEC)经全氟异丁烯(PFIB)染毒后其肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9的含量变化。方法采用改进的组织块种植法分离培养大鼠PMVEC,细胞经鉴定后分为正常对照组和5个PFIB染毒组(n=3)。正常对照组为静息状态细胞;染毒组行PFIB暴露(浓度200 mg·m-3,持续5 min)染毒后0.5,1,2,4和8 h分别收集培养上清液和细胞裂解液。ELISA检测TNF-α,IL-1β,ICAM-1,MMP-2和MMP-9含量,明胶酶谱法分析MMP-2和MMP-9酶活性。结果 1依据细胞生长的形态特征、特异性抗原的表达和植物凝集素结合实验鉴定,采用肺组织块原代培养法获得的细胞均符合PMVEC的特征。2与正常对照组比较,PMVEC经PFIB染毒后2 h细胞裂解液中TNF-α含量显著升高(P<0.05),4和8 h明显回落。细胞培养上清液中TNF-α含量变化趋势与细胞裂解液中TNF-α变化趋势类似,仅发生时间稍滞后。3 PFIB染毒后PMVEC激活并合成IL-1β的时间稍滞后于TNF-α,但达峰与持续时间与TNF-α相似。4 PFIB染毒后PMVEC培养上清液中ICAM-1含量持续保持于较低水平。5 PFIB染毒组细胞裂解液中未检测到MMP-2活性,培养上清液中检测到较高水平的MMP-2含量与活性。PFIB染毒组的培养上清液和细胞裂解液中均未检测到MMP-9表达与活性。结论 PFIB染毒刺激存活的PMVEC合成并释放大量TNF-α,IL-1β,MMP-2和结合型ICAM-1。

关键词：肺微血管内皮细胞全氟异丁烯细胞因子黏附分子基质金属蛋白酶

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糖原合成酶激酶-3β在双相情感性精神障碍发病与治疗中的作用研究进展

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中国药理学与毒理学杂志 2016年第4期30卷 362-368页

作者：崔颖薛瑞张有志洪浩中国药科大学江苏南京210000 军事医学科学院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

双相情感性精神障碍(BD)是一种严重的精神疾病,具有高患病率、高致残率和高致死率等特点。糖原合成酶激酶-3(GSK-3)是普遍存在于真核细胞内的一种多功能丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,其作用主要包括调节糖原的合成代谢、细胞的分化与增殖以及... 详细信息

双相情感性精神障碍(BD)是一种严重的精神疾病,具有高患病率、高致残率和高致死率等特点。糖原合成酶激酶-3(GSK-3)是普遍存在于真核细胞内的一种多功能丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,其作用主要包括调节糖原的合成代谢、细胞的分化与增殖以及基因的表达。它参与多条细胞信号传导通路,通过磷酸化调节细胞内许多信号蛋白、结构蛋白和转录因子,进而影响神经元的存活及可塑性。从基因多态性和临床研究发现,GSK-3β可能与BD发生相关。作为GSK-3β抑制剂,锂盐是一种有效的BD治疗药物,以GSK-3β为靶标研发的小分子抑制剂也是BD治疗的热点。综上所述,GSK-3β可能是治疗BD的潜在靶标。

关键词：双相情感性精神障碍糖原合成酶激酶-3 靶标锂盐小分子抑制剂

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丹酚酸A通过Nrf2/HO-1途径减轻大鼠脑缺血再灌注损伤

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药学学报 2016年第11期51卷 1717-1723页

作者：张雯宋俊科闫蓉何国荣张雪周启蒙肖智勇周文霞杜冠华中国医学科学院、北京协和医学院药物研究所北京市药物靶点研究与新药筛选重点实验室北京100050 军事医学科学院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

研究丹酚酸A(SAA)减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的机制。SD大鼠随机分组,线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞/再灌注(MCAO/R)模型,缺血1.5 h,再灌注24 h,对神经行为学缺损程度评分,TTC法测定大鼠脑梗死体积,Western blot测定脑组织胞核、胞浆Nrf... 详细信息

研究丹酚酸A(SAA)减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的机制。SD大鼠随机分组,线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞/再灌注(MCAO/R)模型,缺血1.5 h,再灌注24 h,对神经行为学缺损程度评分,TTC法测定大鼠脑梗死体积,Western blot测定脑组织胞核、胞浆Nrf2和全细胞HO-1蛋白含量。PC12细胞系制备缺糖缺氧复糖复氧(OGD/R)模型,缺糖缺氧6 h,复糖复氧24 h,MTT法检测细胞存活率,免疫荧光法测定Nrf2和HO-1表达,应用Nrf2 si RNA对SAA的作用机制进行研究。MCAO/R导致脑组织出现病理性损伤,OGD/R导致PC12细胞存活率显著降低。SAA(10和20 mg·kg^(-1))可使脑组织神经细胞损伤明显减轻,并且SAA(0.5和5μmol·L^(-1))能增加PC12细胞存活率。同时SAA能够促进脑组织及PC12胞核和胞浆中Nrf2蛋白表达,核转位率升高,HO-1蛋白表达增强。SAA具有抗脑缺血再灌注损伤的作用,其机制可能与激活Nrf2/HO-1信号途径,促进Nrf2合成和核转位,从而促进下游抗氧化蛋白HO-1的表达有关。

关键词：丹酚酸A 脑缺血再灌注转录因子E2相关因子2 血红素氧合酶1

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离子对反相高效液相色谱法检测小鼠海马组织中ATP、ADP和AMP含量

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国际药学研究杂志 2016年第6期43卷 1151-1155页

作者：张宏超蒋宁刘港周文霞张永祥杜群广州中医药大学脾胃研究所广州510000 军事医学科学院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

目的建立离子对反相高效液相色谱（RP-HPLC）同时检测小鼠海马组织中ATP、ADP和AMP含量的方法。方法高氯酸沉淀蛋白后,碳酸钾-甲醇溶液中和,-20℃冷冻保存样本;流动相：50 mmol/L磷酸盐缓冲液（缓冲液为K2HPO4-KH2PO4,pH=6.60,含22%... 详细信息

目的建立离子对反相高效液相色谱（RP-HPLC）同时检测小鼠海马组织中ATP、ADP和AMP含量的方法。方法高氯酸沉淀蛋白后,碳酸钾-甲醇溶液中和,-20℃冷冻保存样本;流动相：50 mmol/L磷酸盐缓冲液（缓冲液为K2HPO4-KH2PO4,pH=6.60,含22%甲醇和4 mmol/L四丁基硫酸氢铵）。C_（18）色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）及相同填充材料的预柱,测定小鼠海马组织中ATP、ADP和AMP的含量;检测波长254 nm,流速0.6 ml/min;柱温为室温;进样量20μl。结果本法的日内和日间精密度分别为1.27%~3.42%和0.88%~3.52%,回收率为95.67%~104.05%。结论本研究建立的RP-HPLC法可同时测定小鼠海马ATP、ADP和AMP的含量,方法稳定、准确、可靠。

关键词：高效液相色谱三磷酸腺苷二磷酸腺苷一磷酸腺苷快速老化小鼠

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HPLC法测定黄体酮纳米晶体胶囊的溶出度

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国际药学研究杂志 2015年第3期42卷 404-408,412页

作者：郑敏杰张晓燕孙建绪郑爱萍军事医学科学院毒物药物研究所药物制剂室北京100850 抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850 首都医科大学北京100069

目的建立黄体酮纳米晶体胶囊的溶出度考察方法。方法采用《中国药典》2010年版溶出度测定第一法,以900 ml浓度为0.25%十二烷基硫酸钠溶液为溶出介质,转速75 r/min,溶出时间为45 min。使用HPLC法对溶出样品检测,采用Agilent TC C18色谱柱... 详细信息

目的建立黄体酮纳米晶体胶囊的溶出度考察方法。方法采用《中国药典》2010年版溶出度测定第一法,以900 ml浓度为0.25%十二烷基硫酸钠溶液为溶出介质,转速75 r/min,溶出时间为45 min。使用HPLC法对溶出样品检测,采用Agilent TC C18色谱柱（150 mm×4.6 mm,5μm）;流动相：甲醇-乙腈-水（35∶40∶25,V/V/V）;流速：1.0 ml/min;检测波长：241 nm;柱温：25℃;进样量：20μl。结果本方法平均回收率为100.02%（n=15）;溶液在24 h保持稳定（RSD=0.92%,n=8）;在2.78-66.7μg/ml范围内线性关系良好（r=1,n=6）。结论方法简便、灵敏、准确、专属性强,可用于黄体酮纳米晶体胶囊溶出度的检测。

关键词：黄体酮纳米晶体胶囊高效液相色谱法溶出度

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脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其乙酰化产物的培养提取及制备

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食品科学 2015年第3期36卷 132-136页

作者：徐华吴弼东郭磊陈佳林妮妮谢剑炜军事医学科学院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

以禾谷镰刀菌Fusarium graminearum大型分生孢子定量接种大米培养物,制备毒素粗提液,采用硅胶柱一步洗脱分离、分段收集可同时获得脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)和乙酰化脱氧雪腐镰刀菌烯醇(acetyldeoxynivalenol,AcDON),采... 详细信息

以禾谷镰刀菌Fusarium graminearum大型分生孢子定量接种大米培养物,制备毒素粗提液,采用硅胶柱一步洗脱分离、分段收集可同时获得脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)和乙酰化脱氧雪腐镰刀菌烯醇(acetyldeoxynivalenol,AcDON),采用一步结晶法即可分别制备获得毒素纯品,并经红外光谱法、液相色谱-质谱联用技术及核磁共振氢谱等分析确证,液相色谱分析表明两种毒素纯度均大于98%。该培养提取及分离制备方法改变了常规多步骤繁琐过程,提供了一种切实有效的、大量制备纯化DON及乙酰化DON毒素的简便方法。

关键词：禾谷镰刀菌脱氧雪腐镰刀菌烯醇乙酰化脱氧雪腐镰刀菌烯醇培养制备

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小鼠海马糖原合成酶激酶3β过表达对小补心汤总黄酮抗抑郁和抗焦虑作用的影响

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中国药理学与毒理学杂志 2017年第3期31卷 224-230页

作者：叶洪涛薛瑞许方敏丁振春邓云张有志安徽理工大学医学院安徽淮南232000 军事医学科学院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

目的评价小鼠海马糖原合成酶激酶3β(GSK3β)过表达对小补心汤总黄酮(XBXT-2)抗抑郁和抗焦虑作用的影响。方法小鼠海马立体定位微注射包装有GSK3β(S9A)突变型基因的腺相关病毒(AAV)制备小鼠GSK3β过表达模型,3周后采用Western蛋白印迹... 详细信息

目的评价小鼠海马糖原合成酶激酶3β(GSK3β)过表达对小补心汤总黄酮(XBXT-2)抗抑郁和抗焦虑作用的影响。方法小鼠海马立体定位微注射包装有GSK3β(S9A)突变型基因的腺相关病毒(AAV)制备小鼠GSK3β过表达模型,3周后采用Western蛋白印迹法检测GSK3β和磷酸化GSK3β(S9)〔pGSK3β(S9)〕含量,采用开场实验检测小鼠自发活动。而后将空载体AAV组和GSK3β过表达组小鼠各自分为给药组和溶剂组,分别ig给予XBXT-2 100 mg·kg^(-1)或同体积蒸馏水,每天1次,分别于给药14和16 d采用悬尾实验和强迫游泳实验检测小鼠抑郁样行为,18和20 d采用高架十字迷宫实验和爬梯实验检测小鼠焦虑样行为。结果 Western蛋白印迹法检测结果显示,与AAV组相比,GSK3β过表达组小鼠海马GSK3β含量显著升高(P<0.01),p-GSK3β(S9)含量无显著性差异。在开场实验中,GSK3β过表达组与AAV组间小鼠跨格次数和站立次数无显著差异。在小鼠悬尾和强迫游泳实验中,AAV+XBXT-2组与AAV组比较,小鼠不动时间显著缩短(P<0.05,P<0.01);GSK3β过表达+XBXT-2组与GSK3β过表达组比较,小鼠不动时间无明显差异。在高架十字迷宫实验中,与AAV组比较,AAV+XBXT-2组小鼠进入开臂次数百分比和开臂停留时间百分比显著增加(P<0.01,P<0.05);与GSK3β过表达组比较,GSK3β过表达+XBXT-2组小鼠上述行为指标无明显改变。在爬梯实验中,AAV+XBXT-2组比AAV组小鼠爬梯站立次数显著减少(P<0.05);GSK3β过表达+XBXT-2组与GSK3β过表达组比较,小鼠站立次数无明显差异。结论海马脑区GSK3β过表达可取消XBXT-2在小鼠悬尾和强迫游泳实验中的抗抑郁作用及在高架十字迷宫实验和爬梯实验中的抗焦虑作用。

关键词：小补心汤总黄酮抑郁焦虑糖原合成酶激酶3β 腺相关病毒

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高效液相色谱法测sGC-003片的含量及溶出度

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国际药学研究杂志 2016年第5期43卷 989-993页

作者：孙佳星孙建绪郭飞李迎张慧郑爱萍徐州医科大学药物分析教研室徐州221004 军事医学科学院毒物药物研究所药物制剂室抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

目的建立可溶性鸟苷酸环化酶(s GC)-003片的含量及溶出度测定方法。方法采用高效液相色谱(HPLC)法测定。HPLC条件如下:色谱柱:Phenomenex Luna C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水(40∶60,V/V);流速:1.0 ml/min;检测波长为:... 详细信息

目的建立可溶性鸟苷酸环化酶(s GC)-003片的含量及溶出度测定方法。方法采用高效液相色谱(HPLC)法测定。HPLC条件如下:色谱柱:Phenomenex Luna C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水(40∶60,V/V);流速:1.0 ml/min;检测波长为:214 nm;柱温:40℃;进样量:20μl(溶出度检测进样量80μl)。溶出度方法采用《中国药典》2015版溶出度测定第二法(桨法),以900 ml pH 4.5醋酸缓冲液、pH 6.8磷酸缓冲液及水为溶出介质,以50、75 r/min作为转速进行溶出条件的筛选。结果该法专属性良好;s GC-003在0.25~50μg/ml范围内线性关系良好(R^2=1);平均回收率为99.58%(RSD为0.75%,n=9);供试品溶液在12 h内保持稳定(RSD=0.39%,n=8)。确立了以900 ml pH 6.8磷酸缓冲液为溶出介质,桨法转速为50 r/min的溶出方法,30 min时溶出度达80%。结论所选溶出条件适用于s GC-003片溶出度检测。所建HPLC方法简便,灵敏,精密度高,重现性好,专属性强,结果准确,可用于s GC-003片含量测定和溶出度检测。

关键词：高效液相色谱法含量测定溶出度

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同位素稀释-气相色谱-质谱法检测大鼠血浆中的内源性胍丁胺

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色谱 2014年第7期32卷 779-783页

作者：丘忠丽林缨熊志立谢剑炜抗毒药物与毒理学国家重点实验室军事医学科学院毒物药物研究所北京100850 沈阳药科大学药学院辽宁沈阳110016

建立了大鼠血浆中内源性胍丁胺的同位素稀释-气相色谱-负化学电离质谱定量分析方法。大鼠血浆样品经蛋白沉淀并蒸干后,用六氟乙酰丙酮衍生化,采用Florisil固相萃取柱净化,以稳定同位素标记的d8-胍丁胺为内标,在气相色谱-质谱仪上采用负... 详细信息

建立了大鼠血浆中内源性胍丁胺的同位素稀释-气相色谱-负化学电离质谱定量分析方法。大鼠血浆样品经蛋白沉淀并蒸干后,用六氟乙酰丙酮衍生化,采用Florisil固相萃取柱净化,以稳定同位素标记的d8-胍丁胺为内标,在气相色谱-质谱仪上采用负化学电离方式电离,选择离子模式检测。胍丁胺标准溶液的检出限为0.005 7ng/mL。血浆中添加的胍丁胺在1.14-57.0 ng/mL范围内呈良好的线性关系（r=0.997）,方法回收率介于92.3%-109.8%之间,日内和日间精密度均小于15%。大鼠血浆中胍丁胺平均含量水平为（22±9）ng/mL,雌、雄大鼠血浆中的胍丁胺水平未见显著性差异（p〉0.05）。该方法特异性好、灵敏度高,为生物体内胍丁胺的生理功能研究提供了高灵敏的分析方法。

关键词：气相色谱-负离子化学电离质谱同位素稀释内源性胍丁胺血浆大鼠

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