检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学通报 2025年第5期 2203-2215页

作者：谢春芳李菲菲蒋天扬姚冬生暨南大学生物科学与技术系暨南大学生物医药研究院广东省生物工程药物重点实验室教育部基因组药物工程研究中心

【背景】黄曲霉毒素B1（aflatoxin B1,AFB1）是迄今为止发现的毒性最强的生物毒素之一，它通过污染花生、玉米、棉花和辣椒等不同作物，对人类和动物健康造成严重威胁。由于醛酮还原酶能够将多种醛酮类物质还原为毒性更小的醇类物质从... 详细信息

【背景】黄曲霉毒素B1（aflatoxin B1,AFB1）是迄今为止发现的毒性最强的生物毒素之一，它通过污染花生、玉米、棉花和辣椒等不同作物，对人类和动物健康造成严重威胁。由于醛酮还原酶能够将多种醛酮类物质还原为毒性更小的醇类物质从而发挥解毒作用，所以推测醛酮还原酶可能具有转化AFB1的可能。【目的】克隆了假蜜环菌（Armillariella tabescens）中的醛酮还原酶AtAKR297，以研究醛酮还原酶AtAKR297对AFB1的转化作用。【方法】使用TRIzol法提取假蜜环菌的总RNA，根据蛋白质谱获取的肽段信息及c DNA末端快速克隆（rapid-amplification of cDNA ends,RACE）技术获取醛酮还原酶AtAKR297基因全长序列；构建醛酮还原酶AtAKR297的表达系统，用亲和层析对蛋白进行纯化，并进行酶活力检测及酶学性质分析。在p H 8.0缓冲体系中，将醛酮还原酶AtAKR297与AFB1反应12 h，用高效液相色谱仪对残余的AFB1进行检测，并用高分辨率液相色谱-质谱仪对转化产物进行鉴定。【结果】成功克隆出假蜜环菌的全长AtAKR297基因，基因长度为894 bp，共编码297个氨基酸；p ET28a（+）-AtAKR297质粒转入大肠杆菌（Escherichia coli） BL21（DE3）宿主菌中，实现诱导表达并对酶学性质进行分析。AtAKR297的最适反应温度为20℃，最适反应p H值为8.0；在15-50℃具有较好的稳定性，孵育30 min酶活可维持60%以上；在pH 5.0–8.0具有较好的稳定性，孵育2 h酶活可维持75%以上。醛酮还原酶AtAKR297与AFB1的相互作用质谱鉴定结果显示AtAKR297能作用于AFB1（依赖NADPH），将AFB1还原为毒性降低的黄曲霉毒醇（aflatoxicol,AFL），该产物分子式为C17H14O6。【结论】成功从假蜜环菌中克隆出醛酮还原酶基因AtAKR297，并构建了具有醛酮还原酶活性的AtAKR297的原核表达系统。AtAKR297在NADPH的存在下能将AFB1还原为毒性降低的AFL。

关键词：醛酮还原酶黄曲霉毒素转化产物

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放线菌素D诱导人离体HL7702肝细胞株凋亡及其作用机理

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山东医药 2006年第14期46卷 11-13页

作者：李文君蔡绍晖李校堃暨南大学国家教育部基因组药物工程研究中心广州510630

目的探讨放线菌素D（ActD）诱导正常人HL7702肝细胞凋亡及PI3K／Akt信号通路对此过程的作用。方法采用HL7702正常人肝细胞株，MTT法检测ActD对其存活力的影响；Hoechst33342形态学染色；流式细胞仪检测细胞凋亡情况；Western blot方... 详细信息

目的探讨放线菌素D（ActD）诱导正常人HL7702肝细胞凋亡及PI3K／Akt信号通路对此过程的作用。方法采用HL7702正常人肝细胞株，MTT法检测ActD对其存活力的影响；Hoechst33342形态学染色；流式细胞仪检测细胞凋亡情况；Western blot方法检测细胞总Akt（丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶）及p-Akt蛋白表达。结果 ActD可诱导HL7702肝细胞凋亡，其浓度在0．25～8μg／ml范围内呈现剂量效应关系；PI3K／Akt特异性抑制剂wortmannin能够增强ActD诱导的肝细胞凋亡。结论 ActD可诱导肝细胞凋亡，其机理可能是抑制PI3K／Akt信号通路。

关键词：放线菌素D 细胞凋亡肝细胞

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碱性成纤维细胞生长因子生物活性的ELISA检测

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中国药科大学学报 2005年第5期36卷 457-460页

作者：安全李校赵文项琪孟娟暨南大学医药生物技术研究开发中心广州510632 国家教育部基因组药物工程研究中心广州510632

目的:寻找一种简便、经济、灵敏度高而不需使用放射性同位素或MTT的生物活性检测方法,对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)进行活性检测。方法:运用多克隆抗体ELISA、单克隆抗体ELISA和MTT法分别对bFGF进行生物活性检测,并对结果和重现性进... 详细信息

目的:寻找一种简便、经济、灵敏度高而不需使用放射性同位素或MTT的生物活性检测方法,对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)进行活性检测。方法:运用多克隆抗体ELISA、单克隆抗体ELISA和MTT法分别对bFGF进行生物活性检测,并对结果和重现性进行比较。结果:ELISA测得结果与MTT法相比无显著差异,且其精密度明显优于MTT法。结论:用ELISA检测bFGF生物活性,简便准确,值得推广应用。

关键词：碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) ELISA MTF 生物活性检测

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基于多米诺反应合成吲哚衍生物

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有机化学 2014年第8期34卷 1499-1508页

作者：冯亚栋张红程国林崔秀灵分子药物教育部工程研究中心厦门市海洋与基因工程药物重点实验室华侨大学分子药物学研究所厦门361021

近年来,多米诺反应作为合成吲哚衍生物的有效方法已得到有机合成化学家的广泛关注.该反应过程中,不需改变反应条件和添加试剂,中间体也无需分离和提纯,实现了原子经济和环境友好的目标.通过过渡金属催化的多米诺反应合成吲哚衍生物,已... 详细信息

近年来,多米诺反应作为合成吲哚衍生物的有效方法已得到有机合成化学家的广泛关注.该反应过程中,不需改变反应条件和添加试剂,中间体也无需分离和提纯,实现了原子经济和环境友好的目标.通过过渡金属催化的多米诺反应合成吲哚衍生物,已经得到了深入研究并成为一种构筑该类杂环的有利工具.重点综述了近年来运用金属催化多米诺反应合成吲哚及其衍生物方面的研究进展,以催化剂的类型进行分类,介绍相关反应的特点和优势.

关键词：多米诺反应金属催化吲哚衍生物合成

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Runx2通过抑制细胞巨自噬以诱导C2C12细胞向成骨细胞分化

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中国病理生理杂志 2013年第3期29卷 481-487页

作者：余守和洪岸基因工程药物国家工程研究中心教育部基因组药物工程研究中心广东省生物工程药物重点实验室暨南大学生命科学技术学院生物医药研究院广东广州510632

目的:探讨细胞巨自噬与Runx2诱导C2C12细胞成骨分化的关系。方法:在强力霉素(doxycyc-line,Dox)诱导Runx2表达的细胞系C2C12/Runx2Dox中进行研究。Dox(10 mg/L)处理0 d、1 d、3 d及6 d后,real-time qPCR检测LC3b、Beclin-1、p62和LAMP-2表达情况,Western blotting分析LC3-I/LC3-Ⅱ比值。设置不同的3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)或雷帕霉素(rapamycin,Rap)浓度,Dox处理14 d后分析碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)活性。用3-MA(5 mmol/L)或Rap(10μmol/L)与Dox共同处理1 d、3 d及6 d后检测ALP及骨钙素(osteocalcin,OC)表达情况。结果:(1)C2C12细胞向成骨分化时,LC3b与Beclin-1显著下调,p62与LAMP-2无明显变化;(2)LC3-I向LC3-Ⅱ转换的过程被抑制;(3)3-MA(5 mmol/L)可增强ALP活性,而Rap(10μmol/L)则抑制其活性;(4)3-MA可上调ALP及OC表达,Rap则下调二者表达。结论:Runx2通过下调LC3和Beclin-1、抑制LC3-I向LC3-Ⅱ转换的方式阻碍自噬体形成,以诱导C2C12细胞分化为成骨细胞。

关键词： Runx2 C2C12细胞成骨分化巨自噬

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基于钯催化C—H键活化的多米诺反应

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化学进展 2012年第7期24卷 1324-1336页

作者：沈金海程国林崔秀灵分子药物教育部工程研究中心厦门市海洋与基因工程药物重点实验室华侨大学生物医学学院分子药物研究院厦门361021

近年来,多米诺反应作为一种合成复杂分子的高效手段已得到有机合成化学家的广泛关注。该反应过程中,不需改变反应条件和添加试剂,中间体也无需分离和提纯,实现了原子经济和环境友好。通过C—H键活化直接构建碳-碳键和碳-杂原子键,大大... 详细信息

近年来,多米诺反应作为一种合成复杂分子的高效手段已得到有机合成化学家的广泛关注。该反应过程中,不需改变反应条件和添加试剂,中间体也无需分离和提纯,实现了原子经济和环境友好。通过C—H键活化直接构建碳-碳键和碳-杂原子键,大大拓展了传统偶联反应的底物范围,同样具有高原子经济性,已经广泛地作为多米诺反应中的一个高效步骤。此外,钯催化剂运用广泛,能够与多种官能团兼容,是多米诺反应的理想金属催化剂。本文综述了基于钯催化C—H键活化的多米诺反应的最新研究进展,以反应中钯的价态变化进行分类,介绍有关反应的特点、优势及其在天然产物合成中的应用。

关键词：钯催化剂 C—H键活化多米诺反应有机合成

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易修饰诱导基作用下的钯催化C-H键官能团化反应

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有机化学 2012年第11期32卷 2018-2039页

作者：王勇程国林崔秀灵分子药物教育部工程研究中心厦门市海洋与基因工程药物重点实验室华侨大学生物医学学院、分子药物研究院厦门361021

基于Pd催化的C—H键官能团化反应是目前有机合成方法学的一个研究热点,诱导基对反应的区域选择性起着重要作用.综述了近年来关于易合成、易修饰的诱导基作用下的C—H键功能化反应的研究进展及其应用,介绍了各诱导基的作用、优势及其局限... 详细信息

基于Pd催化的C—H键官能团化反应是目前有机合成方法学的一个研究热点,诱导基对反应的区域选择性起着重要作用.综述了近年来关于易合成、易修饰的诱导基作用下的C—H键功能化反应的研究进展及其应用,介绍了各诱导基的作用、优势及其局限性,提出了今后的研究重点与发展趋势.

关键词： C—H键功能化钯催化诱导基区域选择性

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在CHO细胞中表达重组sPDGFRα-Fc及其抑制细胞增殖的研究

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中国生物工程杂志 2009年第7期29卷 1-6页

作者：万艳李丽玲谢秋玲郭淑军秦丽张勇仓陈小佳国家教育部基因组药物工程研究中心/广东省生物工程药物重点实验室暨南大学生物工程研究所广州510623

目的:筛选在CHO-K1中高表达sPDGFRα-Fc的重组细胞株,并对分泌到培养基的表达产物进行抑制细胞增殖的活性分析。方法:构建带有Fc标签的sPDGFRα基因重组表达载体pIRES-Neo3-sPDGFRα-Fc;在脂质体介导下,转染CHO-K1细胞,G418筛选2周后获... 详细信息

目的:筛选在CHO-K1中高表达sPDGFRα-Fc的重组细胞株,并对分泌到培养基的表达产物进行抑制细胞增殖的活性分析。方法:构建带有Fc标签的sPDGFRα基因重组表达载体pIRES-Neo3-sPDGFRα-Fc;在脂质体介导下,转染CHO-K1细胞,G418筛选2周后获得若干单克隆细胞株,随机挑取单克隆细胞进一步放大培养,RT-PCR筛选阳性单克隆细胞;Real-Time PCR方法鉴定各阳性细胞株中的sPDGFRα-Fc基因的转录水平,Western blot检测进一步验证各细胞中目的蛋白表达水平;筛选出表达最高的细胞株,更换无血清培养基培养,取含有可溶性sPDGFRα的培养基上清冻干浓缩,MTT法检测目的蛋白的抑制细胞增殖能力。结果:成功构建重组表达载体并在CHO-K1中成功表达,各阳性单克隆细胞株的表达量有差异且在转录水平和蛋白表达水平表现一致,从无血清培养基中收集的可溶性sPDGFRα-Fc明显抑制血管内皮细胞的增殖。结论:成功筛选获得CHO-K1中高表达sPDGFRα-Fc的重组细胞株,获得的可溶性sPDGFRα-Fc能抑制细胞增殖,有望成为治疗因PDGF及其受体引起的多种疾病的药物。

关键词：可溶性血小板衍生生长因子受体-α 中国仓鼠卵巢细胞抑制细胞增殖

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人EGF受体胞外域cDNA克隆及其序列分析

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2005年第2期26卷 168-173,179页

作者：徐丽慧洪岸何贤辉暨南大学生物工程研究所 .教育部基因组药物工程研究中心广东广州510632 暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室

目的:克隆编码人表皮生长因子受体(EGFR)胞外域的cDNA ,构建可溶性EGFR(sEGFR)的哺乳动物细胞表达载体。方法:以RT -PCR方法从人胎盘中克隆编码EGFR胞外域的cDNA ,测定其序列,构建sEGFR真核表达载体。结果:从人胎盘绒毛组织中成功克隆编... 详细信息

目的:克隆编码人表皮生长因子受体(EGFR)胞外域的cDNA ,构建可溶性EGFR(sEGFR)的哺乳动物细胞表达载体。方法:以RT -PCR方法从人胎盘中克隆编码EGFR胞外域的cDNA ,测定其序列,构建sEGFR真核表达载体。结果:从人胎盘绒毛组织中成功克隆编码EGFR胞外域的cNDA ,通过PCR方法在起始位点前加入Kozak序列并添加终止密码,构建了sEGFR的真核表达载体。该基因编码的蛋白质包含信号肽以及L1、S1、L2和S2等4个结构域。序列分析表明该基因有3个碱基与以往报道的基因不同,即15 6 2G→A、16 2 0G→C、1887T→A ,前两个改变导致氨基酸Arg4 97Lys和Lys5 16Asn的改变,后一个为同义突变Thr6 0 5。结论:成功克隆编码EGFR胞外域的cD NA 。

关键词：表皮生长因子受体可溶性EGFR 单核苷酸多态性

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基于I2催化的C-H键功能团化的研究进展

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有机化学 2019年第6期39卷 1596-1612页

作者：施兆江王连会崔秀灵华侨大学生物医学学院分子药物教育部工程研究中心福建省分子医学重点实验室厦门市海洋与基因药物重点实验室

杂环化合物在医药、精细化工等领域具有广泛的应用价值.因此,开发高效的杂环构筑策略在有机合成中仍然具有强大的吸引力.近年来,基于I2催化的直接C-H功能团化反应已发展成为构筑杂环化合物的重要方法之一.在此,按化合物的成键类型(C-C、... 详细信息

杂环化合物在医药、精细化工等领域具有广泛的应用价值.因此,开发高效的杂环构筑策略在有机合成中仍然具有强大的吸引力.近年来,基于I2催化的直接C-H功能团化反应已发展成为构筑杂环化合物的重要方法之一.在此,按化合物的成键类型(C-C、C-N/O/S),综述近年来该领域的重要研究进展,并做总结与展望.

关键词：碘催化碳氢键活化杂环化合物

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