检索结果-内蒙古大学图书馆

现代生物医学进展 2012年第34期12卷 6624-6627页

作者：郭文东郑倩倩朱亚勤中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室细胞病理生物学研究室辽宁沈阳110001

目的:构建重组原核表达载体pGEX-5x-1-p65,诱导GST-p65融合蛋白的表达并观察其包涵体的显微结构。方法:应用PCR技术扩增得到p65全长序列,并亚克隆至带有GST标签的pGEX-5x-1载体中。经酶切、测序鉴定后,在原核细胞中诱导表达GST-p65融合... 详细信息

目的:构建重组原核表达载体pGEX-5x-1-p65,诱导GST-p65融合蛋白的表达并观察其包涵体的显微结构。方法:应用PCR技术扩增得到p65全长序列,并亚克隆至带有GST标签的pGEX-5x-1载体中。经酶切、测序鉴定后,在原核细胞中诱导表达GST-p65融合蛋白并将诱导后的菌体制作透射电镜标本,观察菌体内部显微结构。结果:成功构建表达载体pGEX-5x-1-p65,原核细胞中诱导表达、凝胶电泳后未见可溶性融合蛋白的高效表达。透射电镜观察到在承载有重组载体的菌体内部出现大量高电子密度的包涵体。结论:成功构建了原核表达载体pGEX-5x-1-p65,电子显微镜观察并证实在原核细胞内p65蛋白诱导表达形成包涵体。

关键词： p65 透射电镜包涵体

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赖氨酸特异性组蛋白去甲基化酶1作用机制及其生物学功能的研究进展

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生命科学 2012年第1期24卷 7-12页

作者：翟曜耀刘晓霞赵越中国医科大学基础医学院卫生部细胞生物学重点实验室医学细胞生物学教育部重点实验室染色质生物学研究室沈阳110001

与其他化学修饰,如乙酰化、磷酸化、泛素化等相似,组蛋白赖氨酸甲基化是一个可以逆转的组蛋白修饰,是一个动态调节的过程。赖氨酸特异性组蛋白去甲基化酶1(lysine specific demethylase 1,LSD1)是一个黄素腺嘌呤二核苷酸(flavin adenine... 详细信息

与其他化学修饰,如乙酰化、磷酸化、泛素化等相似,组蛋白赖氨酸甲基化是一个可以逆转的组蛋白修饰,是一个动态调节的过程。赖氨酸特异性组蛋白去甲基化酶1(lysine specific demethylase 1,LSD1)是一个黄素腺嘌呤二核苷酸(flavin adenine dinulcleotide,FAD)依赖性胺氧化酶,它能够特异性脱去H3K4和H3K9位点上的单甲基化和二甲基化的甲基基团。LSD1参与调控核受体介导的基因转录,并分别维持染色质的活性和非活性状态,被誉为细胞深处的基因"开关"。LSD1的功能失衡可引发多种重要生命现象的改变。主要综述LSD1的结构、作用机制及其在肿瘤发生、胚胎发育、体细胞重编程的调控、细胞分裂和造血等过程中生物学功能的研究新进展。

关键词： LSD1 基因转录调控组蛋白去甲基化酶肿瘤抑制胚胎发育

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雄激素受体与男性代谢综合征

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生命的化学 2013年第1期33卷 41-45页

作者：邓仕超赵越中国医科大学教育部医学细胞生物学重点实验室暨卫生部细胞生物学重点实验室染色质生物学研究室沈阳110001

雄激素受体(androgen receptor,AR)属于核受体超家族成员,以配体依赖的方式介导靶基因的转录活性,并招募一系列辅调节因子调控其转录,发挥其生物学功能。近年研究证实,AR可作为一个正向调节因子,通过影响脂代谢、抑制前脂肪细胞的转化... 详细信息

雄激素受体(androgen receptor,AR)属于核受体超家族成员,以配体依赖的方式介导靶基因的转录活性,并招募一系列辅调节因子调控其转录,发挥其生物学功能。近年研究证实,AR可作为一个正向调节因子,通过影响脂代谢、抑制前脂肪细胞的转化、增强机体对胰岛素的敏感性等途径有效预防肥胖和胰岛素抵抗相关疾病的发生。对AR的结构、作用机制及其对男性脂代谢、胰岛素抵抗等影响的研究进展进行综述。

关键词：雄激素受体转录调控脂代谢异常肥胖胰岛素抵抗

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USP22在转录调控及肿瘤发生中的作用

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生命的化学 2012年第5期32卷 400-403页

作者：刘琪王胜利赵越中国医科大学基础医学院细胞生物学系卫生部细胞生物学重点实验室暨教育部医学细胞生物学重点实验室染色质生物学研究室沈阳110001

泛素特异性蛋白酶22(ubiquitin specific protease 22,USP22)是一种组蛋白去泛素化酶,在核受体介导的基因转录调控中起增强转录活性的作用。USP22在肿瘤发生、发展中发挥着重要作用,影响癌基因c-Myc介导的基因转录,从而促进肿瘤的增殖... 详细信息

泛素特异性蛋白酶22(ubiquitin specific protease 22,USP22)是一种组蛋白去泛素化酶,在核受体介导的基因转录调控中起增强转录活性的作用。USP22在肿瘤发生、发展中发挥着重要作用,影响癌基因c-Myc介导的基因转录,从而促进肿瘤的增殖和生长;另一方面,USP22可改变远上游识别序列结合蛋白1(far upstream element-binding protein 1,FBP1)的泛素化水平,从而影响FBP1下游的抑癌基因p21的表达。USP22与胃癌、大肠癌、乳腺癌及膀胱癌等肿瘤的病理进程相关。此外,USP22在端粒稳态的维持中起作用。本文主要综述USP22参与核受体介导的基因转录调控的表观遗传学机制及其在肿瘤发生中的作用。

关键词： USP22 转录调控表观遗传学机制肿瘤的发生发展

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人IKKγ基因重组载体的构建及在原核体内的表达纯化

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解剖科学进展 2013年第1期19卷 71-74页

作者：郭文东朱亚勤中国医科大学基础医学院细胞生物学教育部重点实验室细胞病理生物学研究室辽宁沈阳110001

目的构建重组原核表达载体pGEX-5X-1-IKKγ,诱导GST-IKKγ融合蛋白的表达并以GST-pulldown方法得到纯化的融合蛋白。方法应用PCR技术,以M6P8载体为模板扩增得到IKKγ全长序列,并亚克隆至带有GST标签的pGEX-5X-1载体中。经酶切、测序鉴定... 详细信息

目的构建重组原核表达载体pGEX-5X-1-IKKγ,诱导GST-IKKγ融合蛋白的表达并以GST-pulldown方法得到纯化的融合蛋白。方法应用PCR技术,以M6P8载体为模板扩增得到IKKγ全长序列,并亚克隆至带有GST标签的pGEX-5X-1载体中。经酶切、测序鉴定后,重组载体转化至原核细胞中并进行诱导表达,以SDS-PAGE凝胶电泳染色鉴定融合蛋白的表达。融合蛋白经GSTbeads沉降后,Western blot分析、鉴定融合蛋白的表达及纯化情况。结果将人IKKγ亚克隆至原核表达载体pGEX-5X-1,酶切、测序鉴定无误。经诱导得到高表达的融合蛋白,经SDS-PAGE电泳染色后可见高表达条带。Westernblot鉴定经GSTbeads沉降后的蛋白,在74kD鉴定出融合蛋白的特异性条带。结论成功构建了原核表达载体pGEX-5X-1-,并在原核细胞内表达,融合蛋白可以经GSTbeads沉降用于GST-pulldown实验。

关键词： IKKγ基因载体构建诱导表达

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ERα介导的基因转录在子宫内膜癌变中的研究进展

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生命科学 2013年第8期25卷 823-828页

作者：高振家赵越中国医科大学沈阳110001 中国医科大学基础医学院卫生部细胞生物学重点实验室教育部医学细胞生物学重点实验室染色质生物学研究室沈阳110001

雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)是核受体超家族成员,主要以配体依赖的方式发挥其生物学功能。ERα对女性生殖系统发育起作用,影响子宫内膜的增殖与分化。研究证实,ERα介导的基因转录在I型子宫内膜癌变进程中扮演着重要的角色... 详细信息

雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)是核受体超家族成员,主要以配体依赖的方式发挥其生物学功能。ERα对女性生殖系统发育起作用,影响子宫内膜的增殖与分化。研究证实,ERα介导的基因转录在I型子宫内膜癌变进程中扮演着重要的角色。此外,雌激素受体β(estrogen receptorβ,ERβ)或雌激素相关受体(estrogen-related receptor,ERR)也参与此过程中,并与ERα有功能联系。主要综述ERα介导的基因转录中参与转录调控的辅助调节因子、ERα下游重要的靶基因及其在子宫内膜癌中的重要作用,为子宫内膜癌的早期发现和治疗提供新的思路和靶点。

关键词：雌激素受体辅助调节因子靶基因子宫内膜癌

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Twist介导的TFF3瞬时激活NFκB炎性应答上游信号机制

Twist介导的TFF3瞬时激活NFκB炎性应答上游信号机制

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第三届细胞结构与功能的信号基础研讨会

作者：郭文东冯艳玲刘彩红王利利朱亚勤教育部医学细胞生物学重点实验室细胞病理生物学研究室中国医科大学细胞生物学教研室

NFκB是炎症应答的重要转录调节因子。在炎性细胞中,多以p65/p50二聚体参与炎性介质诱导的炎症应答,如细胞因子分泌、凋亡。但肠上皮(IEC)中NFκB是如何发挥它的免疫炎性应答调节作用,尚不明确。IEC作为重要的免疫防御细胞成分,通过分泌... 详细信息

NFκB是炎症应答的重要转录调节因子。在炎性细胞中,多以p65/p50二聚体参与炎性介质诱导的炎症应答,如细胞因子分泌、凋亡。但肠上皮(IEC)中NFκB是如何发挥它的免疫炎性应答调节作用,尚不明确。IEC作为重要的免疫防御细胞成分,通过分泌***等免疫分子广泛参与肠组织的固有免疫调节;组织稳态维持。TFF3是主要表达于肠的一种新型肠泌肽、研究显示它具有促进上皮迁徙、损伤修复、抗细胞凋亡作用;在炎性疾病中表达上调。我们已报道了新发现的肠上皮转录因子Twist,并且显示TFF3通过Twist,瞬时激活NFκB,NFκB以p65/p65二聚体参与细胞因子的活性调节,但不清楚这个信号途径的上游分子调节机制。目前的研究表明:IKKs参与这一信号途径的调节,并且可能以异二聚体的方式调节TFF3诱导激活的NFκB特异抑制子IκBα的磷酸化及其相关分子的表观修饰,从而调节Twist介导的TFF3瞬时激活NFκB炎性应答,制衡ILs分泌,维持肠固有稳态。研究对明确TFF3的抗炎保护作用分子机制将提供新的靶向,对治疗以NFκB激活为机制的炎症性疾病的潜在临床肽类药物开发提供实验支持。

关键词： TFF3 NFκB炎症应答上游信号

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USP22截短质粒构建鉴定及其在肝细胞肝癌细胞中的功能初探

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现代肿瘤医学 2020年第12期28卷 2000-2005页

作者：谢威文孙宁王胜利王春玉赵越中国医科大学生命科学学院卫生部细胞生物学重点实验室教育部医学细胞生物学重点实验室染色质生物学研究室辽宁沈阳110122

目的:构建编码ubiquitin specific peptidase 22(USP22)截短蛋白的表达质粒,探索USP22在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的作用及其分子机制,并初步解析USP22在HCC细胞系中对细胞增殖及索拉菲尼作用的影响。方法:设计合成... 详细信息

目的:构建编码ubiquitin specific peptidase 22(USP22)截短蛋白的表达质粒,探索USP22在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的作用及其分子机制,并初步解析USP22在HCC细胞系中对细胞增殖及索拉菲尼作用的影响。方法:设计合成针对于人源USP22截短质粒序列的引物,通过PCR的方法以含有USP22全长蛋白编码序列的表达载体作为模板,扩增目的片段,再用限制性内切酶EcoRⅠ和XhoⅠ进行双酶切,连接转化后,将构建好的质粒进行酶切鉴定及测序,证明USP22截短质粒构建成功。将构建好的USP22全长及截短表达质粒转染到HCC细胞系HCC-LM3中,分别进行Western blot和confocal实验检测USP22全长及截短质粒在HCC-LM3细胞中的表达及定位。生物学功能方面,利用MTS法检测USP22全长对HCC细胞增殖及索拉菲尼作用的影响。结果:成功构建了USP22截短表达质粒,并在HCC细胞系HCC-LM3中验证了其蛋白表达;USP22全长及所构建的截短质粒编码蛋白在HCC-LM3中定位于细胞核;此外,生物学功能实验证实USP22促进HCC-LM3细胞增殖,并削弱了索拉菲尼对HCC-LM3细胞生长的抑制作用。结论:在HCC-LM3细胞中,USP22及其截短质粒编码蛋白均定位于细胞核;USP22促进HCC细胞增殖,且可能参与在HCC治疗中的索拉菲尼耐受进程。

关键词： USP22 截短质粒构建细胞生长增殖肝细胞肝癌索拉菲尼

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GST-LMO1融合蛋白表达载体的构建及其在原核细胞中的表达

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中国医科大学学报 2011年第11期40卷 961-963,978页

作者：顾卉佟宇鑫刘彤李慧李丹妮袁正伟中国医科大学附属盛京医院实验研究中心沈阳110001 中国医科大学基础医学院细胞生物教研室细胞生物学教育部、卫生部重点实验室沈阳110001 中国医科大学第94期临床医学系沈阳110001

目的构建GST-LMO1融合蛋白表达载体,并在原核细胞大肠埃希菌(***)中诱导表达。方法以人胎脑文库为模板,用PCR方法法扩增出LMO1基因全长及各个截短突变体,通过BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点分别将其定向插入pGEX-5X-2载体中,构建原核表达质粒pG... 详细信息

目的构建GST-LMO1融合蛋白表达载体,并在原核细胞大肠埃希菌(***)中诱导表达。方法以人胎脑文库为模板,用PCR方法法扩增出LMO1基因全长及各个截短突变体,通过BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点分别将其定向插入pGEX-5X-2载体中,构建原核表达质粒pGEX-5X-2-LMO1及其截短突变体,通过酶切电泳鉴定和DNA序列测定正确后,转入*** BL21中,经异丙基硫代β-D半乳糖苷诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定。结果酶切电泳及测序结果证明,成功构建了原核表达质粒pGEX-5X-2-LMO1及其截短突变体,并用Western blot方法证实了GST-LMO1全长及各个截短突变体融合蛋白的表达。结论成功构建了LMO1全长及其截短突变体原核表达载体,并证实了其在原核细胞大肠埃希菌中的表达,为LMO1结构与功能的研究提供了前提基础。

关键词： LMO1 截短突变体质粒原核表达

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AR在膀胱癌发生发展中作用的研究进展

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生命科学 2015年第10期27卷 1268-1273页

作者：宋婷婷何天宇赵越王春玉中国医科大学沈阳110122 中国医科大学基础医学院卫生部细胞生物学重点实验室教育部医学细胞生物学重点实验室染色质生物学研究室沈阳110122

雄激素受体(androgen receptor,AR)是依赖配体活化的转录因子,同时也是类固醇激素受体超家族中的一员,参与靶细胞的增殖和分化。膀胱癌是存在较大性别差异的肿瘤之一。一些数据表明,AR在膀胱癌的进程中发挥重要作用,并部分解释了膀胱癌... 详细信息

雄激素受体(androgen receptor,AR)是依赖配体活化的转录因子,同时也是类固醇激素受体超家族中的一员,参与靶细胞的增殖和分化。膀胱癌是存在较大性别差异的肿瘤之一。一些数据表明,AR在膀胱癌的进程中发挥重要作用,并部分解释了膀胱癌在不同性别存在差异的原因,但具体机制远不如其在前列腺癌中的机制明确。主要综述几个与AR有重要联系并参与膀胱癌发生发展的分子,阐述AR介导基因转录及AR辅调节因子在膀胱癌中的作用及机制,为膀胱癌的诊断和治疗提供新的思路和靶点。

关键词：雄激素受体膀胱癌转录调控辅调节因子性别差异

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