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腺病毒介导的小鼠过氧化物酶体增殖剂活化受体γ基因过度表达对Raw264.7细胞小窝蛋白-1基因和蛋白表达影响的实验研究

中华心血管病杂志 2006年第5期34卷 458-463页

作者：胡琴张运刘春喜张梅井玛贺红冯进波王蓉蒋桂花张宪军姜虹朱清教育部和卫生部心血管重构和功能研究重点实验室山东大学齐鲁医院心内科

目的比较腺病毒介导的小鼠过氧化物酶体增殖剂活化受体γ(PPARγ)基因过度表达与配体活化对小鼠Raw264.7巨噬细胞小窝蛋白-1(CAV-1)基因和蛋白表达的影响,探讨PPARγ基因对巨噬细胞CAV-1的调控作用及机制。方法首先构建表达小鼠PPARγ1... 详细信息

目的比较腺病毒介导的小鼠过氧化物酶体增殖剂活化受体γ(PPARγ)基因过度表达与配体活化对小鼠Raw264.7巨噬细胞小窝蛋白-1(CAV-1)基因和蛋白表达的影响,探讨PPARγ基因对巨噬细胞CAV-1的调控作用及机制。方法首先构建表达小鼠PPARγ1基因的复制缺陷型腺病毒表达载体;将Raw264.7细胞随机分成对照组、PPARγ基因过度表达组、PPARγ活化剂曲格列酮干预组以及PPARγ基因过度表达和曲格列酮共刺激组进行干预;观察各组Raw264.7细胞PPARγ和CAV-1基因和蛋白的表达变化。结果RT-PCR检测对照组Raw264.7细胞有CAV-1基因的表达,免疫印迹法未发现CAV-1蛋白表达,但免疫细胞化学证实胞膜和核膜上均有少量CAV-1表达;经RT-PCR、免疫细胞化学和免疫印迹检测发现PPARγ基因过度表达组、曲格列酮干预组和二者共刺激组Raw264.7细胞CAV-1基因和蛋白表达明显增加(且共刺激组>PPARγ基因过度表达组>曲格列酮干预组,P<0.05)。对照组Raw264.7胞浆内PPARγ表达量较低,而PPARγ基因过度表达组和共刺激组PPARγ表达均明显增加(P<0.05),而曲格列酮干预组无明显变化。结论PPARγ基因活化或过度表达均能上调Raw264.7细胞CAV-1基因和蛋白表达。曲格列酮活化PPARγ基因,增加CAV-1基因和蛋白表达,但不增加PPARγ基因和蛋白表达水平。与单一作用比较,同时活化和过度表达PPARγ基因对CAV-1基因和蛋白的表达有累积效应,说明PPARγ的这一作用在配体活化下增强。推测曲格列酮上调CAV-1表达依赖于PPARγ,非本身药理特性所致。

关键词：动脉硬化细胞质膜微囊蛋白巨噬细胞过氧化物酶体增殖剂活化受体γ

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马来酸罗格列酮增强过氧化物酶体增殖剂活化受体γ1基因转染抗ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的作用

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中华心血管病杂志 2007年第11期35卷 1050-1056页

作者：胡琴张运张宪军张澄贺红朱清蒋桂花井玛姜虹刘春喜冯进波教育部和卫生部心血管重构和功能研究重点实验室山东大学齐鲁医院心内科济南250012 教育部和卫生部心血管重构和功能研究重点实验室山东大学齐鲁医院皮肤科济南250012

目的探讨过氧化物酶体增殖剂活化受体(PPAR)γ活化剂马来酸罗格列酮能否增强腺病毒介导的 mPPARγ1基因转染抗 ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的作用。方法将20周龄ApoE-/-小鼠高脂饲养20周后随机分成4组(每组 n=10),即 AdPPARγ1组、AdPPARγ... 详细信息

目的探讨过氧化物酶体增殖剂活化受体(PPAR)γ活化剂马来酸罗格列酮能否增强腺病毒介导的 mPPARγ1基因转染抗 ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的作用。方法将20周龄ApoE-/-小鼠高脂饲养20周后随机分成4组(每组 n=10),即 AdPPARγ1组、AdPPARγ1+RO 组(病毒干预前1周予罗格列酮4 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃)、AdGFP 组和 PBS 组。转染2周后比较各组小鼠主动脉根部斑块面积均值。Movat 5色套染法和油红 O 染色分析主动脉根部斑块成分变化。检测斑块内 PPARγ、血管平滑肌细胞(SM-actin)、巨噬细胞(MOMA-2)、MMP-9/TIMP-1、CD40/CD40L 和组织因子(TF)等抗原的免疫活性。结果 PBS 组与 AdGFP 组比较,各项指标差异均无统计学意义。与AdGFP 组比较,AdPPARγ1组和 AdPPARγ1+RO 组 ApoE-/-小鼠主动脉根部斑块面积和脂质含量减少(P<0.05)[AdGFP 组、AdPPARγ1组和 AdPPARγ1+RO 组病变面积均值分别为(0.98±0.17)、(0.86±0.12)、(0.79±0.15)mm^2,油红 O 染色阳性面积分别为(270±49)×10~3、(150±35)×10~3、(80±21)×10~3μm^2]。Movat 染色法显示 PBS 组和 AdGFP 组小鼠主动脉根部斑块成分差异不显著,而 AdPPARγ1组和 AdPPARγ1+RO 组纤维帽较厚、弹性纤维、胶原和蛋白聚糖含量增加。与 AdGFP组比较,AdPPARγ1组和 AdPPARγ+RO 组主动脉根部斑块 PPARγ、SM-actin、TIMP-1抗原免疫活性增强,而 MOMA-2、MMP-9、CD40/CD40L 和 TF 抗原免疫活性减弱,其中 AdPPARγ1+RO 组作用最显著。结论腺病毒介导的 mPPARγ1基因转染遏制 ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化进程,促进动脉粥样硬化斑块向稳定表型转换,PPARγ活化剂马来酸罗格列酮增强上述作用。

关键词：动脉硬化罗格列酮过氧化物酶体增殖剂活化受体γ

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缬沙坦逆转糖尿病心肌病大鼠心肌间质纤维化的作用

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中华医学杂志 2006年第4期86卷 232-236页

作者：钟明张运苗雅黎莉巩会平马骁孙惠张薇山东大学齐鲁医院心内科教育部和卫生部心血管重构和功能研究重点实验室济南250012

目的探讨缬沙坦逆转糖尿病心肌病(DCM)心肌间质纤维化的作用机制。方法雄性Wistar大鼠40只随机分为3组对照组(8只),DCM组(16只),缬沙坦干预组(16只)。采用高脂高热量饮食诱导出胰岛素抵抗,加小剂量链脲佐菌素(STZ)注射建立DCM动物模型... 详细信息

目的探讨缬沙坦逆转糖尿病心肌病(DCM)心肌间质纤维化的作用机制。方法雄性Wistar大鼠40只随机分为3组对照组(8只),DCM组(16只),缬沙坦干预组(16只)。采用高脂高热量饮食诱导出胰岛素抵抗,加小剂量链脲佐菌素(STZ)注射建立DCM动物模型。利用Masson染色、实时定量逆转录-聚合酶链反应、Western印迹技术,检测左室心肌胶原含量、血小板反应素-1(TSP-1)、TGFβ1mRNA表达水平和蛋白质表达的变化。结果与对照组相比,DCM大鼠左室心肌组织胶原含量明显升高(11%±3%vs17%±3%,P<0·01),存在心肌间质纤维化;TSP-1mRNA和蛋白质表达水平均明显升高(0·0089±0·0034vs0·0141±0·0037,96±17vs130±17,均P<0·05),TGFβ1mRNA、活性和非活性TGFβ1蛋白质表达水平亦明显升高(0·0054±0·0009vs0·0126±0·0057,103±18vs143±17,99±20vs155±35,均P<0·01);应用缬沙坦进行干预治疗后,除非活性TGFβ1蛋白质表达水平无明显变化外,上述异常均明显减轻。结论缬沙坦通过抑制TSP-1/TGFβ1信号传导途径在逆转DCM心肌间质纤维化发生发展过程中起着重要的作用。

关键词：糖尿病心肌病,肥大性受体,血管紧张素信号传递

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斑块稳定性与炎症反应在急性冠状动脉综合征中作用的研究

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中华心血管病杂志 2006年第6期34卷 512-514页

作者：丁士芳张运张梅陈文强陈玉国李继福纪求尚李贵双教育部和卫生部心血管重构和功能研究重点实验室山东大学齐鲁医院心内科济南250012

目的探讨冠状动脉(冠脉)粥样斑块稳定性和炎症反应在急性冠状动脉综合征(ACS)中的作用。方法对28例ACS和13例稳定性心绞痛(SA)患者“罪犯”冠脉进行血管内超声(IVUS)检查,同时测定外周血清高敏C反应蛋白(hs-CRP)、基质金属蛋白酶-9(MMP... 详细信息

目的探讨冠状动脉(冠脉)粥样斑块稳定性和炎症反应在急性冠状动脉综合征(ACS)中的作用。方法对28例ACS和13例稳定性心绞痛(SA)患者“罪犯”冠脉进行血管内超声(IVUS)检查,同时测定外周血清高敏C反应蛋白(hs-CRP)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、组织型基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、可溶性CD40L(sCD40L)含量。结果ACS患者冠脉病变处以软斑块为主71.4%(20/28),SA患者冠脉病变处以硬斑块为主76.9%(10/13),差异有统计学意义(P=0.004)。与SA组比较,ACS组病变处斑块面积大(P=0.004)、斑块负荷重(P=0.048)、以正性重构为主(P=0.013)。ACS组血清hs-CRP、MMP-9、sCD40L含量均高于SA组,TIMP-1含量在ACS组和SA组之间差异无统计学意义(P=0.234),ACS组hs-CRP与MMP-9(r=0.671,P=0.000)、sCD40L(r=0.494,P=0.008)呈正相关。结论冠脉“罪犯”病变处结构性易损斑块是ACS发作基础,CD40L和MMP-9参与的炎症反应导致斑块功能性不稳定和不同临床表现。

关键词：冠状动脉疾病斑块炎症超声检查,血管内

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急性冠状动脉综合征患者冠状循环内中性粒细胞髓过氧化物酶的变化

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中华心血管病杂志 2005年第12期33卷 1106-1108页

作者：黎莉张运陈玉国李贵双王颖马骁李继福钟明张薇教育部和卫生部心血管重构和功能研究重点实验室山东大学齐鲁医院心内科济南250012

目的研究急性冠状动脉综合征患者体循环和冠状循环内中性粒细胞髓过氧化物酶(MPO)浓度梯度的改变及其临床意义。方法50例行冠状动脉造影患者分为急性心肌梗死(AMI)组10例、不稳定性心绞痛(UA)组20例、稳定性心绞痛(SA)组10例和对照组10... 详细信息

目的研究急性冠状动脉综合征患者体循环和冠状循环内中性粒细胞髓过氧化物酶(MPO)浓度梯度的改变及其临床意义。方法50例行冠状动脉造影患者分为急性心肌梗死(AMI)组10例、不稳定性心绞痛(UA)组20例、稳定性心绞痛(SA)组10例和对照组10例,同时抽取股静脉、主动脉根部及冠状静脉窦血测定中性粒细胞MPO浓度及高敏C反应蛋白(hs-CRP)水平。结果(1)冠心病各亚组均较对照组的低密度脂蛋白(LDL)水平升高(P均<0.05)。(2)UA组冠状静脉窦血MPO门内百分数显著低于主动脉根部(P<0.01),MPO门内百分数在冠状循环显著低于体循环(P<0.001);AMI组冠状静脉窦血MPO平均荧光强度显著低于主动脉根部(P<0.05),MPO平均荧光强度在冠状循环显著低于体循环(P<0.001);而对照组和SA组股静脉、主动脉根部和冠状静脉窦血中的MPO和hs-CRP含量差异均无统计学意义(P>0.05)。(3)UA组MPO门内百分数与hs-CRP呈正相关(r=0.78,P<0.01);与LDL呈正相关(r=0.52,P<0.05);AMI组MPO平均荧光强度与hs-CRP呈负相关(r=-0.80,P<0.05);与LDL无相关性(r=0.22,P>0.05)。结论MPO是反映冠状循环动脉粥样硬化斑块局部炎症的较好指标;通过MPO途径使LDL成为氧化型LDL,可能是斑块不稳定的机制之一。

关键词：冠状动脉疾病冠状动脉循环过氧化物酶急性冠状动脉综合征髓过氧化物酶中性粒细胞冠状循环急性心肌梗死(AMI) 患者动脉粥样硬化斑块

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Sirt3抑制血管紧张素Ⅱ诱导的小鼠血管平滑肌细胞增殖

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细胞与分子免疫学杂志 2013年第3期29卷 237-241页

作者：吴新宁卜培莉刘军妮赵立祥王希李娜教育部和卫生部心血管重构与功能研究重点实验室山东大学齐鲁医院心内科山东济南250012

目的检测小鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)中Sirtuin3(Sirt3)的表达,探讨Sirt3在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导小鼠VSMCs增殖中的作用。方法用RT-PCR、Western blot法检测细胞中是否有Sirt3基因和蛋白表达;用不同浓度AngⅡ(10-7mol/L、10-6mol/L、10-5mol/L)分别刺激细胞,用RT-PCR、Western blot法检测AngⅡ对Sirt3表达的影响;用Sirt3 siRNA转染干扰Sirt3mRNA水平后5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(Edu)试剂盒检测细胞增殖水平。结果 Western blot法、RT-PCR结果均显示正常C57小鼠VSMCs中有一定量Sirt3蛋白和mRNA表达;10-7mol/L、10-6mol/L、10-5mol/L AngⅡ刺激细胞后Sirt3 mR-NA水平及蛋白表达量均明显升高(P<0.01),其中10-6mol/L组比10-7mol/L组和10-5mol/L组升高更明显,差异有统计学意义(P<0.05);Sirt3敲减组细胞增殖较对照组明显增加(P<0.01),Sirt3沉默+AngⅡ(10-6mol/L)组较AngⅡ组细胞增殖明显增加(P<0.01)。结论小鼠VSMCs中有一定量的Sirt3表达,AngⅡ刺激可使Sirt3 mRNA水平和蛋白表达量明显升高;Sirt3可抑制AngⅡ诱导的VSMCs增殖。

关键词：沉默信号调节因子3 血管紧张素Ⅱ 血管平滑肌细胞增殖

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实时三维超声心动图定量冠心病、扩张型心肌病心房和心室容积及功能的研究

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中国医学影像技术 2006年第4期22卷 500-503页

作者：王雪张梅张运李晓楠陈良姚桂华张鹏飞山东大学齐鲁医院心内科教育部和卫生部心血管重构和功能研究重点实验室山东济南250012

目的应用实时三维超声心动图(RT-3DE)定量评价冠心病、扩张型心肌病患者左心室、左心房、右心室和右心房容积及收缩功能。方法在24例正常人、16例扩张性心肌病和27例心肌梗死患者中,应用实时三维超声心动图获取各房室全容积三维图像,分... 详细信息

目的应用实时三维超声心动图(RT-3DE)定量评价冠心病、扩张型心肌病患者左心室、左心房、右心室和右心房容积及收缩功能。方法在24例正常人、16例扩张性心肌病和27例心肌梗死患者中,应用实时三维超声心动图获取各房室全容积三维图像,分别应用2、4、8平面方法测量各房室收缩末期容积(ESV)、舒张末期容积(EDV)和射血分数(EF),并与二维超声心动图(2DE)Simpson法和声学定量(AQ)技术测值比较。结果在扩张性心肌病和心肌梗死患者中,2DE、AQ技术和RT-3DE2平面法测量的左、右心房和左、右心室ESV、EDV明显低于RT-3DE4平面法、8平面法测值(P<0.05);各种方法检测的EF值差异无统计学意义(P>0.05)。2DE、AQ技术和RT-3DE检测结果均显示扩张性心肌病、心肌梗死患者各房室ESV、EDV均明显大于正常组(P<0.05),EF明显低于正常组(P<0.05)。结论应用实时三维超声心动图能显示心腔立体结构,测量各心腔容积,评价心脏功能。

关键词：实时三维超声心动图心房心室心功能

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应用实时三维超声心动图技术评价高血压病患者心室质量和功能的研究

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中国医学影像技术 2006年第4期22卷 496-499页

作者：张梅张立君张鹏飞姚桂华陈良李晓楠张运山东大学齐鲁医院心内科教育部和卫生部心血管重构和功能研究重点实验室山东济南250012

目的应用实时三维超声心动图技术评价高血压病患者心室质量、容积和功能改变。方法在38例正常人、36例高血压无左室肥厚(NLVH)患者和31例高血压伴左室肥厚(LVH)患者中进行了超声心动图检查。应用二维超声双平面Simpson法测量左室舒张末... 详细信息

目的应用实时三维超声心动图技术评价高血压病患者心室质量、容积和功能改变。方法在38例正常人、36例高血压无左室肥厚(NLVH)患者和31例高血压伴左室肥厚(LVH)患者中进行了超声心动图检查。应用二维超声双平面Simpson法测量左室舒张末期容积(EDV)、收缩末期容积(ESV)和射血分数(EF),实时三维超声测量左室质量(LVM)及左室质量指数(LVMI),左、右心室容积、左房最大容积(Vmax)、最小容积(Vmin)及Vmin/Vmax。结果应用实时三维超声心动图16平面、8平面法、4平面法与2平面法、二维超声双平面Simpson法测量的左室EDV、ESV、EF各组测值之间差异有统计学意义。应用RT-3DE16平面法测量的LVM、LVMI低于M型超声测值。与对照组比较,高血压NLVH组、LVH组三维超声测量的左室EDV、ESV均显著增高,高血压LVH组左室EF减低;高血压LVH组、NLVH组右室EDV、ESV均较对照组增大,两组左房Vmax、Vmin增加,LVH组Vmax/Vmax增加。结论实时三维超声技术能够定量评价高血压病患者左、右心室及左房容积和功能,测量左心室质量。

关键词：实时三维超声心动图高血压心室功能

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颈动脉粥样硬化斑块与血浆髓过氧化物酶预测冠状动脉狭窄程度

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中国医学影像技术 2012年第12期28卷 2145-2148页

作者：毕成龙张梅胡晓波王琳张伟吴林娣李继福陈文强张运山东大学齐鲁医院心内科教育部和卫生部心血管重构和功能研究重点实验室山东济南250012

目的探讨以颈动脉内-中膜厚度(IMT)、粥样斑块Crouse积分联合血浆髓过氧化物酶(MPO)浓度预测冠状动脉粥样硬化性心脏病患者冠状动脉狭窄程度的价值。方法收集131例疑似急性冠脉综合征患者,均于入院第2天接受血浆MPO浓度检测,入院1周内... 详细信息

目的探讨以颈动脉内-中膜厚度(IMT)、粥样斑块Crouse积分联合血浆髓过氧化物酶(MPO)浓度预测冠状动脉粥样硬化性心脏病患者冠状动脉狭窄程度的价值。方法收集131例疑似急性冠脉综合征患者,均于入院第2天接受血浆MPO浓度检测,入院1周内接受冠状动脉造影(CAG)及颈动脉超声检查。根据CAG结果将其分为冠心病组和对照组,计算颈动脉斑块的IMT积分及粥样斑块Crouse积分,应用ROC分析分别比较颈动脉IMT积分、粥样斑块Crouse积分、血浆MPO浓度及三者联合检测冠心病的价值。结果冠心病组血浆MPO浓度、颈动脉IMT和粥样斑块Crouse积分均明显高于对照组(P均<0.01),IMT积分、Crouse积分及血浆MPO浓度均与冠状动脉狭窄程度呈正相关。IMT积分、Crouse积分、MPO及三者联合检测冠心病的ROC曲线下面积分别为0.657、0.792、0.785及0.814,提示三者联合预测冠状动脉狭窄程度明显优于单个指标。结论联合应用彩色多普勒超声检测颈动脉IMT及粥样斑块Crouse积分与血浆MPO浓度检测可作为评估冠状动脉粥样硬化性心脏病患者血管狭窄程度的有效辅助方法。

关键词：冠状动脉疾病动脉硬化髓过氧化物酶

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心肌纤维化——心力衰竭治疗的新靶标

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中华医学杂志 2006年第17期86卷 1155-1157页

作者：张运徐瑞教育部和卫生部心血管重构和功能研究重点实验室山东大学齐鲁医院心内科济南250012 山东省千佛山医院心内科

20世纪90年代以来的研究充分证明,在慢性充血性心力衰竭(congestive heart failure,CHF)的患者中,神经-内分泌异常所致的左室重构是导致心功能减退和临床不良预后的主要原因.左室重构的病理改变包括两个方面:一是心肌细胞的肥大、坏死... 详细信息

20世纪90年代以来的研究充分证明,在慢性充血性心力衰竭(congestive heart failure,CHF)的患者中,神经-内分泌异常所致的左室重构是导致心功能减退和临床不良预后的主要原因.左室重构的病理改变包括两个方面:一是心肌细胞的肥大、坏死和凋亡,二是成纤维细胞的增生和心肌间质纤维化.以往研究的焦点主要集中于心肌细胞结构和功能异常的预防和逆转,但近年来人们逐渐认识到,心肌纤维化在心力衰竭的发生和发展中起有十分重要的作用,因而已成为心力衰竭治疗的一个新靶标。

关键词：慢性充血性心力衰竭心肌纤维化新靶标治疗 20世纪90年代心肌细胞结构 failure 心肌间质纤维化左室重构 heart

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