检索结果-内蒙古大学图书馆

2019全国老年痴呆与认知障碍相关疾病学术大会

作者：曾菊程肖蕊周文霞张永祥军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所国家抗毒药物和毒理学重点实验室

目的神经炎症参是阿尔茨海默病（AD）的发生发展的重要因素之一,可抑制海马突触可塑性。六味地黄苷糖（LW-AFC）是从经典名方六味地黄汤中提取活性组分所构成的活性成分群,包括糖苷、寡糖和多糖。本研究主要考察LW-AFC对神经炎症所致突... 详细信息

目的神经炎症参是阿尔茨海默病（AD）的发生发展的重要因素之一,可抑制海马突触可塑性。六味地黄苷糖（LW-AFC）是从经典名方六味地黄汤中提取活性组分所构成的活性成分群,包括糖苷、寡糖和多糖。本研究主要考察LW-AFC对神经炎症所致突触可塑性损伤的作用,并对其所含单体免疫活性进行初步评价。方法灌胃给予雄性BALB/c小鼠LW-AFC两周,在体记录海马-齿状回长时程增强变化,检测外周血淋巴细胞亚群、外周血和脑组织中炎性细胞因子,免疫荧光染色观察小胶质细胞激活水平,单次腹腔注射脂多糖（LPS）(250μg·kg,ip)建立炎症模型,观察LW-AFC的作用。在体外,对LW-AFC中部分单体对正常BV-2细胞及LPS刺激BV-2所致TNF-α分泌水平进行检测。结果腹腔注射LPS 4 h后小鼠的兴奋性突触后电位降低,即长时程增强减弱,预防给予LW-AFC可显著改善炎症所导致小鼠神经突触可塑性的降低,可显著减轻海马中小胶质细胞及星形胶质细胞的激活水平。LW-AFC可显著上调炎症模型小鼠脾脏淋巴细胞中CD19细胞的比例,降低CD3CD4细胞比例;同时,LW-AFC能明显升高外周血中CD3CD4和CD3CD25细胞比例。LW-AFC可显著降低海马中IL-1β,IL-6,G-CSF和MCP-1,皮质中MCP-1以及外周血中TNF-α,IL-6,IL-12和INF-γ炎性细胞因子的水平。体外研究表明,LW-AFC中单体芍药苷、马钱苷酸、莫诺苷和水苏糖对正常BV-2细胞TNF-α的分泌有降低作用,而100μmol·L的芍药苷、马钱苷酸、莫诺苷以及10μmol·L的甘露三糖和CA-4-3对LPS刺激的BV-2细胞TNF-α的分泌有促进作用。结论LW-AFC对LPS所致突触可塑性损伤的改善作用以及对胶质细胞过度激活的减轻与LW-AFC对中枢神经和外周免疫系统炎症因子的降低及调节外周B细胞、辅助T细胞和调节性T细胞比例相关。

关键词： LW-AFC LTP 小胶质细胞细胞因子淋巴细胞亚群

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强碱清洗含砷铝制品中毒法医学鉴定2例

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法医学杂志 2020年第3期36卷 431-434页

作者：陈佳徐斌林缨邱泽武孟志云彭晓波吴剑峰谢剑炜军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850 解放军总医院第五医学中心中毒救治科北京100071 军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所北京100850

1案例1.1简要案情2017年8、9月份,某省两地相继发生两起不明原因中毒事件,中毒人数累计达15人,其中3人死亡。中毒患者均从事废旧设备的清洗翻新工作,口述在使用俗称"烧碱"的氢氧化钠强碱溶液清洗不明来源铝制金属设备时感觉... 详细信息

1案例1.1简要案情2017年8、9月份,某省两地相继发生两起不明原因中毒事件,中毒人数累计达15人,其中3人死亡。中毒患者均从事废旧设备的清洗翻新工作,口述在使用俗称"烧碱"的氢氧化钠强碱溶液清洗不明来源铝制金属设备时感觉不适并发生中毒,主要症状表现为不同程度的头晕、头痛、恶心、呕吐,并出现酱油色尿等,中毒原因不清楚。

关键词：法医毒物化学砷中毒铝

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基于表面增强拉曼光谱和顶空-气相色谱/氮磷检测技术的生氰糖苷类中成药中游离态氰化物含量测定

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药物分析杂志 2018年第7期38卷 1202-1209页

作者：刘易陈佳朱颖洁吴剑峰龚莹郭磊谢剑炜抗毒药物与毒理学国家重点实验室军事医学研究院毒物药物研究所北京100850 解放军军乐团卫生科北京100089

目的:分别建立表面增强拉曼光谱(SERS)和顶空-气相色谱/氮磷检测(HS-GC/NPD)2种技术方法,对生氰糖苷(简称氰苷)类中成药中的游离态氰化物进行含量测定和比对确认。方法:SERS方法结合在线裂解-吹扫捕集方式,对中成药中游离态氰化物进行... 详细信息

目的:分别建立表面增强拉曼光谱(SERS)和顶空-气相色谱/氮磷检测(HS-GC/NPD)2种技术方法,对生氰糖苷(简称氰苷)类中成药中的游离态氰化物进行含量测定和比对确认。方法:SERS方法结合在线裂解-吹扫捕集方式,对中成药中游离态氰化物进行提取转化,在785 nm激光(功率90 m W)、积分时间10 s下进行便携式SERS测定;GC-NPD方法则通过顶空进样的方式,采用HP-PLOT Q色谱柱(15 m×0.32 mm×20μm)进行分离,程序升温(初始温度30℃,维持1.5 min,以35℃·min^(-1)速率升至190℃,维持1 min)。结果:SERS和GC-NPD 2种方法均能用于氰苷类中成药中游离态氰化物的含量测定,检测结果基本一致,分别在质量浓度0.1~2 mg·L^(-1)(r=0.997 0)和0.05~50 mg·L^(-1)(r=0.997 9)范围内呈良好的线性关系。对比不同厂家及批次的通宣理肺丸剂、片剂及口服液的检测结果表明:仅在丸剂中发现游离态氰化物,其中最高剂量相当于每次服用氰化物约0.18 mg(以HCN计),苦杏仁苷在样品处理条件下不影响游离态氰化物的准确测定。结论:针对氰苷类中成药中可能存在的游离态氰化物,提供了准确、灵敏的2种技术方法,并互为参照,SERS方法更适于快速检测。所获得的中成药中氰化物的数据可为相关中成药产品的质量控制和工艺优化提供依据。

关键词：生氰糖苷次生代谢产物苦杏仁苷亚麻氰苷百脉根苷垂盆草苷氰化物中成药表面增强拉曼光谱气相色谱/氮磷检测

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外周血白细胞在全氟异丁烯所致急性肺损伤过程中的作用研究

外周血白细胞在全氟异丁烯所致急性肺损伤过程中的作用研究

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中国毒理学会第九次全国毒理学大会

作者：李子轲许兴兴赵建丁日高军事医学科学院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室武警黄金指挥部门诊部

目的大量炎性细胞,如多形核中性粒细胞(polymorphonuclear leukocyte,PMN)、肺泡巨噬细胞(alveolar macrophage,AM)在肺内的聚集浸润是全氟异丁烯(perfluoroisobutylene,PFIB)所致急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的重要表现,而外周血中嗜中性粒细胞(neutrophil,NEUT)、单核细胞(monocyte,MONO)是病理状态下肺内PMN、AM的重要来源。本研究旨在探讨外周血各分类白细胞,NEUT、MONO、淋巴细胞(lymphocyte,LYM)等在PFIB-ALI发生发展中的作用,为化学源性肺损伤致病机制研究提供参考。方法以小鼠为研究对象,腹腔给予环磷酰胺(cyclophosphamide,CPA)、PMN单克隆抗体(lymphocyte antigen 6G-1A8,1A8)、氯磷酸二钠脂质体(clodronate liposomes,CL)、地塞米松磷酸钠注射液(dexamethasone sodium phosphate injection,DEX)等工具药,通过不同的机制抑制或阻断外周血白细胞和/或各分类细胞,构建骨髓抑制模型(外周血白细胞整体抑制)、NEUT抑制模型、MONO抑制模型及LYMPH抑制伴随免疫力低下模型。同时对各干预小鼠采取亚致死性剂量PFIB全身暴露动态吸入染毒,在染毒后24 h测定各组小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白含量、肺湿重/系数,同时对肺组织进行炎性细胞特异性标记蛋白(F4/80和LY6G)的免疫荧光染色,观察上述预处理措施对小鼠PFIB-ALI的防治效果。结果:与空白对照相比,CPA可显著抑制外周血各白细胞(NEUT、LYM、MONO等)及机体免疫功能(脾系数、胸腺系数下降),DEX可显著抑制LYM及机体免疫功能(以上均P<0.001);与自身对照相比,Ly6g-1A8可显著抑制NEUT,CL可显著抑制MONO(以上均P<0.01),上述结果说明各干预模型构建成功。与PFIB染毒组比较,在CPA干预组和CL干预组发现BALF总蛋白含量和肺湿重/系数的显著降低(以上均P<0.01),免疫荧光染色显示PMN、AM在肺内的聚集程度亦显著下降,而Ly6g-1A8干预组和DEX干预组并无上述变化。结论利用CL部分抑制MONO、CPA高度抑制MONO,发现具有程度相关性肺保护作用,同时减少了PMN和AM在肺内的聚集。上述结果证明,在PFIB-ALI过程中,外周血MONO的分化补充是AM的重要来源,并通过减少AM和PMN肺内聚集,在PFIB-ALI中发挥了重要作用。PMN在肺内浸润扣押是PFIB-ALI致病的重要环节,而AM在其中发挥的作用也不容忽视。CPA和CL缓解ALI的作用机制,可能与药物作用减少外周血MONO数量,继而减少大量前炎性细胞因子和趋化因子的释放,导致PMN、AM向肺内趋化聚集的作用减弱,最终改变了肺局部炎症微环境中各炎性细胞、炎性介质、以及促炎/抗炎平衡的作用高度相关。

关键词：全氟异丁烯急性肺损伤白细胞中性粒细胞单核细胞淋巴细胞

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细胞治疗药物非临床安全评价研究

细胞治疗药物非临床安全评价研究

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中国毒理学会药物毒理与安全性评价学术大会（2019年）暨粤港澳大湾区生物医药产业第一届高峰论坛

作者：王全军军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所国家北京药物安全评价研究中心抗毒药物与毒理学国家重点实验室

细胞药物是以不同细胞为基础的用于疾病治疗的制剂、药物或产品的统称,是一种临床有效的治疗手段,可实施个性化治疗。细胞药物的种类很多,按其生物学特性可分为传统体细胞、免疫细胞以及各种不同的干细胞等。成体细胞包括肝细胞、血管... 详细信息

细胞药物是以不同细胞为基础的用于疾病治疗的制剂、药物或产品的统称,是一种临床有效的治疗手段,可实施个性化治疗。细胞药物的种类很多,按其生物学特性可分为传统体细胞、免疫细胞以及各种不同的干细胞等。成体细胞包括肝细胞、血管内皮细胞、角膜上皮细胞和软骨细胞等;干细胞(前体细胞),包括(成体组织干细胞,包括神经干细胞、造血干细胞和间充质干细胞;胚胎干细胞和诱导性多能干细胞)等和免疫细胞(DC,CIK,NK,CART,TCRT)等。细胞药物己在一些难治性疾病中得到应用,包括血液系统疾病、神经系统疾病、免疫系统疾病和抗衰老等。我国细胞类产品的监管目前实施的类双轨制,根据国家健康卫生委员会管理要求,依据《医疗技术临床应用管理办法》,以医疗机构为责任主体的登记备案制,开展的是"临床研究"。根据国家药品监督管理局,依据《药品注册管理办法》和《细胞治疗用产品的研究与评价技术指导原则》等相关要求,以药品上市许可持有人为责任主体的申报审批制,开展的是"临床试验"。但不管以何种管理方式,都应要满足"安全"和"有效"以及"质量可控"的基本理念。因此,细胞类药物的研究转化,干细胞制剂质量应该符合《干细胞制剂质量控制及临床前研究指导原则》,制剂的制备应符合GMP原则《药品生产质量管理规范》;临床前研究应该符合《药物非临床研究质量管理规范》。在非临床研究阶段,根据不同细胞类药物的特点,把控住其主要风险点,选择合适的动物模型,关注免疫原性和免疫毒性以及其他靶器官毒性,评估好致瘤性和促瘤性问题,解决体内代谢分布难题,消除审评专家的评审安全担忧,从而更好地推向临床,继而更快地服务于人们健康。

关键词：细胞类药物临床前评价研究

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小鼠应激易感与耐受模型的建立

小鼠应激易感与耐受模型的建立

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中国药理学会第十五次全国学术大会

作者：楚沙沙石天尧周文霞军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室广东药科大学

目的本研究采用足底电击建立小鼠应激易感与耐受动物评价模型,为深入研究焦虑障碍的发生机制提供依据。方法将C57BL/6J雄性小鼠随机分为对照组,足底电击组。造模方法:一周内随机选4 d进行电击(2次·d-1),每次时间不固定,实验时小鼠... 详细信息

目的本研究采用足底电击建立小鼠应激易感与耐受动物评价模型,为深入研究焦虑障碍的发生机制提供依据。方法将C57BL/6J雄性小鼠随机分为对照组,足底电击组。造模方法:一周内随机选4 d进行电击(2次·d-1),每次时间不固定,实验时小鼠先适应30 s,随后进行10 s声音刺激(85 dB,5 KHz);接着足底电击(1.5 mA,每次2 s)。焦虑易感与耐受评价方法:(1)通过社会交互实验中交互时间与未交互时间比值即交互指数来评价小鼠社会回避症状;(2)通过条件恐惧情景测试中不动时间评价小鼠恐惧记忆再体验症状;(3)通过惊跳反射实验中前脉冲抑制率(PPI)评价小鼠高警觉症状。结果 (1)社会交互实验中交互指数>1的为社会回避耐受小鼠,<1的为易感小鼠;(2)条件恐惧情景测试中足底电击组与对照组相比总的不动时间显著升高(P<0.01),其中不动时间小于等于应激前的为恐惧记忆再体验耐受小鼠,反之为易感小鼠。(3)惊跳反射实验中,74 dB下足底电击组PPI显著降低(P<0.05),其中≤应激前PPI值的为高警觉耐受小鼠,反之为易感小鼠。综上,以上3个实验中均没有出现阳性症状的定义为应激耐受小鼠(占总动物只数10%),均出现阳性症状的被定义为应激易感小鼠(占总动物只数15%)。结论通过以上方法,成功建立了一种小鼠应激易感与耐受的评价模型。

关键词：应激易感与耐受足底电击焦虑障碍

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钩藤碱及其同分异构体对神经系统作用的研究进展

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药学学报 2018年第7期53卷 1017-1022页

作者：黄晏周文霞张永祥赵勤实军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850 中国科学院昆明植物研究所植物化学与西部植物资源持续利用国家重点实验室云南昆明650201

钩藤是我国常用的中药之一,具有清热平肝,息风定惊之功效。生物碱类物质是钩藤的主要活性物质,现代实验药理学研究表明钩藤及其生物碱类物质对神经系统具有广泛的生物学效应,其中钩藤碱是钩藤中含量最高、研究最多的生物碱。本文就钩藤... 详细信息

钩藤是我国常用的中药之一,具有清热平肝,息风定惊之功效。生物碱类物质是钩藤的主要活性物质,现代实验药理学研究表明钩藤及其生物碱类物质对神经系统具有广泛的生物学效应,其中钩藤碱是钩藤中含量最高、研究最多的生物碱。本文就钩藤碱及其同分异构体(异钩藤碱、柯诺辛碱和柯诺辛碱B)对神经系统的作用及机制进行综述,为其应用拓展和深入研究提供参考。

关键词：钩藤钩藤碱柯诺辛碱神经系统阿尔茨海默病癫痫

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阿尔茨海默病患者来源的诱导多能干细胞向神经干细胞及神经元的诱导分化

阿尔茨海默病患者来源的诱导多能干细胞向神经干细胞及神经元的诱...

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2019全国老年痴呆与认知障碍相关疾病学术大会

作者：张林徐玫刘港蒋宁周文霞张永祥军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室沈阳药科大学

目的将阿尔茨海默病（AD）患者、年轻人和认知正常老年人的血细胞重编程为诱导多能干细胞（iPSC）,进一步分化为神经干细胞（NSC）和神经元,观察不同来源iPSC向NSC和神经元分化时细胞表型和功能的变化。方法取年轻人、认知正常老年人和A... 详细信息

目的将阿尔茨海默病（AD）患者、年轻人和认知正常老年人的血细胞重编程为诱导多能干细胞（iPSC）,进一步分化为神经干细胞（NSC）和神经元,观察不同来源iPSC向NSC和神经元分化时细胞表型和功能的变化。方法取年轻人、认知正常老年人和AD患者来源的外周单核巨噬细胞,引入转录因子Oct3/4,Sox2,c-Myc和Klf4重编程为iPSC,进一步诱导为NSC和神经元;应用IncuCyte ZOOM动态细胞观察系统记录分化过程中细胞生长曲线及神经突生长情况;EdU增殖试剂盒检测细胞增殖能力;采用NSC标记物Nestin,Sox1,Sox2和Ki67对诱导得到的NSC鉴定,双肾上腺皮质激素（DCX）对诱导得到的新生神经元鉴定;采用全细胞膜片钳记录分化神经元钠电流、钾电流以及诱发动作电位。结果经过7 d诱导,iPSC可分化为NSC,年轻人和认知正常老年人以及AD患者NSC均表达NSCs标记物Nestin,Sox1,Sox2和Ki67。NSC传代过程中,AD患者来源NSC生长曲线低于年轻人和认知正常老年人;EdU结果显示AD患者来源NSCs中EdU阳性细胞比例显著少于年轻人和认知正常老年人;AD患者来源NSC传代过程中DCX阳性细胞比例明显高于年轻人和认知正常老年人,且可记录到K电流、Na电流以及诱发动作电位;进一步将NSC向神经元定向分化结果显示,AD患者DCX阳性新生神经元比例以及神经突的生长速度明显大于年轻人和认知正常老年人;膜片钳结果显示AD患者来源神经元K电流和Na电流明显大于年轻人和认知正常老年人,动作电位频率和幅度也大于年轻人和认知正常老年人。结论年轻人、认知正常老年人和AD患者的iPSC能够诱导分化为NSC和神经元;AD患者来源NSC增殖能力显著低于年轻人和认知正常老年人;且AD患者来源NSC更容易向神经元分化,分化的神经元表现出更强的兴奋性。

关键词：阿尔茨海默病诱导多能干细胞神经干细胞神经元

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铝对斑马鱼幼鱼运动行为的影响及其机制

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中国药理学与毒理学杂志 2018年第3期32卷 208-214页

作者：谈勇许梦川王远张芳李小满陈豪赵宝全汪雪雁安徽农业大学茶与食品科技学院安徽合肥230036 军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850 解放军总医院肾脏疾病国家重点实验室北京100853

目的研究铝对斑马鱼幼鱼运动行为的影响及其分子机制。方法将受精后3 d的斑马鱼幼鱼随机分别暴露于AlCl_3(0,50,100和150μg·L-1)48,72或96 h,利用Noldus斑马鱼幼鱼行为学检测系统检测其行为,HE染色检测眼的病理变化,生化法检测活... 详细信息

目的研究铝对斑马鱼幼鱼运动行为的影响及其分子机制。方法将受精后3 d的斑马鱼幼鱼随机分别暴露于AlCl_3(0,50,100和150μg·L-1)48,72或96 h,利用Noldus斑马鱼幼鱼行为学检测系统检测其行为,HE染色检测眼的病理变化,生化法检测活性氧(ROS)水平,荧光定量PCR检测血脑屏障及神经系统相关基因m RNA表达水平。结果与正常对照组相比,AlCl_3暴露组斑马鱼幼鱼运动轨迹杂乱无章,部分个体停止活动;暴露48 h,AlCl_3150μg·L-1组运动距离和速度显著下降(P<0.01);暴露72和96 h,各浓度组运动距离和速度均显著下降(P<0.01)。病理检测结果表明,各组斑马鱼幼鱼无明显的眼组织病理改变。与正常对照组相比,暴露48 h,AlCl_3100和150μg·L-1组斑马鱼幼鱼体内ROS水平显著升高(P<0.01);暴露72和96 h,AlCl_3各浓度组ROS水平均显著升高(P<0.01)。荧光定量PCR检测结果显示,与正常对照组相比,AlCl_3暴露48 h,50μg·L-1组淀粉样前体蛋白b(appb)m RNA表达明显升高(P<0.01),100μg·L-1组早老素1(psen1)和胶质细胞原纤维酸性蛋白(gfap)m RNA表达显著降低(P<0.01,P<0.05),150μg·L-1组psen1,生长相关蛋白43(gap43)和gfap m RNA表达均显著降低(P<0.01);AlCl_3暴露72 h,50μg·L-1组gap43和gfap m RNA表达明显降低(P<0.01),100和150μg·L-1组appb和psen1 m RNA表达显著升高(P<0.01),gap43和gfap m RNA表达明显降低(P<0.01);暴露96 h,AlCl_350μg·L-1组appb和gap43 m RNA表达显著升高(P<0.01),100μg·L-1组appb和psen1 m RNA表达显著升高(P<0.01),gap43和gfap m RNA表达明显降低(P<0.01,P<0.05),150μg·L-1组appb和psen1 m RNA表达显著升高(P<0.01),密封蛋白(cldn5a),gap43和gfap m RNA表达明显降低(P<0.01,P<0.05)。结论铝暴露可导致斑马鱼幼鱼运动行为发生变化,其机制可能与体内ROS水平升高,以及cldn5a,appb,psen1,gap43和gfap基因表达的变化有关。

关键词：铝斑马鱼神经毒性

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基质金属蛋白酶-9基因敲除斑马鱼模型的建立

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国际药学研究杂志 2018年第12期45卷 914-919,933页

作者：张芳陈豪李行舟王永安赵殿发李前赵宝全汪雪雁安徽农业大学合肥230000 军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

目的建立斑马鱼基质金属蛋白酶-9(MMP9)基因敲除模型,为研究MMP9基因在阿尔茨海默病(AD)中的作用机制奠定基础。方法根据CRISPR/Cas9的靶点设计原则,利用生物信息学方法,选取MMP9基因敲除靶点,构建gRNA质粒,将gRNA和Cas9的mRNA混合后注... 详细信息

目的建立斑马鱼基质金属蛋白酶-9(MMP9)基因敲除模型,为研究MMP9基因在阿尔茨海默病(AD)中的作用机制奠定基础。方法根据CRISPR/Cas9的靶点设计原则,利用生物信息学方法,选取MMP9基因敲除靶点,构建gRNA质粒,将gRNA和Cas9的mRNA混合后注入AB野生型和APPsw转基因斑马鱼(APPsw+/+)的受精卵单细胞中,48 h后通过PCR、酶切及基因测序等方法验证基因敲除情况;遗传学方法传代筛选,建立斑马鱼mmp9-/-、APPsw+/+-mmp9-/-基因敲除品系;对基因敲除品系的发育、突变遗传率、突变类型和行为学等进行研究。结果构建成功4条gRNA,m2是最佳敲除靶点,突变遗传率平均>50%;野生型和APPsw转基因斑马鱼模型分别获得2个突变类型,APPsw+/+-mmp9-/-模型分别在敲除部位缺失4个和8个碱基,mmp9-/-缺失5个碱基和敲入5个碱基并伴有1处点突变,建立了野生型和APPsw过表达型MMP9基因敲除斑马鱼品系;F2代纯合子孵化率、幼鱼期表型和行为学检测结果与正常斑马鱼无统计学差异(P>0.05),成鱼期开始出现学习记忆能力的变化。结论MMP9基因的敲除能够减缓痴呆的发生发展进程,该模型的建立为AD研究提供支持。

关键词： CRISPR/Cas9 基质金属蛋白酶-9 斑马鱼

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