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华中科技大学学报（医学版） 2014年第3期43卷 275-280页

作者：雷钧陈知水方路刘天德袁荣发王军邵江华南昌大学第二附属医院普通外科南昌330006 华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所、器官移植教育部重点实验室、器官移植卫生部重点实验室武汉430030

目的观察抗白细胞介素6(IL-6)单克隆抗体(anti-IL-6monoclonal antibody,anti-IL-6mAb)对同种异体小鼠心脏移植急性排斥反应的抑制作用,并探讨其可能作用机制。方法建立小鼠颈部异位心脏移植模型。实验动物随机分为同系移植组、移植模... 详细信息

目的观察抗白细胞介素6(IL-6)单克隆抗体(anti-IL-6monoclonal antibody,anti-IL-6mAb)对同种异体小鼠心脏移植急性排斥反应的抑制作用,并探讨其可能作用机制。方法建立小鼠颈部异位心脏移植模型。实验动物随机分为同系移植组、移植模型组、移植对照组(注射rat-IgG)和移植治疗组(注射anti-IL-17mAb或anti-IL-6mAb)。观察各组移植心脏存活时间并检测病理组织学改变;Real-time PCR检测各组移植心脏中细胞因子IL-17、干扰素-γ(IFN-γ)及Th17细胞特异性转录因子RORγt mRNA表达水平,流式细胞术检测各组受鼠脾脏CD4+、CD8+T细胞中IL-17、IFN-γ的表达水平。结果①anti-IL-6mAb、anti-IL-17mAb输注均可显著抑制小鼠急性排斥反应的发生,移植心脏存活时间分别延长至(22.0±2.3)d、(13.0±1.8)d,anti-IL-6mAb组抑制排斥反应发生的效果更加显著。组织病理学结果显示anti-IL-6mAb组排斥反应病理分级明显下降(Stanford 2级);②anti-IL-6mAb组移植心脏中IL-17、IFN-γ和RORγt mRNA的转录水平较rat-IgG对照组及移植模型组显著下降,anti-IL-17mAb输注可部分下调IFN-γmRNA的转录水平;③anti-IL-6mAb组受鼠脾脏CD4+及CD8+T细胞中IFN-γ+的比例均有不同程度的下降,且CD4+IFN-γ+T细胞较CD8+IFN-γ+T细胞下降更为明显,同时CD4+IL-17+T(Th17)细胞的比例在anti-IL-6mAb组中亦明显下降。结论 anti-IL-6mAb可有效抑制急性排斥反应小鼠体内Th17和Th1细胞的活化,并延长同种异体心脏移植物的存活时间。

关键词：急性排斥反应心脏移植抗白细胞介素6单克隆抗体白细胞介素-17 RORyt 干扰素-γ

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雌激素对天然杀伤细胞的作用

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现代免疫学 2006年第3期26卷 247-250页

作者：闫冀焕周鸿敏王雪琼周绍棠陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所国家教育部器官移植重点实验室国家卫生部器官移植重点实验室华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所国家教育部器官移植重点实验室国家卫生部器官移植重点实验室武汉430030

为探讨雌激素对NK细胞的作用,在不同时间把不同剂量的雌激素加入培养体系中,分析雌激素对无和有外来刺激原刺激NK细胞的影响。结果显示培养开始加入生理剂量、低于生理剂量和超生理剂量的雌激素均可明显抑制NK细胞的增殖;培养48 h后加... 详细信息

为探讨雌激素对NK细胞的作用,在不同时间把不同剂量的雌激素加入培养体系中,分析雌激素对无和有外来刺激原刺激NK细胞的影响。结果显示培养开始加入生理剂量、低于生理剂量和超生理剂量的雌激素均可明显抑制NK细胞的增殖;培养48 h后加入相同剂量的雌激素,生理剂量和低于生理剂量雌激素仍可明显抑制NK细胞的增殖,超生理剂量雌激素非但不能抑制反而使NK细胞的数量增加。

关键词：雌激素天然杀伤细胞

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EGCG对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用

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中华器官移植杂志 2007年第6期28卷 349-351页

作者：陈杰郭晖金昊汪理陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的研究表绿茶活性成分没食子儿茶素-3-没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)对大鼠肾脏缺血再灌注损伤是否具有保护作用。方法将12只Lewis大鼠随机分为2组:(1)实验组大鼠7只,于肾缺血后的再灌注期将10 mg/kg的EGCG置于2ml生理... 详细信息

目的研究表绿茶活性成分没食子儿茶素-3-没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)对大鼠肾脏缺血再灌注损伤是否具有保护作用。方法将12只Lewis大鼠随机分为2组:(1)实验组大鼠7只,于肾缺血后的再灌注期将10 mg/kg的EGCG置于2ml生理盐水中静脉注射;(2)对照组大鼠5只,于肾缺血后的再灌注期静脉注射2 ml生理盐水。2 h后处死动物,收集血液和肾脏标本,行血肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、肾组织超氧化物歧化酶(SOD)和脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量测定,并进行组织病理和超微病理检查。结果实验组大鼠血Cr和BUN水平明显低于对照组(P<0.05),肾组织中SOD活性较对照组明显升高(P<0.01),肾组织脂质过氧化产物MDA的含量较对照组明显降低(P<0.01)。病理学检测表明实验组大鼠肾小管周围毛细血管内未见淤血,肾小管上皮细胞变性及线粒体的损伤减轻。结论EGCG对大鼠肾脏缺血再灌注损伤具有保护作用。

关键词：没食子儿茶素-3-没食子酸酯再灌注损伤大鼠

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OX40信号调节抑制小鼠CD4＋CD25＋调节性T淋巴细胞Foxp3的表达

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中华器官移植杂志 2013年第7期34卷 424-427页

作者：马东霞王璐赵越向莹刘斌华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨共刺激信号OX40对体外诱导的小鼠CD4＋CD25＋适应性调节性T淋巴细胞（iTreg）的Foxp3表达的影响。方法制备C57BL／6小鼠淋巴细胞悬液，经免疫磁珠法分选，获得CD4＋CD25一静息T淋巴细胞，与抗CD3单克隆抗体、抗CD28单克隆抗体... 详细信息

目的探讨共刺激信号OX40对体外诱导的小鼠CD4＋CD25＋适应性调节性T淋巴细胞（iTreg）的Foxp3表达的影响。方法制备C57BL／6小鼠淋巴细胞悬液，经免疫磁珠法分选，获得CD4＋CD25一静息T淋巴细胞，与抗CD3单克隆抗体、抗CD28单克隆抗体、转化生长因子B1、白细胞介素2共孵育，诱导产生Foxp3＋iTreg。在此基础上，于培养体系中加入OX40激动型抗体及其对照抗体，利用流式细胞仪分析研究OX40信号刺激对iTregFoxp3表达的影响。结果C57BL／6小鼠淋巴结中CD4＋CD25＋天然调节性T淋巴细胞（Treg）比例为（5．0±0．4）％，体外诱导培养的CD4＋CD25＋Treg比例为（71．8±13．4）％，其中Foxp3阳性表达占（74．9±1．9）％。OX40激动型抗体组CD4＋CD25＋Treg细胞比例为（80．0±1．6）%，其中Foxp3表达水平为（59．2±0．7）％；OX40激动型抗体对照抗体组CD4＋CD25＋Treg细胞比例为（86．0±1．4）％，其中Foxp3表达水平为（70．0±0．8）％，两组问差异有统计学意义（P〈0．05）。结论静息T淋巴细胞可以在体外诱导培养获得高纯度iTreg；OX40信号刺激可以显著抑制CD25＋iTreg细胞Foxp3的表达。

关键词： T淋巴细胞调节 CD4 共刺激移植

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亲属活体供肾移植后近期及中长期供者和受者的安全性分析

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中华器官移植杂志 2009年第10期30卷 616-619页

作者：宫念樵陈知水曾凡军明长生张伟杰林正斌周平陈孝平华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨亲属活体供肾移植术后近期及中长期供、受者的安全性。方法对106名亲属活体供肾者及其受者进行随访。随访日分别为肾移植后2个月至7年，其中32名供者随访时处于术后3个月内，44名处于术后3个月至1年，30名处于术后1年以上（其... 详细信息

目的探讨亲属活体供肾移植术后近期及中长期供、受者的安全性。方法对106名亲属活体供肾者及其受者进行随访。随访日分别为肾移植后2个月至7年，其中32名供者随访时处于术后3个月内，44名处于术后3个月至1年，30名处于术后1年以上（其中术后1～3年者14名，3～5年者11名，5年以上者5名）。以GFR作为评估供、受者肾功能的主要指标，比较供、受者手术前后的肾功能以及血压和尿蛋白。GFR的计算采用同位素发射计算机辅助断层显像法（GFRECT法）、24h尿肌酐（Cr）清除率法（GFR-24h Urine法）及Cockcroft-Gault公式法（GFR-Cr法）。结果取肾前106名供者的GFR-ECT和GFR—Cr分别为（1．51±0．13）和（1．99±0．42）ml／s，GFR-ECT是GFR—Cr的75．8％；术后第5天，供者的GFR—Cr为（1．40±0．33）ml／s，为术前的70．5％；术后3个月内、3个月至1年和1年以上者的GFR-Cr分别为（1．47±0．28）、（1．36±0．24）和（1．37±0．23）ml／s，分别为取肾术前的73．7％、68．0％和68．6％；术后1～3年者、3～5年者及5年以上者的GFR-Cr与超过1年者整体的GFR-Cr比较，差异无统计学意义（P〉O．05）。4名供者术后尿蛋白为±，均为术后超过1年者；4名供者血压升高。术后3个月、1年及1年以上，受者的GFR-Cr分别为（1．09±0．26）、（1．20±0．31）和（1．07±0．29）ml／s。结论术后近期供者的GFR会下降，并小幅波动，术后中长期其GFR接近术前70％的水平，并趋于稳定。亲属活体供肾移植术后供、受者具有良好的安全性。

关键词：肾移植活体供者手术后期间肾功能试验

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抗γc单克隆抗体联合供者特异性输注延长移植物存活

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免疫学杂志 2007年第2期23卷 199-201页

作者：向芙莉陈必成袁劲吴轲周洁陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨抗γ公共链单克隆抗体(抗γc单抗)联合供者脾细胞特异性输注(DST)诱导移植物长期存活的可行性及相关机制。方法建立小鼠颈部异位心脏移植模型,组Ⅰ为单纯实施心脏移植组,组Ⅱ于移植前给予DST,组Ⅲ术前予DST联合抗γc单克隆抗体... 详细信息

目的探讨抗γ公共链单克隆抗体(抗γc单抗)联合供者脾细胞特异性输注(DST)诱导移植物长期存活的可行性及相关机制。方法建立小鼠颈部异位心脏移植模型,组Ⅰ为单纯实施心脏移植组,组Ⅱ于移植前给予DST,组Ⅲ术前予DST联合抗γc单克隆抗体处理,术后观察移植物的存活时间及相关指标。结果组Ⅲ心脏移植物平均存活时间明显长于组Ⅰ及组Ⅱ(P<0.05)。FACS分析显示组Ⅲ受者脾细胞中Tr比例较组Ⅰ及组Ⅱ显著增高(P<0.05),同时脾细胞增殖活性明显减低(P<0.05)。结论抗γ公共链单克隆抗体联合DST通过增加供者体内Tr的比例,减低对同种抗原的应答能力,显著延长同种心脏移植模型中移植物存活时间。

关键词：供者特异性输注抗γ公共链单克隆抗体心脏移植

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转录因子诱骗性寡核苷酸转染猪血管内皮细胞抑制人补体介导的异种细胞毒作用

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中华器官移植杂志 2008年第10期29卷 594-597页

作者：黄亚冰王璐尹注增李荣郭晖陈实华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所器官移植教育部/卫生部重点实验室武汉430030

目的探讨转录因子SP，诱骗性寡核苷酸（decoyODNs）转染的猪血管内皮细胞对人血清补体介导的异种细胞毒作用的影响。方法将培养的永生化猪血管内皮细胞系细胞株SV40-PED分为3组。转染组：SV-40PED转染了SP，decoyODNs；错配组：S驴4D—... 详细信息

目的探讨转录因子SP，诱骗性寡核苷酸（decoyODNs）转染的猪血管内皮细胞对人血清补体介导的异种细胞毒作用的影响。方法将培养的永生化猪血管内皮细胞系细胞株SV40-PED分为3组。转染组：SV-40PED转染了SP，decoyODNs；错配组：S驴4D—PED转染了错配的decoyODNs；空转染组：SV-40PED仅用转染试剂oligofectamine作用。转染后26h，采用细胞爬片免疫荧光技术、蛋白印迹法、逆转录聚合酶链反应及乳酸脱氢酶释放试验进行检测，分别观察各组SV40-PED胞膜a半乳糖残基（regal）、蛋白质和α1，3-半乳糖基转移酶（α1，3-GT）mRNA等表达的变化，以及转染了SP，decoyODNs的SV-40PED对人血清补体介导的细胞毒作用的影响。结果转染组SV-40-PED胞膜α—G1的荧光表达明显减弱，部分胞膜可见点状荧光缺损，而空转染组和错配组仍可见明亮的绿色荧光。转染组蛋白表达水平均有不同程度的下降，相对吸光度（A值）仅为未转染组的52．6％。转染组α1，3GT基因异构体1和2mRNA的相对表达量分别为0．42±0．20和0．27±0．12，空转染组分别为0．72±0．17和0．50±0．19，两组比较，差异有统计学意义（P〈0.05）；错配组与空转染组相比，差异无统计学意义（P〉0.05）。体积分数为20％和40％的人血清对空转染组和错配组SV40-PED均有不同程度的杀伤，而对转染组SV-40-PED的杀伤明显减弱（P〈0.，05）。结论经SP，decoyODNs转染的猪血管内皮细胞可以抑制人血清补体介导的异种细胞毒作用。

关键词：转录因子 SP1 寡核苷酸类补体内皮细胞

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雷帕霉素在肾移植后肝功能损害患者中的应用七例

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中华器官移植杂志 2005年第7期26卷 435-436页

作者：张伟杰王海灏明长生陈知水曾凡军林正斌刘斌徐崇松聂明张成德华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨肾移植术后发生肝功能损害时使用雷帕霉素治疗的有效性和安全性.方法 7例患者肾移植术后均采用以环孢素A(CsA)为基础的免疫抑制方案,发生肝功能损害后,除采取常规护肝治疗外,根据肝功能的受损程度,以雷帕霉素替代CsA,或加用雷... 详细信息

目的探讨肾移植术后发生肝功能损害时使用雷帕霉素治疗的有效性和安全性.方法 7例患者肾移植术后均采用以环孢素A(CsA)为基础的免疫抑制方案,发生肝功能损害后,除采取常规护肝治疗外,根据肝功能的受损程度,以雷帕霉素替代CsA,或加用雷帕霉素,同时CsA减量.结果肝功能损害的发生时间,3例为术后2～3周,4例为术后4～10个月.经过采取上述措施,6例肝功能恢复正常,1例死亡.迄今随访3～13个月,肝功能未再出现异常.6例患者在治疗及随访期间肾功能均正常,未发生急性排斥反应.结论肾移植术后发生肝功能损害时,使用雷帕霉素治疗是安全和有效的.

关键词：肾移植肝功能衰竭雷帕霉素

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胰、肾联合移植术式的选择

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中华器官移植杂志 2005年第3期26卷 186-188页

作者：明长生华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030

由于胰腺外分泌液的引流方式和移植胰腺排斥反应难以诊断的特殊性,胰、肾联合移植的总数和效果都远远落后于其它器官移植.直到最近十年,胰、肾联合移植的手术方式才趋向定型,成为治疗1型糖尿病合并尿毒症的最佳选择.在我国,胰、肾联合... 详细信息

由于胰腺外分泌液的引流方式和移植胰腺排斥反应难以诊断的特殊性,胰、肾联合移植的总数和效果都远远落后于其它器官移植.直到最近十年,胰、肾联合移植的手术方式才趋向定型,成为治疗1型糖尿病合并尿毒症的最佳选择.在我国,胰、肾联合移植的经验积累十分有限,手术方式尚无统一标准,多数中心仅仅实施单一术式.因此,本文结合我们的经验,对胰腺与胰、肾联合移植手术选择的有关问适题作一综述.

关键词：联合移植术式诊断治疗手术方式引流方式胰腺外分泌总数定型趋向

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肾移植术后新生HLA-DQ抗体的临床意义

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中华医学杂志 2014年第42期94卷 3284-3288页

作者：朱兰陈刚谢林汪芯王大卫林正斌明长生陈孝平陈知水华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部重点实验室武汉430030

目的探讨临床肾移植术后新生HLA-DQ抗体的产生规律及临床意义.方法入选2012年1月至2013年12月期间在华中科技大学同济医学院附属同济医院长期随访的175例初次肾移植受者,移植前微量淋巴毒和群体反应性抗体（PRA）均为阴性,入组时间在... 详细信息

目的探讨临床肾移植术后新生HLA-DQ抗体的产生规律及临床意义.方法入选2012年1月至2013年12月期间在华中科技大学同济医学院附属同济医院长期随访的175例初次肾移植受者,移植前微量淋巴毒和群体反应性抗体（PRA）均为阴性,入组时间在肾移植术后6～18年（平均10年）.根据入组时移植肾功能分为3组：（1）移植肾功能正常的对照组（n=94）：血肌酐＜120 μmol/L;（2）慢性移植肾功能减退组（n=54）：血肌酐持续＞150μmol/L达6个月以上,但尚未透析;（3）移植肾失功能组（n=27）：患者恢复血液透析.所有病例在入组时收集血清,采用流式PRA或Luminex方法进行HLA抗体初筛,抗体阳性者进一步行Luminex单抗原包被的微球法检测分别针对HLA-A、B、DR、DQ位点的抗体水平.结果（1） HLA抗体的出现与慢性移植肾功能不全密切相关.慢性移植肾功能减退组HLA抗体阳性的出现率为48％（26/54）,移植肾失功能组为52％（14/27）,而对照组的HLA抗体阳性率只有17％（16/94）（P＜0.01）.（2）在3组HLA抗体阳性的病例中,相比于HLA-DR、HLA-Ⅰ类抗体,HLA-DQ抗体的出现频率均最高,在对照组、慢性移植肾功能减退组、移植肾失功能组分别为14/16、24/26及14/14,此外,HLA-DQ抗体的平均荧光强度也最高.（3） HLA-DQ抗体在对照组的HLA抗体阳性病例中以单独出现为主（10/16）,而在慢性移植肾功能减退组和移植肾失功能组都多数伴随有HLA-DR抗体和Ⅰ类抗体（17/26、14/14）,显示单独出现的HLA-DQ抗体与慢性移植肾功能不全没有直接相关性,而DQ抗体合并DR和（或）Ⅰ类抗体同时出现与慢性移植肾功能减退和失功能有关（均P＜0.05）.结论从移植肾功能状态而言,HLA-DQ抗体往往先于其他位点的抗体出现.在临床移植肾功能尚稳定时,早期发现HLA-DQ抗体对预警免疫系统的特异性激活及后者所致的慢性移植肾功能减退或失功能具有重要意义.监测HLA-DQ抗体将为早期干预治疗和去除免疫危险因素提供第一时机.

关键词：肾移植移植物排斥 HLA-DQ抗体同种异体抗体慢性移植肾功能不全

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